PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达及其临床意义

目的:探讨PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌中的表达与其发生、发展的关系及其临床意义。方法:应用免疫组化法检测62例膀胱尿路上皮细胞癌和23例正常膀胱黏膜标本中PTEN的表达情况,分析其表达与膀胱癌的发生,病理分级及临床分期的关系。结果:PTEN在膀胱尿路上皮细胞癌组织和正常膀胱黏膜组织中的阳性表达率分别是100%和46.77%,比较差异有统计学意义(P0.05);且膀胱癌细胞分化越差,临床分期越高,PTEN阳性表达率越低,比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:膀胱尿路上皮细胞癌的发生、发展与PTEN的表达缺失有关。检测其表达情况对膀胱癌的预后判断及治疗选择可能具有重要价值。     

组织芯片中膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义

【目的】探讨组织芯片中膀胱癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义。【方法】应用组织芯片制作机制作膀胱移行细胞癌组织芯片，并用免疫组织化学方法检测组织芯片中膀胱癌cyclinD1的表达．统计其与临床病理学参数的相关性。【结果】在组织芯片中，成功检测了58例膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达，其中27例（46．6％）cyclinD1表达阳性。膀胱癌G3级cyclinD1阳性表达率高于G1、2：级的阳性表达率（68．8％VS．38．1％，P=0．036），浸润性膀胱癌cyclinDl表达阳性率高于表浅性膀胱癌的阳性表达率（73．7％VS．33．3％。P=0．004），膀胱癌肿瘤大小和数目与cyclinD1蛋白表达无统计学意义上的相关性（P〉0．05）。【结论】cyclinD1蛋白表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期相关，可作为膀胱癌恶性程度的指标之一。     

CD24蛋白在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨CD24蛋白在膀胱癌中的表达及其与膀胱癌临床特征的关系。方法采用免疫组化方法对43例膀胱肿瘤、10例正常膀胱组织中CD24的表达进行检测。结果CD24蛋白主要表达于膀胱恶性肿瘤细胞的细胞膜和胞浆中,其阳性例数为27例,阳性率为62．8％,在正常膀胱组织中1例阳性表达,阳性率10％。在43例膀胱肿瘤石蜡标本中,CD24表达强度与肿瘤分级和分期有关,恶性程度高的肿瘤阳性表达高于恶性程度低的肿瘤,浸润性癌也高于非浸润性癌（P〈0．05）。结论①CD24在膀胱癌中的表达明显高于在正常膀胱组织中的表达。②CD24高表达与膀胱移行细胞癌的分化和浸润性进展密切相关。③CD24高表达可能成为判断膀胱移行细胞癌预后的一个重要指标。     

P16和PTEN在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨P16和PTEN在人膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法使用免疫组织化学法fs—P法）检测和比较P16蛋白、PTEN蛋白的表达情况,并以PBS作为阴性对照,以确诊前列腺癌的标本切片作为阳性对照。结果P16蛋白在正常膀胱黏膜中表达的阳性率为92．31％（24／26）,在膀胱移行细胞癌中表达的阳性率40．32％（25／62）,差异明显（P〈0．05）故有统计学意义;PTEN蛋白在正常膀胱黏膜中表达的阳性率为96．15％（25／26）,在膀胱移行细胞癌中表达的阳性率45．16％（28／62）,差异明显（P〈0．05）,有统计学意义。结论P16与PTEN蛋白在正常膀胱组织中均表现为高表达,在膀胱移行细胞癌均表现为低表达,说明P16蛋白与PTEN蛋白在膀胱癌的发生、发展中可能具有一定的协同作用。     

Connexin26在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的研究间隙连接蛋白26（connexin26，Cx26）在膀胱移行细胞癌中的表达情况并分析其临床意义。方法对40例不同分化程度的膀胱移行细胞癌及10例非肿瘤膀胱上皮组织的石蜡切片，用免疫组织化学SP法分别检测Cx26蛋白的表达。结果Cx26蛋白主要表达于细胞膜，10例非肿瘤膀胱组织中Cx26蛋白均呈阳性表达（阳性率100％），而在40例不同分化程度的膀胱移行细胞癌组织中Cx26的阳性表达率为27．50％，而且细胞质中也有少量表达，其中G1期、G2期、G3期的阳性表达率分别为11．11％、30．00％、36．36％；T1期、T2期、T3、T4期的阳性表达率分别为28．57％、18．75％、37．50％和50．00％。进一步进行统计学分析发现：与非肿瘤膀胱上皮组织相比间隙连接蛋白26在膀胱移行细胞癌中的表达显著下调p〈0．001，但未发现Cx26的表达与膀胱癌的临床分期及细胞分级呈负相关p〉0．05。结论Cx26蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达显著下调，Cx26蛋白的下调与膀胱癌的发生发展密切相关，Cx26蛋白可作为一种有用的肿瘤标记物，并可应用于肿瘤的诊断。     

E-cadherin/catenin复合体在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的：探讨E-cadherin／catenin复合体在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法：用RT-PCR和S-P免疫组化方法检测54例膀胱移行细胞癌中E-Cadherin、β-catenin基因mRNA及蛋白表达，综合分析其表达与膀胱移行细胞癌病理分级、分期的关系。结果：在膀胱移行细胞癌中，蛋白正常表达率分别为29．6％和25．9％，E-Cadher／n蛋白与mRNA表达没有统计学差异（P〉0．05），β-catenin蛋白表达与mRNA表达有明显差异（P〈0．05）。E-Cadherin、β-catenin蛋白表达与肿瘤分级、分期呈负相关（P〈0．05）。高分化病例两者共同阳性率低于低分化病例（P〈0．05）。结论：膀胱移行细胞癌中E-Cadhefin、β-catenin蛋白异常表达的原因可能不同。E-Cadherin、β-catenin同时测定对膀胱移行细胞癌预后有重要意义。     

p27和Cyclin E在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨p27和Cyclin E蛋白在膀胱移行细胞癌组织中的表达及其意义.方法采用免疫组化方法(S-P法)检测45例膀胱移行细胞癌组织和8例正常膀胱组织石蜡切片中p27和Cyclin E蛋白的表达.结果膀胱移行细胞癌组织中p27阳性表达率明显低于正常膀胱组织(P＜0.01);膀胱移行细胞癌组织中Cyclin E阳性表达率明显高于正常膀胱组织(P＜0.05).p27与Cyclin E呈负相关(r=-0.207,P＜0.05).结论提示p27和Cyclin E可以作为判别膀胱癌分化程度的标志物,并作为判断预后的指标.     

CD44v6和survivin在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

【目的】探讨细胞黏附分子CD44v6和凋亡抑制蛋白survivin的表达与膀胱移行细胞癌病理分级、临床分期及预后的关系。【方法】应用免疫组织化学方法检测56例膀胱移行细胞癌及5名正常人膀胱黏膜标本中CD44v6和survivin的表达。【结果】56例膀胱癌的CD44v6和survivin的表达总阳性率为57．1％和85．7％，且随着癌细胞分化程度降低、癌组织浸润深度增加CD44v6的表达减弱，而survivin在分级和分期的表达无统计学差异。CD44v6和survivin的表达与肿瘤复发无明显相关。【结论】CD44v6的表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期有关，有助于膀胱癌早期诊断；survivin的高表达率可能成为膀胱移行细胞癌辅助诊断指标之一。     

组织芯片中膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义

[目的]探讨组织芯片中膀胱癌cyclinD1蛋白表达的临床病理学意义。[方法]应用组织芯片制作机制作膀胱移行细胞癌组织芯片,并用免疫组织化学方法检测组织芯片中膀胱癌cyclinD1的表达,统计其与临床病理学参数的相关性。[结果]在组织芯片中,成功检测了58例膀胱移行细胞癌cyclinD1蛋白表达,其中27例(46.6%)cyclinD1表达阳性。膀胱癌G3级cyclinD1阳性表达率高于G1、2级的阳性表达率(68.8%vs.38.1%,P=0.036),浸润性膀胱癌cyclinD1表达阳性率高于表浅性膀胱癌的阳性表达率(73.7%vs.33.3%,P=0.004),膀胱癌肿瘤大小和数目与cyclinD1蛋白表达无统计学意义上的相关性(P>0.05)。[结论]cyclinD1蛋白表达与膀胱移行细胞癌的分级、分期相关,可作为膀胱癌恶性程度的指标之一。     

p16、nm23-H1基因蛋白在膀胱癌的表达与临床意义

目的：探讨抑癌基因p16及肿瘤抑制基因nm23-H1在膀胱中的表达及临床意义。方法：应用免疫组织化学s-p法检测18例正常膀胱组织中及38例膀胱移行细胞癌组织中p16及nm23-H1的表达。结果：p16在正常组织、膀胱癌中阳性表达率分别为88．8％（16／18）、47．4％（18／38），两者间有显著差异性（P＜0．01）。nm23-H1在正常膀胱组织、膀胱癌中阳性表达率分别为83．3％（15／18），44．7％（17／38）。两者间有显著差异（P＜0．01）。提示，p16、nm23-H1阳性表达率与膀胱移行细胞癌的临床分期、临床分级、肿瘤大小及是否转移有密切关系。结论：p16、nm23-H1在膀胱癌中的阳性表达对抑制肿瘤生长，浸润和转移起重要作用，可作为膀胱癌患者预测转移和预后及判断膀胱移行细胞癌生物学行为的良好指标。     

鼠尾胶原蛋白提取、分离、纯化方法的建立及鉴定

目的建立一种高效提取、分离、纯化鼠尾胶原蛋白的方法。方法通过对鼠尾进行剥离获得鼠尾腱,用Tris-HCl缓冲液、胃蛋白酶处理获得鼠尾胶原蛋白原液、反复使用氯化钠溶液进行分级盐析、醋酸溶液复溶进行鼠尾胶原蛋白的纯化。超纯水透析除去无机盐类获得纯化的鼠尾胶原蛋白。通过SDS-PAGE蛋白质电泳、氨基酸含量分析等技术手段鉴定。结果本研究建立的方法可以获得高纯度的鼠尾胶原蛋白,纯度达到电泳纯。与国外进口的商业化鼠尾胶原蛋白产品相比无差异。研究了提取、分离、纯化参数对得率、纯度的影响,建立了最优的鼠尾胶原蛋白提取条件,胃蛋白酶用量:1∶500,酶解时间:72 h,盐析浓度:2 mol/L,提取所用酸溶液:0.05mol/L醋酸溶液。结论为鼠尾胶原蛋白的扩大化生产提供了合适的工艺参数,为大量获得鼠尾胶原蛋白并进行更深层次的功效方面研究提供了理论支持和实践基础。     

肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及意义

目的　探讨肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达及其与临床病理因素的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 6 2例肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达。结果　肺癌组织中Fhit蛋白和PCNA蛋白表达阳性率分别为 5 3.2 %和6 4 .5 % ,PCNA蛋白表达阳性肺癌Fhit蛋白阳性率明显低于PCNA蛋白表达阴性肺癌 (P <0 .0 1)。Fhit蛋白和PCNA蛋白在肺癌中表达与肺癌的分化程度、淋巴结转移、3年生存期均密切相关 ,PCNA蛋白与肺癌病理类型亦有关。结论　Fhit蛋白和PC NA蛋白异常表达与肺癌发生、发展密切相关 ,二者相互抑制 ,呈明显负相关     

Survivin、Her-2、P16和PTEN在膀胱癌中的表达及意义

目的研究Survivin、Her2、P16和PTEN蛋白在膀胱癌中的表达及其生物学意义。方法采用免疫组织化学SP法检测43例膀胱移行细胞癌和10例正常膀胱组织中以上4种蛋白的表达。结果4种蛋白在膀胱癌中的表达与在正常膀胱黏膜比较差异均有显著性意义(均为P<0.01)。不同临床分期间Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05);不同病理分级间Survivin、Her2和PTEN表达的差异具有显著性意义(P<0.05或P<0.01)。Her2和Survivin蛋白表达间存在正相关(r=0.821,P<0.05)。结论Her2和Survivin的高表达是膀胱癌预后不良的指征;P16可作为早期诊断的标记物;PTEN则可作为膀胱癌预后不良的独立性指标。     

星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达及意义

目的研究人脑星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白的差异表达，探讨它们之间、它们与病理分级及复发之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测了50例星形细胞瘤中不同级别的FHIT、、PCNA蛋白的表达水平，以10例非肿瘤脑组织作对照。结果非肿瘤脑组织FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为100％、0，星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白阳性表达率分别为40％、86％；尽管在星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达总体差异有显著性（P〈0．05），Ⅱ级与Ⅲ级、Ⅱ级与Ⅳ级间比较差异有显著性（P〈0．05），但Ⅲ级与Ⅳ级比较差异无显著性（P〉0．05）；经统计学分析FHIT、PCNA蛋白呈皿著负相关（P〈0．01）；8例复发病例中复发前后FHIT、PCNA蛋白表达差异有显著性（P〈0．05）。结论星形细胞瘤中FHIT、PCNA蛋白表达之间的显著负相关，提示FHIT、蛋白可能对细胞增殖具有负性调控作用。FHIT、PCNA蛋白的表达水平可能与星形细胞瘤的病理分级和复发有关，推测FHIT、PCNA蛋白的表达可能与星形细胞瘤的肿瘤侵袭性相关。     

子宫腺肌病中PTEN和Akt的表达及其相关性研究

目的探讨子宫腺肌病病灶中10号染色体缺失张力蛋白磷酸酶(PTEN)和蛋白激酶B（PKB/Akt）的蛋白表达情况,旨在为子宫腺肌病的发生发展以及治疗提供理论依据。方法采用免疫组织化学SP法检测子宫腺肌病异位内膜(30例)、在位内膜（27例）、正常子宫内膜(20例)的腺上皮细胞和间质细胞中PTEN、Akt、磷酸化Akt （P Akt）蛋白的表达并进行比较。结果PTEN蛋白在腺上皮细胞中的表达,正常子宫内膜表达高于在位内膜和异位内膜（P＜0.05,P＜0.01）,子宫腺肌病在位内膜的表达高于子宫腺肌病异位内膜的表达（P＜0.01);Akt、P Akt蛋白在子宫腺肌病异位内膜的腺上皮细胞中的表达强度高于在位内膜（P＜0.05）和正常子宫内膜(P＜0.01),其在位内膜腺上皮细胞中的表达强度高于正常子宫内膜(P＜0.01)。PTEN蛋白在间质细胞中的表达,正常子宫内膜明显高于子宫腺肌病的在位内膜和异位内膜（P＜0.05）,但在位内膜与异位内膜之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）;Akt、P Akt蛋白在间质细胞中的表达,异位和在位内膜明显高于正常内膜,异位内膜和在位内膜两组之间比较差异无统计学意义（P＞0.05）。PTEN与Akt、PTEN与P Akt在子宫腺肌病异位内膜、在位子宫内膜和正常子弓内膜中的表达均呈负相关（r＝-0.444;r＝-0.546）。结论PTEN蛋白表达在子宫腺肌病的在位、异位内膜中减少;Akt、P Akt蛋白表达增加。PTEN蛋白低表达不能有效的抑制Akt的激活,从而对子宫腺肌病的发生与发展起重要的作用。     

P53、Caspase-3和凋亡调节蛋白FasL在乳腺癌的表达及其意义

目的:通过在人乳腺癌组织和癌旁(相对正常)乳腺组织中观察p53、Caspase-3和FasL凋亡调节蛋白的表达,探讨p53、Caspase-3及FasL在乳腺癌疾病发生、发展过程中的作用及关系,为提高生物治疗乳腺癌疾病提供一定的实验依据。方法:运用免疫组织化学方法检测21例收集于手术切除患者的乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织中的p53、Caspase-3及FasL。结果:P53蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为61.9%明显高于癌旁组织(相对正常)乳腺组织的0%;而Caspase-3蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为38.0%明显低于癌旁乳腺组织的80.9%;FasL蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率为57.1%明显高于癌旁乳腺组织的19.0%。结论:在乳腺癌发生、发展过程中p53、Caspase-3和FasL蛋白发挥着既独立又协同的作用。     

绿色荧光蛋白-小鼠纤维介素蛋白融合基因表达载体的构建和表达

目的：构建绿色荧光蛋白(GFP)和小鼠纤维介素蛋白(mfgl2)的融合蛋白表达载体，在仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达，为mfgl2的RNA干扰体外研究提供简便的判断手段。方法：用PCR从mfgl2cDNA文库中扩增出mfgl2cDNA片段，插入到GFP表达载体pEGFP—N2中GFP基因序列的上游，构建成GFP—mfgl2融合基因表达载体pEGFP—mfgl2，将该载体转染到CHO细胞后24—48h，通过荧光显微镜观察并摄片。结果：扩增出长约1．3kb的基因片段，经双酶切鉴定和测序鉴定无误；重组载体转染CHO细胞后，在荧光显微镜下可观察到GFP的表达。结论：成功构建了pEGFP．mfgl2融合基因表达载体；重组载体可在CHO细胞中表达出GFP—mfgl2融合蛋白，为下一步进行mfgl2RNA干扰研究提供了简便的判断手段。     

WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义

目的研究WWOX与c-jun在胃癌中表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测60例原发性胃癌及其癌旁组织中WWOX与c-jun蛋白的表达情况。结果胃癌组织中WWOX蛋白阳性表达率(28.3%)显著低于在癌旁组织中的表达率(81.7%)(P<0.01)。胃癌组织中c-jun蛋白阳性表达率(68.3%)显著高于其癌旁组织中的表达率(23.3%)(P<0.01)。WWOX蛋白的阳性表达与肿瘤的分化程度有关(P<0.05),与其他临床病理参数无关。c-jun蛋白阳性表达与胃癌浸润深度、淋巴结转移有关(P<0.05)。两者的表达存在相关性(χ2=4.96,P<0.01)。结论WWOX蛋白和c-jun蛋白在胃癌组织和癌旁组织的表达均有明显的差异,WWOX蛋白在胃癌中低表达,而c-jun蛋白在胃癌中高表达。     

cAMP—依赖性蛋白激酶的提纯及活性测定

用ＤＥＡＥ－纤维素层析和羟基磷灰石层析方法,从牛心中提取了ｃＡＭＰ－依赖性蛋白激酶。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳鉴定分子量为３８ｋＤａ,并测定了其活性,为ｃＡＭＰ代谢途径的研究打下了基础。     

Ki67、P53蛋白在人喉组织中的表达及临床意义

目的 探讨Ki67和P53蛋白表达在人喉癌发生、发展及预后中的作用.方法 采用免疫组织化学Envision法检测182例喉不同病变组织标本(喉癌141例,喉癌前病变18例,声带息肉15例和癌周正常喉组织8例)中Ki67和P53蛋白的表达.结果 Ki67、P53在人喉癌组织中表达阳性率均显著高于喉癌前病变、声带息肉组织及癌周正常喉组织(P＜0.01);中晚期(Ⅲ～Ⅳ期)、伴颈淋巴结转移及术后3年或5年死亡的喉癌组织中PD4、Ki67阳性表达率均显著高于早期(Ⅰ～Ⅱ期)、无颈淋巴结转移及3年或5年存活病例(P＜0.01或0.05);Ki67和P53蛋白在人喉癌组织中联合表达阳性率显著高于喉其他不同病变组织中联合表达阳性率(P＜0.01).结论 Ki67和P53联合表达与人喉癌的发生、发展及预后有一定的相关性.