多次氯胺酮麻醉对大鼠学习记忆的影响

目的观察多次使用氯胺酮对学习记忆的影响及剂量效应关系。方法30只SD大鼠随机分为高剂量组、低剂量组和对照组,高、低剂量组大鼠分别予以氯胺酮50 mg/kg和10 mg/kg腹腔注射麻醉,每日1次,连续7日。对照组予以等容生理盐水。用Morris水迷宫测试各组大鼠寻找隐匿台的逃避潜伏期和空间搜索能力,用电镜观察海马神经元超微结构。结果高剂量组逃避潜伏期显著延长(P<0.01),并且空间搜索能力明显降低(P<0.01),对照组与低剂量组之间有关指标无显著性差异。电镜观察显示高剂量组海马神经元有明显变性。结论高剂量氯胺酮多次麻醉对学习记忆有损害作用。     

梓醇对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的 考察梓醇对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马Bax、Bcl-2蛋白表达的影响.方法 采用双侧颈总动脉结扎来制备VD大鼠模型,造模后第30天,将大鼠分成模型组、阳性组及梓醇高、中、低剂量组,连续给药30 d.采用Morris水迷宫法检测大鼠的学习记忆能力,HE染色法观察海马CA1区的病理组织形态,免疫组化法检测海马CA1区Bax和Bcl-2蛋白的表达.结果 与模型组相比,高、中剂量组大鼠第3、4天的逃避潜伏期明显缩短,高、中、低剂量梓醇组大鼠的站台穿越次数明显增加;梓醇能改善大鼠海马CA1区神经元的病理改变;梓醇高、中剂量能下调促凋亡蛋白Bax的表达,上调抑凋亡蛋白Bcl-2的表达.结论 梓醇能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与抑制海马神经细胞凋亡有关.     

芦丁对慢性脑低灌注大鼠海马组织神经元损伤及RhoA/ROCK信号通路的影响

目的 探讨芦丁对慢性脑低灌注大鼠海马组织神经元损伤及Ras同源基因家族成员A（RhoA）/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶（ROCK）信号通路的影响。方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、芦丁低剂量组（20 mg/kg）、芦丁中剂量组（40 mg/kg）、芦丁高剂量组（80 mg/kg）、RhoA抑制剂组（Rhosin hydrochloride,40 mg/kg）,每组9只。除假手术组外,其余各组大鼠均通过结扎颈动脉构建慢性脑低灌注大鼠模型,按照各组给药剂量进行干预处理,每天给药1次,持续4周。采用Morris水迷宫实验测定大鼠的认知功能和记忆能力,苏木素-伊红染色观察大鼠海马组织神经元状态,TUNEL染色检测大鼠海马组织神经元凋亡情况,透射电镜观察大鼠海马组织神经元超微结构,蛋白免疫印迹法检测大鼠海马组织凋亡相关蛋白[胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白（Bax）]及RhoA/ROCK通路相关蛋白表达情况。结果 与假手术组相比,模型组大鼠海马组织神经元数量减少,神经元超微结构、细胞器结构严重受损,逃避潜伏期、海马组织神经元凋亡率、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bax）、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达显著升高（P<0.05）,穿越平台次数显著减少（P<0.05）;与模型组相比,芦丁各剂量组及RhoA抑制剂组大鼠神经元数量显著增多,神经元超微结构、细胞器受损等均得到一定的恢复,逃避潜伏期、海马组织神经元凋亡率、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Bax）、RhoA、ROCK1、ROCK2蛋白表达显著降低（P<0.05）,穿越平台次数显著增多（P<0.05）,且芦丁各剂量组呈剂量依赖效应;芦丁高剂量组与RhoA抑制剂组上述指标比较差异均无统计学意义。结论 芦丁可能通过抑制RhoA/ROCK信号通路缓解慢性脑低灌注引起的大鼠神经元损伤。     

硫化氢对创伤后应激障碍大鼠空间学习记忆能力及海马神经元放电的影响

目的探讨创伤后应激障碍(posttraumatic stress disorder,PTSD)大鼠行为学改变及脑内胱硫醚-β-合成酶(cysta-thionine-β-synthase,CBS)/硫化氢(hydrogen sulfide,H_2S)水平的变化,并研究外源性补充H_2S对大鼠行为学影响的作用及机制。方法应用连续单一应激方案制备创伤后应激障碍动物模型,用Morris水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,Western blot技术和亚甲基蓝法检测海马脑区CBS/H_2S体系含量,用多管微电极在体细胞外电生理记录海马神经元放电情况。结果 (1)与正常对照组比较,PTSD组大鼠逃避潜伏期增加(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显减少(P<0.01);海马脑区的CBS/H_2S体系含量明显降低(P<0.01,P<0.05)。(2)与PTSD组比较,PTSD+硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaH S)组大鼠逃避潜伏期减小(P<0.01),在平台所在象限停留时间百分比和通过原平台位置次数明显增加(P<0.01)。(3)微量压力注射L-半胱氨酸(L-cysteine)使海马神经元自发放电频率明显升高(P﹤0.01)。结论PTSD大鼠通过抑制海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。海马脑区CBS/H_2S体系导致空间学习记忆能力降低。H_2S改善PTSD大鼠空间学习记忆能力的机制可能与其增加海马神经元放电频率和兴奋性有关。     

安钠咖对大鼠体质量及空间学习和记忆巩固能力的影响

目的观察腹腔注射安钠咖对大鼠体质量及空间学习和记忆巩固能力的影响。方法27只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、安钠咖小剂量组及安钠咖大剂量组,隔1 d于腹腔注射药物前测量并记录大鼠体质量。药物注射结束后,应用Morris水迷宫评定大鼠空间学习及记忆巩固能力。结果安钠咖大剂量组大鼠平均体质量与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);而安钠咖小剂量组与对照组、安钠咖大剂量组大鼠体质量比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。在Morris水迷宫定位航行试验中,安钠咖大剂量组逃避潜伏期与对照组及安钠咖小剂量组相比,差异有统计学意义(P<0.05);而对照组与安钠咖小剂量组比较平均逃避潜伏期在各训练日差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量安钠咖使大鼠体质量增加缓慢,并可损害大鼠空间学习和记忆巩固能力。     

地塞米松对氯胺酮麻醉后幼鼠认知功能及海马Caveolin-1表达的影响

目的:探讨地塞米松对氯胺酮麻醉致幼鼠认知功能的影响及机制。方法:选取30只SD幼鼠,随机分为正常对照组、氯胺酮组、氯胺酮+地塞米松组,每组10只。除正常对照组外,其余两组采用腹腔注射氯胺酮(50 mg·kg^-1)麻醉并行剖腹探查术,术前和术后氯胺酮+地塞米松组腹腔注射给药地塞米松(2.0 mg·kg^-1),1次/d,连续3 d,正常对照组和氯胺酮组腹腔注射等体积生理盐水。各组幼鼠进行Morris水迷宫实验,HE染色观察大鼠脑组织病理变化,Western blotting实验、免疫组化实验、Realtime PCR实验检测脑部海马组织中小窝蛋白-1(Caveolin-1)蛋白及基因表达水平。结果:定位巡航阶段第1天,氯胺酮组、氯胺酮+地塞米松组幼鼠逃避潜伏期均显著高于正常对照组(P<0.05),氯胺酮组与氯胺酮+地塞米松组幼鼠逃避潜伏期差异无统计学意义(P>0.05);从第2天开始,氯胺酮组幼鼠逃避潜伏期显著高于氯胺酮+地塞米松组与正常对照组(P<0.05)。与氯胺酮组比较,氯胺酮+地塞米松组幼鼠首次穿过平台所在象限需要的时间显著缩短,穿台次数显著增多(P<0.05);幼鼠海马组织Caveolin-1蛋白和mRNA表达水平显著升高(P<0.05)。病理组织学检查结果显示,氯胺酮+地塞米松组幼鼠大脑组织海马区神经元细胞形态明显改善。结论:地塞米松提高幼鼠脑组织Caveolin-1的表达改善氯胺酮麻醉手术后对学习记忆影响。     

山茱萸环烯醚萜苷对穹隆海马伞切断大鼠学习记忆能力和突触生长素的影响

目的:探讨山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycoside,CIG)对脑损伤大鼠模型学习记忆能力的影响及其作用机制。方法:采用穹隆海马伞切断(Fimbria-fornixtransaction,FFT)制备机械性脑损伤大鼠模型。造模后灌胃给予CIG(20,60和180 mg.kg-1)21 d,应用避暗试验和Morris水迷宫试验测定大鼠学习记忆能力的变化。然后立即取脑,采用免疫组织化学染色法和Western blot法测定脑海马区突触生长素(syn-aptophysin,SYP)表达的变化。结果:在避暗试验中,FFT模型大鼠潜伏期较假手术对照组明显缩短(P<0.01),CIG(60和180 mg.kg-1)组与模型组相比潜伏期显著延长(P<0.05)。在Morris水迷宫试验中,模型大鼠逃避潜伏期与假手术对照组相比明显延长(P<0.01),CIG(20和60 mg.kg-1)灌胃给药可显著缩短模型大鼠的逃避潜伏期(P<0.05,P<0.01)。免疫组织化学和Western blot检测结果显示,模型组大鼠海马区SYP表达比假手术对照组明显减少(P<0.01);CIG(20,60和180 m...     

TNF-α在丙泊酚诱发的神经元凋亡及认知功能障碍中的作用

目的探讨TNF-α在丙泊酚诱发的海马神经元凋亡及远期认知功能障碍中的作用。方法 7 d龄(P7)SD大鼠随机分为3组:Control组,无任何处理;P(single)组,腹腔注射丙泊酚50 mg·kg~(-1);P(repeated)组,腹腔注射丙泊酚50mg·kg~(-1),每天1次,共7次。丙泊酚两组于麻醉结束后2 h(对照组则分别对应上述两时间点)采用Western blot法检测海马组织TNF-α含量。另取P7大鼠随机分为5组:Control组;P(single)组;P(repeated)组;P(single)+ETN组,腹腔注射丙泊酚50 mg·kg~(-1)前30 min侧脑室注射依那西普0.4 mg·kg~(-1);P(repeated)+ETN组,腹腔注射丙泊酚50 mg·kg~(-1),每天1次,共7次,第1次和第4次丙泊酚注射前30min侧脑室注射依那西普0.4 mg·kg~(-1)。于P7、P13、P21、P35时间点,各组采用免疫组化法检测海马CA1区神经元凋亡。剩余大鼠于P36-P41行Morris水迷宫实验。结果丙泊酚单次或多次暴露均使海马组织TNF-α含量明显高于同期对照水平(P<0.05,P<0.01);P(single)组中,活化caspase-3阳性神经元于P7较对照组同时间点明显增多(P<0.05),而于其它时间点差异无显著性(P>0.05),逃避潜伏期和穿越平台次数与对照组比较均无差异(P>0.05);P(repeated)组中,P13、P21、P35时间点活化caspase-3阳性神经元均明显高于同期对照组水平(P<0.01),逃避潜伏期从d1~d5均明显高于对照组同期水平(P<0.01),且穿越平台次数明显低于对照组(P<0.01);依那西普侧脑室注射后,丙泊酚麻醉后各时点的活化caspase-3阳性神经元、逃避潜伏期及穿越平台次数与对照组比较差异均无显著性(P>0.05)。结论 TNF-α介导了丙泊酚诱发的发育期海马神经元凋亡和远期认知功能障碍,而远期认知功能障碍可能与持续性神经元凋亡有关。     

氯胺酮对七日龄SD大鼠脑皮层神经元凋亡的影响及其机制探讨

目的:探讨氯胺酮对七日龄SD大鼠脑皮层神经元凋亡的影响及其机制。方法:新生七日龄SD大鼠18只,随机分成3组:对照组腹腔注射等量的生理盐水,低剂量氯胺酮组、高剂量氯胺酮组分别腹腔注射20 mg/kg和80 mg/kg氯胺酮,给药24小时后,用原位末端标记法检测脑皮层神经元的凋亡细胞数,免疫印迹法检测Bcl-2基因和Bax基因蛋白表达的变化。结果:原位末端标记法检测结果显示与对照组比较,低剂量氯胺酮组的凋亡细胞增多但无统计学意义(P>0.05),高剂量氯胺酮组的凋亡细胞数则呈显著性增加(P<0.05)。免疫印迹法检测结果显示与对照组比较,低剂量和高剂量氯胺酮组Bcl-2基因蛋白表达水平明显下降,Bax基因蛋白表达水平增加。结论:氯胺酮可导致新生大鼠皮层神经元凋亡,其机制可能与皮层神经元Bcl-2基因蛋白表达下调、Bax基因蛋白表达上调有关。     

铜对大鼠学习记忆和海马区超微结构的影响

目的观察铜负荷饮食对大鼠空间学习记忆行为和海马超微结构的影响。方法 40只雄性大鼠随机分为模型组和空白对照组各20只,采用Morris水迷宫实验测试大鼠学习记忆能力,采用原子吸收法检测肝、脑组织铜元素含量,电镜技术观察海马区超微结构变化。结果 Morris水迷宫实验:模型组大鼠在定位航行试验中平均逃避潜伏期较正常对照组显著延长,空间探索试验中穿越平台次数较正常组明显减少(P<0.01),与正常对照组比较,模型组大鼠肝、脑组织铜含量明显增加(P<0.01),海马组织内模型组大鼠神经元突触间隙明显变宽(P<0.05),突触后致密物厚度明显变薄(P<0.05)。结论铜可能通过损伤海马超微结构引起大鼠学习记忆功能障碍。     

七氟醚麻醉对子代大鼠海马神经元自噬的影响

目的探讨七氟醚麻醉对子代大鼠海马神经元自噬的影响。方法孕5~7 d的SD雌鼠18只,采用随机数字表法将其分为3组(n=6):对照组(C组)、七氟醚组(S组)、七氟醚+自噬抑制剂wortmannin组(SW组)。C组母鼠仅置于麻醉箱内,通入相同流量氧气暴露4 h,S组和SW组母鼠给予2.8%七氟醚吸入麻醉4 h。SW组子代大鼠于出生后1~3 d腹腔注射0.5 mg/kg自噬抑制剂wortmannin,C组和S组于相同时点腹腔注射等量的生理盐水对照。于出生后22 d,对各组子代大鼠进行水迷宫实验,测定其学习记忆功能,出生后28 d,完成水迷宫测试后处死子代大鼠,并取其海马组织。采用TUNEL染色测定子代大鼠海马组织内神经元的凋亡率,采用Western blot法检测子代大鼠海马组织内微管相关蛋白l轻链3(LC3)Ⅱ/LC3Ⅰ比值作为自噬活性的指标。结果 S组、C组子代大鼠逃避潜伏期较C组,穿越平台次数比较差异无统计学意义(P>0.05),SW组子代大鼠逃避潜伏期较C组延长,穿越平台次数较C组减少(P<0.05)。与C组比较,S组和SW组子代大鼠海马神经元的凋亡率和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值均升高(P<0.05);与S组比较,SW组子代大鼠海马神经元的LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值降低(P<0.05)。结论大鼠孕期七氟醚麻醉对子代学习记忆功能无影响,其机制与激活生理性自噬对抗神经元凋亡有关。     

氯胺酮对未成年大鼠记忆维持及海马p-CREB、c-fos表达的影响

目的 探讨氯胺酮(Ket)对未成年大鼠记忆维持能力及海马磷酸化环腺苷酸应答元件结合蛋白(p-CREB)、c-fos表达的影响及其相关性.方法 筛选合格21日龄SD大鼠72只分为正常对照组、生理盐水组、假训练组、氯胺酮组(根据时间与剂量不同分为四个亚组:Ket1a、Ket1b:分别给与氯胺酮50 mg/kg、100 mg/kg腹腔注射后3 d进行训练).生理盐水组腹腔注射等体积的生理盐水.采用Y型迷宫进行学习记忆能力测试,应用免疫组化法检测海马p-CREB、c-fos的表达.结果 与生理盐水组相比,Ket1a、Ket1b组大鼠记忆维持能力下降(P＜0.05),同时海马神经元p-CREB、c-fos的表达减少(P＜0.05);而Ket3a组、Ket3b组差异无统计学意义(P＞0.05).与正常对照组相比,其余各组海马神经元p-CREB、c-fos表达均增多(P＜0.05).而Ket1a和Ket1b或Ket3a和Ket3b组之间的行为学指标与免疫组化指标差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 氯胺酮可能通过抑制未成年大鼠海马p-CREB、c-fos的表达短期影响其记忆维持能力.     

不同剂量美金刚对慢性脑缺血老龄大鼠认知障碍的改善作用及机制

目的：探讨美金刚（Memantine）对慢性脑缺血老龄大鼠认知障碍及海马区神经的保护作用及机制。方法：采用双侧颈总动脉结扎法（2VO）建立慢性脑缺血动物模型,将造模成功的31只12月龄雄性SD大鼠随机分为缺血组（n=7）和干预组（3.75,7.5,15,30 mg·kg^-1,n=6）,对照组（n=5）只分离血管不做结扎处理。采用水迷宫评估大鼠空间学习记忆功能,免疫荧光染色后对海马齿状回神经细胞增殖及CA1区凋亡细胞进行计数。结果：水迷宫实验显示：缺血组大鼠空间学习和记忆能力明显受损,与对照组和干预组相比有统计学差异（P<0.01）,美金刚干预后大鼠的空间学习和记忆能力得以改善（P<0.05）。免疫荧光染色显示：缺血组大鼠新生神经细胞计数明显多于对照组（P<0.01）,干预组齿状回新生神经细胞数量较对照组进一步增多（P<0.01）;缺血组大鼠凋亡细胞明显多于对照组（P<0.01）,美金刚干预后凋亡细胞数量较缺血组明显减少（P<0.05）。相关性分析表明,CA1区凋亡细胞数量与空间记忆功能呈负相关。结论：美金刚可通过促进海马神经细胞增殖、抑制细胞凋亡,改善认知功能障碍,且不同的药物剂量作用效果存在差异。     

Chronic administration of docosahexaenoic acid improves the performance of radial arm maze task in aged rats

1. In the present study, we investigated the effect of docosahexaenoic acid (DHA) on spatial memory related learning ability in aged (100 weeks) male Wistar rats. 2. Rats were fed a fish oil-deficient diet through three generations and were then randomly divided into two groups. Over 10 weeks, one group was per orally administered 300 mg/kg per day DHA dissolved in 5% gum Arabic solution and the other group was administered the vehicle alone. Five weeks after the start of the administration, rats were tested with the partially baited eight-arm radial maze to estimate two types of spatial memory related learning ability displayed by reference memory error and working memory error. 3. Chronic administration of DHA significantly decreased the number of reference memory errors and working memory errors. 4. The level of lipid peroxide (LPO) in the hippocampus tended to decrease with chronic DHA administration and demonstrated a positive correlation with the number of reference memory errors. 5. These results suggest that the accumulation of hippocampal LPO reduces spatial memory related learning ability in aged rats. Moreover, chronic administration of DHA was effective in decreasing the level of hippocampal LPO, then improving learning ability.     

LTBP2通过TLR4/NF-κB信号通路抑制糖尿病大鼠海马神经元凋亡

目的 探讨沉默潜在转化生长因子 β 结合蛋白 2（LTBP2）基因对糖尿病大鼠学习记忆功能的影响及 机制。方法 雄性SD大鼠45只一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）55 mg/kg,72 h后采尾静脉血测血糖,将血糖＞ 16.7 mmol/L 的大鼠定为糖尿病模型;模型诱导成功后将大鼠随机分成3组：糖尿病（DM）组、si-LTBP2组（大鼠海马 给予腺病毒包装的针对LTBP2的siRNA 10 μL）、sc-LTBP2组（大鼠海马给予LTBP2对照序列10 μL）,每组15只。另 取15只正常大鼠作为对照（CON）组。12周后,水迷宫检测大鼠学习记忆能力;免疫组织化学染色和实时荧光定量聚 合酶链式反应（qPCR）检测海马LTBP2表达;Western blot检测海马LTBP2、Toll样受体4（TLR4）、核因子（NF）-κB蛋 白相对表达量;TUNEL染色检测海马神经元凋亡。结果 与CON组相比,DM组、si-LTBP2组和sc-LTBP2组LTBP2、 TLR4、NF-κB表达明显增加,海马神经元凋亡明显增多,大鼠学习记忆能力明显下降（均P＜0.05）。与DM组相比, si-LTBP2 组 LTBP2、TLR4、NF-κB 表达明显降低,海马神经元凋亡明显减少,大鼠学习记忆能力明显提升（均 P＜ 0.05）。结论 沉默海马LTBP2的表达可明显改善糖尿病大鼠学习记忆能力,其机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号 通路有关。     

吡格列酮对脂多糖所致大鼠学习记忆障碍的改善作用及其机制

目的研究吡格列酮(Pioglitazone,Pio)对脂多糖引起的大鼠学习记忆障碍和海马CA1区锥体神经元损伤的保护作用。方法大鼠灌胃给予Pio(408、0 mg/kg)3周,脑室内注射LPS(5、30μg),2 d后进行Mor-ris水迷宫定位航行实验,连续训练5 d,第6天进行空间探索实验。行为学实验后,取脑组织,制成石蜡切片,进行尼氏(Nissl)染色和胶质纤维酸蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)免疫组织化学染色,研究海马CA1区锥体神经元形态学改变和星型胶质细胞的活化浸润情况。结果脑内注射LPS可以引起大鼠学习和记忆障碍,表现为大鼠逃避潜伏期较对照组明显延长,大鼠在平台所在象限游泳距离百分比明显较对照组低,这些行为学改变伴随海马CA1区星型胶质细胞和锥体神经元的损伤。治疗组LPS所致的学习记忆损伤减轻,Pio能明显减轻海马CA1区锥体神经元的损伤和星型胶质细胞的浸润。结论吡格列酮能对抗LPS引起的锥体神经元的损伤和星型胶质细胞的活化浸润,从而改善大鼠的学习记忆能力。     

美洛昔康对老年痴呆模型大鼠学习记忆能力及脑组织SOD，MAO-B，MDA的影响

目的探讨美洛昔康对老年痴呆模型大鼠抗痴呆作用及其作用机制。方法采用慢性铝过负荷建立大鼠脑损伤老年痴呆动物模型,通过每天给予大鼠灌胃葡萄糖酸铝（Al3＋200 mg.kg-1）溶液,每周持续5 d,连续灌胃20周建立老年痴呆大鼠动物模型;根据大鼠体重每千克给予3mg或1mg美洛昔康的比例,在大鼠灌胃给予铝后进行美洛昔康溶液灌胃。建模成功后,分别观察大鼠空间学习记忆能力、海马病理形态学变化及大鼠脑组织SOD,MAO-B活性和MDA含量。结果老年痴呆模型大鼠学习记忆能力明显下降、海马神经元损伤,而在大鼠脑组织中MDA含量及MAO-B活性则呈现明显升高趋势,同时大鼠脑组织SOD活性则显著降低。给予美洛昔康能明显改善老年痴呆模型大鼠的学习记忆能力,减轻大鼠海马神经元细胞损伤,同时使老年痴呆大鼠脑组织MDA含量明显减少,而大鼠脑组织MAO-B活性升高及SOD活性降低的趋势得到明显遏制。结论美洛昔康使老年痴呆模型大鼠学习记忆能力有明显的改善,对老年痴呆模型大鼠有显著的保护作用。