儿童H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤41例临床病理学分析

目的:探讨儿童H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤的临床病理学特征并分析预后相关因素。方法:收集复旦大学附属儿科医院（39例）和西安交通大学附属西安市儿童医院（2例）2016年7月至2020年7月诊断为H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤、年龄≤18岁的病例41例,分析其临床表现、影像学特点、组织病理学特征、免疫表型及分子遗传...     

组蛋白H3 K27M和BRAF V600E共突变的儿童中线Ⅰ级节细胞胶质瘤

<正>节细胞胶质瘤是一种Ⅰ级肿瘤,其特点为MAPK通路突变,包括BRAF V600E突变。最近,伴H3 K27M突变的弥漫中线胶质瘤作为一种Ⅳ级的新类型被WHO(2016)新分类收录。同时出现H3 K27M和BRAF V600E突变已在中线胶质瘤和间变性节细胞胶质瘤中报道,作者检测54例儿童中线     

弥漫中线胶质瘤伴H3K27M突变的研究进展北大核心CSCD

弥漫中线胶质瘤（diffuse midline glioma）伴H3K27M突变（第27位赖氨酸突变为甲硫氨酸）是2016年WHO中枢神经系统的新增分类．是一类主要为星形细胞分化并伴有组蛋白H3K27M突变的浸润性中线高级别胶质瘤,该病主要发生于儿童,可见于成人,常见于脑干、丘脑和脊髓等中线部位。     

成人H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤临床病理学分析

目的探讨成人H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤(diffuse midline glioma, DMG)的临床病理特征、病理诊断及预后。方法收集南京医科大学第一附属医院2017—2022年收治的经病理确诊的20例成人H3K27变异型DMG, 对其临床表现、组织学形态、免疫表型及分子遗传学改变进行分析总结, 并复习文献。结果患者男女比例1∶1, 发病年龄25～74岁, 中位发病年龄为53岁, 3例(3/20, 15%)位于脑干, 17例(17/20, 85%)位于非脑干部位(其中胸腰髓3例, 松果体1例)。临床表现无特异性, 多为头晕头痛、视物模糊、记忆力下降、腰背痛、肢体感觉和/或运动障碍等。光镜下肿瘤呈浸润性生长, 组织学分级WHO 2级3例, 3级12例, 4级5例, 多呈星形细胞肿瘤形态, 部分病例可见少突胶质细胞样、毛细胞样、上皮样等形态。免疫组织化学:肿瘤细胞均表达胶质纤维酸性蛋白、Olig2及H3K27M, H3K27me3均不同程度表达缺失, 4例ATRX表达缺失, 11例p53强阳性表达, Ki-67阳性指数5%～70%。分子检测:20例均存在H3F3A基因第1号外显子p...     

室管膜瘤临床病理特征及H3K27me3表达的意义

目的探讨室管膜瘤(ependymomas, EPN)中H3K27me3的表达及其与预后的相关性。方法回顾性分析48例EPN的临床病理学特征,采用免疫组化法检测H3K27me3的表达,分析其在不同部位及不同组织学分级的表达差异及与肿瘤预后的关系。结果 48例EPN中男性19例,女性29例;30例位于脊髓、5例位于幕上、13例位于后颅窝;WHOⅠ级4例、WHOⅡ级33例、WHOⅢ级11例;48例EPN中9例预后不佳(7例复发、2例死亡)。EPN标本GFAP、Olig-2、EMA免疫组化阳性率分别为100%、11%、79%;4例幕上EPN行L1CAM检测均为阳性,其中3例行FISH检测显示C11orf95-RELA融合基因阳性,随访阳性患者中1例出现复发。5例H3K27me3表达缺失均发生于后颅窝EPN,统计学分析显示WHO分级、H3K27me3表达在后颅窝、脊髓、幕上EPN中差异有统计学意义(P0.05)。H3K27me3缺失组和H3K27me3未缺失组间总生存期差异无显著性(P0.05),而无进展生存期差异有显著性(P0.05)。结论 H3K27me3表达缺失的EPN主要好发于后颅窝,常见于儿童及青少年人。H3K27me3可作为判断后颅窝EPN分子分型及评估预后的标志物。     

子宫内膜异位症中组蛋白H3K27Me3及其修饰酶的表达及意义

目的探讨组蛋白H3K27Me3及其修饰酶EZH2、KDM6B在子宫内膜异位症(endometriosis, EM)中的表达及意义。方法收集30例腹腔镜下手术切除卵巢EM病灶组织(增生期和分泌期各15例)及30例其它异位部位EM病灶组织(8例结直肠、10例盆腔、7例腹壁皮肤、5例输卵管)为实验组,60例因子宫肌瘤或卵巢纤维瘤等良性病变行在位子宫内膜诊刮组织为对照组(增生期和分泌期各30例)。采用免疫组化EnVision两步法及Western blot法检测H3K27Me3、EZH2、KDM6B的表达水平。收集实验组卵巢EM的临床各指标,包括患者年龄、体重指数(BMI)、病灶大小、痛经评分、月经周期、盆腔液CA125浓度、rAFS评分,应用相应统计学方法分析H3K27Me3及其修饰酶的表达与临床各指标的相关性。结果 H3K27Me3和EZH2在实验组卵巢EM病灶与对照组正常分泌期子宫内膜中的表达差异无显著性(P0.05),两者的表达水平均高于对照组正常增生期子宫内膜(P0.01),KDM6B在各组中均高表达且组间差异无显著性(P0.05);各蛋白在实验组不同异位部位中的表达差异无显著性(P0.05);月经周期对卵巢EM组各蛋白的表达无显著影响(P0.05)。患者年龄、BMI、病灶大小、盆腔液CA125浓度及rAFS评分与H3K27Me3、EZH2的表达呈正相关(P0.01),痛经程度与H3K27Me3、EZH2的表达无相关性(P0.01)。结论组蛋白H3K27Me3及其修饰酶EZH2在EM中高表达,孕酮可通过EZH2的甲基化作用使H3K27Me3的表达增加。H3K27Me3、EZH2的表达水平可在一定程度上反映EM病变严重程度,H3K27Me3可能成为EM的一个潜在生物蛋白标记,EZH2作为H3K27Me3的修饰酶或能成为EM诊治的潜在新靶点。     

CXorf67与H3K27me3在中枢神经系统生殖细胞肿瘤病理诊断中的应用价值

目的:探讨CXorf67、H3K27me3在中枢神经系统生殖细胞肿瘤（GCT）中的表达情况及其在诊断和鉴别诊断中的价值。方法:选取复旦大学附属华山医院病理科中枢神经系统GCT病例370例,通过免疫组织化学（EnVision法）检测石蜡标本中CXorf67、H3K27me3及常用指标OCT4、胎盘碱性磷酸酶（PLAP）、...     

H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤临床病理分析及NTRK作为治疗靶点的初步探讨

目的分析H3K27变异型弥漫性中线胶质瘤(diffuse midline glioma, H3K27-altered, DMG)的临床病理学特征及预后相关因素, 并探讨神经营养原肌球蛋白受体激酶(neurotrophic tropomyosin receptor kinase, NTRK)作为DMG的治疗靶点的可行性。方法收集2016年7月至2021年3月首都医科大学三博脑科医院诊断为DMG的病例样本232例, 分析其临床、影像、病理、O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)启动子甲基化比率、NTRK免疫表达、NTRK基因融合的特点, 并对肿瘤发生年龄、部位、组织学分级、NTRK蛋白及基因改变、术后辅助治疗方式在预后方面的意义进行研究。结果 232例病例(包含原发/复发病例8例, 即共有224例患者, 男性118例, 女性106例), 儿童组(≤18岁)98例, 成人组(>18岁)126例。儿童组和成人组发病部位分别以脑干(59/98, 60.2%)和丘脑(41/126, 32.5%)最为多见。影像学上病变多呈现为T1低或等信号, T2高信号, 增强信号变化较大, 但多数肿瘤...     

第5版WHO中枢神经系统肿瘤分类儿童型高级别胶质瘤解读

2021年WHO第5版中枢神经系统肿瘤分类将常见于儿童的胶质瘤分为儿童型弥漫性低级别胶质瘤和高级别胶质瘤。其中儿童型高级别胶质瘤根据分子病理学改变及全基因组DNA甲基化谱聚类分析分为以下4类:弥漫性中线胶质瘤, H3K27变异型;弥漫性半球胶质瘤, H3G34突变型;弥漫性儿童型高级别胶质瘤, H3和IDH野生型;婴儿型半球胶质瘤。本文对其进行详细的解读。     

后颅窝室管膜瘤21例临床病理及分子特征

目的 探讨后颅窝室管膜瘤的临床病理及分子特征。方法 收集21例后颅窝室管膜瘤病例,对其临床病理学资料、分子遗传学及预后进行分析总结,并复习相关文献。结果 患者男性12例,女性9例,中位年龄44岁。组织学表现：6例可见筛网状、腺样结构,腔内充满均质嗜酸性球状物质。免疫表型：肿瘤细胞EMA、D2-40核旁点状阳性,H3K27me3阳性20例、缺失1例,10例TRPS1核强阳性。分子分型：PFB组20例,PFA组1例;1例检测到TP53体系突变。平均总生存期180.6个月。结论 后颅窝室管膜瘤任何年龄均可发生,日常工作中需常规对后颅窝室管膜瘤进行H3K27me3染色分组,PFB组总体预后较好;嗜酸性分泌物的形态特点可能与室管膜瘤细胞的分泌功能有关,认识此种形态可减少误诊,TRPS1、TP53突变可能在部分室管膜瘤中起作用。     

组蛋白H3F3A和HIST1H3B K27M突变将桥脑内弥漫型胶质瘤分为不同的预后和表型

正桥脑内弥漫型胶质瘤是最致命的儿童实体瘤,在过去50年里依然未取得显著的治疗进展。最近的研究表明,伴有H3B K27M突变的中线弥漫型胶质瘤可能包含不止一个生物学类型。该文回顾性研究91例经典桥脑内弥漫型胶质瘤,均经立体定位活检证实。组蛋白H3B基因突变通过免疫组化和直接测序法评估,应用芯片检测全基因表达谱和染色体异常。将患者初诊及复发时完整的MRI结果与分子谱     

弥漫性中线胶质瘤,组蛋白H3-K27M突变型:47例形态学变异谱系及相关遗传学改变分析

正最近发现在儿童和年轻人丘脑、桥脑和脊髓的高级别胶质瘤中存在编码组蛋白H3的亚型H3.3和H3.1的H3F3A和HIST1H3B基因体细胞突变。然而,关于发生这些肿瘤的患者和部位具体范围,以及形态学谱系和相关遗传学改变仍然不确定。本文检测47例伴组蛋白H3-K27M突变的弥漫性中线胶质瘤,包括25例男性和22例女性患者,年龄2~65岁(中     

cIMPACT-NOW对胶质瘤分子分型的补充更新及意义

中枢神经系统肿瘤分类分子信息及实践方法联盟-非WHO官方组织(cIMPACT-NOW)就2016 WHO中枢神经系统肿瘤分类第4版修订版发布以来的神经系统肿瘤部分临床实践中的分类分级、争议问题与研究进展进行了深入的分析研究,发布了4次更新,包括(1)NEC、NOS术语的使用范围;(2)H3K27M突变型弥漫性中线胶质瘤的定义修订;(3)IDH野生型具有胶质母细胞瘤分子特征的弥漫性星形细胞胶质瘤,WHOⅣ级的分子遗传特征;(4)以MYB、MYBL1或FGFR1改变或BRAF V600E突变为特征的IDH野生型/H3野生型弥漫性胶质瘤。上述更新将成为未来第5版WHO中枢神经系统肿瘤分类改版建议,在该文中逐一进行分析解读。     

cIMPACT-NOW对胶质瘤分子分型的补充更新及意义

中枢神经系统肿瘤分类分子信息及实践方法联盟-非WHO官方组织(cIMPACT-NOW)就2016 WHO中枢神经系统肿瘤分类第4版修订版发布以来的神经系统肿瘤部分临床实践中的分类分级、争议问题与研究进展进行了深入的分析研究, 发布了4次更新, 包括(1)NEC、NOS术语的使用范围;(2)H3K27M突变型弥漫性中线胶质瘤的定义修订;(3)IDH野生型具有胶质母细胞瘤分子特征的弥漫性星形细胞胶质瘤, WHO Ⅳ级的分子遗传特征;(4)以MYB、MYBL1或FGFR1改变或BRAF V600E突变为特征的IDH野生型/H3野生型弥漫性胶质瘤。上述更新将成为未来第5版WHO中枢神经系统肿瘤分类改版建议, 在该文中逐一进行分析解读。     

腺病毒介导的hTERTC27在体内外对小鼠胶质瘤的抑制作用

目的:探讨人端粒酶逆转录酶C-末端27kD多肽(hTERTC27)对小鼠胶质瘤的抑制作用及其可能的机制。方法:体外实验用PT-PCR法检测hTERTC27的cDNA水平,Western杂交鉴定hTERTC27蛋白的表达,hoechst法检测细胞的凋亡,CCK8法检测hTERTC27对GL261细胞的抑制率,及加入Caspsase-3的抑制剂ZdevdFMK后hTERTC27对GL261细胞抑制率的变化。体内实验建立小鼠胶质瘤模型,原位分别注射AdC27-EGFP、AdC27-EGFP+Zdevd-FMK和Ad-EGFP,观察小鼠的存活时间。结果:体外实验表明,hTERTC27能明显地抑制肿瘤细胞的生长,促进肿瘤的凋亡;而当加入Caspsase-3的抑制剂后,hTERTC27的抑制作用被明显阻断。体内实验显示,AdC27-EGFP小鼠组的生存时间为(40.38±11.30)d,高于AdC27-EGFP+Zdevd-FMK组的(27.25±6.41)d和Ad-EGFP组的(25.38±6.79)d(P0.05)。结论:hTERTC27能在体内和体外明显地抑制小鼠胶质瘤的生长,其机制可能与Caspases-3凋亡途径有关。     

一例H3G34突变的儿童弥漫性半球胶质瘤病例报道及文献复习

H3 G34突变的儿童弥漫性半球胶质瘤(Diffuse Hemispheric Glioma,DHG)是一种以组蛋白H3 G34基因突变为主要特征的高级别胶质瘤,临床罕见,预后不佳,且由于缺乏典型影像学表现,早期极易误诊。该亚型以手术治疗为主,尚无统一的放化疗方案。本文报道一例癫痫起病的左侧颞叶胶质瘤患儿,经手术全切肿瘤,术后病理证实为H3 G34突变的弥漫性半球胶质瘤。患儿术后恢复良好,随访6个月未见复发。     

出核因子CRM1及p27在胶质瘤中的表达

目的 探讨出核因子CRM1、p27 10位丝氨酸(Ser10)磷酸化及p27蛋白在胶质瘤中的表达、相互关系及意义.方法 免疫组织化学SP法检测70例胶质瘤和10例非肿瘤对照脑组织标本中CRM1、p27Ser10磷酸化形式及p27蛋白的表达,Western blot检测6例新鲜胶质瘤标本中相应蛋白的表达.结果 CRM1及p27Ser10磷酸化形式在对照脑组织中表达不明显,在低级别胶质瘤中表达较少,在高级别胶质瘤中表达较多,两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).p27在对照脑组织中表达明显,其表达水平随肿瘤级别增高而降低,差异有统计学意义(P<0.01).Western blot结果显示CRM1、p27Ser10磷酸化形式在胶质瘤中的表达水平与肿瘤细胞的恶性程度相关.相关分析显示:胶质瘤中CRM1蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r=0.727,P<0.01),与p27Ser10磷酸化形式呈正相关(rs=0.954,P<0.01),与增殖指标Ki-67表达呈正相关(rs=0.799,P<0.01);p27Ser10磷酸化形式与p27蛋白表达呈负相关(rs=-0.744,P<0.01),与Ki-67表达呈正相关(rs=0.785,P<0.01).结论 在胶质瘤中高表达的CRM1可能通过识别并结合高表达的p27Ser10磷酸化形式,促进p27的出核降解,使p27表达降低,失去对细胞周期的调控,从而促进胶质瘤的恶性进展和增殖.     

组蛋白H3K9甲基修饰酶在2周、4周和6周龄小鼠肝脏中的表达

目的 探讨不同周龄小鼠肝脏组蛋白H3K9甲基转移酶(KMT)和去甲基化酶(KDM)的表达.方法 取2周、4周和6周龄BALB/c雄性小鼠肝脏组织,分别提取总mRNA和蛋白质,应用实时定量反转录-聚合酶链式反应(RT-qPCR)确定几种H3K9甲基转移酶和去甲基化酶的表达差异,使用Western blotting 检测两...     

前列腺癌细胞组蛋白H3甲基化的差异

 目的：整体分析雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌细胞组蛋白H3甲基化差异,探讨前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的表观遗传机制。方法：应用重甲基细胞培养条件下氨基酸稳定同位素标记(SILAC)技术结合生物质谱分析雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP和非依赖性前列腺癌细胞DU145组蛋白H3的甲基化修饰谱,寻找差异的修饰位点和模式;通过Western blotting验证所发现的差异修饰;采用real-time PCR检测2株细胞相关甲基化酶和去甲基化酶的表达差异。结果：质谱鉴定发现2株前列腺癌细胞的组蛋白H3存在5个甲基化位点,甲基化模式分别为H3K14me2、H3R17me1、H3K36me1、H3K36me2、H3K36me3、H3R72me2、H3K79me1和H3K79me2。其中,包含甲基化位点H3K36的肽段有2种,分别为“KSAPATGGVKKPHR”和“KSAPSTGGVKKPHR”,前者鉴定到的频数高于后者,两者的区别在于第31位的氨基酸分别为A与S,前者归属于组蛋白H3变异体H31T、H31和H32,主要出现在DU145细胞中,后者归属于组蛋白H3变异体H33,在LNCaP细胞中出现次数稍多;提示2株细胞可能表达不同的组蛋白H3变异体,从而导致甲基化模式的差异。Western blotting检测发现H3K36的一甲基化和二甲基化在2株细胞间没有差异,而其在DU145细胞中的三甲基化程度显著高于LNCaP细胞。Real-time PCR检测显示DU145细胞的H3K36去甲基化酶mRNA表达比LNCaP细胞有所降低。结论：组蛋白H3变异体和H3K36去甲基化酶的差异表达可能导致非激素依赖性前列腺癌细胞H3K36三甲基化增加,成为前列腺癌从激素依赖性发展为非激素依赖性的一种表观遗传转变。     

贝伐珠单抗通过调控PI3K/AKT信号通路下调肺腺癌H1299细胞PD-L1表达北大核心CSCD

目的:探讨贝伐珠单抗(Beva)对人肺腺癌H1299细胞程序性细胞死亡配体1(PD-L1)表达的影响及其可能机制。方法:使用不同浓度Beva(0、5、10、20、40、80μg/ml)作用于H1299细胞36 h、48 h、72 h,CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞PD-L1表达;实验分为:对照组(等量培养液)、Beva组、740-YP(PI3K激活剂)组、LY294002(PI3K抑制剂)组、Beva+740-YP组,流式细胞术检测细胞PD-L1表达,Western blot法检测细胞p-PI3K、p-AKT蛋白表达。结果:(1)Beva能抑制H1299细胞增殖,其作用与剂量有关(P<0.05);(2)随着Beva浓度升高、作用时间延长,H1299细胞PD-L1表达量逐渐减少(P<0.05);(3)PI3K通路抑制剂LY294002处理H1299细胞后PD-L1的表达量显著减少(P<0.01),PI3K通路激活剂740-YP处理H1299细胞后PD-L1的表达量显著增加(P<0.01);(4)Beva处理H1299细胞后PD-L1、p-PI3K、p-AKT的表达显著减少(P<0.05),加入740-YP后可减弱Beva对PD-L1、p-PI3K、p-AKT的抑制作用(P<0.01)。结论:Beva在一定范围内以剂量依赖方式抑制H1299细胞增殖,以时间-剂量依赖方式下调H1299细胞中PD-L1的表达,其机制与抑制PI3K/AKT信号通路有关。