慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞PD-1表达的研究

目的探讨CD4+和CD8+T淋巴细胞上PD-1的表达与慢性乙型肝炎患者的关系。方法采用流式细胞技术测定66例慢性乙型肝炎患者、17例HBV携带者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1,并与19例健康人群对照。结果慢性乙型肝炎患者外周血CD4+T淋巴细胞PD-1的荧光强度较对照组明显增强,而慢性乙型肝炎患者CD8+T淋巴细胞和HBV携带者CD4+T淋巴细胞PD-1的表达量和荧光强度都高于对照组。CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1表达与血清中乙肝病毒载量无明显关系。慢性乙型肝炎轻度组患者CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1表达的荧光强度明显高于重度组,差异有统计学意义(P0.05)。结论慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能紊乱和淋巴细胞异常激活现象,CD4+和CD8+T淋巴细胞PD-1的表达与其病情发展和转归相关。     

乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28分子表达与病毒载量的关系

目的：分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者、HBeAg阳性乙肝病毒携带者外周血T淋巴细胞上CD28表达情况及其与HBV病毒载量的关系。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4^＋、CD8^＋、CD4^＋CD28^＋、CD8^＋CD28^＋T淋巴细胞,同时检测肝功能HBV DNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4^＋CD28^＋T细胞、CD8^＋CD28^＋T细胞百分率明显低于健康对照组（P〈0.05）;HBV DNA≥107组CD8^＋CD28^＋T细胞百分率低于HBV DNA＜107组（P〈0.05）。结论乙型肝炎病毒感染者CD8^＋T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

慢性乙肝携带者HBV DNA载量与细胞免疫功能间关系研究

目的:探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者的HBV-DNA载量与细胞免疫功能的关系。方法:选择本院诊治的HBV携带者为观察组(90例),根据荧光定量PCR法测定HBV-DNA含量分为阴性组(14例)、低拷贝组(49例)、高拷贝组(27例),同期体检合格的健康人群为对照组(90例),观察各组受试者外周血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+百分比和CD4+/CD8+值,外周血B淋巴细胞、自然杀伤细胞(NK)、活化T细胞比例,及CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率和PD-1平均荧光强度。结果:观察组患者CD3+、CD4+百分比、CD4+/CD8+值、NK细胞比例均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),CD8+百分比、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率和PD-1平均荧光强度高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。随着HBV-DNA病毒拷贝数的增加,CD3+、CD4+百分比、CD4+/CD8+值、NK细胞比例降低(P<0.05或P<0.01),CD8+百分比、CD4+T淋巴细胞和CD8+T淋巴细胞表面的PD-1阳性率及PD-1平均荧光强度上升(P<0.05或P<0.01)。结论:慢性乙型肝炎病毒携带者的HBV-DNA病毒载量与外周紊乱的T淋巴细胞之间存在密切联系,临床可动态监测HBV-DNA病毒载量与T淋巴细胞的变化,以指导临床治疗。     

急、慢性乙型肝炎患者CD8^＋ T细胞PD-1分子表达的变化及临床意义

目的探讨急、慢性乙型肝炎患者病程中程序性死亡因子（PD-1）在CD8＋T细胞上的表达及临床意义。方法收集急性乙型肝炎（AHB）和慢性乙型肝炎（CHB）患者治疗前后的外周血样本,以正常体检者外周血样本作对照组（HC）,应用流式细胞术检测外周血CD8＋T淋巴细胞表面PD-1分子的表达情况,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,同时检测血清ALT水平。统计分析PD-1在急慢性HBV感染过程中的表达变化,并分析其与HBV DNA载量及ALT的相关性。结果发病期的AHB、CHB患者外周血CD8＋T细胞的PD-1均明显高于HC组（P均〈0.01）,且两组病人在治疗后PD-1表达与治疗前相比均降低（P均〈0.05）。发病期AHB组PD-1的表达与ALT水平正相关（r=0.378,P=0.0395）,与HBV DNA水平无相关性（r=0.0468,P=0.477）;发病期CHB组PD-1的表达与HBV DNA水平正相关（r=0.441,P=0.0148）,与ALT水平无相关性（r=0.135,P=0.477）。结论急、慢性乙型肝炎患者外周血CD8＋T细胞上PD-1的表达水平均被上调,急性乙肝患者PD-1的上调与肝脏损伤相关,而慢性乙肝患者PD-1的上调与病毒的复制水平相关。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞程序性死亡受体1表达与HBV-DNA水平的相关性

目的分析慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血T淋巴细胞程序性死亡受体1 (PD-1)表达与乙型肝炎病毒DNA (HBV-DNA)水平的相关性。方法将四川省遂宁市中心医院2016年1月至2019年3月收治的92例CHB患者作为研究对象,另选择60例健康志愿者作为对照组,采用流式细胞仪检测两组受检者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1表达情况,采用荧光定量PCR检测CHB患者HBV-DNA水平,根据HBV-DNA水平将患者分为HBV-DNA高水平组、HBV-DNA中水平组和HBV-DNA低水平组,比较3组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1表达情况,分析CHB患者PD-1表达水平与HBV-DNA水平的相关性。结果观察组外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1表达水平高于对照组(P <0.05);不同HBV-DNA水平的CHB患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1表达水平:HBV-DNA高水平组>HBV-DNA中水平组>HBV-DNA低水平组(P <0.05);CHB患者外周血CD4+、CD8+T淋巴细胞PD-1表达水平与HBV-DNA水平均呈正相关... 更多     

慢性乙型肝炎患者外周血CD8^＋T细胞亚群分布和PD-1表达特征研究

目的分析慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血中CD8^＋T细胞及其亚群表面程序性死亡受体-1（PD-1）表达的变化特征及其临床关联性。方法用流式细胞术检测14例CHB患者和15例健康对照者外周血中CD8^＋T细胞及其亚群初始T细胞（TN）、中央记忆T细胞（TCM）、效应记忆T细胞（TEM）、终末效应记忆T细胞（TEMRA）的频数及细胞表面PD-1的表达水平,同时收集患者一般资料、生化指标和乙型肝炎病毒（HBV）病毒学指标等临床资料。使用SAS 9.1统计软件分析数据,应用Mann-Whitney U test分析组间差异,应用Spearman秩相关进行相关性分析,P〈0.05为差异有统计学意义。结果与健康对照组相比,CHB患者的TEMRA亚群在CD8^＋T细胞中的频数显著降低（P=0.012）,总CD8^＋T细胞（P=0.018）及其TEM亚群（P=0.004）表面PD-1的表达水平显著上升。相关性研究显示,CD8^＋TEM细胞表面PD-1的表达水平与HBV DNA载量呈显著正相关（r=0.554,P=0.040）。结论 CHB患者外周血中PD-1阳性的CD8^＋TEM频数升高,且与外周血中HBV DNA载量呈正相关,提示慢性乙型肝炎患者机体内HBV复制的活跃性可能与外周血中CD8^＋T细胞的活化状态,特别是其TEM亚群上PD-1的高表达关联。     

慢性HBV感染者外周血T细胞亚群研究

目的分析健康人及慢性HBV感染者T细胞亚群特点,探讨宿主细胞免疫功能与慢性HBV感染临床转归的关系。方法使用流式细胞仪检测30名健康人及137例各型HBV感染者外周血T细胞亚群。结果1．对照组与各型HBV感染者的外周血T细胞亚群比较：从慢性HBV携带（CHBVC）组、慢性乙型肝炎（CHB）组到肝炎后肝硬化（PHBC）组,患者外周血CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值呈逐渐下降趋势,显著低于对照组（P〈0．05）。PHBC组CD4^＋T/CD8^＋T比值显著高于对照组和CHBVC组（尸〈0．05）。2．不同程度CHB组间外周血T细胞亚群比较：从CHB（轻度）组、CHB（重度）组到慢性重型乙型肝炎（CSUB）组,患者CD3^＋F、CD4^＋T、CD8^＋T绝对值和CD4^＋T／CD8^＋T比值逐渐下降。CSHB组CD3^＋T、CD4^＋T和CD8^＋T绝对值显著低于CHB（轻度）组（P〈0．05）。结论HBV慢性感染机制复杂,不同的临床转归患者T细胞亚群状态不同。慢性HBV感染后,肝脏损害程度严重的患者T细胞亚群功能低下及紊乱程度明显。     

慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的观察

目的：观察慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群的改变。方法：观察比较慢性乙型肝炎患者及正常健康人的外周血T淋巴细胞亚群差异;并比较慢性乙型肝炎转氨酶正常者与异常者外周血T淋巴细胞亚群差异。结果：慢性乙型肝炎患者CD4^＋、CD8^＋T细胞计数及CD4^＋/CD8^＋低于正常人;慢性乙型肝炎血清转氨酶异常者与转氨酶正常者比较,CD3^＋、CD8^＋T细胞计数升高,CD4^＋/CD8^＋比值降低。结论：慢性乙型肝炎患者存在细胞免疫功能的低下。     

病毒含量不同的慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群比较

[目的]研究慢性乙型肝炎患者外周血乙肝病毒量与外周血T淋巴细胞亚群变化的关系,探讨患者体内病毒含量与患者免疫功能状态的关系。[方法]用流式细胞仪检测60例慢性乙型肝炎患者和15名体检的健康人外周血T淋巴细胞亚群CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋,荧光定量PCR法检测血清HBV-DNA。[结果]慢性乙肝患者CD4^＋,CD4^＋／CD8^＋下降,CD8^＋升高。高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。从HBV-DNA阴性组、低病毒量组到高病毒量组随病毒量增加,CD4^＋细胞减少,而CD8^＋升高,CD4^＋／CD8^＋下降。HBV—DNA阴性组,低病毒量组患者CD3^＋,CD4^＋,CD8^＋及CD4^＋／CD8^＋数值与正常对照比较无显著差异。[结论]高病毒量的患者比低病毒量患者T淋巴细胞亚群变化更明显。HBV-DNA阴性组,低病毒量患者CD4^＋,CD8^＋,CD4^＋／CD8^＋,与正常对照比较数量无显著差异,提示细胞功能低下。     

慢性牙周炎患者外周血T淋巴细胞中PD-1和PD-1L的表达量及其与炎症反应程度的相关性

目的:研究慢性牙周炎患者外周血T淋巴细胞中PD-1和PD-1L的表达量及其与炎症反应程度的相关性。方法:选择2012年5月~2015年10月期间在广东省清远市人民医院确诊为慢性牙周炎的58例患者以及同期体检的50例健康志愿者,分别作为研究的牙周炎组和对照组,采集外周血并测定T淋巴细胞中PD-1和PD-1L的表达量,采集龈沟液及血清并测定炎性因子、黏附分子、蛋白酶分子的含量。结果:牙周炎组患者外周血CD3~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞表面PD-1、PD-1L的荧光强度均显著高于对照组,血清及龈沟液中IL-1β、IL-8、TNF-α、sICAM-1、sVCAM-1、MMP-1、MMP-7、MMP-13的含量显著高于对照组;外周血CD3~+T淋巴细胞和CD8~+T淋巴细胞表面PD-1、PD-1L的荧光强度与血清及龈沟液中IL-1β、IL-8、TNF-α、sICAM-1、sVCAM-1、MMP-1、MMP-7、MMP-13的含量呈正相关。结论:慢性牙周炎患者外周血T淋巴细胞中PD-1和PD-1L的高表达能够通过负性免疫调节效应来增强炎症反应、促进牙槽骨的吸收和破坏。     

HBeAg阳性慢性乙型肝炎外周血T淋巴细胞上CD28表达初步研究

目的分析HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞CD28表达特点。方法采集健康人、HBeAg阳性乙肝病毒携带者、HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者的外周血,抗体标记,采用流式细胞技术检测CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T淋巴细胞,同时检测肝功能、HBVDNA。结果慢性乙型肝炎组、乙肝病毒携带组CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞、CD28+T细胞明显低于健康对照组(P<0.05);高病毒载量组(HBVDNA≥107组)CD8+CD28+T细胞低于低病毒载量组(HBVDNA<107组)(P<0.05)。结论所有结果显示乙型肝炎病毒持续感染状态与CD8+T细胞上共刺激分子CD28的表达低下有关,而CD8+T细胞上CD28的低表达与高病毒载量有关。     

慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者外周血T细胞亚群的变化和意义

目的分析慢性乙型肝炎患者、乙型肝炎病毒携带者和正常人外周血T细胞亚群的差异,探讨乙型肝炎的发病机制与宿主细胞免疫功能的关系。方法收集2004年2月至7月在中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院肝炎门诊就诊的的慢性乙型肝炎患者29例、HBV携带者25例及健康献血员35例的外周血,使用流式细胞仪检测T细胞亚群,分析其差异及临床意义。结果慢性乙肝患者、HBV携带者和正常对照外周血CD4+T细胞计数分别为565±192、672±148和816±259;CD8+T细胞计数分别为491±225、445±157和609±177。与正常对照组比较,慢性乙肝患者和HBV携带者外周血白细胞、淋巴细胞、T细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞、CD4+CD28+T细胞、CD8+CD28+T细胞计数均减少,慢性乙肝患者NK细胞计数减少;与正常对照和HBV携带者相比,慢性乙肝患者CD8+CD38+T细胞和CD4+CD45RA-记忆/效应T细胞比例显著升高,CD4+CD45RA+62L+初始T细胞比例及计数均显著减少。结论慢性乙肝患者和HBV携带者体内存在T淋巴细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱,这可能与乙肝病毒感染后慢性化相关。     

慢性乙肝患者及HBV携带者CD8^＋T细胞表面活化分子CD38和HLA-DR表达研究

目的研究慢性乙肝（CHB）患者阿德福韦酯治疗前后及HBV携带者CD8＋T细胞表面活化分子CD38和HLA-DR表达情况,并探讨其与疾病进展的关系。方法收集32例经阿德福韦酯治疗的CHB患者,31例HBV携带者和28例正常对照,采集CHB患者治疗前后及HBV携带者和正常对照外周血。采用流式细胞术检测CD4＋和CD8＋T细胞数量和比例,以及CD8＋CD38＋和CD8＋HLA-DR＋T细胞比例,HBV DNA和生化由本院检验室检测。结果 CHB患者治疗前CD8＋CD38＋T细胞比例显著高于HBV携带者和正常对照组,阿德福韦酯治疗后显著降低（P〈0.05）。HBV携带者CD8＋CD38＋T细胞比例高于正常对照组（P〈0.05）。CHB患者治疗前CD8＋HLA-DR＋T细胞比例显著高于正常对照组（P〈0.01）,但与HBV携带者无明显差异,阿德福韦酯治疗后显著下降,仍高于正常水平（P〈0.05）。结论 HBV感染可以引起CD8＋T活化水平显著升高,阿德福韦酯抗病毒治疗能够降低CD8＋T的活化。CD8＋T活化水平是良好的HBV感染病情评价指标。     

慢性HBV感染者外周血单个核细胞中miR-194-5p和MagT1表达水平检测及其意义

目的：检测慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者外周血单个核细胞（PBMCs）中miR-194-5p和镁离子（Mg²⁺）转运蛋白1（MagT1）表达水平,阐明其可能的临床意义。方法：收集40例健康体检者（健康对照组）、40例HBV携带者（HBV携带组）、40例轻中度慢性乙型肝炎（轻中度CHB组）和40例重度慢性乙型肝炎（重度CHB组）患者的临床资料。采集各组研究对象外周血并利用Ficoll-Hypaque密度梯度离心法分离PBMCs,采用RT-PCR法检测各组研究对象PBMCs中miR-194-5p及MagT1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组研究对象PBMCs中MagT1蛋白表达水平,检测各组研究对象外周血和PBMCs中Mg⁺水平,流式细胞术检测各组研究对象PBMCs中CD8+T淋巴细胞表面分子程序性死亡受体1（PD-1）和自然杀伤细胞受体2群D分子（NKG2D）表达水平。在293T细胞中分别转染miR-194-5p mimic质粒（miR-194-5p mimic组）和miR-NC质粒（miR-NC组）,应用双荧光素酶报告基因实验检测2组293T细胞中荧光素酶活性。结果：与健康对照组比较,HBV携带组、轻中度CHB组和重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均明显降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。与HBV携带组和轻中度CHB组比较,重度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平均降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T细胞表面分子PD-1表达水平降低（P<0.05）。与HBV携带组比较,轻中度CHB组患者PBMCs中MagT1 mRNA和蛋白表达水平、Mg²⁺水平及CD8+T淋巴细胞表面分子NKG2D表达水平降低（P<0.05）,miR-194-5p mRNA及CD8+T淋巴细胞表面分子PD-1表达水平升高（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验,MagT1是miR-194-5p靶基因。结论：miR-194-5p可能通过靶向下调MagT1表达,引起MagT1介导的Mg²⁺内流障碍,造成CD8+T淋巴细胞免疫活性降低,导致乙型肝炎慢性发展。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及临床意义

目的 观察不同类型乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）感染者外周血T淋巴细胞亚群变化特点.方法 对我院2013年6-11月门诊及住院的200例乙肝患者和50例健康对照者采用流式细胞术（flow cytometry,FCM）检测外周血淋巴细胞（CD45＋）、T淋巴细胞（CD45＋CD3＋、CD45＋CD3＋CD4＋、CD45＋CD3＋CD8＋）、B淋巴细胞（CD45＋CD3-CD19＋）、NK淋巴细胞（CD45＋CD3-CD16＋56＋）百分比和细胞绝对计数.结果 急性乙型肝炎组T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数较健康对照组显著升高（P＜0.01）.慢性乙型肝炎组、肝硬化组和肝衰竭组：T淋巴细胞总数、CD4＋和CD8＋T淋巴细胞数、CD4＋/CD8＋比值均较健康对照组降低,其中肝衰竭组＜肝硬化组＜慢性乙型肝炎组.慢性乙型肝炎组CD4＋淋巴细胞百分比较健康对照组显著降低（P＜0.01）.肝硬化组CD4＋淋巴细胞百分比较慢性乙型肝炎组显著降低（P＜0.01）,CD8＋T淋巴细胞百分比显著升高（P＜0.01）.肝衰竭组T淋巴细胞和CD4＋T淋巴细胞百分比较肝硬化组显著降低（P＜0.01）.结论 乙型肝炎患者CD4＋T淋巴细胞持续降低,与疾病病程发展密切相关.     

慢性乙型肝炎中医虚实辨证与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系探讨

目的：通过对虚实不同证型的慢性乙型肝炎患者体内HBV特异性的细胞毒性T淋巴细胞（CTL）及T淋巴细胞亚群及病毒复制水平的检测,探讨慢性乙型肝炎中医虚实辨证分型与机体特异性细胞免疫及病毒复制的关系。方法：抗原特异性CTL及T淋巴细胞亚群采用流式细胞仪检测;HBV病毒学指标由ABBOTT I2000检测;HBVDNA由ABI荧光定量PCR仪完成。结果 （：1）虚实两组患者特异性CTL细胞的阳性率存在差异（P〈0.05）,实证组患者特异性CTL细胞阳性率较虚证组患者高,差异有统计学意义（P〈0.05）。（2）虚实两组CD3＋、CD4＋以及CD4＋/CD8＋值均较正常对照有所下降,其中虚证组患者CD4＋、CD4＋/CD8＋水平下降较正常组明显,有统计学意义（P〈0.05）,虚实两组之间CD4＋水平有显著性差异（P〈0.05）,但实证组与正常对照组相比,二者无显著性差异（P〉0.05）,虚实两组患者CD8＋水平均高于正常组,虚证组升高更明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。（3）虚实两组患者病毒复制程度不同,实证组中高病毒载量患者所占比例较大,约为62.2%,虚证组高病毒载量患者所占比例仅为40%,较前者明显减少,虚证组患者病毒复制处于低复制水平,二者有统计学意义（P〈0.05）。结论：虚实两组患者的外周血特异性CTL细胞阳性率、T淋巴细胞亚群及病毒复制水平存在有统计学差异,可以为指导临床辨证分型提供一定的客观参考价值。