PCR诊断微小病毒B19感染致儿童造血危象初探

应用聚合酶链反应技术检测儿童骨髓片和血清标本中微小病毒Ｂ１９－ＤＮＡ，在急性造血停滞、周期性粒细胞缺乏症及血液病患儿中均有检出。     

无偿献血员血清人微小病毒B19感染情况调查

目的 了解当地献血员中人微小病毒Ag(HPV B19)感染情况，为预防HPV B19感染提供初步依据；方法 随机抽查ll0名无偿献血员所供血液；以聚合酶链反应技术检测血清中HPV B19-DNA的表达。结果 测出HPV B19 DNA阳性23名，阳性率达20．9％。结论 初步表明献血员中HPV B19感染率较高。     

血液病微小病毒B19检测的意义

1975年人类微小病毒B19(Human parvovirusB19,缩写为HPVB19,以下简称B19)由Coosart[1]等在人类血清中发现后,现已证实HPVB19是引起一过性再生障碍性危象的致病因素.该病毒能引起骨髓衰竭,主要抑制红细胞系统克隆形成,导致红细胞发育不良,引起再障危象和各种溶血性贫血[2].HPVB19的检测在急性造血停滞和再障病人的检测屡有报道,但对其它血液病的检测未见报道.因此,为了解HPVB19在各种血液病中检测的临床意义,对98例血液病患者进行微小病毒(HPVB19)、巨细胞病毒(HCMV)、单纯疱疹病毒(HSV)聚合酶链反应(PCR)检测,现报道如下.     

1538例孕妇及其胎儿人微小病毒B19检测

目的：了解广州地区孕妇和胎儿人微小病毒Ｂ１９感染状况及传播途径。方法：对１５３８例孕产妇进行母血及脐血微小病毒ＤＮＡ检测。结果：发现微小病毒Ｂ１９孕产妇检出率１．０４％，脐血检出率０．２６％，并在胎盘组织发现２例微小病毒Ｂ１９阳性。结论：广州地区孕产妇存在微小病毒Ｂ１９的感染，并通过胎盘传播给胎儿。     

人微小病毒B19VP1基因原核表达克隆的构建

目的：构建人微小病毒B19 VP1基因的原核高效表达系统。方法：通过PCR扩增B19病毒主要抗原决定簇VP1区段基因，将目的基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2上，IPTG诱导表达融合蛋白，产物经亲和层析初步纯化，以Western-Blot进行鉴定，并包被ELISA板，对临床血清进行检测。结果：pGEX-4T-2-VP1可在大肠杆菌中高效表达，表达产物经纯化后可得单一目的蛋白条带。ELISA结果表明，其灵敏度、特异度等指标与德国Virion试剂盒有较好的符合率。结论：该重组蛋白具有良好的抗原性，为研制和开发具有我国独立知识产权的B19病毒基因工程抗原ELISA诊断试剂盒提供了有价值的资料。     

巢式PCR检测先天性心脏病心脏石蜡标本中B19病毒的感染

目的：探讨微小病毒Ｂ１９与先天性心脏病（ＣＨＤ）的相关性及可能致畸机理。方法：采用病例对照研究，病例组为２９例ＣＨＤ尸解心脏组织，对照组为３０例同期非先天性畸形尸解心脏组织，应用巢式ＰＣＲ扩增Ｂ１９－ＤＮＡ，单纯疱疹病毒（ＨＳＶ），兔弓形虫（ＴＯＸ），巨细胞病毒（ＣＭＶ），结果：２９例ＣＨＤＢ１９－ＤＮＡ５例阳性，全瓿对照组为均阴性（Ｐ＝０．０２３７），ＨＳＶ，ＴＯＸ两组中均阴性，ＣＭＶ在两组中均     

巢式PCR检测胎儿组织人细小病毒B19感染

作用设计合成的两对引物建立了巢式ＰＣＲ－ＥＢ染色法检测Ｂ１９ＤＮＡ新技术，扩增产物为１０４ｂｐ片段，敏感性达０．００７ｆｇ，是一般ＰＣＲ的１００倍，是一种特异、敏感、简便、快速诊断Ｂ１９感染的新方法。用该方法检测了５７例自然流产和死胎的胎儿组织，１７例阳性，其中自然流产１１／４２（２６５），死胎６／１５（４０％），证实了国内胎儿有Ｂ１９病毒感染，和自然流产、死胎可能相关，并对ＰＣＲ实验中防污染措     

应用PCR—SSCP方法初步分析人微小病毒B19基因变异

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法初步了从华南地区收集的３份畸胎组织标本人微小病毒Ｂ１９分离株，其意泳图谱与国外参数株相同，提示两者衣壳蛋白ＶＰ１编码区的基因结构可能无差异。     

血液病微小病毒B_(19)检测的意义

１９７５年人类微小病毒Ｂ１９（ＨｕｍａｎｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ１９，缩写为ＨＰＶＢ１９以下简称Ｂ１９）由Ｃｏｏｓａｒｔ１等在人类血清中发现后，现已证实ＨＰＶＢ１９是引起一过性再生障碍性危象的致病因素。该病毒能引起骨髓衰竭，主要抑制红细胞系统克隆形成，导致红细胞发育不良，引起再障危象和各种溶血性贫血２。ＨＰＶＢ１９的检测在急性造血停滞和再障病人的检测屡有报道，但对其它血液病的检测未见报道。因此，为了解ＨＰＶＢ１９在各种血液病中检测的临床意义，对９８例血液病患者进行微小病毒（ＨＰＶＢ１９）…     

应用PCR－SSCP方法初步分析入微小病毒B19基因变异

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法初步分析了从华南地区收集的３份畸胎组织标本中人微小病毒Ｂ１９分离株，其电泳图谱与国外参考株相同，提示两者衣壳蛋白ＶＰ１编码区的基因结构可能无差异。     

41例微小病毒B_(19)阳性报告

我院儿科自１９９５年应用ＰＣＲ技术检测微小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）以来,发现其与新生儿病理性黄疸、特发性血小板减少性紫癜（ＩＴＰ）、急性造血停竭、再生障碍性贫血（ＡＡ）、先天性脑发育畸形、急性白血病、自身免疫性溶血性贫血等疾病有关,现将阳性病例报告...     

巢式PCR检测关节炎患者血清人细小病毒B19DNA

目的：探讨关节炎患者人细小病毒Ｂ１９（ＨＰＶＢ１９）的感染情况以及ＨＰＶＢ１９感染与类风湿性关节炎（ＲＡ）的相关性．方法：应用巢式ＰＣＲ方法对７４例单发或多发性关节炎患者以及对照组５０例非病毒感染相关性疾病、正常健康献血员及正常健康儿童血清进行ＨＰＶＢ１９－ＤＮＡ检测．结果：①病例组ＨＰＶＢ１９－ＤＮＡ阳性１５例（２０．３％）,其中６例为ＲＡ患者（４０％）,对照组阳性１例（２％）,相差非常显著（Ｐ     

人类微小病毒B19感染与大肠癌的关系

目的探讨人类微小病毒B19感染与大肠癌的关系。方法收集160例临床已确诊的肠癌病人及120例健康体检者血液标本，采用聚合酶链式反应（PCR）技术进行B19DNA检测。结果160例肠癌病人血标本中，B19DNA阳性为15例（9.38％）；120例健康体检者中B19DNA阳性为1例（0．83％）。差异有显著意义（P〈0．01）。结论肠癌病人微小病毒感染率明显高于健康人群。     

人微小病毒B19 VP2蛋白抗原在大肠杆菌中的表达

目的：利用原核系统表达人微小病毒B19的重组蛋白抗原,为建立ELISA方法诊断B19病毒感染提供特异性抗原。方法：采用PCR方法扩增B19 VP2基因,将之插入到T载体中进行测序,验证序列正确后再重组入原核表达载体pET-30a( ),并转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,进行诱导表达。用SDS-PAGE分析表达产物。表达产物经亲合层析柱纯化得到VP2重组蛋白抗原。用B19 VP2 IgG对该蛋白进行了Western-Blot分析。结果：筛选出2株B19 VP2蛋白抗原高表达菌株,经IPTG诱导后,表达VP2重组蛋白量占菌体总蛋白量的24．6％。结论：VP2重组蛋白具有良好的抗原活性。     

人类微小病毒B19感染与胸水征关系的探讨

目的：了解人类微小病毒B16(B19V)感染与胸水征的关系。方法：采集胸水为检测标本，应用聚合酶链反应(PCR)技术检测B19V。结果：由恶性胸水组、结核性胸水组、漏出液胸水组、其他胸水组构成研究对象，各组胸水标本中均有一定的B19V阳性发现，B19V的检出率其他组(22．0％)＞恶性组(11．6％)＞漏出组(9．8％)＞结核组(7．0％)。结论：各种胸水征时均可以存在B19V感染，此B19V感染可能是导致或加重胸水征的重要因素。     

应用聚合酶链式反应和原位杂交方法检测胎儿组织中人微小病毒B19核酸序列

用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）法检测了７例胎儿的１２份组织标本，在４份脑组织和１份脾组织中扩增出７００ｂｐ片段，经酶切鉴定证明其为特异性片段。用地高辛标记的人微小病毒Ｂ１９（ＰＶＢ１９）ＤＮＡ探针对ＰＣＲ检测阳性标本进行原位杂交，在２份脑组织和１份脾组织中检出了ＰＶＢ１９ＤＮＡ阳性颗粒，ＰＣＲ和原位杂交方法结合应用可为胎儿ＰＶＢ１９感染的病原学诊断和致病机理的研究提供一套持异、敏感和准确的实验方法。     

自然流产组织中人细小病毒B19的检测

自然流产组织中人细小病毒Ｂ１９的检测许东亮张国成陈星琪王荣平钱新宏（第四军医大学西京医院儿科病毒室西安７１００３３）关键词套式聚合酶链反应人细小病毒Ｂ１９自然流产中图号Ｒ７１５．１０引言人细小病毒Ｂ１９（ｈｕｍａｎｐａｒｖｏｖｉｒｕｓＢ１９，ＨＰＶＢ...