RASSF7表达与乳腺癌上皮-间质转化的关系

目的 探讨RASSF7在乳腺癌中的表达及与乳腺癌上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系.方法 采用免疫组化法检测80对乳腺癌及癌旁正常乳腺组织中RASSF7的表达,分析RASSF7表达与乳腺癌临床病理特征的关系.采用Western blot法检测8对新鲜乳腺癌...     

结肠癌组织中LKB1的表达及其与上皮-间质转化的关系

目的探讨LKB1在结肠癌组织中的表达及其与肿瘤上皮-间质转化的关系。方法采用免疫组化法检测75例结肠癌组织及对应癌旁正常结肠组织中LKB1、上皮-间质转化(epithelial mesenchymal transformation,EMT)相关标志物E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达,分析LKB1表达与结肠癌临床病理特征及EMT的关系。结果 49例结肠癌组织中LKB1低表达,55例正常结肠组织中LKB1高表达;LKB1表达降低与淋巴结转移、TNM肿瘤分期相关(P0.05);E-cadherin、N-cadherin、vimentin分别在25例、48例、26例结肠癌组织中高表达,LKB1表达与E-cadherin表达呈正相关(r=0.648,P0.05),与Ncadherin(r=-0.891,P0.05)和vimentin(r=-0.660,P0.05)表达呈负相关。结论 LKB1在结肠癌组织中表达下调,与EMT的发生呈正相关,可作为结肠癌转移发生的预测指标。     

同期放化疗诱导人结直肠癌细胞发生上皮-间质转化

目的:探讨放化疗抵抗的结直肠癌细胞发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的意义.方法:采用5-FU化疗同期进行放疗对人结直肠癌野生型细胞(HCTll6)进行干预,诱导放化疗共同抵抗的细胞株(HCT1 16CRR)并采用克隆形成实验进行放化疗抵抗性的鉴定.高倍显微镜下观察细胞形态学变化.采用Real-time PCR和Western印迹,检测上皮表型标志物E-cadherin,间质表型标志物N-cadherin、波形蛋白(vimentin)、核转录因子(Snail)mRNA及其蛋白的表达.结果:放化疗抵抗的结直肠癌细胞发生与EMT相符的形态学改变,细胞呈纺锤体状,极性消失,并出现伪足;Real-time PCR和Western印迹结果显示E-cadherin mRNA及蛋白表达下调;N-cadherin,vimentin,Snail mRNA及蛋白表达上调,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:放化疗抵抗后的人结直肠癌细胞发生EMT,其与结直肠癌的治疗抵抗相关.     

乳腺癌中miR-134的表达及其与上皮-间质转化的关系

目的：探讨miR-134在乳腺癌中的表达及临床意义,分析其表达与上皮-间质转化（ epithe1ia1-mesenchyma1 transition, EMT）标志物的相关性。方法采用原位分子杂交法检测97例乳腺癌组织中miR-134的表达,同时应用免疫组化MaxVision两步法检测E-cadherin、N-cadherin、vimentin的表达,并分析三者表达与临床病理特征的关系。结果 miR-134在乳腺癌中的阳性率随组织学分级的升高而降低,其表达与HER-2表达呈负相关。miR-134的阳性率随E-cadherin表达下调及N-cadherin、vimentin表达上调而降低;E-cadherin在乳腺癌中表达下调以及N-cadherin、vimentin在乳腺癌中表达上调均与组织学分级升高、淋巴结转移和HER-2阳性以及ER、PR阴性有关。结论 miR-134在乳腺癌组织中的表达随肿瘤恶性程度的升高而下调,并与EMT关系密切,是乳腺癌的潜在生物学标志物。     

结直肠癌组织中CD10的表达及其临床意义

目的探讨结直肠癌组织中间质和上皮细胞CD10的表达及与肿瘤临床生物学行为的关系。方法运用免疫组化EnVision法检测90例结直肠癌组织和20例正常黏膜中CD10的表达,同时用α-SMA标记结直肠癌组织中肌纤维母细胞。结果正常结直肠黏膜中间质和上皮细胞均无CD10的表达,而在结直肠癌组织中,CD10在间质和上皮细胞的阳性表达率分别为57．8％和26．7％。结直肠癌中CD10阳性的间质细胞和上皮细胞在高、低级别癌中的表达差异无显著性（P〉0．05）;间质细胞CD10阳性在侵及肌层者高于侵及浆膜层者（P〈0．01）,而CD10阳性的上皮细胞与肿瘤的浸润深度无关（P〉0．05）;间质细胞和上皮细胞表达CD10与淋巴结转移均无相关性（P〉0．05）;CD10阳性间质细胞在有脉管侵犯者低于无脉管侵犯者（P〈0．01）,CD10阳性上皮细胞在有脉管侵犯者高于无脉管侵犯者（P〈0．01）。CD10阳性间质细胞与α-SMA阳性间质细胞分布一致。结论结直肠癌中间质细胞肌纤维母细胞化可阻止肿瘤的转移,而肿瘤细胞表达CD10可能通过促进细胞外基质溶解而促进转移。     

上皮-间质转化与肿瘤的浸润和转移

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transitions,EMT)是指上皮细胞失去极性,经过细胞骨架重塑,转变成具有迁移能力的间充质表型的过程,是多细胞生物胚胎发生发育过程中的基础。细胞因子TGF-β、转录因子Snail、基质金属蛋白酶MMPs、病毒癌基因可以诱导EMT。肿瘤细胞EMT与肿瘤细胞的浸润、转移、信号转导有关,研究肿瘤细胞EMT将为寻找抗肿瘤治疗靶点奠定基础。     

上皮-间质转化在蒿甲醚逆转结直肠癌细胞放化疗抵抗中的作用

目的:探讨上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)在蒿甲醚(artemether,ARE)对同期放化疗抵抗人结直肠癌细胞HCT116(HCT1 16CRR)的逆转作用中的作用.方法:实验分为四组:1)对照组;2)单纯放化疗组;3)ARE联合放化疗组;4)ARE组.采用Real-time PCR和Westernblot,检测各组EMT相关指标E-cadherin,N-cadherin,vimentin,snail mRNA及其蛋白的表达情况.结果:Real-time PCR和Western blot结果显示E-cadherin mRNA及其蛋白的表达情况,单纯放化疗组＜ARE联合放化疗组＜对照组＜ARE组;N-cadherin,vimentin,snail mRNA及其蛋白的表达情况,单纯放化疗组＞ARE联合放化疗组＞对照组＞ARE组.结论:EMT在ARE逆转同期放化疗抵抗人结直肠癌细胞HCT116CRR细胞系的放化疗抵抗作用中有重要的作用,即上调E-cadherin mRNA及其蛋白的表达,下调N-cadherin,vimentin,snail mRNA及其蛋白的表达.     

上皮-间质转化的信号转导机制

上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)出现在各种生理和病理情况下,在胚胎发生与器官发育、肿瘤形成和转移以及纤维化过程中均有表现。TGF-β是EMT的一个重要诱导因素,其通过Smad和非Smad依赖通路对EMT的发生进行调节,对肿瘤的形成、转移和扩散起到了重要的作用。本文综述了近年来EMT信号转导机制的研究进展。     

结直肠癌中SPOCD1的表达及相关分子机制

目的 探讨含SPOC结构域蛋白1(SPOC domain-containing protein 1, SPOCD1)在结直肠癌中的表达及相关分子机制。方法 利用TCGA数据库和GEO数据库分析结直肠癌和癌旁正常组织中SPOCD1 mRNA的表达;采用免疫组化和Western blot法检测结直肠癌和癌旁正常组织或细胞系中SPOCD1蛋白表达,并分析其与临床病理特征的关系;应用GEPIA和Prognoscan数据库分析SPOCD1表达与结直肠癌患者预后的关系;基因集富集分析SPOCD1可能参与的通路;采用GEPIA数据库分析基因表达之间的相关性;利用siRNA沉默结直肠癌细胞系HCT116中SPOCD1蛋白表达,Western blot法验证下游基因。结果 TCGA和GEO数据库分析结果显示,SPOCD1 mRNA在结直肠癌组织中的表达显著增加;免疫组化结果显示,SPOCD1蛋白在结直肠癌组织中高表达(67.8%,40/59),显著高于癌旁正常组织(37.3%,22/59)(P<0.001);SPOCD1在结直肠癌细胞系(HCT116和LoVo)中的表达高于正常结直肠细胞系(NCM...     

结直肠癌中突触核蛋白-γ的表达及意义

目的 探讨结直肠癌组织中突触核蛋白-γ(Synuclein-γ, SNCG)的表达及临床病理意义。方法 采用免疫组化EnVision两步法检测126例结直肠癌组织、癌旁组织和远端正常组织中SNCG的表达,应用单因素、多因素对SNCG表达与临床病理特征的相关性及危险因素进行分析。结果 结直肠癌组织中SNCG的阳性率(65.1%,82/126)高于癌旁组织(0,0/126)及远端正常组织(0,0/126)(P<0.05);SNCG表达与结直肠癌病理类型、血管内癌栓、侵犯深度、肿瘤分期和分级具有相关性(P<0.05);多因素Logistic回归分析显示,SNCG表达与黏液腺癌、血管内存在癌栓、TNM分期Ⅲ+Ⅳ期以及HER-2阳性具有相关性(P<0.05)。结论 SNCG在结直肠癌中高表达,其对于预测结直肠癌患者病情的恶变程度和治疗预后等具有较广的临床应用价值。     

肿瘤组织力学异质性与肿瘤细胞的上皮-间质转化

在肿瘤生长过程中,随着癌细胞的增殖扩张、癌组织胞外基质的重建、周围组织的约束及癌组织间隙液的流动等,肿瘤组织内形成了特殊的应力环境。肿瘤组织不同区域的力学环境和力学特征存在显著差异,即肿瘤组织的力学异质性。研究发现,肿瘤组织侵袭前沿区域的力学特征更加显著和复杂。特别地,肿瘤细胞的上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）也偏好集中于该区域,侵袭前沿产生的机械应力可通过TWIST1、TGF-β、WNT等力信号转导途径诱导侵袭前沿肿瘤细胞的EMT,促成肿瘤细胞的侵袭性表型。从肿瘤生物力学角度出发,对肿瘤组织的力学异质性、肿瘤细胞的EMT以及两者的关系加以综述,为力学微环境靶向的肿瘤治疗提供理论依据。     

沉默Twist基因对胃癌BGC-823细胞上皮-间质转化的影响

目的探讨干扰Twist基因表达对胃癌细胞株BGC-823细胞上皮-间质转化的影响。方法采用干扰技术并构建质粒、生物信息学软件、qRT-PCR技术、划痕实验、Transwell实验和Western blot法对BGC-823细胞进行体外实验。结果 Twist在胃癌组织中的表达高于癌旁组织(P0.05),且与胃癌患者的预后呈负相关性(P0.05)。干扰Twist表达后,胃癌细胞株的迁移、侵袭能力减弱(P0.05);E-cadherin的相对表达量增高(P0.01),而N-cadherin的相对表达量降低(P0.05)。结论胃癌细胞株BGC-823中Twist的表达可促进胃癌细胞发生上皮-间质转化,Twist在胃癌发生发展中起癌基因的作用。     

SCUBE2过表达通过Wnt/β-catenin抑制结直肠癌细胞上皮-间质转化

目的:研究信号肽-CUB-EGF结构域蛋白2(SCUBE2)对结直肠癌细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及可能的分子机制。方法:首先,用real-time PCR与Western blot法检测人结直肠癌HCT116细胞和正常人结直肠上皮FHC细胞SCUBE2的表达;HCT116细胞转染GV144-SCUBE2质粒过表达SCUBE2后,MTT、Transwell和流式细胞术分别检测其对细胞活力、迁移和凋亡的影响。转染GV144-SCUBE2质粒6 h后加入10μg/L重组转化生长因子(TGF)-β1蛋白继续培养48 h,real-time PCR或者Western blot法检测EMT标志物[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)和Snail]、β-catenin、c-Myc和细胞周期蛋白(cyclin)D1的表达。随后,在HCT116细胞中使用Wnt/β-catenin通路激活剂氯化锂(Li Cl)或抑制剂XAV93920并加入TGF-β1且过表达SCUBE2,检测Wnt/β-catenin通路激活或阻断后对HCT116细胞EMT的影响。结果:HCT116细胞中SCUBE2的表达明显低于FHC细胞;过表达SCUBE2能够抑制HCT116细胞的活力与迁移,但是对其凋亡影响不大;SCUBE2增加了E-cadherin的表达,降低了TGF-β1诱导的vimentin、Snail、β-catenin、c-Myc和cyclin D1的表达,XAV93920增强了SCUBE2对EMT的影响,而Li Cl阻碍SCUBE2对EMT的影响。结论:过表达SCUBE2能够抑制结直肠癌细胞的生长与迁移,抑制其EMT的发生,这一过程可能是通过抑制Wnt/β-catenin信号通路发挥作用的。     

转录因子在上皮间质转化中分子机制研究进展

上皮细胞-间充质转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT),是指上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型细胞的生物学过程,目前研究证实这种表型的转化与转录因子密不可分.与其他转录因子相比,转录因子SNAIL、TWIST、ZEB为促进EMT过程的主要转录因子,本文总结国内外与EMT相关研究并对转录因子及其在EMT过程中的分子机制加以综述.     

甲状腺乳头状癌中Dickkopf-1蛋白的表达及与上皮-间质转化的关系

目的 探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)和甲状腺乳头状增生(papillary thyroid hyperplasia, PTH)中Dickkopf-1(DKK1)的表达及与上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)相关蛋白的关系。方法 采用生物信息学技术分析TCGA数据库中DKK1在PTC中的诊断价值;采用免疫组化EnVision法检测80例PTC和60例PTH组织中DKK1蛋白的表达,以及PTC组织中MMP-2、E-cadherin和vimentin的表达,并分析其与临床病理特征及相关性。结果 生物信息学分析和免疫组化结果显示,DKK1对PTC诊断预测的曲线下面积(AUC)分别为0.674和0.874(P均<0.001),其灵敏度为95.0%,特异性为71.2%,诊断准确度为81.4%,误诊率为28.8%,漏诊率为5.0%,具有较高的诊断价值。PTC和PTH组织中DKK1的阳性率分别为28.8%(23/80)和95.0%(57/60),差异有统计学意义(P<0.001...     

上皮-间质转化与肿瘤转移的相关进展

上皮-间质转化(EMT)是一种来源于发育生物学的概念,它表示上皮细胞发生向间质细胞表型转化的一个过程。近年来,EMT机制已经成为肿瘤转移研究的热点。本文概要回顾了EMT及其与肿瘤转移相关的研究成果,并介绍了生物力学因素在EMT参与肿瘤转移中的可能作用,以期为本领域的研究提供一些思路。     

Endophilin A2与胃癌BGC-823细胞转移及上皮-间质转化的关系

目的:探究Endophilin A2在胃癌转移及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中的作用及相关机制.方法:通过免疫组织化学法测定37例胃癌原发灶组织和35例胃癌转移淋巴结中Endophilin A2蛋白的分布和表达情况.在BGC-823细胞转染腺病毒过表达EndophilinA2后,通过划痕实验和Transwell实验观察其迁移能力;Western印迹检测EMT及相关信号通路蛋白的水平.结果:免疫组织化学结果显示胃癌淋巴结转移灶中Endophilin A2蛋白的表达明显低于原发灶.BGC-823细胞中过表达Endophilin A2之后细胞的迁移能力降低,上皮细胞标志物上皮黏附蛋白(epithelium cadherin,E-cadherin)的表达升高,同时黏附蛋白辅助因子p-catenin的表达升高,而间质细胞标志物神经钙黏蛋白(nervous cadherin,N-cadherin)和波形蛋白vimentin的表达明显下降.Endophilin A2过表达之后,Notch和snail的表达也明显降低.结论:Endophilin A2与胃癌淋巴转移密切相关,过表达Endophilin A2可能通过Notch/snail通路抑制胃癌细胞BGC-823的EMT进程.     

过表达Oct4B1 诱导结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化

目的:探讨Oct4B1 基因过表达是否诱导人结直肠癌SW480 细胞发生上皮间质转化(EMT)及其可能的机制。方法:用带G418 抗性的Oct4B1 基因过表达质粒及阴性对照质粒转染人结直肠癌SW480 细胞株,分别称为实验组(SW480-Oct4B1)及对照组(SW480-NC),转染成功后用G418 筛选建立稳定转染的细胞株,对两种稳定转染细胞进行如下检测: RT-qPCR 检测Oct4B1 的mRNA 水平;于划痕实验和Transwell 小室实验检测迁移和侵袭能力;盂Western blot 检测EMT 相关标记物E-cadherin、N-cadherin 及Vimentin 蛋白表达; RT-qPCR 和Western blot 检测EMT 转录因子Twist 的mRNA 及蛋白表达。结果:稳定转染细胞株建立后,实验组与对照组比较:Oct4B1 基因表达水平明显升高(P<0.01);细胞迁移明显增强(P<0.01);细胞侵袭能力明显提高(P<0.01);上皮标记物E-cadherin 蛋白表达量明显下降(P<0.01);而间质标记物N-cadherin 及Vimentin蛋白表达量明显上调(P<0.01);Twist 的mRNA 及蛋白表达量均明显升高(P<0.01)。结论:过表达Oct4B1 基因可诱导人结直肠癌SW480 细胞发生EMT,增强细胞迁移及侵袭能力,其分子机制可能与提高Twist 表达有关。     

PTTG1通过上皮-间质转化促进非小细胞肺癌的迁移和侵袭

目的 研究PTTG1在非小细胞肺癌侵袭转移中的作用.方法 应用免疫组织化学染色法检测80例NSCLC组织中PTTG1、E-cadherin和Vimentin的表达,并分析其相关性.细胞分组:1)A549/con,转染空载的A549,2)A549/PTTG1,转染目的基因的A549,3)Scr/H1299,转染空载的H1299,4)SiPTTG1/H1299,敲除PTTG1的H1299;用Western blot检测细胞中PTTG1、E-cadherin、Vimentin蛋白的表达情况.结果 NSCLC组织中PTG1蛋白的阳性表达率为85％与E-cadherin的表达呈负相关(P＜0.05)而与Vimentin的表达呈正相关(P＜0.05).Western blot结果显示在SiPTTG1/H1299细胞中PTTG1蛋白表达水平明显降低,Vimentin蛋白表达水平降低而E-cadherin蛋白表达水平升高.同时在A549/PTTG1细胞中Vimentin蛋白表达水平升高而E-cadherin蛋白表达水平降低.结论 PTG1能促进NSCLC EMT的发生,从而促进NSCLC的侵袭和转移.