肿节风中异秦皮啶含量的HPLC法测定

目的：建立肿节风中主要有效成分异秦皮啶的含量测定方法。方法：采用μＢｏｎｄａｐａｋＣ_１８柱,乙腈０．１％磷酸（２０∶８０）为流动相,检测波长３４４ｎｍ。结果：平均回收率为９８．１％,ＲＳＤ为１．９％（ｎ＝５）。结论：提供了对肿节风质量控制的方法。     

HPLC测定肿节风片中异秦皮啶和迷迭香酸的含量

目的:测定肿节风片中异秦皮啶和迷迭香酸的含量。方法:HPLC法;采用Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(20∶80);流速:1.0mL/min,柱温:35℃,检测波长为342nm。结果:异秦皮啶和迷迭香酸的线性良好,R2值分别为:0.99999和0.99992;平均回收率(n=6)分别为98.7%(RSD=2.22%)和96.9%(RSD=2.76%)。结论:该方法可行,准确度、重复性良好,可用于控制肿节风片的质量。     

不同栽培年限与刺五加异秦皮啶含量

目的:通过不同栽培年限刺五加的异秦皮啶含量测定,为刺五加规范化种植提供依据和指导.方法:采用高效液相色谱法,研究不同栽培年限的刺五加地下器官(根及根茎)及地上器官不同组织(茎木质部和茎皮部)中的异秦皮啶含量.结果:异秦皮啶含量,根及根茎以两年生最高,茎木质部以一年生最高,茎皮部以四年生最高;根、根茎和茎皮部的异秦皮啶含量高于茎木质部.结论:本试验可为刺五加规范化种植提供理论依据及参考.     

2005与2010年版《中国药典》肿节风中异秦皮啶含量测定方法的比较

目的：比较2005与2010年版《中国药典》肿节风中异秦皮啶含量测定方法的优劣。方法：分别按照2005和2010年版《中国药典》肿节风中异秦皮啶的样品处理方法处理同一批肿节风根、茎、叶样品,制备待测溶液,HPLC方法测定异秦皮啶的含量。结果：分别采用2005与2010年版《中国药典》的测定方法测得肿节风根、茎、叶中异秦皮啶平均含量分别为0.071 %,0.045 1%,0.025 3%和0.047 %,0.015 4%,0.0073%。结论： 2010年版方法测得异秦皮啶的含量显著低于2005年版方法,且灵敏度也显著低于2005版方法,建议对2010年版方法进行修订。     

HPLC法测定肿节风注射液中反丁烯二酸和异嗪皮啶的含量

肿节风为常用中药,为金粟兰科植物草珊瑚Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai的干燥全株。具有显著的抗菌、消炎、止痛及一定的肿瘤抑制作用,其主要化学成分为有机酸、倍半萜、黄酮及香豆素类化合物。肿节风注射液为肿节风药材经处理后制成的单味药注射剂,具有清热解毒、消肿散结的功效,用于热毒壅盛所致肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎、菌痢、脓肿,与肿节风片联合用于消化道癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤的治疗。现行肿节风药材质量标准的含量测定项采用HPLC法测定异嗪皮啶(isofraxidin)的含量,而肿节风注射液则是采用HPLC法测定反丁烯二二酸(furmaricacid)的含量,两者之间缺乏相关性,难以有效的控制药品的质量。据文献报道,反丁烯二酸具有抗菌、消炎的药理活性,而异嗪皮啶在体外活件实验中显示出一定的肿瘤细胞抑制作用。为有效控制肿节风注射液的产品质量,本实验建立HPLC法同时测定产品中异嗪皮啶和反丁烯二酸的含量。结果表明:该法可用于肿节风注射液的质量控制。     

HPLC法测定消炎灵片中异秦皮啶的含量

以高效液相色谱法测定了消炎灵片中异秦皮啶的含量,平均回收率为99．4％,RSD为1．32％（n=5)。方法简便,可靠,可作为本品质量控制标准。     

HPLC法测定强力宁片中异秦皮啶的含量

强力宁片是承德颈复康药业集团的主要产品之一，是由刺五加和枸杞子组成的中药复方制剂，具有补中益精、抗疲劳、抗衰老等功效。临床用于体乏无力、失眠健忘、精神怠倦、过度疲劳、腰膝酸软、脾肾阳虚、食欲不振等症。刺五加是处方的君药，其中异秦皮啶是刺五加的特异性成分和主要活性成分之     

不同加工方法对刺五加器官组织中异秦皮啶含量的影响

目的:通过对不同加工方法处理的刺五加中异秦皮啶进行含量测定,为选择刺五加适宜加工方法提供理论依据和实践指导.方法:采用高效液相色谱法,研究不同加工方法对刺五加地下器官(根及根茎)及地上器官不同组织(茎木质部和茎皮部)中的异秦皮啶含量影响规律.结果:在阴干、晒干及60℃烘干三种加工方法中,以60℃烘干的效果较好.结论:本试验为选择刺五加适宜加工方法提供理论依据和参考.     

不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素、秦皮乙素的含量测定

目的：测定不同地理种源秦皮的树皮及叶中秦皮甲素和秦皮乙素的含量。方法：采用HPLC法，以乙腈-水(15：85)为流动相，使用Novapak C18柱，检测波长348nm，外标法。结果：进样量与峰面积线性关系良好，秦皮甲素与秦皮乙素的r值分别为0．9992，0．9994，平均回收率分别为98．2％，99．2％，RSD分别为2．24％，2．15％。因地理种源不同而造成的秦皮质量差异明显存在，陕西产秦皮质量上乘。结论：本法操作快速、简便、易行，精密度、重复性、稳定性好，适用于秦皮含量的分析测定。     

RP-HPLC法测定清热消炎宁胶囊中异秦皮啶的含量

目的：建立测定清热消炎宁胶囊中异秦皮啶含量的方法。方法：采用Lichrospher 100RP18(5μm)色谱柱，以乙腈-0．1％磷酸溶液(20：80)为流动相，检测波长344nm，外标法定量。结果：异秦皮啶进样量在0．028～0．42峭范围内呈线性关系，平均回收率为99．84％，RSD为1．3％(n=5)。结论：此法简便、准确、重现性好。     

肿节风中黄酮苷类成分研究

目的：研究中药肿节风的化学成分，为阐明其有效成分提供依据。方法：利用聚酰胺、Sephadex LH-20，Lipophilic sephadex LH-20柱色谱进行分离，根据化合物的理化性质和波谱数据(IR，UV，MS，¹H-NMR，¹³C-NMR)鉴定其结构。结果：从肿节风水提取物中分离得到5个黄酮苷类和3个其他类化合物，分别鉴定为：山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(1)，槲皮素-3-O-α-D-葡萄糖醛酸苷(2)，槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(3)，5，7，4′-三羟基-8-C-β-D-葡萄糖二氢黄酮碳苷(4)，新落新妇苷(5)，5-O-咖啡酰基-奎宁酸甲酯(6)，3，4-二羟基苯甲酸(7)，异秦皮啶(8)。结论：化合物1～6为首次从本属植物中得到，其中1～3为该属中首次发现的葡萄糖醛酸类化合物。     

草珊瑚的化学成分研究

目的:对草珊瑚的化学成分进行分离和鉴定。方法:采用正相、反相、凝胶柱色谱和高效液相制备方法进行分离纯化,利用波谱数据和理化常数鉴定化合物的结构。结果:从乙醇提取物中分离鉴定了7个化合物,分别为:异嗪皮啶(1),hemidesmin-1(2),(-)-(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol(3),N-trans-feruloyl tyramine(4),methyl rosmarinate(5),ethyl rosmarinate(6),(+)-3,3′,5,5′,7-五羟基双氢黄酮(7)。结论:化合物2~4,6,7均为首次从该植物中分离得到。     

草珊瑚中香豆素化学成分研究

目的:研究草珊瑚中的具有抗菌活性的化学成分。方法:对草珊瑚干燥全草乙醇提取物中具有抗菌活性的氯仿部分和醋酸乙酯部分进行柱色谱分离,根据各种波谱技术和理化性质研究确定各活性化合物的结构。结果:首次从草珊瑚干燥全草中分离得到6种具有抗菌活性的香豆精类化学成分,分别为4,4′-双异嗪皮啶(4,4′-biisofraxidin,1),秦皮乙素(esculetin,2),秦皮素(fraxetin,3),滨蒿内酯(scoparone,4),异嗪皮啶(isofraxidin,5),东莨菪内酯(scopoletin,6)。结论:化合物1为1个新的天然产物,化合物2~4为首次从金粟兰科植物中分离得到,首次测定了6种香豆精类化学成分的抗菌活性,一些化合物具有进一步研究开发成为抑制口腔细菌的天然药用植物制剂的潜力。     

草珊瑚正丁醇部位化学成分及抑菌活性研究

目的：研究草珊瑚Sarcandra glabra正丁醇部位的化学成分及抑菌活性。方法：采用Diaion HP-20，Sephadex LH-20，MCI CHP-20及硅胶等柱色谱法对草珊瑚正丁醇部位的化学成分进行分离纯化，根据理化性质及现代波谱技术确定化合物的结构。采用滤纸片法，记录化合物对金葡菌株24 h 抑菌效果。结果：分离鉴定了7个化合物：5,7,3′,4′- 四羟基-6-C-β-D-葡萄糖二氢黄酮碳苷(1)，山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖酸苷(2)，嗪皮啶(3)，异嗪皮啶(4)，异嗪皮啶-7-O-β-D葡萄糖苷(5)，山柰酚(6)，异美五松针二氢黄酮(7)。其中化合物2，5，6对金葡菌株的抑菌环直径分别为：(14.67±0.08)，(11.14±1.06)，(8.26±1.26) mm，化合物4对金葡菌株无抑菌活性。结论：化合物1～3，5为首次从该植物中分离得到。     

基于多指标评价优选草珊瑚炮制工艺

目的运用层次分析法(AHP)建立一种中药多指标的综合评价方法,优选草珊瑚最佳炮制工艺。方法在单因素实验基础上,通过AHP以新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、落新妇苷、迷迭香酸含量的综合评分为评价指标,以烘干温度、烘干时间为影响因素,通过单因素考察确定草珊瑚叶的净制工艺;以浸泡时间、闷润时间、切制长度、烘干温度为影响因素,通过星点设计-效应面法优选草珊瑚茎的最佳切制工艺;利用多指标AHP对优选工艺进行分析与验证。结果草珊瑚茎最佳炮制工艺为茎抢水洗净1次,12倍量水浸泡1 h,闷润软化3 h,取出后切制成15 mm的段,于50℃烘2 h;叶的炮制方法为叶抢水清洗1次,置50℃干燥4h;再将炮制好的草珊瑚茎与叶2∶1混合。最优的草珊瑚茎软化切制方法的综合评分的验证值与预测值的偏差为4.70%。结论优化的炮制工艺简单、稳定、可行,所得参数可为草珊瑚的研究生产提供科学依据,同时AHP为中药多指标评价研究提供借鉴。     

外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响

目的探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响,找到延缓干旱胁迫的方法,为抗旱栽培提供理论依据。方法考察15%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,经过不同浓度5-氨基乙酰丙酸(ALA)和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量,提高了最大荧光(Fm)、最大光化学效率(Fv/Fm)、光系统PSII潜在活性(Fv/Fo)、PSII有效光化学效率(Fv′/Fm′)、PSII实际光化学效率(ΦPSII)、光化学淬灭系数(qP)、电子传递率(ETR)和光化学速率(PCR)的水平,有效地降低了初始荧光(Fo),非光化学淬灭系数(NPQ)和热耗散速率(HDR),经过ALA处理后的光化学反应能量(P)所占比例显著升高,天线色素热耗散能量(D)和非光化学耗散能量(E)则表现出相反的趋势,并且P成为能量利用的主要途径,ALA促进了能量合理的再分配。结论 100 mg/L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散,提高光合电子传递效率,有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害,提高植株的抗旱能力。     

不同居群草珊瑚的ITS序列分析及模式识别研究

目的 通过分析不同居群草珊瑚Sarcandra glabra和金粟兰属5种近缘植物的核糖体基因内部转录间隔区(rDNA-ITS)序列,为草珊瑚鉴定和品种鉴别提供模式识别与思路。方法 采集不同产地的草珊瑚18份、金粟兰6份,所有样品提取总DNA,并对其ITS片段进行扩增、测序,并搜索GenBank数据库中收录的其他4种金粟兰属植物的ITS序列,运用ClustalX 2.1软件比较不同产地草珊瑚与其他金粟兰属植物的ITS序列差异,并对其进行聚类分析。结果 草珊瑚样品不同居群间的ITS序列相似度达99%,其中位点总突变率ITS1(2.7%)>ITS2(1.4%),而与金粟兰属其他植物相比,位点总突变率ITS2(20.3%~22.7%)>ITS1(15.9%~18.3%)。聚类分析表明18个不同种群的草珊瑚居群间变异极小,且与金粟兰属5种近缘植物具有显著差异的聚类识别。结论 草珊瑚ITS1与ITS2分别为不同居群间及与不同属近缘植物间比较有效的鉴别序列,具有较多个特异性信息位点的草珊瑚ITS序列用于鉴别金粟兰属5种近缘植物,具显著差异的聚类识别,是草珊瑚和金粟兰属近缘植物鉴定和品种鉴别的有效分子标记。     

大孔吸附树脂分离肿节风中总黄酮的研究

目的考察11种大孔吸附树脂对肿节风总黄酮的吸附分离性能。方法采用静态吸附分离法确定适合的大孔吸附树脂;采用动态吸附分离法确定分离条件。以总黄酮吸附量、总黄酮质量分数和回收率为考察指标,采用紫外分光光度法测定总黄酮。结果HPD 400大孔吸附树脂对肿节风总黄酮有良好的吸附分离性能,其分离肿节风总黄酮的工艺条件为:肿节风总黄酮上样质量浓度为10 m g/mL,肿节风总黄酮最大吸附量为9.5 m g/mL,吸附体积流量为2.5 mL/m in,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为3倍柱体积,树脂可重复使用3次。结论采用HPD 400大孔吸附树脂吸附分离肿节风总黄酮简便有效,总黄酮回收率为85%左右。     

土茯苓中二氢黄酮醇甙的研究

从土茯苓根茎中分出３个二氢黄酮醇甙，经理化常数和波谱分析，鉴定为异黄杞甙，异落新妇甙，落新妇甙。利用二维核磁共振相关谱对其信号进行了全面归属，并首次确定了甙键构型。其中异落新妇甙为首次从本属植物中获得。