维甲酸和1，25二羟维生素D3对LoVo细胞株细胞周期的影响

【目的】观察全反式维甲酸 (ATRA)和 1,2 5 二羟维生素D3 对大肠癌细胞株LoVo细胞周期的影响。【方法】流式细胞术测定细胞周期的分布。【结果】ATAR和 1,2 5 二羟维生素D3 使LoVo阻止在G0 /G1期 ,未发现明显的亚G1峰。【结论】单独或联合使用ATRA和 1,2 5 二羟维生素D3 均具有诱导分化LoVo细胞的作用 ,这种诱导分化与细胞凋亡无关。     

1,25-二羟维生素D_3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞增殖和细胞周期的影响。方法:1,25-二羟维生素D3作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期。结果:1,25-二羟维生素D3作用后胃腺癌细胞生长受抑制,细胞集落形成率明显下降(P<0.05);处理48 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变。结论:1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有抑制增殖、诱导分化作用。     

维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D_3与糖尿病的关系

糖尿病的发病机制正在研究中,近些年的研究发现,维生素D及其活性形式1,25-二羟维生素D3除传统的调节钙、磷代谢的作用外,还通过刺激胰岛素分泌和减少细胞因子介导的β细胞凋亡途径,在糖尿病的发生、发展中起着关键作用。     

1,25-二羟维生素D3的免疫调节机理及其应用进展

1,25-二羟维生素D3[1,25（OH）2D3]不仅具有调节钙磷代谢的作用,还可影响多种细胞的生长和分化,具有调节免疫系统的作用.该文综述1,25（OH）2D3的免疫调节机制,为进一步开发更安全有效的类似物,并作为新兴的免疫调节剂应用于临床提供理论依据.     

1,25-二羟维生素D3对小鼠成骨细胞OPG和RANKL基因表达的影响

目的观察1,25-二羟维生素D 3[1,25(OH)2D 3]对体外培养的小鼠成骨细胞osteoprotegerin(OPG)和receptor activator of NF-κB ligand(RANKL)基因表达的作用.方法取30只出生24 h内的新生小鼠,在无菌条件下取颅盖骨,去除纤维结缔组织,用胰蛋白酶-胶原酶消化法进行成骨细胞的原代培养.取第3～5代的成骨细胞,分成对照组和实验组,在实验组培养液中加入不同浓度的1,25(OH)2D3(10-8、10-9、10-11 mol/L),培养48 h后,取出培养液,-70℃冻存备用.从培养瓶中贴壁细胞提取总RNA,应用RT-PCR法检测细胞中OPG和RANKL的mRNA表达.应用EUSA方法检测培养液中OPG蛋白的浓度.结果各浓度1,25(OH)2D3作用的成骨细胞中,OPG的mRNA表达均较对照组显著减弱,并随1,25(OH)2D3浓度的增加而表达减弱,呈现明显的浓度依赖性;实验组RANKL mRNA的表达较对照组表达明显,且随1,25(OH)2D3浓度增加而增强;实验组成骨细胞中OPG蛋白的表达明显低于对照组(P＜0.05).结论1,25(OH)2D3抑制小鼠成骨细胞OPG的表达,同时增加RANKL的表达.     

维甲酸联合维生素D3对非小细胞肺癌耐药基因表达的影响及其意义的探讨

目的探讨全反式维甲酸（ATRA）联合维生素D3（VD3）逆转非小细胞肺癌细胞耐药的影响和意义。方法应用原代细胞培养、四甲基偶氮唑兰（M啊）比色、逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及多药耐药相关蛋白（MRP）、肺耐药蛋白（LRP）表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关；ATRA与VD3可以明显降低肺腺癌原代细胞及A549细胞株MRP、LRP的表达量，对肺鳞癌MRP、LRP的表达量无明显影响；可以明显提高肺癌化疗敏感性。结论MRP、LRP在非小细胞肺癌中高表达，可反映肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD，可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，二药合用有协同作用，可以提高肺腺癌的化疗敏感性；但对肺鳞癌MRP、LRP基因的表达水平无明显影响，可能还存在其他的提高肺鳞癌化疗敏感性的机制。     

1,25-二羟维生素D3与小儿呼吸系统疾病研究进展

1,25-二羟维生素D3除调节人体内钙磷平衡外,在呼吸系统还具有重要作用。临床研究发现,1,25-二羟维生素D3缺乏可使罹患支气管哮喘、反复呼吸道感染、肺炎、肺结核、肺癌危险性增高。其在呼吸系统疾病中的作用机制可能包括以下四方面:对免疫细胞的作用;对细胞周期的作用;对细胞凋亡的作用;对生长因子和癌基因的影响。     

1,25-二羟维生素D3对人胃黏膜上皮细胞恶性转化过程的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3(骨化三醇)在化学致癌剂N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)诱导的恶性转化过程中对人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞生长、凋亡及Shh、Gli1基因表达的影响. 方法 MNNG诱导GES-1细胞作为对照组,诱导后用不同浓度(10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L)1,25-二羟维生素D3干预(实验组),采取四甲基固氮唑盐(MTT)检测实验组和对照组细胞增殖并确定实验组最佳药物浓度.分为GES-1细胞组、对照组和实验组,流式细胞术(FCM)检测各组细胞的凋亡率,RT-PCR检测各组细胞Shh、Gli1 mRNA基因的表达. 结果 MTT法显示,对照组细胞出现大量死亡,实验组给予10-6,10-7,10-8,10-9 mmol/L的1,25-二羟维生素D3干预后存活细胞较对照组增多(P＜0.05).取最佳药物作用浓度10-6 mmol/L为实验组,FCM测各组细胞7d的凋亡率分别为实验组(45.73±2.08)％、对照组(85.23±2.08)％、GES-1细胞组(4.9±0.91)％.与对照组相比,实验组细胞凋亡明显减少(P＜0.05).RT-PCR显示Shh mRNA在实验组(0.674 7±0.011 6)、对照组(0.661 6±0.0095)均表达(P＞0.05),Gli1 mRNA实验组(0.338 2±0.015 0)表达低于对照组(0.532 8±0.011 5)(P＜0.05). 结论 1,25-二羟维生素D3有阻止GES-1细胞恶性转化的作用,从而可达到延缓或阻止细胞恶变的目的.其机制可能与通过阻断Sonic Hedgehog(SHH)信号通路有关.     

1,25二羟维生素D_3缺乏与衰老的研究进展

1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]是维生素D的活性形式,其不仅参与调节机体钙磷代谢,还对心血管系统、免疫系统、泌尿系统、神经系统等多系统的活动具有调节作用。研究显示维生素D的减少与多种老年性疾病密切相关,维生素D在控制和改善与衰老相关的疾病方面起到了积极的作用。其机制可能与1,25(OH)2D3可通过调控与细胞衰老和凋亡的相关基因、降低氧化应激、抑制肾素-血管紧张素系统以及减少端粒耗损等有关。     

1,25-二羟维生素D3及其类似物对免疫系统的调节作用

1,25-二羟维生素D3是维生素D的活性形式,是一种第二类固醇类激素,和维生素D受体（VDR）结合发挥作用。VDR是核受体超家族中的一员,这一核受体超家族还包括类固醇激素受体,甲状腺激素受体和维甲酸受体。1,25-二羟维生素D3调节钙磷代谢,控制细胞的增殖和分化,产生免疫调节作用。对1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的进展和免疫调节机制的新认识,提示它们在治疗自身免疫性疾病和诱导同种异体移植耐受上可有广泛的应用。1,25-二羟维生素D3及其类似物除了直接作用于T细胞外,还通过各种机制调节抗原呈递细胞的表型和功能,尤其是树突细胞。体内和体外实验都已证明1,25-二羟维生素D3及其类似物诱导树突细胞获得致耐受性,这一特性可被用于人类自身免疫性疾病及同种异体移植排斥的治疗。作者就1,25-二羟维生素D3及其类似物功能研究的新进展和免疫调节机制的新认识作一综述。     

1,25（OH）2D3和ATRA对HO8910生长的协同抑制作用

目的：通过单独或联合使用1,25-二羟维生素D3[1,25-dihydroxy vitaminD3,1,25（OH）2D3]和全反式维甲酸（all trans rinoic acid,ATRA）,研究其对人卵巢癌细胞HO8910生长、细胞周期和细胞凋亡的影响,以及维生素D受体（vitamin D recept VDR）及维甲酸α受体受体（retinoic acid receptorα,RARα）mRNA的表达变化,探讨其作用的分子机制。方法：选用人卵巢癌细株HO8910在体外进行培养,培养时分别添加1,25（OH）2D3、ATRA或二者联合,采用MTT比色法测定细胞生长抑制率,流式细胞术（flow cytometry,FCM）进行细胞周期和细胞凋亡分析,用RT-PCR检测VDR及RARαmRNA的表达。结果：结果是单独或联合使用1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸诱导后,HO8910细胞生长均受到不同程度的抑制（P〈0.05）,并呈时间依赖关系;能够引起细胞周期时相的改变,G1细胞增多（P〈0.05）;能够诱导细胞产生细胞凋亡（P〈0.05）;能够上调VDR及RARαmRNA的表达（P〈0.05）,进而抑卵巢癌细胞增殖,其中以联合用药组最为显著。结论：说明1,25-二羟维生素D3和全反式维甲酸能抑制人卵巢癌细胞株HO8910生长;诱导细胞周期发生G1期阻滞,同时产生细胞凋亡作用;通过上调VDR及RARαmRNA的表达,从而抑制癌细胞增当1,25-二羟维生素D3与全反式维甲酸联合用药时,能够对HO8910细胞生长产生协同抑制作用。     

1,25二羟维生素D3靶控VDRE-ERα表达载体对MDA-MB-231细胞周期的影响

目的探讨1,25二羟维生素D1靶控的雌激素受体α表达载体（VDRE—Tk—ERα）对雌激素受体阴性的MDA—MB-231乳腺癌细胞周期进程的影响及其机制。方法利用MTT法检测1,25二羟维生素D,联合他莫两芬对转染VDRE—Tk—ERα表达载体的MDA—MB-231细胞增殖能力的影响,通过流式细胞仪法检测1,25二羟维生素D,联合他莫西芬对转染该表达质粒的MDA—MB-231细胞周期相的分布。用RT—PCR、Westernblot和免疫沉淀法检测细胞Rh及其磷酸化水平、CyclinD1、CDK4的表达以及CyclinD1／CDK4激酶复合物的结合力变化。结果1,25二羟维生素D,联合他莫西芬能够有效抑制转染该质粒的MDA—MB-231细胞的增殖活性并将其细胞周期进程阻遏于G0／G1期。与此同时,CyclinD．的表达则显著降低,其与CDK4的结合力亦显著降低。Rb的表达虽无显著变化,但其磷酸化水平显著下降。结论1,25二羟维生素D3可通过靶控MDA—MB-231细胞内外源性雌激素受体α的表达进而对G．／S期相关分子的表达和活性进行调控从而阻止雌激素受体α阴性的乳腺癌细胞的周期进程并恢复对他莫两芬的化疗敏感性。     

1,25-二羟维生素D3处理树突状细胞在过敏性气道炎症中的作用

目的 研究1,25-二羟维生素D3对树突状细胞(dendritic cells,DC)表型和功能的影响及其处理后DC在过敏性气道炎症中的作用.方法 体外扩增小鼠骨髓来源的树突状细胞,采用流式细胞术和ELISA检测1,25-二羟维生素D3对DC表型和分泌细胞因子IL-10和IL-12的影响;观察1,25-二羟维生素D3处理DC过继卵蛋白致敏小鼠肺组织病理特点和支气管肺泡灌洗液细胞类型.结果 经1,25-二羟维生素D3处理后,DC表达CD80和MHC Ⅱ均明显降低,而CD11c变化不明显;分泌IL-10显著增加,而分泌IL-12显著降低.过继小鼠肺组织未见典型的哮喘样病理改变,支气管肺泡灌洗液细胞类型与空白对照组无显著差异.结论 1,25-二羟维生素D3可抑制DC成熟,经其处理后DC过继致敏小鼠可诱导对抗原的免疫耐受,避免过敏性气道炎症的发生.     

1,25-二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株Hs578T生长及凋亡的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3[1.25(OH)2D3]联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株Hs578T生长、细胞周期及凋亡的影响.方法 采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增生,流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率.结果 1,25(OH)2D3及塞莱昔布均可抑制乳腺癌细胞增生,诱导细胞凋亡,呈时间与剂量依赖性.当联合塞莱昔布时抑瘤率较1,25(OH)2D3单药具有叠加作用,但低于塞莱昔布单药.10-8mol/L联合塞莱昔布组抑瘤率高于10-7mol/L联合塞莱昔布组.结论 1,25(OH)2D3及塞莱昔布可成为新一类乳腺癌预防、治疗药物.     

全反式维甲酸、1,25二羟维生素D3对白血病细胞株SHI-1中几种糖基转移酶mRNA表达的影响

目的探讨在全反式维甲酸（ATRA）、1,25二羟维生素D3[1,25-（OH）2D3]的作用下,白血病细胞株SHI-1中多肽N-乙酰氨基半乳糖转移酶（ppGalNAcTs）和某些N-乙酰氨基葡萄糖转移酶（GnTs）表达的变化。方法应用RT-PCR法研究在不同浓度ATRA、1,25-（OH）2D3作用下,白血病细胞株SHI-1中ppGalNAcTs、GnTs表达的变化。结果在SHI-1细胞株中,随着1,25-（OH）2D3浓度（10^-8～10-^6mol/L）的增加,ppGalNAcT1和T2表达增加,T3表达没有变化,T4表达减少;加入ATRA（10^-8～10^-6mol/L）后,细胞株中ppGalNAcT2、β6GnTV、O-GnT表达量升高。结论白血病细胞株SHI-1ppGalNAcTs各型表达水平不同;在不同浓度ATRA、1,25-（OH）2D3的作用下,白血病细胞株SHI-1中各型ppGalNAcTs表达变化也不同。在SHI-1细胞株加入ATRA后细胞中β2GnTI、β6GnTV发生显著变化。ppGal-NAcT1、ppGalNAcT2、GnTs与白血病细胞株的分化可能有一定关系。     

1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的临床观察

目的 观察1,25-二羟维生素D3治疗IgA肾病的疗效及其安全性.方法 将30例IgA肾病患者按随机数字表法分为观察组和对照组,每组各15例.两组均用双嘧达莫150 mg/d、厄贝沙坦150～300 mg/d,观察组加用1,25-二羟维生素D3 0.25～0.5 μg/d,观察8周.检测治疗前后尿蛋白、肾功能、血钙.结...     

1,25-二羟维生素D3联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T增殖的影响

目的 研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]联合塞莱昔布对乳腺癌细胞株HS578T生长的影响.方法 采用四唑氮蓝比色(MTT)法检测细胞增殖,免疫组化法检测Ki-67表达变化.结果 10-7mol/L、10-8mol/L的1,25(OH)2D3及塞莱昔布(50μmol/L)均可抑制乳腺癌细胞增殖,呈时间...     

1,25二羟维生素D3联合他莫西芬对转染VDRE-Tk-ERα表达载体的MDA-MB-231细胞周期和凋亡的影响

目的构建受1,25二羟维生素D3调控的雌激素受体α真核表达载体(VDRE-Tk-ERα),并观察其对雌激素受体阴性乳腺癌细胞的细胞周期相分布和凋亡的影响.方法利用PCR法体外构建得到含有4个拷贝VDRE和Tk启动子的VDRE-Tk-ERα表达载体,并将其和空载体质粒分别转染入MDA-MB-231细胞中,通过流式细胞仪检测乳腺癌细胞周期相的分布,用TUNEL法检测细胞凋亡的发生. 结果 1,25二羟维生素D3和他莫西芬联合作用较对照组和单独作用组能够显著抑制乳腺癌细胞的周期进程,并能有效诱导肿瘤细胞发生凋亡.结论利用1,25二羟维生素D3靶控雌激素受体α表达载体联合他莫西芬可以阻止雌激素受体α阴性的MDA-MB-231乳腺癌细胞的周期进程并诱导其发生凋亡,从而使原本对他莫西芬耐受的乳腺癌细胞恢复对其的化疗敏感性.     

1,25-二羟维生素D3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响

摘要：目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901 细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-α
mRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞
仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果1,25(OH)2D3对胃癌
SGC-7901细胞增殖有抑制作用（P<0.05）,并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动
力学改变（F=9.81,P<0.05）。TNF-α mRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少（P<0.05）。结论1,25(OH)2D3可抑制胃癌
细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。