茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯对鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用

目的:研究茶藨子木层孔菌多糖硫酸酯(PRP-S)对鸡胚尿囊膜血管生成的影响。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜模型,观察不同硫酸根取代度的PRP-S对血管生成的作用。结果:不同硫酸根取代度的PRP-S对鸡胚尿囊膜血管的生成均有抑制作用,与阴性组比较有显著性差异。硫酸化程度越高,其血管生成抑制活性越强。结论:PRP-S能够抑制鸡胚尿囊膜血管的生成。     

当归多糖促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的实验研究

目的:探讨五万分子量以下当归多糖成分对鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管生成的影响.方法:通过超滤技术制备五万分子量以下当归多糖成分,将高、中、低剂量五万分子量以下当归多糖水溶液及生理盐水(NS)、表皮生长因子(EGF)对照品加于CAM表面的载体上,作用后制备CAM标本,解剖显微镜下计数新生血管数目.结果:五万分子量以下当归多糖具有明显的促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的作用,与NS对照组相比有显著性差异(P<0.05),但药效明显低于EGF对照组(P<0.01).结论:五万分子量以下当归多糖成分可促进鸡胚绒毛尿囊膜血管生成.     

云南鼠尾草茎叶中化学成分及其抗血管生成活性研究

目的:研究云南鼠尾草茎叶的化学成分,寻找抗血管生成活性成分,综合开发药用植物资源.方法:利用溶剂超声提取,硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、MCI柱色谱等分离手段进行分离纯化,根据化合物理化性质和波谱数据对其进行结构鉴定,通过鸡胚尿囊膜模型(CAM)进行活性筛选.结果:从提取物中共分离得到7个化合物,分别被鉴定为(+)桉油烯醇(1)、5,7,4'-三羟基二氢黄酮(2)、β-香树素(3)、3β-羟-12-乌苏烯(4)、马斯里酸(5)、熊果酸(6)、3-氧-12-烯-28-乌苏酸(7).抗血管生成实验表明化合物5,6在鸡胚尿囊膜模型中表现出较好抗血管生成作用.结论:化合物1,2,5,6首次从该植物中分离得到,并首次发现化合物5(齐墩果烷型),6(乌苏烷型)在0.8 nmoL/egg的剂量下就具有抑制血管生成的活性,且呈剂量依赖性.     

尖吻蝮蛇毒抗血小板聚集活性蛋白的纯化和性质研究

目的 分离纯化尖吻蝮蛇毒中抗血小板聚集活性蛋白agacutegrin,并研究其生化性质.方法依次用Uno Q、UnoS离子交换色谱和反相高效液相色谱分离得到单一组分agacutegrin,用比浊法和MTT法检测其体外抗血小板聚集和抗肿瘤细胞生长活性.用电泳和Edman降解法测定了agacutegrin相对分子质量和N端氨基酸序列.结果和结论Agacutegrin为碱性蛋白,pI为8.04,SDS-PAGE方法测得其相对分子质量为26.59 kDa.Agacutegrin体外具有抗ADP和胶原诱导的血小板聚集活性,IC50分别为153.1 nmol·L-1和214.4 nmol·L-1.此外,agacutegrin还具有较广泛的体外抑制肿瘤细胞生长活性,ID50为18～35 μg·mL-1.Agacutegrin与蛇毒中的C-型凝集素类似蛋白家族成员N端序列高度同源,表明它可能为1个新的C-型凝集素类似蛋白.     

蟾毒灵抑制血管生成作用的初步观察

目的明确抗肿瘤中药提取物蟾毒灵有无抗血管生成的活性,并检测其量效关系。方法采用MTT法测定蟾毒灵对人脐静脉内皮细胞ECV304生长的抑制作用,计算IC50,观察其量效、时效关系;并以鸡胚绒毛尿囊膜为模型观察蟾毒灵在体内组织器官水平对血管生成的影响。结果蟾毒灵对ECV304细胞的生长有抑制作用,且呈浓度和时间的依赖性。24、48、72hIC50分别为1.104、0.355、0.0905μg/mL。鸡胚绒毛尿囊膜实验表明蟾毒灵可显著抑制血管生成的作用,并呈浓度依赖性。结论蟾毒灵具有明确的抑制血管内皮细胞增殖、抗血管生成的作用。     

蜂毒素抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的实验研究

目的:研究蜂毒素对鸡胚绒毛尿囊膜血管生成的抑制作用。方法:建立鸡胚绒毛尿囊膜模型,光镜下观察蜂毒素对正常鸡胚绒毛尿囊膜微血管形态的影响,应用医学图像分析软件定量检测蜂毒素对鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成的影响。结果:光镜下可见经蜂毒素作用后,鸡胚绒毛尿囊膜微血管数目减少,管径变细,分布零乱。定量检测结果表明,蜂毒素浓度为:2.0、4.0、8.0μg/mL时的血管生成抑制率分别为:12.11%、29.85%和45.09%,血管数目明显少于生理盐水对照组(P<0.01),却多于沙利度胺组(P<0.01)。结论:蜂毒素可显著抑制鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成,并且呈现浓度依赖关系。     

中国皖南尖吻蝮蛇毒细胞毒素的体外抗癌活性

目的：探讨从中国皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒中提取的细胞毒素的体外抗癌活性。方法：DEAE-Sepharose FF，Source30s柱层析分离纯化细胞毒素组分，溴化二苯四偶氮盐(MTT)比色法测定该组分对体外培养的人癌细胞的细胞毒作用。结果：从中国皖南尖吻蝮蛇毒中分离出两种单一组分(ACTX-6，ACTX-8)对体外培养的人鼻咽癌细胞株(KB)，胃癌细胞株(BGC)，结肠癌细胞株(CACO-2)，卵巢癌细胞株(HO8910)，肺癌细胞株(A549)均有很强的抑制作用，ACFX-6的体外抗癌活性较ACTX-8强，对A549的抑制作用最强，呈剂量依赖关系。结论：ACTX-6对体外培养的人癌细胞有明显的抑制和杀伤作用。     

青蒿琥酯抑制鸡胚尿囊膜血管生成作用的研究

 目的观察青蒿琥酯对新生血管生成的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜方法,检测青蒿琥酯对正常鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成抑制作用,对肿瘤细胞诱导的鸡胚绒毛尿囊膜微血管生成的敏感性以及对MCF-7细胞、白血病K562细胞生长和浸润的影响。结果青蒿琥酯有较强的抗肿瘤细胞和浸润作用,以及抑制血管增殖作用,并且呈剂量依赖性。结论青蒿琥酯具有抑制新生血管增殖作用。     

苦豆子提取物抗人结肠癌HCT116细胞株鸡胚尿囊膜移植瘤血管生成的研究

目的：通过观察苦豆子提取物抗人结肠癌HCTll6细胞株鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）移植瘤的血管生成现象,探讨其抗肿瘤血管生成作用及机制。方法：采用人结肠癌HCT116细胞培养并建立鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤模型,观察苦豆子提取物作用下甜M移植瘤血管生成的变化。结果：苦豆子提取物作用于鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤具有明显的抗血管生成现象,用药组血管面积比（VA／CAM）均明显小于模型对照组,其中大剂量及中剂量组（1000μg／胚、500μg/胚）能达到重组人血管内皮生长因子抑制素组的抗血管生成效果（P值分别为0．899及0．362,差异无统计学意义）。结论：苦豆子提取物具有抑制人结肠癌HCT116鸡胚绒毛尿囊膜移植瘤血管生成的作用,其作用效果同剂量呈相关性。     

魟鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成的影响

观察鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成的影响。采用两种鸡胚绒毛尿囊膜技术 ,分别观察与检测鱼骨素对血管形成的影响。结果表明 ,鱼骨素对鸡胚绒毛尿囊膜血管形成具有显著的抑制作用。提示鱼骨素可能通过抑制肿瘤血管形成 ,发挥良好的抗瘤活性     

蝮蛇蛇毒中小分子肽的纯化及其抑制血小板聚集的作用

本文首次报道从中国蝮蛇蛇毒中分离出一种分子量为1234.616Da的具有抑制血小板聚集作用的小肽SV-PP-1.SV-PP-1能明显抑制ADP诱导的兔血小板聚集,并有剂量依赖性.这是目前从蛇毒中发现的分子量最小的能抑制血小板聚集的蛇毒小肽.     

《中国药典》中蕲蛇饮片分子鉴定方法的研究和探讨

目的：运用多种分子鉴定方法,从技术要求和标准编写方面对蕲蛇饮片现行质量标准提出建议。方法：本研究选取蕲蛇所在蝰科Viperidae蝮亚科Crotalinae的7个近缘物种和9种常见的蕲蛇伪品物种作为研究对象,采用DNA 条形码技术扩增16S rRNA序列,运用电泳检视法,根据扩增条带的有无评价模板DNA的质量;16S rRNA序列扩增产物通过双向测序,运用BioEdit软件拼接,双端对齐后剪切比对,利用MEGA 5.1软件构建邻接（NJ）系统发育树;采用蕲蛇饮片现行标准方法进行同步鉴别。结果：16S rRNA序列的电泳检视结果可有效评价蕲蛇样品的模板DNA质量,避免由于模板DNA质量不佳导致的假阴性结果的可能性;基于16S rRNA条形码序列建立的NJ树可以鉴别蕲蛇饮片及其混淆品;蕲蛇饮片现行标准方法专属性良好。结论：DNA条形码方法、现行标准方法以及NJ树三者相互结合,从不同角度对蕲蛇饮片进行真伪鉴别,有效弥补蕲蛇饮片现行标准方法的不足,为其他中药品种的分子鉴定技术的质量标准制定提供了参考。     

蝮蛇中抗血小板聚集多肽的纯化及其特征研究

本实验采用高效液相C18层析柱,从华南地区产蝮蛇蛇毒中分离出一种分子量为23339.00Da的多肽SV-PP-2.SV-PP-2在体外能剂量依赖性地抑制ADP诱导的兔血小板聚集.在蝮蛇中尚未见有与SV-PP-2分子量相同并具有抑制血小板聚集作用的类似多肽的报道.     

江浙蝮蛇毒C_4组分的中枢镇痛作用及其机理研究

目的:研究江浙蝮蛇毒镇痛C4组分的中枢镇痛作用并初步探讨其镇痛机理。方法:通过侧脑室给药、脊髓化鼠镇痛实验和足跖定压刺激试验研究C4组分的镇痛作用部位;通过C4组分与阿托品、利血平、纳络酮药物的相互作用,研究其与乙酰胆碱受体、阿片受体间的作用关系。结果:C4组分的镇痛部位主要在脑中枢,且C4组分不通过乙酰胆碱受体作用,而与阿片受体相关。结论:江浙蝮蛇毒C4组分镇痛通过中枢起效,提示江浙蝮蛇毒C4组分可能与增加内源性阿片肽系统的活动有关。     

Antihemorrhagic, antinucleolytic and other antiophidian properties of the aqueous extract from Pentaclethra macroloba

Several Brazilian plants have been utilized in folk medicine as active agents against various effects induced by snake venoms. The inhabitants of the Amazon region use, among others, the macerated bark of a plant popularly named "Pracaxi" (Pentaclethra macroloba Willd) to combat these effects. We report now the antihemorrhagic properties against snake venoms of the aqueous extract of Pentaclethra macroloba (EPema). EPema exhibited full inhibition of hemorrhagic and nucleolytic activities induced by several snake venoms. Additionally, partial inhibition of myotoxic, lethal, phospholipase and edema activities of snake venoms and its isolated PLA(2)s by EPema is reported. In vivo tests showed that EPema is able to totally inhibit a Bothrops jararacussu metalloprotease (BjussuMP-I) induced hemorrhage, suggesting interaction of the extract compounds with this high molecular weight protein. The extract did induce neither hemorrhage nor death in mice when administered alone by i.m. route. When administered separately by i.m. route, the extract did not induce death in mice at 12.5--300 mg/kg doses. Other assays demonstrated that EPema was unable to inhibit fibrinogenolytic and coagulant activities of Bothrops atrox venom. Although the mechanism of action of EPema is still unknown, the finding that no visible change was detected in the electrophoretic pattern of snake venom after incubation with the extract excludes proteolytic degradation as a potential mechanism. The search for new inhibitors of venom metalloproteases and DNAases are a relevant task. Investigation of snake venom inhibitors can provide useful tools for the elucidation of the action mechanisms of purified toxins. Furthermore, these inhibitors can be used as molecular models for development of new therapeutical agents in the treatment of ophidian accidents.     

沙蚕纤溶酶的一种纯化方法

目的 从双齿围沙蚕体内提取并纯化一种新的纤溶酶。方法 应用硫酸铵沉淀、透析、凝胶柱层析（Sephadex G-100）以及电泳等生化手段对沙蚕纤溶酶进行分离纯化。用平板法测定它降解纤维蛋白的活性。结果 得到纯的沙蚕纤溶酶,测出其等电点为4．5左右,由两条边组成,其相对分子量分别为33000u和14400u。结论 该酶为首次从沙蚕中发现的一种新的纤溶酶。     

露峰房抗炎蛋白中多肽成分的分离、纯化及性质研究

 目的:从药用露峰房(Nidus vespae)筛选出的具有较好的抗炎、免疫活性蛋白粗品——NV₃中分离纯化,得到一多肽类化合物,命名为NV-PP-1,并检测其理化性质?方法:以离子交换层析、排阻层析、HPLC等进行分离纯化,并以高效凝胶排阻色谱(HPSEC)、高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)、亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱、氨基酸分析、DNS-Cl法的N-末端测定检测其理化性质。结果:高效凝胶排阻色谱(HPSEC)及高效毛细管等电聚焦电泳(IEF-HPCE)检测其皆为单峰。亲水性分子排阻液相Protein-Pak^TM60柱测得其分子量为7.079kD。IEF-HPCE确定其PI值为4.08。紫外吸收最高峰为274nm。氨基酸分析表明其含有近56个氨基酸残基,其中谷氨酸、丝氨酸、甘氨酸较多,还有天冬氨酸等,是一酸性多肽。末端测定表明其N-末端封闭。结论:酸性多肽NV-PP-1是从药用露蜂房抗炎蛋白粗品中首次分离得到的成分。     

蜂毒素的SDS-PAGE质控方法研究

目的　建立以 SDS- PAGE进行蜂毒素质量控制的方法。方法　将通过凝胶色谱法从蜜蜂毒中分离纯化所得到的蜂毒素 ,以 SDS- PAGE法测定其相对分子质量 ,并通过凝胶成像扫描测定蜂毒素纯度。结果　蜂毒素样品电泳后在凝胶块上显示为均一条带 ,相对分子质量约为 2 80 0 ,含量为 (90 .5 9± 0 .85 ) % ,与 HPL C测定结果平行。结论　 SDS- PAGE法作为蜂毒素的质控方法 ,结果准确、可靠、简便