Apoptin与顺铂联用对膀胱癌T24细胞具有协同杀伤作用

目的探讨pApoptin-EGFP质粒转染与顺铂(DDP)联用对体外培养的膀胱癌T24细胞的协同杀伤作用。方法脂质体介导pApoptin-EGFP瞬时转染与梯度浓度DDP共同处理膀胱癌T24细胞,流式细胞仪检测细胞增殖变化;pApoptin-EGFP瞬时转染与10μg/ml的DDP处理T24细胞,Annexin V法检测凋亡变化;金氏法分析两种抗肿瘤方式的协同作用。结果 DDP、pEGFP-N1+DDP和pApoptin-EGFP+DDP 3组的IC50分别为10.61、7.9和2.4μg/ml,以金氏法计算,确认pApoptin-EGFP质粒转染与DDP处理对T24的抑制增殖效应具有协同作用,而转染空质粒与DDP干预仅仅为简单相加。同法检测DDP、pApoptin-EGFP、pApoptin-EGFP+DDP 3组的凋亡率分别为(6.96±1.32)%、(19.55±1.09)%和(32.5±1.15)%,3组凋亡率相互间均具有显著性差异(P<0.05)。按金氏法计算,确认转染pApoptin-EGFP重组质粒与10μg/ml浓度DDP处理对T24细胞具有协同的促凋亡作用。结论 Apoptin基因转染与顺铂联用对T24肿瘤抑制增殖及诱导凋亡具有协同作用。     

Mir-200b抑制膀胱癌细胞T24的迁移

目的在膀胱癌细胞系中过表达mir-200b,观察其对T24细胞迁移能力的影响,并检测WASF-3表达水平的改变。方法将mir-200b mimic,WASF-3 siRNA及阴性对照分别转染T24细胞,通过qPCR及Western印迹实验检测WASF-3表达水平的改变;利用Transwell实验检测转染后T24细胞迁移能力的改变。结果转染mir-200b及WASF-3 siRNA后WASF-3在mRNA及蛋白水平上均有明显下降,同时细胞迁移能力亦有明显下降。结论mir-200b能够通过改变WASF-3的表达水平抑制膀胱癌细胞系T24的迁移能力,为进一步探索miRNA在膀胱癌发生发展过程中的作用提供了研究基础。     

沙利度胺联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长和肿瘤血管生成的影响

目的 观察沙利度胺（thalidomide,TLD）联合照射对人食管癌裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法 建立人食管鳞癌裸鼠移植瘤模型,将24只荷瘤裸鼠标号,按随机数字表随机分为健康对照组、TLD组、20 Gy组、20 Gy+TLD组,每组6只。计算肿瘤抑制率,并用免疫组织化学法检测移植瘤瘤组织血管内皮细胞生长因子（VEGF）、乏氧诱导因子-1α（HIF-1α）、微血管密度（MVD）的表达水平。结果 20 Gy+TLD组荷瘤鼠瘤体积及瘤重均小于20 Gy组,差异具有统计学意义（t=3.68、4.60,P<0.05）。20 Gy+TLD组的抑瘤率高于其他各实验组,达到60.61%。与20 Gy组相比较,20 Gy+TLD组中裸鼠移植瘤组织中VEGF、HIF-1α蛋白表达均有所降低（t=11.82、6.63,P<0.01）;20 Gy组MVD值高于20 Gy+TLD组（t=5.92,P<0.01）。结论 沙利度胺联合照射对移植瘤的抑瘤作用较单独照射增强,可能是沙利度胺通过调控VEGF的表达,从而影响了食管癌组织的放疗敏感性。     

索拉非尼联合顺铂抑制肝癌HepG2细胞生长的体外研究

目的探讨索拉非尼联合顺铂(DDP)对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及其可能的分子机制。方法实验细胞分为4组:空白对照组、索拉非尼单药组、顺铂单药组、索拉非尼联合顺铂组。索拉非尼和顺铂单独或联合作用于细胞,以MTT法检测24、48、72、96h时间点药物对HepG2细胞的增殖抑制率,流式细胞仪检测24、48h时间点的细胞周期与凋亡率。在药物作用后24h,用荧光染料罗丹明123(Rh123)染色细胞,流式细胞仪测定线粒体跨膜电位(ΔΨm),分光光度法检测caspase-3活性。结果索拉非尼及顺铂单独应用对HepG2生长均有抑制作用,且低剂量联合具有协同作用。联合用药可以使细胞周期阻滞于G0/G1期和G2期,且凋亡率明显高于单药组(P<0.05)。单独应用顺铂和索拉非尼均能使线粒体跨膜电位降低,而联合组作用强于单药组(P<0.05)。药物作用后caspase-3活性增高,联合组高于单药组(P<0.05)。结论索拉非尼联合顺铂能更好地抑制肝癌HepG2细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与细胞周期阻滞、线粒体跨膜电位降低及caspase-3活性增加有关。     

抑制OCT4-pg5与OCT4B表达对膀胱癌顺铂敏感性的影响

目的探讨八聚体结合转录因子4假基因5(OCT4-pg5)与八聚体结合转录因子4B(OCT4B)的表达对人膀胱癌细胞顺铂敏感性的影响。方法采用反转录实时定量PCR(RT-qPCR)检测OCT4-pg5、OCT4B在膀胱癌细胞及组织中的表达;选择高表达细胞株,通过RNA干扰技术下调其OCT4-pg5、OCT4B表达,细胞借此分为si-OCT4-pg5组、si-OCT4B组、si-OCT4-pg5/si-OCT4B组及对照组;采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测各组细胞顺铂半数抑制浓度(IC₅₀);RT-qPCR及Western blotting检测细胞OCT4-pg5、OCT4B表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布情况。结果 OCT4-pg5与OCT4B在膀胱癌T24细胞及膀胱癌组织中高表达,且两者在癌组织中的表达呈正相关关系(r=0.73,P<0.01)。干扰OCT4-pg5、OCT4B表达可显著降低T24细胞的顺铂IC₅₀,二者呈现协同效应[(29.41±3.84)μmol/L vs.(85.00±7.63)μmol/L,P&l...     

血管生长抑制剂TNP-470对肿瘤生长及转移的影响

血管生长抑制剂主要通过抑制肿瘤的新生血管从而抑制肿瘤的生长和转移,TNP-470是近年来文献报道最多的血管生长抑制剂之一,本文主要介绍了TNP-470对肿瘤生长和转移抑制作用的实验研究及TNP-470与介入治疗联合的应用研究.     

顺铂——对耳有毒性作用的细胞抑制剂

顺铂是一种新的抗癌药,其副作用包括肾脏毒性,恶心呕吐,骨髓和耳的毒性.1975年Stadnicki等,1982年Nakai等已先后报告了顺铂对实验动物耳蜗各基底转中外层毛细胞的损害.但文献中顺铂对人耳的毒性影响的报导差异甚大.九位作者用顺铂治疗296例病人,175例(59%)发生听力损失,发生率最少者为     

灵芝多糖对小鼠T细胞IL—2IL—3mRNA表达的影响

目的：研究灵芝多糖GLB7对小鼠T细胞IL－2，IL－3mRNA表达的影响，进一步探讨灵芝多糖免疫调节作用的机制。方法：培养开始时加入不同浓度的GLB7（5，10，20，40mg.L^-1)，培养一定时间后，以RT－PCR和凝胶图像吸收度分析系统检测灵芝多糖（GLB7）与小鼠脾脏T细胞IL－2，IL－3 mRNA表达之间的量效关系。结果：GLB7能剂量依赖性增强静息IL－2和IL－3 mRNA的表达，分别于11h和20h达到高峰，而对活化的T细胞则不产生影响，此时培养上清中IL－2和IL－2活性与对照组比较亦有明显升高，并具有一定的剂量依赖关系。结论：灵芝多糖免疫增强和抗肿瘤作用的基础与其在转录水平促进T细胞中IL－2和IL－3 mRNA的表达有关。     

血管生成抑制剂对肝脏肿瘤灌注以及细胞毒性治疗的影响

摘要目的评价CT动态增强扫描(dynamic contrast material-enhanced,DCE)肝脏肿瘤灌注是否可以在兔模型中反映抗血管生成药物诱导的血管重建情况。材料与方法本研究经过大学动物保护委员会动物使用小组委员会(Animal Use Subcommittee of the University Councilon AnimalCare)     

131I-2F7抗体在荷小细胞肺癌裸鼠体内分布及其对肿瘤的生长抑制作用

目的 观察131I-2F7抗体对荷小细胞肺癌裸鼠模型的肿瘤生长抑制作用,并分析其在裸鼠体内的分布、靶向性和药代动力学.方法 用氯胺T法制备131I-2F7抗体,制备荷H128小细胞肺癌BALB/c裸鼠模型,15只荷瘤裸鼠尾静脉注射131I-2F7抗体7.4 MBq,分别在不同时间测量肿瘤组织及各器官的放射性,计算每克组织百分注射剂量率(%ID/g).将20只荷瘤裸鼠随机分成4组①生理盐水对照组,②单纯2F7抗体治疗组,③单纯131I治疗组和④131I-2F7抗体治疗组.尾静脉注射相应试剂后观察24 d,比较肿瘤的体积、质量,计算抑瘤率.结果 给药36 h肿瘤组织的放射性最强,为(6.45±0.33)%ID/g,此时肿瘤/血液放射性比值为2.63,肿瘤/肝放射性比值为4.13.给药24 d后,肿瘤体积和质量分别为①组(3.431±0.667)cm3,(6.441±1.234)g;②组(2.964±0.263)cm3,(5.876±0.620)g;③组(2.674±0.897)cm3,(5.689±1.605)g;④组(0.746±0.153)cm3,(1.602±0.194)g.131I-2F7抗体治疗组与其他各组间差异有显著性(P＜0.05).结论 131I-2F7抗体能有效抑制裸鼠小细胞肺癌的生长,对小细胞肺癌治疗有潜在的应用前景.     

MR动态增强对肿瘤血管生成的评价作用

肿瘤是血管生成依赖性疾病[1],血管生成与肿瘤的发生发展及转移都密切相关[1,2]。MVD测定技术是目前评价肿瘤血管生成的金标准[3]。但MVD测定技术是一项创伤性检查且测定方法较繁琐,所得结果只能反映肿瘤极小区域血管生成的情况,更无法动态地对肿瘤血管生成活性进行监测[4]。MR     

血管生长抑制剂ＴＮＰ—４７０对肿瘤生长及转移的影响

血管生长抑制剂主要通过抑制肿瘤的新生血管从而抑制肿瘤的生长和转移，ＴＮＰ－４７０是近年来文献报道最多的血管生长抑制剂之一，本语言要介绍了ＴＮＰ－４７０对肿瘤生长和转移抑制作用的实验研究及ＴＮＰ－４７０与介入治疗联合的应用研究。     

锌对顺铂肾毒性及抗癌作用影响的实验研究

 目的 寻求一种顺铂肾毒性的防护剂,给临床化疗提供手段和依据.方法 对C 57 BL/6小鼠在给予顺铂(14 mg/kg)前后24 h分别给予醋酸锌(20 mg/kg),4 d后通过电镜及光镜观察其肾脏的形态学改变,并测定血清尿素氮(BUN)及肌酐(Cr),观察肾脏的功能改变.结果 C 57 BL/6小鼠给顺铂前预先给锌可使顺铂对贤脏的损害明显减轻,锌对顺铂的抗癌效果无明显影响(单用顺铂组抑瘤率52.91%,锌与顺铂合用组抑瘤率50.97%,P>0.05).结论 锌可作为顺铂肾毒性的有效防护剂,并有希望用于临床.     

姜黄素对T24细胞survivin蛋白表达的影响

目的：探讨中药姜黄素对T24细胞凋亡发生及survivin蛋白表达的影响。方法：以培养的T24细胞为研究对象，姜黄素组加入终浓度为1、10、l00（μmol／L）的姜黄素，对照组不加姜黄素。用MTT法、TUNEL染色、RT-PCR、免疫印迹及图像分析技术分别检测12、24和48h后各组细胞活性、凋亡发生率、survivin转录水平及蛋白表达变化。结果：姜黄素组T24细胞生长抑制率随姜黄素浓度增加显著上升，细胞凋亡发生显著升高，survivin蛋白活性及转录水平显著降低。结论：姜黄素能抑制T24细胞survivin的转录和蛋白活性。     

电离辐射及顺铂对人肺癌细胞中TOB1基因表达的影响

目的 探讨电离辐射及其联合顺铂对人肺腺癌细胞株SPCA-1、LTEP-α-2中TOB1基因表达的影响.方法 体外培养人肺腺癌SPCA-1、LTEP-α-2细胞,用X射线一次性照射,细胞吸收剂量为2、4、6、8和10 Gy,源靶距为100 cm,吸收剂量率为200 cGy/min,在6GyX射线照射后6、12、18和24 h取样;X射线和顺铂联合对TOB1表达的研究设立单纯照射组(6 Gy)、顺铂处理组(20 mol/L顺铂)和联合处理组(6 Gy +20 mol/L顺铂);上述实验同时设立未处理的对照组.采用RT-PCR和Western blot法检测TOB1 mRNA及蛋白表达水平的变化.结果 SPCA-1、LTEP-α-2细胞在不同剂量的X射线照射后24 h,其TOB1蛋白及mRNA表达量均明显增加(t=8.25 ～24.48,P ＜0.05);不同时间检测提示,细胞在X射线照射后6h,TOB1蛋白及mRNA的表达量即开始上升,并持续到照射后24 h(t=14.23 ～15.82,P＜0.05);联合处理组TOB1的表达量均明显高于单纯照射组、顺铂处理组和对照组(t=4.67 ～ 13.67,P＜0.05).结论 TOB1基因有可能作为临床肺癌放化疗靶基因,对临床放化疗疗效的判断具有一定的应用潜力.     

植物多糖对正常及肿瘤小鼠T和B淋巴细胞的影响

本文用细胞化学方法,观察了24种植物多糖对正常小鼠外周血T和B淋巴细胞,胸腺T淋巴细胞及肿瘤小鼠外周血T淋巴细胞的影响。结果指出,上述多糖可分为三类:(1)可使外周血T和B淋巴细胞及胸腺T淋巴细胞增加;(2)可使外周血T和B淋巴细胞及胸腺T淋巴细胞降低,(3)不引起外周血T和B淋巴细胞及胸腺T淋巴细胞明显的增减。文中初步讨论了使正常小鼠外周血和胸腺T淋巴细胞增减的多糖、正常小鼠胸腺重量与胸腺T淋巴细胞百分数以及肿瘤小鼠外周血T淋巴细胞增减与抑瘤效应的关系。     

桂皮醛对裸鼠人胃癌细胞移植瘤生长及凋亡的影响

目的研究桂皮醛对肿瘤细胞的细胞毒作用和对裸鼠人胃癌SGC-7901细胞移植瘤生长及凋亡的影响。方法采用MTT法观察桂皮醛对人癌细胞体外增殖的抑制作用;建立胃癌裸鼠移植瘤模型,以不同浓度桂皮醛ip,与卡铂治疗对比,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率。应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率。通过透射电镜观察肿瘤组织细胞凋亡情况。结果桂皮醛对体外培养的7种人肿瘤细胞具有直接细胞毒作用,其半数抑制浓度(IC50)的范围为12.3~37.1μg·ml-1;桂皮醛25、50、100mg·kg-1和卡铂5mg·kg-1ip21d均能明显抑制裸鼠移植瘤的生长,抑瘤率分别为15.15%、41.67%、60.61%和65.15%。桂皮醛治疗组裸鼠移植瘤细胞S期比率升高,50、100mg·kg-1剂量组诱导移植瘤细胞凋亡率明显高于对照组。透射电镜发现桂皮醛导致移植瘤大量细胞发生凋亡,可见典型的细胞凋亡形态学变化。结论桂皮醛体内抗肿瘤作用明显,其机制与抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡有关。     

氧化砷抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤生长及作用机制的研究

 目的研究氧化砷(As2O3)对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用及其作用机制.方法建立BALB/C-nu/nu裸鼠SW480结肠癌皮下移植瘤模型,以不同浓度As2O3行腹腔内注射治疗,与5-氟脲嘧啶(5-FU)治疗进行对比,观察移植瘤的瘤重及瘤重抑制率,TUNEL法检测移植瘤SW480细胞凋亡率,免疫组织化学法检测bcl-2,Fas基因表达水平的变化.结果5-FU、低剂量As2O3及高剂量As2O3均能明显抑制裸鼠皮下肿瘤的生长,抑瘤率分别为41.51%、53.21%和58.02%,As2O3对移植瘤的生长抑制作用明显强于5-FU,两者比较有显著性差异(P＜0.01).两种浓度As2O3组SW480细胞凋亡率明显高于5-FU.移植瘤组织中bcl-2蛋白阳性细胞数明显减少,Fas蛋白阳性细胞数明显增加.结论As2O3对结肠癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,可诱导移植瘤SW480细胞凋亡,其作用的分子机制可能是下调bcl-2基因表达,上调Fas基因表达.     

衣霉素对顺铂诱导人宫颈癌细胞凋亡的影响

目的 探讨内质网应激在顺铂诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡中的作用.方法 取人宫颈癌HeLa细胞作为研究对象,实验分为衣霉素(5mg/L)组、顺铂(6mg/L)组、衣霉素(5mg/L)与顺铂(6mg/L)联合给药组、阴性对照组,处理12h后采用MTT法观察细胞生长情况,Hoechst荧光染色检测细胞核形态的变化,免疫印迹法检测凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-4活化情况,间接免疫荧光法检测蛋白质二硫键异构酶(PDI)、磷酸化H2AX组蛋白(γ-H2AX)的表达变化.结果 MTT法检测显示衣霉素组、顺铂组、联合给药组和阴性对照组的细胞增殖抑制率分别为2.65％±2.71％、19.60％±4.34％、44.69％±7.07％、0,除衣霉素组与对照组外其余各组间两两比较差异均有统计学意义(P＜0.05,P＜0.01).Hoechst染色显示,阴性对照组荧光较弱且均匀,顺铂组和联合给药组部分HeLa细胞核明显变小并呈现致密强荧光,部分细胞核呈碎块状,联合给药组核碎裂细胞比例(44.5％±5.1％)显著高于顺铂组(22.7％±3.9％,P＜0.05).免疫印迹法检测显示,顺铂组裂解Caspase-3、Caspase-4蛋白表达明显高于对照组和衣霉素组,但显著低于联合给药组(P＜0.05).间接免疫荧光法检测显示:顺铂组胞质内无PDI表达,荧光较弱;衣霉素组、顺铂组PDI蛋白均呈颗粒状,分布于核周,荧光较强;联合给药组大部分细胞内PDI呈现明显强荧光,荧光强度明显高于衣霉素组和顺铂组.阴性对照组和衣霉素组细胞核内未见γ-H2AX表达,而顺铂组与联合给药组均可见部分细胞核内出现明显绿色荧光,但两组无明显差异.结论 衣霉素可增加内质网应激水平,促进顺铂诱导HeLa细胞发生凋亡.