核小体结合蛋白1在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用

目的 明确核小体结合蛋白1(NSBP1)在雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3)中的生物学功能.方法 通过RNA干扰技术,使PC-3细胞中的NSBP1表达水平明显降低,然后用胆囊收缩素(CCK)-8法观察细胞活性的变化,用流式细胞光度术检测细胞周期的变化.结果 NSBP 1的表达抑制后,从60 h开始PC-3 细胞活性(A值为0.329±0.017与0±386±0.022)有显著下降(P＜0.05),抑制率到108 h达到高峰(27.5%).流式细胞光度术检测结果显示,NSBP1抑制后的PC-3细胞的G2M+S期细胞百分率也从60 h开始(31.7%±2.0%)与对照组(37.3%±2.5%)有统计学意义(P＜0.05).结论 NSBP 1在前列腺癌PC-3细胞中,对维持细胞活性及促进细胞生长增殖有重要作用.     

抑制核小体结合蛋白1基因对人前列腺癌细胞LNCaP增殖的作用

目的利用RNA干扰（RNAi）技术,探讨核小体结合蛋白1（NSBP1）基因对人激素依赖前列腺癌细胞系LNCaP增殖的作用。方法设计并合成针对NSBP1的4种小分子干扰RNA（siRNA）（包含1种阴性对照）,构建能抑制NSBP1 mRNA表达的重组pSilencer 2．1-U6 neo质粒,转染LNCaP细胞。应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western印迹实验检测不同质粒对NSBP1表达的抑制效率,选取抑制效率最高的质粒转染LNCaP细胞,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞增殖活性,用流式细胞光度术检测细胞周期的变化。结果筛选出抑制效率最高的质粒pSilencer-81（mRNA水平抑制80％,蛋白水平抑制85％）,与阴性对照pSilencer-Neg质粒分别转染LNCaP细胞。转染60h后,经过84h、108h,一直到132h,LNCaP／81细胞A值（代表细胞活性）低于LNCaP／Neg细胞A值,差异均有统计学意义（t=4．501,4．282,5．229,4．759,均P〈0．05）。抑制率随时间延长而增加,在84h有所降低,在108h达最大值30．2％。转染60h后,经过84h,一直到108h,LNCaP／81细胞的G2M＋S期细胞百分率较LNCaP／Neg细胞的降低,差异均有统计学意义（t=3．705,3．887,8．220,均P〈0．05）。结论针对NSBP1的siRNA通过抑制前列腺癌LNCaP细胞中NSBP1基因的表达,能明显抑制细胞的增殖,NSBP1可能参与前列腺癌细胞生长增殖过程。     

P53蛋白和增殖细胞核抗原在前列腺癌中的表达及意义

目的　探讨前列腺癌中P5 3蛋白和增殖细胞核抗原 (PCNA)表达的意义。②方法　用免疫组织化学技术 ,对 30例前列腺癌和 2 0例良性前列腺增生组织中P5 3蛋白和PCNA进行检测。③结果　 6 3.3%前列腺癌中存在P5 3蛋白的异常表达 ,良性前列腺增生组织P5 3蛋白均表达阴性 ;前列腺癌PCNA增殖指数明显高于良性前列腺增生组织 (t′ =8.31,P <0 .0 0 1) ,P5 3蛋白及PCNA表达均与前列腺癌的组织学分级及病人预后有关 (P5 3:Hc=7.73,P <0 .0 5 ;z=2 .5 5 ,P <0 .0 5 .PCNA :F =36 .2 5 ,q =3.2 5～ 8.96 ,P <0 .0 1.t=5 .2 5 5 ,uc=2 .843,P <0 .0 0 1) ,前列腺癌P5 3蛋白阳性表达者PCNA增殖指数明显高于P5 3蛋白阴性表达者 (t=4.46 6 ,P <0 .0 0 1)。④结论　p5 3基因突变可能是促进前列腺癌发生发展和导致肿瘤细胞增殖异常活跃的重要因素 ;P5 3蛋白表达与PCNA增殖指数可作为鉴别前列腺良恶性肿瘤 ,以及判断前列腺癌的恶性程度和预测预后的综合性指标之一。     

金属硫蛋白在前列腺癌中的表达及临床意义

目的探讨金属硫蛋白（Metallothionein，MT）在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法观察不同分级的66例前列腺癌、20例前列腺增生组织MT的表达情况，分析MT与临床病理因素及预后之间的关系。结果20例前列腺增生组织MT的表达率为100％（20／20），66例前列腺癌组织中MT的表达率为59．1％（39／66），两者比较差异有统计学意义（P〈0．05）。MT的表达随着前列腺癌组织学分级、临床分期的增加而增加（P〈0．05）；与患者血清PSA水平、年龄无相关性（P〉0．05）；MT阳性表达组与阴性表达组之间的生存率差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MT的表达与前列腺癌发生、发展及预后有一定的关系。     

PTEN蛋白在前列腺癌中的表达及意义

目的 研究前列腺癌PTEN蛋白的表达及其与肿瘤转移、分级及分期的关系。方法 采用抗PTEN的多克隆抗体免疫组织化学技术染色法(Envision法)研究35例前列腺癌组织切片。结果 35例前列腺癌中有8例(22．9％)呈不同程度的阳性表达。转移者的PTEN表达率(5．9％)明显低于非转移者(38．9％，P＜0．01)；在A、B期的表达率明显高于C、D期(P＜0．05)；高、中分化组间表达率的差异虽无显著性，但高分化与低分化、中分化与低分化间PTEN阳性表达率的差异有显著性(P＜0．05)。PTEN蛋白在良性组织上皮细胞及肿瘤细胞胞质中表达，在胞核及基质中不表达，在癌旁增生组织上皮细胞中呈强弱不等的阳性表达。结论 PTEN可作为良好的前列腺癌进展的肿瘤标记物。     

TGF-β和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的：探讨转化生长因子-β（TGF-β）和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法：应用免疫组织化学SP法检测36例前列腺癌标本组织中TGF-β和P53蛋白表达情况。结果：36例前列腺癌标本组织中高、中、低分化癌分别为10、16和10例。TGF-β在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为30%（3/10）、37.5%（6/16）和70.0%（7/10）;P53蛋白在高、中和低分化前列腺癌组织中的阳性表达率分别为20%（2/10）、25.0%（4/16）和50%（5/10）。TGF-β和P53蛋白在高、中分化前列腺癌组织中的表达强度均低于在低分化前列腺癌组织（P<0.05）。结论：TGF-β和P53蛋白阳性表达率和表达强度与前列腺癌分化程度有相反的变化趋势,提示检测TGF-β与P53蛋白的表达可协助鉴定前列腺癌分化程度并评估预后。     

前列腺癌组织中层粘连蛋白的免疫组织化学表达

①目的 探讨前列腺癌组织中层粘连蛋白（LN）的表达与其生物学行为之间的关系。②方法 应用免疫组织化学LSAB法检测38例前列腺癌组织中LN的表达。③结果 前列腺癌组织中LN分布在基膜上，呈多样性；高分化癌组织中LN呈连续型分布的百分比明显高于低分化和未分化癌组织（P＝0．038，0．009），发生转移的癌组织中LN呈连续型分布的百分比明显低于未转移的癌组织（P＝0．035）。④结论 LN在前列腺癌侵袭和转移过程中可能起重要作用。     

高速泳动族蛋白B1和自噬在急性肺损伤致病中的作用机制

急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是危重患者病程中出现的一种危及生命的临床综合征.鉴定早期诊断ALI的新型生物标志物和寻找更有效的治疗方法是当前研究的热点.高速泳动族蛋白B1 (high mobility group box-1 protein,HMGB1)是一种与脓毒症、恶性肿瘤和免疫性疾病密切...     

凋亡相关基因Survivin蛋白在前列腺癌组织中的表达及临床意义

[目的]探讨凋亡抑制基因Survivin蛋白在前列腺癌（PCa）中的表达及临床意义。[方法]应用免疫组织化学方法，检测43例前列腺癌和5例正常前列腺组织中Survivin蛋白的表达。[结果]PCa组织Survivin蛋白的表达率为81．40％（35／43），其中低、中、高分化腺癌的阳性表达率分别为100％、84．62％、57．14％；临床分期A—B、C—D期阳性表达率分别为72．41％、100％。5例正常前列腺组织中未见阳性表达。[结论]Survivin蛋白的表达与前列腺癌临床病理特征和生物学行为有密切关系，检测Survivin对诊断前列腺癌、判断其恶性程度及预后均有一定参考价值。     

claudin-1在胆囊癌中的表达及意义

目的:检测claudin-1蛋白在原发性胆囊癌中的表达情况,并分析其与临床病理参数的可能关系。方法:收集胆囊癌标本47例、胆囊腺瘤18例、慢性胆囊炎15例。应用免疫组织化学方法检测claudin-1蛋白的表达情况,同时收集胆囊癌患者的临床病理资料,并分析结果。结果:在胆囊癌、胆囊腺瘤及慢性胆囊炎组织中claudin-1的阳性表达率分别为89.4%、27.8%和26.7%,差异有统计学意义(P0.01),胆囊腺瘤组与胆囊炎组差异无统计学意义(P0.05)。胆囊癌患者的年龄、性别、肿瘤的组织学类型间claudin-1表达差异均无明显不同(P0.05)。病理Ⅱ～Ⅲ级标本中claudin-1表达高于Ⅰ级(P0.01),Nevin分期Ⅳ～Ⅴ期中表达高于Ⅰ～Ⅲ期(P0.05),有转移者高于无转移者(P0.05)。结论:claudin-1在胆囊癌的发生、侵袭及转移机制中发挥重要作用。     

高迁移率族蛋白B1在子宫内膜腺癌中的表达及意义

目的 探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)在子宫内膜腺癌组织及细胞系中的表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学染色法检测45例不典型增生子宫内膜、120例子宫内膜腺癌和20例正常子宫内膜组织中HMGB1的表达,用免疫印迹法(Western blot)分析HMGB1的表达水平;另外选取高、中、低分化子宫内膜腺癌细胞系ECC-1、HEC-1 a、KLE细胞,应用免疫细胞化学染色和Western blot检测其HMGB1的表达差异。结果 HMGB1在子宫内膜癌和不典型增生组织中的阳性表达率分别为80.00%(96/120)、66.67%(30/45),明显高于正常内膜5.00%(1/20),差异有统计学意义(P＜0.05);HMGB1表达阳性率与肿瘤浸润程度、转移和手术病理分期联系密切(P＜0.05),而与肿瘤的分化程度无明显联系(P＞0.05)。ECC-1、HEC-1-a、KLE细胞中均发现HMGB1表达,表达水平无明显差异。结论 HMGB1在子宫内膜腺癌及癌前病变中表达水平明显升高,可能在子宫内膜癌发生和发展过程中具有重要作用。     

凋亡抑制蛋白Livin在良性前列腺增生和前列腺癌中的表达及临床意义

目的:探讨凋亡抑制蛋白(Inhibitor of apoptosis protein IAP)家族的新成员Livin及其两种异构体Livin α和Livin β在良性前列腺增生和前列腺癌组织中的表达,及其与前列腺癌发生发展的关系.方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中Livin α和Livin β的表达.结果:26例前列腺癌组织中Livin α表达阳性率为65.38%,20例良性前列腺增生组织中阳性表达率为60.00%,而在正常前列腺组织中均不表达,Livin β在前列腺癌组织及良性前列腺增生和正常前列腺组织中均不表达.Livin α在正常前列腺组织中的表达率与在前列腺癌、良性前列腺增生中的阳性表达率有显著差异,而存良性前列腺增生和前列腺癌中的阳性表达率无显著差异,同时Livin α的表达与前列腺癌的病理分级和临床分期均无明显相关关系.结论:Livin α存前列腺癌和良性前列腺增生中的高表达及与前列腺癌和良性前列腺增生的发生、发展密切相关.     

Shh蛋白在前列腺癌组织中的表达及临床意义

目的探讨Shh蛋白在人前列腺癌、前列腺增生组织中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测60例前列腺癌和60例前列腺增生组织Shh的表达。结果 Shh在前列腺增生组织中不表达或低表达,而在前列腺癌组织中的表达明显高于增生组织,前列腺癌中Shh的表达与病理分级密切相关。结论 Hedgehog信号通路中Shh蛋白表达上调可能参与了前列腺癌的发病,其在前列腺癌的发生、发展等方面可能具有重要作用。     

HMGA1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

目的探讨高迁移率族蛋白A1（high mobility group protein A1,HMGAl）在人类甲状腺乳头状癌组织中的表达及临床意义。方法应用RT—PCR检测32例甲状腺乳头状癌组织及相应的癌旁正常组织和15例甲状腺腺瘤组织中HMGAl mRNA的表达情况;应用免疫组织化学法检测石蜡包埋的60例甲状腺乳头状癌组织和20例甲状腺腺瘤组织中HMGAl的蛋白表达水平。结果HMGAl mRNA在甲状腺乳头状癌组织中的表达量显著高于癌旁正常甲状腺组织（P〈0．01）及甲状腺腺瘤组织（P〈0．05）。HMGAl蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的阳性表达率显著高于甲状腺腺瘤组织（P〈0．01）,在有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组（P〈0．05）;HMGAl蛋白的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、包膜侵犯及TNM分期均无关（P〉0．05）。结论HMGAl的异常表达可能与甲状腺乳头状癌的发生发展和淋巴结转移有关,有望成为甲状腺乳头状癌诊治中的一个新的标志物。     

PTEN和Eg5蛋白在前列腺癌中表达及相关性

目的 对前列腺癌中PTEN和Eg5蛋白进行免疫组化检测,探讨PTEN和Eg5蛋白表达与前列腺癌临床病理的相关性。方法 采用免疫组化SP法对2014年12月至2016年3月浙江大学医学院附属金华医院检测81例前列腺癌和45例前列腺增生PTEN和Eg5蛋白的表达,对前列腺癌临床病理资料与PTEN和Eg5表达分析,采用Spearmen对PTEN和Eg5蛋白表达进行相关性分析。结果 前列腺癌中PTEN蛋白表达阳性率为25.93%(21/81),前列腺增生中表达阳性率为88.89%(40/45),二者比较,差异有统计学意义(P0.05)。Eg5蛋白在前列腺癌中表达阳性率为70.37%(57/81),前列腺增生中表达阳性率为4.44%(2/45),二者比较,差异有统计学意义(P0.05)。PTEN蛋白缺失表达和Eg5蛋白增高表达与前列腺癌的Gleason评分、TNM分期、术前PSA、精囊浸润、盆腔淋巴结转移和五年生化复发密切相关(P0.05)。Spearmen相关性分析显示PTEN与Eg5蛋白的表达呈负相关(r=-0.763,P0.05)。结论 前列腺癌中PTEN蛋白下降表达,Eg5蛋白升高表达,它们异常表达与前列腺癌发生进展有关。     

核糖体结合蛋白在甲状腺癌中的表达及其与临床病理特征的关系

目的:探讨核糖体结合蛋白1(RRBP1)在甲状腺癌组织中的表达及其表达与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测RRBP1在86例甲状腺癌和15例癌旁正常组织中的表达,并分析其表达与临床病理特征的关系。结果:RRBP1在甲状腺癌及癌旁正常组织中表达的阳性率分别为77.9%和20.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。甲状腺癌组织中RRBP1表达在肿瘤直径≥2 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期及淋巴结转移患者中的表达均明显高于肿瘤直径< 2 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期及无淋巴结转移患者(P<0.05),而在患者不同年龄、性别、吸烟史及肿瘤好发部位间的表达阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:RRBP1可作为甲状腺癌发生相关的新型分子标志物,其表达与患者的临床病理特征相关。     

RPS4Y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义

目的 探讨RPS4Y1蛋白在前列腺癌组织中的表达及意义.方法 利用Real-time PCR、RT-PCR和免疫组织化学方法检测RPS4Y1在不同细胞系以及前列腺癌组织中的表达.结果 RPS4Y1的表达在C4-2中比LNCaP中下调(137.19±13.64)倍;RPS4Y1在LNCaP、C4-2、C4-2B中随着恶性程度的增加,其表达随之降低,在骨转移前列腺癌细胞系中未见表达,而脑转移的前列腺癌细胞系DU145中有较高表达,在MCF-7、HepG2、Hela、PC12、293T等细胞系中未检测到RPS4Y1的表达,特异性较好;RPS4Y1胞浆阳性,表达与恶性程度呈负相关,与表达谱结果一致.结论 RPS4Y1蛋白可作为前列腺癌进展诊断的候选分子标志物.     

高迁移率族蛋白B1在肝癌细胞中的表达及其临床意义

目的比较不同转移能力人肝癌细胞和人正常肝细胞中高迁移率族蛋白B1(high mobility group protein box1,HMGB1)mRNA和蛋白表达的差异,以探索HMGB1在原发性肝癌生长和转移中的临床意义。方法应用PCR法检测高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2和人正常肝细胞LO2 HMGB1mRNA的表达,Western blot法检测高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2和人正常肝细胞LO2 HMGB1蛋白的表达。结果高转移人肝癌细胞LM3、低转移人肝癌细胞HEPG2的HMGB1mRNA和蛋白均较正常肝细胞LO2的表达明显升高(P<0.05);而且,高转移人肝癌细胞LM3较低转移人肝癌细胞HEPG2 HMGB1mRNA和蛋白的表达也明显升高(P<0.05)。结论 HMGB1在高转移人肝癌细胞LM3中较在低转移人肝癌细胞HEPG2和正常肝细胞LO2中高表达,提示HMGB1可能与原发性肝癌的生长和转移有关。     

脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4基因的表达及相关性

目的 探讨脓毒症大鼠肝组织高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)mRNA的表达变化及其相互关系.方法 采用盲肠结扎穿孔术(CLP)制成脓毒症大鼠模型.将50只Wistar大鼠分成正常对照组(10只)和CLP组(40只),CLP组分别于CLP术后6、12、18、24 h各处死10只大鼠,应用实时聚合酶链反应检测肝脏组织HMGB1和TLR4 mRNA的表达.结果 正常对照组大鼠肝脏组织存在微量的HMGB1、TLR4 mRNA表达.脓毒症组大鼠CLP术后各时间点的HMGB1、TLR4 mRNA表达均显著高于正常对照组(P值均<0.01),CPL术后6 h HMGB1、TLR4 mRNA表达开始升高,至12 h达峰值,18 h后开始下降,各时间点间HMGB1、TLR4 mRNA表达的差异均有统计学意义(P值均<0.05).直线相关分析表明,脓毒症大鼠肝脏组织HMGB1 mRNA与TLR4 mRNA的表达呈正相关(r=0.90,P=0.04).结论 HMGB1可能通过TLR4进一步激活炎性细胞,引起下游炎性因子释放的瀑布效应.