骨髓内残存白血病细胞检测方法探讨

将不同的白血病细胞株与正常骨髓细胞按比例混合，体外模拟人缓解期白血病骨髓。用染色体核型分析、流式细胞仪－ＤＮＡ（ＦＣＭ－ＤＮＡ）及ＦＣＭ－免疫标志等方法测定，证明该三项实验的灵敏度达０．５％。初步临床验证上述方法亦有一定的应用价值     

筑巢式PCR等多项指标对小儿急性白血病微量残留病的监测

①目的　探讨采用筑巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ）等多项指标监测小儿急性白血病（ＡＬ）微量残留病（ＭＲＤ）的临床意义。②方法　对１５２ 例ＡＬ在形态学、免疫学和细胞遗传学（ＭＩＣ）分型诊断的基础上,结合Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,姐妹染色单体交换（ＳＣＥ）、染色体核型分析方法进行ＭＲＤ监测。③结果　对５８ 例急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）进行了Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）Ｖδ２Ｄδ３ 基因重排监测,其中８３％ 的Ｂ－ＡＬＬ和２５％ 的Ｔ－ＡＬＬ具有此基因重排,检测灵敏度为１０－ ５～１０－ ６ ．对４４ 例ＡＬＬ进行了ＭＲＤ动态监测,结果显示化疗期间ＰＣＲ由阴性转为阳性或持续阳性者,易引起骨髓复发、死亡。ＰＣＲ转阴时间有明显个体差异性。持续完全缓解３ 年以上的ＡＬＬ病儿ＰＣＲ持续阴性可作为停药治疗的可靠指标。对７６ 例ＡＬ进行了ＳＣＥ动态监测,结果表明ＳＣＥ频率变化与疾病的严重程度呈平行关系。对６１ 例ＡＬ进行了染色体核型动态监测,结果表明初发ＡＬ染色体核型正常者亦有ＤＮＡ 严重损伤。④结论　在ＭＩＣ分型诊断的基础上,采用Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ,ＳＣＥ,染色体核型分析等多项指标进行ＡＬ的ＭＲＤ动态监测、综合分析评价,对指导治疗、预测复发及判断     

滋养细胞疾病DNA含量的流式细胞分析

用流式细胞术检测１９８７～１９９２年石蜡包埋标本４４例。其中正常绒毛８例，ＤＴ＝０．９９±０．０８，均为二倍体。葡萄胎１９例，ＤＩ＝１．１５±０．３２，非整倍体５例，占２６．３％，其中３例在随访中发生恶变为侵蚀性葡萄胎。滋养细胞肿瘤１７例，ＤＩ＝１．４５±０．４５，非整倍体１１例，占５４．５％。滋养细胞肿瘤ＤＮＡ指数及非整倍体率明显高于葡萄胎Ｐ＜０．０５。因此ＤＮＡ指数及非整倍体率增高是恶性肿瘤的一个特点，作为区别良、恶性肿瘤的一个定量依据，也是预测葡萄胎恶变的一个重要参数，为临床进行预防性化疗提供客观依据。     

流式细胞计量术在临床医学中的应用

近年来，流式细胞计量术(flow cytometry,FCM)在细胞生物学、分子生物学、免疫学、血液学及肿癌学等学科领域中已经得到了广泛的应用。下面介绍FCM在细胞周期分析、细胞凋亡分析、核型分析、多价耐药性检测、免疫细胞分型分选、血液病的免疫分型、肿癌细胞监测、机体免疫状态监别等方面研究中的应用。     

2例慢性肉芽肿病临床特征和中性粒细胞功能测定

目的：探讨2例慢性肉芽肿病（CGD）患儿临床特点、患儿及其父母血中性粒细胞活化功能。方法：收集2005～2010年在本院临床拟诊为CGD2例患儿的临床资料,同时采集患儿及其父母外周静脉血进行流式细胞术中性粒细胞功能测定。结果：2例皆为男性,外周血免疫细胞分型T、B细胞计数均正常,血清免疫球蛋白水平增高。流式细胞术呼吸爆发实验NAPDH氧化酶活性皆降低。结论i2例患儿临床症状符合慢性肉芽肿病改变,流式细胞术检测证实皆为中性粒细胞吞噬功能缺陷。     

DETECTION OF PLATELET-DERIVED MICROPARTICLES USING FLOW CYTOMETRY AND ITS CLINICAL APPLICATION

Objective. To establish a flow cytometric internal standard method for counting platelet-derived microparti-cles (PMPs) and to study its clinical significance.Methods. PMPs suspension (platelet poor plasma, PPP) was extracted by gradual centrifugation. According to the size of PMPs, 3 μm and 0. 8μm latex beads were used as internal standards for the quantitation. PMPs were counted by adjusting flow cytometric discrimination and voltage of forward scatter and side scatter.Results. In 30 healthy donors, the average concentration of resting PMPs was (1. 2×105±5.7×104 ) /ml and that of activated PMPs was (1. 6×106±9. 1×105) /ml. Compared with healthy donors, PMPs mean value was significantly higher ( P < 0. 001) in 18 patients with coronary artery disease, 12 with acute cerebral infraction and 23 with chronic renal failure [the average PMPs concentration, ( 6. 1×105±2. 5×105 )/ml, ( 6. 8×105±3. 4×105) /ml and (5. 9×105±3. 1×105) /ml respectively]. However, no significant difference in PMPs     

流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白测定的临床意义

目的：探讨流式细胞术对人脑胶质瘤多药耐药膜糖蛋白（P－gp）测定的临床意义。方法：采用流式细胞术直接免疫荧光染色法检测新鲜脑胶质瘤和正常脑组织标本中P－gp的表达。结果：不同性别、年龄、肿瘤大小之间P－gp表达阳性率无明显差异（P＞0．05），不同恶性程度之间P－gp表达阳性率差异有显著性（P＜0．05）。相同级别胶质瘤中复发与原发者P－gp表达差异有显著性（P＜0．05）。结论：P－gp表达与病人性别、年龄、肿瘤大小无关，与肿瘤恶性程度呈正相关，P-gp测定可判断胶质瘤对化疗药物敏感性，指导临床应用多药耐药逆转剂，制订化疗方案，亦对判断预后有指导作用。     

35例儿童急性淋巴细胞白血病DNA含量流式细胞术分析

对35例急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿血液标本进行了DNA含量流式细胞术(FCM)分析。依据DNA指数(DI)分类,35例中亚二倍体5例,二倍体22例,超二倍体8例。其中亚二倍体组患儿初诊时肝脾肿大及白细胞计数显著高于其它二组。患儿完全缓解(CR)后其DI值恢复正常。依据DNA含量做细胞周期分析表明,获CR后患儿的增殖期细胞百分数(P％)较初治时有显著下降。流式细胞术标本制做简单,便于临床常规使用。     

流式细胞术检测DNA含量在胃癌早期诊断中的价值

肿瘤的发生与发展是一个多基因、多因素的过程,胃癌亦是如此,它的发生与发展是一个极其复杂的过程,有众多复杂的分子生物学变化.用流式细胞术(FCM)测定细胞核DNA含量,可反映细胞的增殖能力,并可根据异倍体的出现,判断组织的良性与恶性.由于细胞核DNA含量的变化出现在细胞形态和组织结构改变之前,因此,检测胃黏膜癌前病变和胃癌细胞核内DNA含量,对分析癌前病变发展趋势,发现早期胃癌有一定价值.FCM检测细胞DNA倍体在胃癌的研究中虽然取得了一定成果,但能否同病理形态学一样作为胃癌诊断依据尚不明确.随着研究的不断深入,人们对它的了解越来越多,应用于胃癌早期诊断的前景更为广阔.     

流式细胞术单分散细胞悬液样品的制备方法

流式细胞术是近年来发展的一项新技术,应用该项技术的重要环节是制备合格的单分散细胞悬液。本文对食管癌组织、脱落细胞和血液标本的悬液制备方法作了初步探讨,结果表明,胶原酶对实体肿瘤组织单细胞悬液制备是可行的。脱落细胞和血液样品容易得到合格的细胞悬液。并对影响流式细胞分析的一些因素作了简单的讨论。     

肾上腺肿瘤DNA含量测定的临床意义

为明确DNA含量可否作为肾上腺肿瘤良恶性诊断的指标 ,采用FCM技术对肾上腺嗜铬细胞瘤 10例以及肾上腺皮质肿瘤 7例新鲜标本进行了DNA含量的测定。6例病理为皮质腺瘤标本 ,2例DNA含量为非整倍体 ,其中 1例出现肝转移而确诊为恶性 ,1例皮质腺癌为二倍体的患者无瘤生存 ,而肾上腺嗜铬细胞瘤以及瘤旁肾上腺标本DNA含量均为非整倍体 ,但病理学及随访均不支持恶性。认为采用FCM技术测定肾上腺肿瘤DNA含量对判断皮质肿瘤良恶性可能是一项重要方法 ,但对嗜铬细胞瘤的作用不大     

A COMPARATIVE STUDY OF DNA FLOW CYTOMETRY AND MICROSPECTROPHOTOMETRY IN GASTRIC CARCINOMAS

Flow cytometric (FCM) and microspectrophotometric (MSP) measurements of cell nuclear DNA content were made in 53 fresh gastric carcinoma specimens and in 30 gastric mucosal specimens with chronic gastritis. DNA aneuploidy was found in 32/53 (60%) of gastric carcinomas, and appeared more frequently in wellor moderately differentiated tubular adenocarcinomas (90%) than in undifferentiated and mucousa cell carcinomas (23.6%) (P<0.001). No aneuploidy was found in chronic gastritis samples, but their proliferative cell fractions were higher than in normal control gastric mucosa samples (P<0.01). A comparison was made between FCM and MSP analyses of DNA content in 29 cases of gastric carcinoma, a high correlation rate (r=0.90) was found. The advantages and limitations of both methods are discussed, they may be used in combination for more precise cytochemical analysis.     

贲门癌切除标本切缘残留癌的流式细胞分析及其与预后的关系

研究目的探讨贲门癌切除术切缘残癌细胞的DNA倍体类与患者预后的关系以及残癌细胞的克隆起源。研究设计病例对照研究研究对象 1981～1985年间手术切除的贲门癌标本共40例,患者均经5年随访。处理方法样品制成单细胞悬液,经过DNA染色,用FACS-Δ20型流式细胞计检测。每例样品需测2万个细胞。结果以组方图和数字表的形式显示并打印。测定结果 40例残癌中,2倍体(2C)16例,占40％;异倍体(AN)24例,占60％。2C患者的3年及5年生存率显著高于AN患者(P<0.05)。残癌的倍体类型与主体癌之间无显著性差异(P>0.05)。结论 DNA倍体是判断残癌患者预后的重要生物学指标;残癌细胞起源于与主体癌相同的DNA干系细胞群。     

造血系统疾病的患者外周血象出现幼红、幼粒细胞临床意义的探讨

本文报道经骨髓检查确诊为各种造血系统疾病的患者中,137例外周血发现幼稚红细胞(简称幼红),250例同时出现幼红、幼稚粒细胞(简称幼粒)。就其出现的临床意义进行了探讨,认为成人外周血出现幼红或同时出现幼红、幼粒则表示有一定病理意义,提示患者有造血系统疾病存在的可能,应予以注意。此种情况多见于红白血病、严重巨幼贫、骨髓转移癌、骨髓纤维化等。     

SIGNIFICANCE OF FLOW CYTOMETRY IN THE DIAGNOSIS AND TREATMENTOF BLADDER TUMORS

ＳＩＧＮＩＦＩＣＡＮＣＥＯＦＦＬＯＷＣＹＴＯＭＥＴＲＹＩＮＴＨＥＤＩＡＧＮＯＳＩＳＡＮＤＴＲＥＡＴＭＥＮＴＯＦＢＬＡＤＤＥＲＴＵＭＯＲＳＳｏｎｇＺｏｎｇｌｕ（宋宗禄）；ＳｕｎＸｉａｏｊｕｎ（孙晓峻）ａｎｄＷｕＤｅｃｈｅｎｇ（吴德诚）（ＰｅｋｉｎｇＵｎ...     

加味玉屏风散对小鼠脾淋巴细胞增殖影响的流式细胞术分析

用流式细胞术分析了加味玉屏风散对小鼠脾淋巴细胞增殖周期中各时相分布及细胞增殖指数的影响,结果表明,本方具有促进淋巴细胞DNA合成,加快分裂增殖,延缓细胞衰老及增强免疫功能效应。     

结缔组织病患者抗ENA抗体的检测及其临床意义

用免疫印迹法检测２２８例结缔组织病（ＣＴＤ）患者血清抗ＥＮＡ抗体，阳性率为７１．９％，明显高于对照组的３．２％（Ｐ＜０．０ｌ）。在各种ＣＴＤ中，系统性红斑狼疮抗ＥＮＡ抗体阳性率为６７．６％。结果表明：抗ＥＮＡ抗体的检测对ＣＴＤ的诊断、鉴别诊断及分型有重要价值。     

哮喘患者呼气流速峰值节律变化的临床意义

监测38名支气管哮喘患者及38名正常对照者的呼气流速峰值(PEFR)的昼夜变化,发现哮喘病人PEFR昼夜变化比值A的均值为29.0%,明显高于正常组(8.8%),可作为诊断哮喘的重要依据。哮喘病人以清晨下降型(占79.3%)为其昼夜变化的特征性类型,对这方面的深入研究将有助于哮喘病的诊治。     

上皮性卵巢癌DNA倍体的测定

①目的 探讨DNA倍体对上皮性卵巢癌的临床意义。②方法采用流式细胞仪对60例上皮性卵巢肿瘤石蜡包埋组织进行DNA倍体测定。③结果46例卵巢癌DNA二倍体16例(35%),DNA异倍体30例(65%)。4例交界性上皮性卵巢肿瘤有2例为DNA异倍体,10例良性上皮性卵巢肿瘤及8例正常卵巢组织均为DNA二倍体。DNA倍体与肿瘤组织学分级、腹水及术后残余灶大小密切相关,而与组织学类型、分期和病人年龄无关。在3年以上的随访中,9例病死病人有8例为DNA异倍体,其平均生存期为1.5年。1例DNA异倍体的I期交界性卵巢肿瘤病人于术后3年复发。④结论DNA倍体可反映上皮性卵巢癌的侵袭性,在临床上可作为上皮性卵巢癌的一个主要预后指标。     

混合性结缔组织病患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体测定及其临床意义

目的:通过检测混合性结缔组织病(MCTD)患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体,研究其与MCTD有关指标的关系,以探讨该抗体在MCTD发病中的作用.方法:收集MCTD患者、非MCTD结缔组织病患者和正常人群血清.用Dot-ELISA法测定抗鸡卵核中72000蛋白抗体及其滴度.结果:88例MCTD患者血清中有71例检出该抗体,阳性率为80.7%(71/88);正常对照人群100例均为阴性;皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)76份,硬皮病(PSS)48份和系统性红斑狼疮(SLE)116份血清无交叉反应出现.在MCTD患者血清中,该抗体的几何平均倒数滴度(GMRT)治疗前高于治疗后,与疾病活动指数、ANA滴度及抗nRNP抗体滴度呈显著正相关.结论:MCTD患者血清抗鸡卵核中72000蛋白抗体检测,对MCTD诊断有较高的价值,在治疗随访中也可起到一定的临床提示作用.