步行训练对不完全性脊髓损伤大鼠损伤部位周围组织可塑性的影响

目的探讨步行训练对不完全性脊髓损伤大鼠损伤部位周围组织可塑性的影响。 方法将雌性SD大鼠24只分为步行训练组和对照组,每组12只,制作第10胸椎段脊髓损伤模型。步行训练组在制作脊髓损伤模型后1周开始进行步行训练,共训练9周;对照组不接受干预。制作模型后每周利用BBB评分评定后肢运动功能,8周后取材进行免疫荧光染色、Western blotting和轴突示踪分析。 结果后肢运动功能：步行训练组在伤后4周（步行训练3周）时,BBB评分较对照组出现明显改善（P<0.05）,一直持续到实验结束（伤后第10周,P<0.01）。损伤部位神经丝(NF)免疫荧光染色分析：对照组胶质瘢痕中可见许多排列比较规则、与脊髓纵轴方向一致的NF阳性纤维穿行,步行训练组除了可见少量NF阳性纤维在胶质瘢痕中穿越,还可见较多的NF阳性纤维围绕空洞边缘延伸,其NF阳性纤维数量明显高于对照组（P<0.05）。损伤部位生长相关蛋白-43（GAP-43）表达：2组损伤部位周围均可见呈红色的排列凌乱的GAP-43表达,步行训练组GAP-43+组织免疫荧光灰度值较对照组高 (P<0.05)。皮质脊髓束再生:2组损伤部位尾侧均未见生物素化葡聚糖胺（BDA）标记的纤维。 结论步行训练能明显增强脊髓损伤大鼠后肢损伤部位组织的可塑性,促进大鼠后肢运动功能恢复,但未能促进皮质脊髓束的再生。     

序贯应用他克莫司后处理与康复训练治疗脊髓缺血再灌注损伤的疗效观察

目的观察他克莫司后处理联合康复训练对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护效应。 方法采用随机数字表法将60只雄性SD大鼠分为后处理组、康复训练组、序贯治疗组及模型组。采用经股动脉置管球囊扩张术将各组大鼠制成脊髓缺血模型,模型组在脊髓缺血20 min后行再灌注;后处理组及序贯治疗组在再灌注即刻经左颈总动脉按每千克体重0.5 mg一次性注射他克莫司;康复训练组与序贯治疗组于再灌注1 d时开始进行康复训练。于再灌注2 d时采用黄嘌呤氧化酶法测定各组大鼠脊髓内超氧化物歧化酶(SOD)活性,采用硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量;于再灌注7 d、14 d及28 d时采用BBB评分对各组大鼠后肢运动功能进行评定;于再灌注7 d时观察各组大鼠受损脊髓病理改变。 结果再灌注2 d时序贯治疗组脊髓组织内SOD活性为（139.94±13.41）U/mg prot,明显高于其他各组水平（均P<0.05）,其中后处理组SOD活性为（122.42±10.36）U/mg prot,显著高于康复训练组［（102.67±13.86）U/mg prot］和模型组［（99.72±12.77）U/mg prot］（P<0.05）;序贯治疗组MDA含量为（7.01±0.93）nmol/mg prot,明显低于其他各组水平（均P<0.05）,其中后处理组和康复训练组MDA含量分别为（8.38±1.03）nmol/mg prot、（8.40±0.55）nmol/mg prot,均显著低于模型组水平［（9.87±1.32）nmol/mg prot］（均P<0.05）。再灌注28 d时序贯治疗组、后处理组及康复训练组BBB评分分别为（18.23±1.14）分、（16.11±1.03）分和（14.80±1.83）分,均显著优于模型组水平［（11.62±1.92）分］（均P<0.01）,其中序贯治疗组BBB评分亦显著优于后处理组及康复训练组（均P<0.05）。序贯治疗组大鼠受损脊髓病变程度较轻,后处理组及康复训练组次之,模型组病变程度最严重。 结论序贯应用他克莫司后处理与康复训练治疗脊髓缺血再灌注损伤具有协同效应,能进一步抑制机体脂质过氧化,促进肢体运动功能恢复。     

水中平板步行训练对脊髓损伤大鼠运动功能及脑源性神经营养因子、神经营养素-3表达的影响

目的探讨水中平板步行训练在脊髓损伤（SCI）大鼠康复中的作用及其与脊髓可塑性的关系。 方法将40只成年雄性Sprague-Dawley大鼠分为假模组、模型对照组、水疗训练组、减重平板训练组及水中平板训练组,每组8只。建立大鼠脊髓挫伤模型,各训练组于术后1周开始进行8周的康复训练。采用BBB评分、爬网格试验评定大鼠后肢功能的恢复,采用免疫组织化学方法检测大鼠脊髓中脑源性神经营养因子（BDNF）、神经营养素-3（NT-3）的表达。 结果水中平板训练组大鼠后肢运动功能较其他组明显改善（P<0.05）。3个训练组大鼠脊髓前角神经元BDNF及NT-3的表达与模型对照组相比均显著增加（P<0.05）。BDNF的表达在3个训练组之间两两比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。水中平板训练组NT-3的表达明显高于减重平板训练组（P<0.05）;而水中平板训练组与水疗训练组相比,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论水中平板训练可能通过影响BDNF及NT-3的表达增强脊髓损伤大鼠脊髓可塑性,促进后肢运动功能的恢复。     

大鼠脊髓压迫性损伤后脱髓鞘病变及硫酸软骨素蛋白多糖的表达变化

目的 探讨脊髓压迫性损伤（CSCI）后脱髓鞘病变及硫酸软骨素蛋白多糖(CSPG,NG2)的表达变化。 方法选取健康成年SD大鼠75只,雌雄不限,采用随机数字表法将其分为正常组、假手术组、CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组,每组15只。采用自行设计的大鼠脊髓压迫器制作脊髓压迫模型,应用BBB运动功能评分、锇酸染色及透射电镜观察CSCI后1 d、3 d及7 d时大鼠的运动功能情况及白质有髓神经纤维的病理变化,计算脊髓后索有髓神经纤维的数量及髓鞘厚度与轴突直径的比值即G-ratio值,并采用免疫印迹法检测NG2蛋白的表达变化。 结果CSCI后,CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组的大鼠后肢BBB评分分别为（1.23±0.45）分、（0.65±0.35）分和（0.00±0.00）分,与正常组（21.00±0.00）分和假手术组（21.00±0.00）分相比,差异有统计学意义（P<0.05）,大鼠的运动功能随受压时间延长而逐渐下降。锇酸染色显示正常组和假手术组大鼠的白质正常,脊髓受压后,CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组的有髓神经纤维开始出现水肿、变性、崩解,正常组和假手术组脊髓后索的有髓神经纤维计数分别为 (2771±108）根和（2675±199)根,CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组的有髓神经纤维计数分别为（2403±161）根、（1708±70）根和（810±95）根,压迫后有髓神经纤维数目减少,压迫后7 d,有髓神经纤维数目减至最低（P<0.05）,与正常组和假手术组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。电镜定量分析结果显示,正常组、假手术组、CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组的G-ratio值分别为（18.10±0.4）、（17.70±1.0）、（6.69±0.8）、（5.73±0.4）和（4.95±0.5）,CSCI 1 d组、CSCI 3 d组和CSCI 7 d组的G-ratio值均较正常组和假手术组低,且在压迫后7 d时降至最低,差异有统计学意义（P<0.05）。透射电镜结果显示,正常组和假手术组的轴突、髓鞘板层结构正常;脊髓受压后,轴索出现肿胀,轴浆内细胞器变性、坏死、减少;髓鞘折叠、皱缩,出现“洋葱皮”样变,髓鞘崩解;少突胶质细胞的染色质凝聚;巨噬细胞浸润。NG2蛋白免疫印迹结果显示,脊髓受压后,NG2蛋白表达水平在压迫后第1天升至最高（P<0.05）,且表达水平随压迫时间延长而逐渐下调,但均高于正常组和假手术组,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论CSCI后,大鼠运动功能随受压时间延长而逐渐下降,有髓神经纤维发生脱髓鞘病变且数量减少,随着压迫时间延长,溃变呈现出进行性加重趋势;NG2细胞与CSCI后髓鞘的变化情况关系密切,可能增殖分化为少突胶质细胞或其它类型细胞,是脊髓髓鞘内源性修复的机制之一。     

丰富康复训练对脑缺血再灌注大鼠微管相关蛋白2和突触素表达的影响

目的研究丰富康复训练能否促进大鼠脑缺血再灌注后微管相关蛋白2（MAP2）和突触素（SYN）的表达，探寻其与神经系统可塑性的联系。 方法雄性Wistar大鼠77只，体重160~200 g，随机分为缺血丰富训练组（n=36），缺血对照组（n=8），假手术丰富训练组（n=21）和假手术对照组（n=12），使用线栓模型造成右侧大脑中动脉阻断（MCAO）并再灌注，丰富训练组自术后2 d至28 d给予丰富康复训练，对照组则独居标准环境笼，不予任何训练。再灌注1 d、7 d、14 d、21 d和28 d分别进行各项行为功能测试，并用免疫组化SP法染色观测MAP2和SYN的表达。 结果训练后，28 d时Bederson评分缺血丰富训练组（0.910±0.302）优于缺血对照组（1.330±0.577），差异有统计学意义（P<0.05）；足失误测试中缺血丰富训练组与缺血对照组间差异始终无统计学意义（P&rt;0.05），但缺血丰富训练组恢复趋势优于缺血对照组；免疫组化结果示梗塞周边区及海马的MAP2和SYN的表达早期下降，明显低于假手术组（P<0.05），后不断恢复，缺血丰富训练组在晚期（MAP2-21 d为0.2055±0.0124，MAP2-28 d为0.2406±0.0419；SYN-28 d为0.2931±0.2407）优于缺血对照组（MAP2-21 d为0.1681±0.0124，MAP2-28 d为0.2064±0.0301；SYN-28 d为0.2407±0.0565），差异有统计学意义（P<0.05）。 结论丰富康复训练可促进脑缺血再灌注大鼠MAP-2和SYN的表达，促进功能表现的改善和大脑可塑性的改变。     

电针对大鼠脊髓压迫性损伤后髓鞘再生的影响

目的观察电针对大鼠脊髓压迫性损伤（CSCI）后DNA结合抑制物2(Id2)和髓鞘碱性蛋白(MBP)的表达变化,探讨髓鞘再生的机制。 方法将54只SD大鼠分为对照组和治疗组,每组27只,再根据取材时间点的不同各分为3 d、7 d和14 d三个亚组,每个亚组9只大鼠。治疗组采用自行设计的大鼠脊髓压通器制作脊髓压通性损伤模型,针刺脊髓损伤节段局部夹脊穴、双侧足三里和双侧太溪穴,并于双侧足三里和太溪穴进行电针刺激（连续波,输出频率为2 Hz,电压1.5 V,30 min）。对照组只造模,不治疗。2组大鼠均于对应时间点取材,运用电镜观察脊髓损伤节段髓鞘的超微结构;采用免疫印迹技术和免疫荧光双标从分子水平检测Id2及MBP的表达变化。 结果CSCI后,荧光双标结果显示,造模后第3天,对照组大鼠的Id2免疫阳性少突胶质细胞数目为（20±2）个/高倍镜视野,并在造模后第14天下降至（16±1）个/高倍镜视野,组内各时间点Id2免疫阳性少突胶质细胞数目比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。造模后第3天,治疗组大鼠Id2免疫阳性少突胶质细胞为（13±1）个/高倍镜视野,造模后第14天降至（7±1）个/高倍镜视野,组内各时间点Id2免疫阳性少突胶质细胞数目比较,差异有统计学意义（P<0.05）,并与同时间点的对照组比较,差异亦有统计学意义（P<0.05）。Western结果显示,造模后第3天,对照组和治疗组Id2蛋白表达分别为（1.12±0.12）和（0.67±0.01）,造模后第14天,对照组和治疗组Id2蛋白表达分别下降至（0.86±0.02）和（0.25±0.01）,与组内造模后第3天比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,2组相同时间点Id2蛋白表达组间比较,差异有统计学意义（P<0.05）。造模后第3天,对照组和治疗组的MBP蛋白表达分别为（0.44±0.02）和（0.67±0.04）,造模后第14天,对照组和治疗组MBP蛋白表达均分别上调至（0.95±0.04）和（1.74±0.09）,与组内造模后第3天比较,差异均有统计学意义（P<0.05）,2组相同时间点的MBP蛋白表达比较,差异有统计学意义（P<0.05）。 结论电针刺激可调节Id2的表达从而负向调控MBP的表达。     

头针配合康复训练对脑缺血再灌注损伤沙鼠模型神经可塑性相关蛋白MAP-2的调节作用

目的观测头针配合康复训练对脑缺血再灌注损伤沙鼠模型神经可塑性相关蛋白MAP-2调节作用。 方法使用SPSS 19.0版统计软件生成的随机数字表将36只成功造模的脑缺血再灌注损伤模型雄性沙鼠随机分为模型组、康复训练组和头针配合康复训练组,每组12只。模型组不作任何干预措施,康复训练组采用康复训练治疗,头针配合康复训练组给予头部穴位电针刺激配合康复训练治疗;1日1次,共治疗14d。分别于术后24h、第7天和第14天,对各组沙鼠采用Bederson评分评定其神经功能,14d后行缺血灶MAP-2表达检测,并进行统计学分析比较。 结果术后第7天,头针配合康复训练组的Bederson评分为（1.81±0.52）分,与模型组［（2.13±0.49）分］和康复训练组［（2.00±0.31）分］比较,组间差异均无统计学意义（P&rt;0.05）;但第14天头针配合康复训练组的Bederson评分为（0.47±0.31）分,与模型组［（1.46±0.72）分］和康复训练组［（1.04±0.63）分］比较,头针配合康复训练组明显优于其余两组（P<0.05）,且康复训练组亦优于模型组（P<0.05）。MAP-2蛋白表达水平定量分析,头针配合康复训练组为（0.91±0.18）,与模型组的（0.43±0.21）及康复训练组的（0.67±0.24）比较,组间差异均有统计学意义（P<0.05）,康复训练组较模型组也有一定优势（P<0.05）。 结论头针配合康复训练能更好地促进神经运动功能的恢复,并增加脑缺血再灌注损伤沙鼠缺血灶神经可塑性相关蛋白MAP-2的表达。     

经肋间动脉移植骨髓基质细胞对家兔脊髓损伤后神经轴突及胶质瘢痕的影响

目的探讨经肋间动脉移植骨髓基质细胞(BMSC)对家兔脊髓损伤（SCI）后神经轴突及胶质瘢痕的影响。 方法采用随机数字表法将30只家兔分为假手术组、损伤对照组和BMSC治疗组。采用钳夹法将损伤对照组及BMSC治疗组制成T9 SCI动物模型,假手术组仅打开椎板,不损伤脊髓。BMSC治疗组和损伤对照组于制模后1周时分别经肋间动脉注射0.5ml BMSC细胞悬液和等量生理盐水。于制模后第1天、第1周、第2周和第4周时分别采用BBB评分评定各组家兔后肢运动功能,于制模后4周时提取各组家兔受损脊髓行HE和Nissl染色,观察脊髓病理形态改变;并采用免疫组化法观察各组家兔受损脊髓神经丝蛋白(NF200)和胶原纤维酸性蛋白(GFAP)变化。 结果制模后不同时间点发现假手术组BBB评分均明显高于损伤对照组及BMSC治疗组（P<0.05）;BMSC治疗组制模后第2周、第4周时BBB评分［分别是(8.38±0.97)分和(14.63±1.77)分］均明显高于损伤对照组［分别是(6.38±1.07)分和(8.50±0.93)分］（P<0.05）。HE染色显示,制模后第4周时假手术组脊髓内未发现胶质瘢痕及空洞形成;损伤对照组和BMSC治疗组SCI区域均可见胶质细胞增生、胶质瘢痕及空洞形成,并且BMSC治疗组病理改变较损伤对照组减轻。Nissl染色显示假手术组典型神经元数量较多,损伤对照组及BMSC治疗组均有大量神经元碎裂、降解,其中BMSC治疗组的残存神经元数量明显多于损伤对照组;免疫组化检查提示损伤对照组、BMSC治疗组NF200阳性细胞数及GFAP阳性染色面积均较假手术组明显增加（P<0.05）,其中BMSC治疗组受损脊髓内NF200阳性细胞数［（57.88±9.76）%］明显高于损伤对照组［（21.25±4.50）%］（P<0.05）;同时BMSC治疗组GFAP阳性染色面积［（3154.01±334.47）μm2］明显小于损伤对照组［（4536.79±686.83）μm2］（P<0.05）。 结论经肋间动脉移植BMSC能促进SCI家兔受损脊髓神经轴突生长,抑制胶质细胞增生及胶质瘢痕形成,有助于脊髓神经功能恢复。     

艾灸与电针督脉腧穴上调大鼠受损脊髓组织表达降钙素基因相关肽的对比研究

目的比较对相同的督脉腧穴采取不同的刺激方式（艾灸与电针）对大鼠受损脊髓组织表达降钙素基因相关肽（CGRP）的影响,并探讨其可能的临床意义,为临床治疗脊髓损伤（SCI）提供可靠的理论依据。 方法将20只Sprague-Dawley大鼠分为正常对照组（对照组）、SCI组、电针督脉组（电针组）和艾灸督脉组（艾灸组）,并在显微镜下行脊髓全横断术（对照组除外）。自术后第7天开始,艾灸组和电针组分别采用艾灸和电针督脉腧穴的方法治疗3 d（SCI组不予任何治疗）。实验第10天各组分别取材并以免疫荧光组织化学染色的方法检测脊髓背角CGRP阳性染色区面积变化,用Western blot法检测脊髓CGRP含量变化。 结果脊髓背角CGRP阳性染色区面积比率比较,艾灸组（0.054 579±0.007 044）与电针组（0.058 581±0.006 941）明显高于SCI组（0.034 939±0.005 161）（P<0.05）;CGRP含量比较,艾灸组（1.552 409±0.165 974）与电针组（1.579 893±0.159 371）明显高于SCI组（0.668 149±0.073 298）（P<0.05）;艾灸组与电针组脊髓背角CGRP阳性染色区面积及其含量比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）;艾灸组、电针组与对照组脊髓背角CGRP阳性染色区面积（0.058 236±0.007 044）及其含量（1.527 093±0.095 643）比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论艾灸督脉穴与电针督脉穴两种治疗方法均可以促进大鼠受损脊髓组织表达CGRP,且两者对其影响程度无明显差异。     

强化训练时间对脑卒中偏瘫患者步行功能恢复的影响

目的探讨强化训练时间对脑卒中偏瘫患者步行功能恢复的影响。 方法选取符合入组标准的脑卒中偏瘫住院患者36例,采用随机数字表法按每日训练时间的不同分为40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组,每组12例,因失访3例,3组最终完成本研究样本数分别为12、11和10例。各组均在常规康复治疗的基础上进行下肢功能训练,训练时间分别为每日40、80和120 min,每周5 d,共训练4周。在治疗前及治疗2周和4周后,分别采用Holden步行功能分级（FAC）和下肢Fugl-Meyer运动功能评定法（FMA）进行功能评定,并分别分析和比较强化训练前后3组患者FAC分级、FMA评分及独立步行情况。 结果强化训练前,40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组三组患者的FAC分别为（1.83±0.94）、（1.73±1.01）和（1.80±1.03）级,FMA分别为（19.17±5.52）、（23.00±4.71）和（19.40±7.90）分;治疗2周后,120 min训练组患者的FAC为（3.30±0.48）级较40 min训练组［（2.17±0.94）级］明显提高（P<0.05）。治疗4周后, 120 min训练组的FAC为（3.80±0.42）级,与80 min训练组［（3.18±0.60）级］同时间点比较,差异有统计学意义（P<0.05）;80 min训练组的FAC与40 min训练组［（2.67±0.65）级］同时间点比较,差异亦有统计学意义（P<0.05）。治疗4周后,40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组三组患者的FMA分别为（25.08±4.46）、（28.64±3.56）和（25.90±5.19）分,分别与组内治疗前比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;但强化训练2周和4周后,3组之间FMA两两比较,差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。强化训练前,40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组三组患者中达到独立步行患者所占比例分别为16.67%、18.18%和20.00%;治疗2周后,40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组三组患者中达到独立步行患者所占比例分别为33.33%、36.36%和100%,120 min训练组分别较40 min训练组和80 min训练组均有明显提高（P<0.05）,但40 min训练组与80 min训练组之间的差异无统计学意义（P&rt;0.05）。治疗4周后,40 min训练组、80 min训练组和120 min训练组三组患者中达到独立步行患者所占比例分别为58.33%、90.91%和100.00%,与组内治疗前比较,差异均有统计学意义（P<0.05）;120 min训练组独立步行功能改善的效果较40 min训练组更为明显（P<0.05）,但40 min训练组和120 min训练组分别与80 min训练组比较,组间差异均无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论强化训练可促进脑卒中患者步行功能的恢复,且训练时间越长,治疗效果越明显。     

不同训练方式对脊髓损伤大鼠运动功能及神经肌肉形态学的影响

目的观察不同训练方式对脊髓损伤大鼠功能恢复的影响。 方法成年雌性SD大鼠45只,设正常组大鼠6只,其余39只大鼠进行脊髓损伤模型制作（采用改良Allen′S撞击法制作T9不完全性脊髓损伤模型）,剔除造模后死亡的9只大鼠,余下30只脊髓损伤大鼠随机分成7 d对照组、35 d对照组、减重平板组、游泳组和转笼组5组,每组6只大鼠。其中减重平板组、游泳组和转笼组损伤后第8天开始运动训练,30 min/d,共4周。于不同时间点采用斜板试验、改良Tarlov评分、BBB评分对各组进行运动功能评定。损伤后35 d,通过光镜和电镜观察脊髓及腓肠肌形态变化,计算肌纤维横截面积和直径大小。 结果①减重平板组和游泳组在训练后各时间点的运动功能评分较7 d对照组和35 d对照组均显著增加（P<0.05）,且2组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）;转笼组与7 d对照组和35 d对照组比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。②光镜及电镜观察显示,减重平板组经过4周的训练,损伤部位脊髓水肿消退明显,细胞空泡变性明显减轻,神经元和胶质细胞形态趋于完整,神经纤维增生也较明显,改善情况较其他各组更为显著。③减重平板组肌肉横截面积和直径分别为（55.34±14.46）μm2和（8.32±0.99）μm,接近正常组的（55.49±13.84）μm2和（8.37±1.13）μm（P&rt;0.05）,游泳组肌肉横截面积和直径分别为（46.05±8.50）μm2和（7.68±0.76）μm,与对照35 d组的（36.16±12.84）μm2和（6.62±1.33）μm比较,差异有统计学意义（P<0.05）,但转笼组的肌肉横截面积和直径［（39.83±8.35）μm2和（7.19±0.68）μm］与35 d对照组比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论3种训练方式均能不同程度地促进脊髓损伤大鼠运动功能及神经肌肉功能的恢复,减重平板训练和游泳训练效果优于转笼训练。     

不同强度磁刺激对星型胶质细胞迁移的影响及其机制研究

目的研究不同强度磁刺激对星形胶质细胞迁移作用的量效关系,并探讨其作用机制。 方法24只SD大鼠按刺激强度被随机分为A（0 T）、B（1.9×40% T）、C（1.9×80% T）、D（1.9×100% T）4组,4组的刺激频率均为1 Hz,刺激量为30个脉冲,均采用溴已锭（EB）注入脊髓左侧背索复制局灶性的脊髓损伤模型。刺激后第14天,处死大鼠,采用图像分析系统观察胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白-2（MAP-2）和细胞外信号调节激酶1/2（ERK1/2）的表达及脊髓损伤区空洞体积的变化。 结果随着磁刺激强度的增加,在第14天时空洞的体积逐渐缩小,组间差异具有统计学意义(P<0.05)。在空洞缩小的区域中,可以观察到GFAP,ERK1/2的阳性表达,而无MAP-2的阳性表达。随着磁刺激强度的增加,GFAP, ERK1/2的阳性表达亦显著增强(P<0.05)。 结论磁刺激可影响星形胶质细胞的迁移,并随着刺激强度的增强,星形胶质细胞迁移的能力亦增强,这可能与ERK1/2的高表达有关。     

针刺对脑缺血再灌注损伤后星型胶质细胞增生的 影响

目的探讨针刺对脑缺血再灌注损伤后星形胶质细胞增生的影响。 方法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)再灌注模型，随机分为对照组、模型组和针刺组，应用免疫组化和免疫印迹方法检测脑缺血再灌注后2 d和7 d损伤侧海马细胞周期素D1和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。 结果脑缺血再灌注后2 d，损伤侧海马细胞周期素D1蛋白表达明显增强，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01），脑缺血再灌注后7 d，损伤侧海马GFAP的表达明显增强，与对照组比较差异有统计学意义（P<0.01）；给予针刺治疗后，细胞周期素D1蛋白和GFAP表达明显减弱，与模型组比较差异有统计学意义（P<0.01）。 结论针刺可抑制胶质细胞增生，从而有可能为神经再生和功能重建提供更有利的生存环境。其机制可能与其调控细胞周期有关。     

早期高压氧治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶的影响及疗效评价

目的探讨早期高压氧（HBO）治疗对急性脊髓损伤大鼠诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性表达变化的影响及疗效评价。 方法选取70只健康SD大鼠按随机数字表法分为对照组、假手术组、SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组,每组10例。将SCI组、HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠均采用改良的Allen法制成T8～T9急性脊髓损伤模型（打击后大鼠尾部痉挛摆动、双侧下肢瘫痪,诱发电位测定值明显异于对照组,表明制模成功）;假手术组只进行硬膜囊暴露手术但不打击损伤脊髓;对照组不做任何处理。对照组、假手术组和SCI组仅饲养不做高压氧处理;HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组分别在制模成功后2、4、6和8 h始置于动物实验纯氧舱内行高压氧治疗,每日1次,连续7 d。分别于制模成功时和高压氧治疗完成时2个时间点,采用Gale等建立的联合行为评分(CBS)法对各个损伤组大鼠后肢功能进行神经学评定,使用神经肌电图机检测运动诱发电位（MEP）评价大鼠肢体功能。在HBO治疗结束后24 h内处死所有大鼠取材,取材后用重氮比色法测定iNOS表达量,用硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）含量。将所得数据进行统计学分析比较。 结果SCI组、HBO 2 h组和HBO 4 h组在实验期间各死亡1只,余67只大鼠纳入结果分析。①治疗结束后,脊髓损伤的大鼠脊髓组织中iNOS检测显示, SCI组iNOS测定值为（0.64±0.13）U/L,表达量最高;iNOS表达量逐渐明显降低,以HBO 8 h组最为明显（P<0.05）,HBO 8 h组iNOS值为（0.36±0.10）U/L,表达量最低,且与其它各组间差异有统计学意义（P<0.05）;但脊髓损伤各组大鼠的iNOS值仍高于假手术组的（0.33±0.07）U/L和对照组的0 U/L,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。②HBO治疗结束后,对照组、假手术组和SCI组大鼠血清中NO的测定量分别为（6.52±4.17）、（48.36±8.49）和（105.68±13.12）mmol/L;经HBO治疗后大鼠NO生成量明显降低,以HBO 8 h组最为明显,HBO 2 h组、HBO 4 h组、HBO 6 h组和HBO 8 h组大鼠血清NO的测定量分别为（89.25±12.82）、（66.53±17.91）、（41.33±15.59）和（33.14±11.21）mmol/L,均低于SCI组（P<0.05）;且与假手术组比较,组间差异亦均有统计学意义（P<0.05）。③与对照组及其它HBO治疗组比较,HBO治疗各组大鼠的CBS评分百分比均有提高（P<0.05）,运动功能逐渐恢复良好,以HBO 8 h组最为明显,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。④除对照组和假手术组外,其余各组脊髓损伤大鼠治疗前、后MEP检测的潜伏期和波幅组间比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论大鼠急性脊髓损伤后8 h开始高压氧治疗与损伤后2、4和6 h开始高压氧治疗相比,在减少iNOS的合成和促进运动功能恢复方面有更明显的作用。     

脉冲强磁场诱导体外新生大鼠神经干细胞向神经元方向分化

目的探讨脉冲强磁场对体外新生大鼠神经干细胞（NSCs）向神经元方向分化的作用。 方法体外分离培养新生3d内的SD大鼠脑室下区的NCSs,无血清培养14d后,随机分为实验组和对照组。实验组置于脉冲强磁场条件下用前期探索的促增殖参数（0.1Hz、4T、8次）进行干预,每次脉冲放电20ms。对照组置于相同条件下但不做干预处理。干预后第1天,采用10%胎牛血清诱导贴壁分化,显微镜下观察不同时间段细胞形态学变化;贴壁分化后第7天,通过免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法（Western Blot）及实时定量聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测NCSs分化后第7天神经元βⅢ微管蛋白（TUJ1）及星形胶质细胞相关特异性标志神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）的表达。 结果干预后,免疫荧光染色示实验组TUJ1阳性细胞数为（33.4±5.1）%,较对照组［（26.5±7.0）%］明显增多(P<0.05),实验组的GFAP阳性细胞率［（23.9±5.0）%］较对照组［（36.2±2.2）%］明显减少 (P<0.05)。RT-PCR检测显示,实验组TUJ1的mRNA表达量是对照组的（1.682±0.086）倍,GFAP的mRNA相对表达量是对照组的（0.590±0.157）倍,且组间差异有统计学意义(P<0.05)。Western Blot检测结果与RT-PCR检测一致,实验组TUJ1蛋白表达较对照组增多,GFAP蛋白表达较对照组减少。 结论脉冲强磁场具有促进NCSs向神经元分化,并抑制其向星形胶质细胞分化的作用。     

短期正念行为训练对髋部骨折固定术后老年患者负性情绪及免疫功能的影响

目的探讨短期正念行为训练对髋部骨折固定术后老年患者负性情绪及免疫机能的影响。 方法将60例符合条件的髋部骨折固定术后老年患者按随机数字表法分为对照组和训练组，每组30例。对照组给予早期运动康复训练；训练组在此基础上给予正念行为训练，每周1次，每次90min，共5周。分别于治疗前和治疗5周后（治疗后），对2组患者采用心境状态量表(POMS)评测患者心境状态，采用正念注意觉知量表（MAAS）评测患者的正念水平；并采用EXPO32-ADC流式分析软件实施免疫荧光的数据分析，对血清T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+)数目进行免疫机能评测。 结果治疗前，2组患者POMS和MAAS评分及血清T细胞CD3+、CD4+、CD8+数目比较，组间差异均无统计学意义(P&rt;0.05)。治疗后，2组患者的POMS和MAAS评分及血清T细胞水平明显优于组内治疗前（P<0.05）。治疗后，与对照组相比，训练组中患者正念水平MAAS评分（58.00±4.78 vs 54.00±4.89）及POMS各项评分中的紧张-焦虑（13.14±3.36 vs 15.90±4.28）、忧郁-沮丧（18.10±6.24 vs 20.06 ±5.42）、疲惫-惰性（16.53±3.50 vs 18.98±4.88）,活力-好动（26.68±5.22 vs 22.43±5.20），组间差异均有统计学意义(P<0.05)；但愤怒-敌意（9.94±2.48 vs 10.38±2.30）和困惑-迷惑（13.60±3.48 vs 13.78±3.50）两项指标评分组间差异无统计学意义（P&rt;0.05）。与对照组相比，训练组患者治疗后的血清T细胞CD3+、CD4+、CD8+数目升高（75.75±5.40 vs 69.91±4.42；39.54±3.29 vs 34.44±4.21；39.82±3.55 vs 36.82±3.55），训练组亦明显优于对照组(P<0.05)。 结论短期正念训练可改善髋部骨折固定术后老年患者心境情绪状态，提高患者免疫机能。     

构音障碍强化训练改善脑卒中患者构音障碍的疗效观察

目的观察和比较常规构音障碍训练和强化构音障碍训练方法对脑卒中构音障碍患者的构音器官运动功能及言语清晰度的影响，探讨改善构音障碍患者构音功能和言语清晰度以及提高康复训练疗效的方法。 方法选取符合入组标准的脑卒中住院患者26例，采用随机数字表法分为强化训练组和常规训练组，每组13例，2组患者均行相同的常规药物对症治疗和康复训练治疗，在此基础上，常规训练组给予常规构音障碍康复训练，每日1次，每次30min，每周5d，持续2周（共10次）；强化训练组则在常规训练组治疗的基础上每日增加1次构音障碍训练，即每日2次，每周5d，持续2周（共20次）。分别于治疗前和治疗2周后（治疗后），采用改良Frenchay构音障碍评估法和王国民言语清晰度字表，对2组患者的构音器官运动功能及言语清晰度进行评估，并进行统计学分析比较。 结果治疗2周后,强化训练组与常规训练组言语清晰度分别为（82.54±19.89）%和（73.00±14.66）%，2组Frenchay评分分别为（88.69±13.14）分和（77.38±13.97）分，均较组内治疗前明显改善（P<0.05）；强化训练组的言语清晰度和Frenchay评分与常规训练组比较，组间差异有统计学意义（P<0.05）。Frenchay评估法分项评估中，强化训练组与常规训练组的呼吸分项得分为（6.15±1.91）和（5.69±1.18）分、唇运动分项得分为（15.31±2.02）和（12.38±3.02）分、喉控制分项得分为（12.62±3.10 ）和（11.85±3.21）分、舌运动分项得分为（17.92±2.69）和（14.92±3.80）分，与各分项组内治疗前比较，差异均有统计学意义（P<0.05）。治疗后，强化训练组在唇运动和舌运动分项的得分方面与常规训练组治疗后比较，差异亦有统计学意义（P<0.05），且强化训练组比常规训练组评分提高更明显。 结论强化训练及常规训练均可促进患者构音功能的恢复，强化构音障碍训练能进一步改善患者的构音功能，效果优于常规构音障碍训练疗法。     

运动训练对大鼠脑梗死灶周突触素mRNA及生长相关蛋白mRNA水平的影响

目的研究运动训练对大鼠梗死灶周突触素mRNA和生长相关蛋白(GAP-43)mRNA的表达水平和大鼠运动功能的影响。 方法将肾性高血压后的大脑中动脉闭塞脑梗死模型大鼠100只分成训练组和对照组（n＝50）,训练组大鼠进行运动训练,对照组大鼠常规饲养。2组大鼠均于制模成功后第3,7,14天采用横木行走实验评定各亚组大鼠运动功能,在制模成功后第1,3,7,14,28天时用半定量逆转录-多聚酶链式反应法检测各组大鼠脑梗死灶周边区突触素mRNA、GAP-43 mRNA水平。 结果造模后第7,14天,2组大鼠运动功能得分与本组造模后第3天比较,差异有统计学意义(P<0.01); 制模后第7,14天时,训练组运动功能得分［分别为(3.2±0.3)分和（5.8±0.9)分］显著高于对照组［分别为 (1.6±0.4)分和（2.6±0.8)分］,差异有统计学意义(P<0.01)。2组大鼠脑梗死灶周突触素mRNA和GAP-43 mRNA水平均在造模后第1,3,7天时逐渐增高,差异有统计学意义(P<0.01)。训练组突触素mRNA水平在造模后第3,7,14和28天时均高于对照组, 差异有统计学意义(P<0.01); 训练组GAP-43 mRNA水平仅在造模后第3和第7天时(0.295±0.03、0.512±0.045) 高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。 结论运动训练可使大鼠脑梗死灶周突触素mRNA和GAP-43 mRNA水平增高,促进运动功能恢复。     

P2X3受体在神经源性膀胱大鼠背根神经节及逼尿肌中的表达

目的探讨P2X3受体在不同平面脊髓损伤后神经源性膀胱大鼠L6～S1背根神经节（DRG）和膀胱逼尿肌中的表达变化及临床意义。 方法共选取健康雌性SD大鼠80只，将其随机分为骶上脊髓（胸腰段）损伤组、骶髓损伤组及对照组。采用脊髓横断法制备大鼠不同平面脊髓损伤后神经源性膀胱模型，于模型制作20 d后采用Western blotting技术检测各组大鼠背根神经节和膀胱逼尿肌中P2X3受体表达情况，并进行组间比较。 结果骶上脊髓损伤组大鼠背根神经节、膀胱逼尿肌中P2X3受体表达水平较对照组、骶髓损伤组明显增高（P<0.01）；骶髓损伤组背根神经节、膀胱逼尿肌中P2X3受体表达水平较对照组明显降低（P<0.05）。 结论结合本课题前期研究的尿流动力学检查结果，推测P2X3受体表达水平与膀胱尿道功能障碍程度密切相关，有望通过影响P2X3受体表达水平为临床治疗脊髓损伤后神经源性膀胱提供新途径。     

电刺激小脑顶核对脑梗死大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43的影响

目的观察电刺激小脑顶核（FNS）对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及生长相关蛋白-43（GAP-43）表达的影响。 方法选用随机数字表法将60只健康成年雄性SD大鼠分为正常组、假手术组、FNS组及模型组，采用线栓法将FNS组及模型组大鼠制成左侧大脑中动脉栓塞/再灌注（MCAO/R）模型。FNS组大鼠于制模3h后给予FNS治疗，模型组仅将针电极置于大鼠小脑顶核部位，但不给予电刺激。分别于制模1d、3d及7d时采用Morris水迷宫实验检测各组大鼠学习记忆能力，并于上述时间点采用实时荧光定量PCR技术检测各组大鼠脑梗死部位GAP-43 mRNA表达。 结果制模后1d、3d及7d时模型组与FNS组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期均较正常组及假手术组明显延长（均P<0.05）；FNS组大鼠上述时间点逃避潜伏期［分别为（25.72±0.42）s，（24.27±0.55）s和（23.82±0.63）s］则较模型组显著缩短（均P<0.05）。在制模后1d、3d及7d时正常组与假手术组大鼠脑组织中仅存在少量GAP-43 mRNA表达；模型组及FNS组GAP-43 mRNA表达在上述时间点均较正常组及假手术组显著增多（均P<0.05）；并且上述时间点FNS组GAP-43 mRNA表达［分别为（1.54±0.34），（2.03±0.56）和（2.78±0.81）］亦显著强于模型组（均P<0.05）。 结论FNS干预有助于改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力，其治疗机制可能与上调脑梗死部位神经元GAP-43 mRNA表达、从而促进脑梗死灶周围神经轴突再生及修复有关。