保存2年头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白表达对比分析

<正>免疫组化染色是组织中检测特定蛋白表达最常用、最成熟的方法^[1]。研究表明,组织固定、蜡块保存时间、抗原修复等是影响免疫组化染色结果的重要因素^[2]。其中,蜡块保存时间对免疫组化染色结果影响的研究较少^[3]。Ki-67属于大分子量核蛋白,表达于细胞周期的各个活动期,是反映细胞增殖活性的重要指标^[4],其在头颈部常见恶性肿瘤的疗效及预后评估中具有重要意义^[5-6]。本科室对比分析保存2年的常见头颈部恶性肿瘤石蜡标本中Ki-67蛋白的表达,     

p16、p53和Ki-67蛋白在宫颈上皮内瘤变中的表达及意义

目的 探讨p16、p53和Ki-67蛋白在宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测正常子宫颈或炎性病变组织、CIN1～3中p16、p53和Ki-67蛋白的表达.结果 p16、p53和Ki-67蛋白在正常子宫颈或炎性病变中罕见表达,在CIN1～3组织中三者表达均较高,随CIN级别升高p16、p53和Ki-67表达增强,各组间表达差异有统计学意义(P<0.05).同时p16、p53和Ki-67三者阳性表达均可见分层现象,在CIN1中大部分阳性细胞位于子宫颈鳞状上皮的下1/3,在CIN2中多累及上皮下2/3,而CIN3则普遍超过上皮的下2/3或全层弥漫阳性,各组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论 p16、p53和Ki-67蛋白表达均与子宫颈上皮内瘤变的病变进展密切相关,联合检测p16和Ki-67的抗原表达可作为CIN分级诊断的辅助方法,具有较好的应用价值.     

胃腺癌中G6PC和Ki-67蛋白表达的临床病理学意义

目的 探讨胃腺癌组织中G6PC和Ki-67蛋白表达及临床病理学意义。方法 采用免疫组化EnVision法检测129例胃腺癌和126例正常胃黏膜组织中G6PC和Ki-67蛋白表达,运用生物信息数据库分析其与胃腺癌临床病理特征及预后的关系。结果 胃腺癌组织中G6PC和Ki-67蛋白高表达率分别为62.0%、65.9%,明显高于癌旁正常胃黏膜组织(16.7%、30.2%)(P均<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃腺癌组织中G6PC与Ki-67表达呈正相关(P<0.05)。G6PC蛋白高表达与胃腺癌分化程度(χ²=6.808,P=0.009)、脉管浸润(χ²=4.525,P=0.033)及淋巴结转移(χ²=8.371,P=0.004)相关。Kaplan-Meier法分析显示,G6PC蛋白高表达胃腺癌患者的总生存期明显低于G6PC蛋白低表达患者(P<0.001),与数据库分析结果趋向一致。Cox单因素和多因素分析显示,G6PC高表达不能作为胃腺癌患者死亡风险的独立因素。结论 G6PC蛋白在胃腺癌组织...     

三阴型乳腺癌间质肿瘤浸润淋巴细胞CD4、CD8、Foxp3和PD-L1表达的临床病理意义

目的 探讨三阴型乳腺癌（triple negative breast cancer, TNBC）间质肿瘤浸润淋巴细胞（stromal tumor-infiltrating lymphocytes, sTILs）程序性死亡配体-1（programmed death ligand-1, PD-L1）蛋白的表达及CD4⁺、CD8⁺、Foxp3⁺sTILs亚群与临床病理特征的相关性及对患者预后的影响。方法 收集遵义医科大学附属医院2015～2019年病理资料完善的女性TNBC标本92例,评估每张HE切片肿瘤区域内sTILs的浸润密度,采用免疫组化EnVision法检测92例TNBC中sTILs的PD-L1蛋白表达情况及CD4⁺、CD8⁺、Foxp3⁺sTILs的浸润密度。结果 TNBC中sTILs与Ki-67指数（P=0.001）显著相关;CD4⁺、CD8⁺sTILs与肿瘤大小（P=0.012、0.006）和Ki-67指...     

运动重置骨骼肌生物钟调控线粒体质量控制的研究进展

<正>昼夜节律是指生物体的行为、生理和生化反应呈现出近24 h的节律活动,这些节律受生物钟系统控制调节。流行病学调查表明,长时间的光照或轮班工作扰乱了生物钟系统,导致生物钟基因节律性表达出现紊乱,不仅增加了罹患肿瘤^[1]、心血管疾病^[2]、糖尿病及肥胖等代谢系统疾病^[3]的风险,也可能造成骨骼肌质量^[4]及运动能力下降^[5]。     

宫颈鳞状上皮内病变与EBP50、p16和Ki-67表达的相关性分析

目的:评价Ezrin-radixin-moesin结合磷酸化蛋白50(Ezrin-radixin-moesin binding phosphoprotein 50,EBP50)、p16和Ki-67在正常宫颈组织和宫颈鳞状上皮内病变(Squamous intraepithelial lesion,SIL)中的表达及临床意义.方法:选取2018年10月至2020年06月正常宫颈组织21例、SIL组织80例,采用免疫组化方法检查EBP50、p16和Ki-67表达水平,通过相关性检验分析EBP50与p16、Ki-67表达的相关性.结果:EBP50在正常宫颈组织中表达明显高于SIL(P=0.000);SIL中p16和Ki-67表达显著高于正常宫颈组织中的表达(P=0.000);高级别鳞状上皮内病变(High-grade squamous intraepithelial lesion,HSIL)EBP50表达强度比低级别鳞状上皮内病变(Low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)降低(P=0.003);EBP50与p16或Ki-67的表达在SIL中呈负相关.结论:EBP50、p16和Ki-67的检测对SIL的病理诊断具有参考价值.EBP50表达的降低与宫颈病变的级别升高相关,EBP50可作为判断SIL分级的有效辅助手段.     

p16/Ki-67细胞学双染在子宫颈癌筛查中应用价值

目的探讨p16/Ki-67细胞学双染检测在子宫颈癌筛查中的应用价值。方法选取液基细胞学(thinprep cytologic test,TCT)检查结果为意义不明的非典型鳞状细胞(atypical squamous cells of undetermined significance,ASC-US)和低级别鳞状上皮内病变(low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL)的患者295例,行p16/Ki-67细胞学双染检测、阴道镜检查、定位活检病理检查,比较p16/Ki-67细胞学双染与病理活检的符合率,并检测其在两组病例中的敏感性和特异性。结果在ASC-US和LSIL两组中,p16/Ki-67细胞学双染的阳性率分别为37.42%和36.36%;病理活检诊断子宫颈上皮内病变2/3(cervical intraepithelial neoplasia 2/3,CIN2/3)阳性率分别为25.77%和25.76%,两者具有较高的符合率。ASC-US组中,p16/Ki-67诊断CIN2/3病例的敏感性83.33%,特异性78.51%;LSIL组中,p16/Ki-67诊断CIN2/3病例的敏感性85.30%,特异性80.61%。结论 p16/Ki-67细胞学双染可提高TCT的敏感性和人类乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)检测的特异性;p16/Ki-67细胞学双染检测有效分流TCT中宫颈高级别病变,提高子宫颈癌筛查的准确率。     

常规生物透射电镜无污染手工制样和染色的要点

<正>生物常规透射电子显微镜超薄制片是必不可少的基础性技术^[1]。制样过程中，预防和减少染色污染不容忽视。染色污染常见于制样的最后环节。文献报道的关注点是减少或避免铅污染或铀污染^[2-4],问题尚未完全解决。近年随着染色仪的应用^[5],切片全自动化染色的污染现象基本排除。但全自动染色仪消耗试剂多，导致成本高、危害大^[6]。相同条件下全自动染色的反差偏低。采用阵列缝硅胶染色板行批量手工染色，染色速度更快，反差更好，节省试剂的同时也减少了危害。     

茯苓酸抑制人结肠癌细胞系HT-29增殖

目的 探讨茯苓酸(PA)对人结肠癌细胞系HT-29增殖和凋亡的影响及可能的分子机制。方法 将细胞分为空白组、20、40和80μmol/L PA组。MTT法检测HT-29细胞增殖;流式细胞仪测定HT-29细胞周期和凋亡;Western blot检测HT-29细胞中细胞周期、凋亡以及Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白质表达。构建HT-29细胞的肿瘤异种移植模型,随后将成瘤裸鼠随机分为对照组、腹腔注射10、30和60 mg/kg PA组(每组6只),测量肿瘤体积、质量;免疫组化测定Ki-67、cleaved caspase-3蛋白表达;Western blot检测肿瘤组织中Akt/MDM2/p53信号通路相关蛋白表达。结果 各剂量PA均可呈浓度依赖性显著降低HT-29细胞增殖活力,S、G₂/M期细胞比例,细胞中B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)蛋白表达水平和p-Akt/Akt、p-MDM2/MDM2比值(P<0.05),同时升高细胞凋亡率、G₀/G_1...     

甲状腺肿瘤p63、p16基因表达与细胞增殖活性的关系

肿瘤的发生是一个多基因参与的复杂过程,抑癌基因功能的丧失和癌基因的表达及细胞周期的调节失控等导致细胞增殖和分化异常,细胞增殖过度,分化不足,最终发展为肿瘤。为了探索p63、p16蛋白与细胞增殖活性之间的关系,我们采用免疫组化EnVision法检测p63、p16蛋白及Ki-67抗原在甲状腺肿瘤中的表达水平,探讨甲状腺肿瘤的发生、发展和基因产物间的关系。     

上皮膜蛋白1在浆液性卵巢癌中的表达及临床意义

目的 探讨上皮膜蛋白1(EMP1)在浆液性卵巢癌(SOC)中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组化法检测EMP1蛋白在306例SOC组织和85例正常卵巢组织中的表达情况，利用χ²检验比较不同EMP1蛋白表达水平的SOC患者临床病理特征的差异，应用Kaplan-Meier法分析EMP1蛋白表达水平与患者预后的关系。结果 SOC组织EMP1蛋白高表达率为42.8%显著高于正常卵巢组织的12.9%(χ²=25.661,P<0.001)。EMP1蛋白高表达与淋巴结转移(χ²=14.251,P<0.001)和高FIGO分期(χ²=6.954,P=0.008)呈正相关。EMP1蛋白高表达的SOC患者总生存率(χ²=14.574,P<0.001)和无进展生存率(χ²=4.683,P=0.031)均较低表达者降低。结论 EMP1蛋白在SOC组织中呈高表达，其表达水平上调与淋巴结转移和高FIGO分期相关，且可预测SOC患者预后不良。提示EMP1可能成为一个...     

YTHDC1 m6A修饰调控与疾病发病机制的研究进展

<正>表观遗传学是指DNA序列不变的情况下，基于非基因序列改变所致的基因表达水平的变化^[1]，如DNA甲基化^[2]、RNA甲基化^[3]、组蛋白修饰^[4]、染色质构象变化^[5]等。表观遗传学在真核生物中的变化主要是调控细胞增殖^[6-7]、分化^[8]、代谢^[3,9]、周期循环^[10]以及免疫调控^[11]等生物学过程，这一过程中通过某些调控分子量的变化或发生结构修饰变化等，进而靶向调节下游靶基因的生物学效应。     

肝脏窦周纤维化病理诊断中网状纤维染色方法的优化

<正>脂肪肝是指肝脏内的脂肪因为各种原因堆积,且比重超过肝脏重量5%的一种常见肝脏疾病^[1]。脂肪肝如不引起重视会逐步发展为肝纤维化、肝硬化甚至是肝癌^[1-2]。虽然一些检查手段也能诊断脂肪肝,例如血清学、影像学检查和临床评估等,但肝活检评价才是明确诊断脂肪性肝炎、肝损伤的严重程度和纤维化的“金标准”^[2]。脂肪性肝纤维化的发生、发展有其特点,它常以窦周纤维化(perisinusoidal fibrosis, PSF)等其中一种类型为主或多种类型混合存在^[3]。     

m6A修饰调控酶及其结合蛋白在细胞自噬中作用的研究进展

<正>自噬可消除细胞内错误折叠或聚集的蛋白质、清除受损的细胞器以及降解不必要的细胞成分,对于维持细胞功能和新陈代谢十分重要^[1]。自噬水平的异常在癌症、心血管、呼吸系统和神经退行性病变等疾病的发病机制中起到重要作用^[2]。在过去几十年,对自噬的研究主要集中在自噬的调控机制及自噬基因的生物学功能^[3-4]。     

子宫颈不典型不成熟鳞化免疫组化表达的意义

目的探索子宫颈不典型不成熟鳞状化生（atypical immature metaplasia,AIM）的生物学行为。方法采用SP法免疫组化技术检测p63、CK5、Ki-67及p16在14例AIM中的表达;对照7例不成熟鳞化（immature metaplasia,IM）,7例低级别鳞状上皮内病变（LSIL）,3例高级鳞状上皮内病变（HSIL）和7例鳞状细胞癌（SCC）。结果p63和CK5在AIM和IM阳性率〉75％,p63在AIM与LSIL和HSIL中的表达差异有显著性（P〈0．05）,与SCC差异无显著性。AIM与IM中Ki-67总平均指数及分布幅度相近,AIM（43．23％）略高于LSIL（36．95％）,较明显低于HSIL（68.5％,P〉0．05）,从Ki-67阳性细胞分布范围比较,AIM与LSIL及HSIL有重叠。p16在AIM表达6例强阳性、6例局灶阳性、2例阴性,7例SCC及3例HSIL全呈强阳性,3例LSIL强阳性,4例局灶阳性。结论p63和CK5佐证AIM形态特征。p63与Ki-67同样表达在异型细胞阳性。p16阳性表达与Ki-67和p63相结合,具有LSIL和HSIL的诊断价值,但p16阴性和Ki-67低表达,不排除AIM向良性转化可能。AIM是属于子宫颈上皮表现为一异质性病变。     

p16ink4a与Ki-67用于人宫颈病变 辅助诊断的比较

目的对p16ink4a与Ki-67作为辅助诊断人宫颈病变的两种标记物进行比较。方法采用免疫组织化学方法,检测p16ink4a与Ki-67蛋白在42例人正常宫颈组织,21例人宫颈上皮内瘤样变(CIN)Ⅰ级、21例CINⅡ、36例CINⅢ组织中的表达,用等级相关方法分析p16ink4a、Ki-67表达水平与CIN等级之间的相关性。计算两种标记物的敏感性、特异性、阳性预测价值、阴性预测价值和约登指数。结果p16ink4a和Ki-67表达均与CIN等级呈正相关。p16ink4a检测人宫颈病变的敏感性为83.3%,特异性为90.5%,阳性预测值为94.2%,阴性预测值为74.5%,约登指数为0.738。Ki-67检测人宫颈病变的敏感性为98.7%,特异性为16.7%,阳性预测值为68.75%,阴性预测值为87.5%,约登指数为0.154。联合使用两种标记物的敏感性、特异性均为83.3%。结论Ki-67敏感性、阴性预测值高,但特异性差,适用于早期发现人宫颈病变。p16ink4a特异性、阳性预测值高,是辅助诊断人宫颈病变的较好指标。综合比较,p16ink4a优于Ki-67。     

cyclinD1过表达对子宫颈鳞状细胞癌SiHa细胞增殖及上皮间质转化的影响北大核心CSCD

目的 探讨cyclin D1过表达对子宫颈鳞癌SiHa细胞增殖、分化的影响及其他信号分子的变化情况.方法 采用PCR法扩增cyclin D1基因全长,构建cyclin D1-pcDNA3.1质粒转染人乳头状瘤病毒16阳性的SiHa细胞,筛选cyclin D1稳定过表达细胞株.采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法和Western blot分别检测转染细胞cyclin D1 mRNA和蛋白表达.采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法绘制细胞生长曲线,采用RT-PCR法和Western blot检测转染细胞CK7、E-cadherin、波形蛋白、Snail基因的mRNA和蛋白表达;采用RT-PCR法检测增殖分化相关基因CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E、Rb、E2F、E6/E7、Ki-67基因的mRNA表达水平.对细胞同步化处理,用RT-PCR法检测细胞周期不同时间点cyclin D1及p21基因的mRNA表达情况.结果 成功构建cyclin D1稳定过表达的G-3细胞株.生长曲线及Ki-67 mRNA升高（P〈0.05）提示G-3细胞增殖速度加快,G-3细胞中波形蛋白、Snail基因和蛋白表达明显增加（均P〈0.05）,E-cadherin、CK7基因和蛋白表达明显降低,提示转染细胞发生了上皮间质转化.cyclin D1过表达后,CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E表达增加,Rb、E2F、E6/E7、p16表达无明显改变,p21与cyclin D1表达趋势基本一致,在细胞周期不同时间点表达存在波动性.结论 转染诱导cyclin D1过表达可促进SiHa细胞增殖和上皮间质转化,这一过程中伴随着CDK4、CDK2、p21、p27、cyclin E基因表达的上调.cyclin D1过表达时,p21表达量也增高,可能通过影响波形蛋白表达参与了对SiHa细胞上皮间质转化的调控.     

上皮钠通道在相关呼吸系统疾病中的研究进展

<正>上皮钠通道(epithelial sodium channel,ENa C)是一种非电压依赖性的离子通道,是上皮细胞主要的Na⁺转运通道之一,属于ENa C/退化蛋白(degenerin)超家族^[1-2]。ENa C对阿米洛利敏感,主要分布于人体肺部^[3]、肾脏^[4]、结肠、生殖道^[5]及中枢神经系统^[6]等多种组织的上皮细胞,能够控制Na⁺进入上皮细胞,对稳定细胞内Na⁺浓度及维持细胞渗透平衡具有重要作用^[7]。细胞内外液体渗透平衡是维持细胞正常生理功能的基础,这种平衡取决于细胞内外的相对渗透压和膜的渗透性^[8],而人体细胞内液和细胞外液的渗     

乳腺原发癌和淋巴结转移癌中TGF-β1和p53的间质表达及临床意义

目的 探讨乳腺原发癌和淋巴结转移癌间质中TGF-β1和p53的表达及预后价值。方法 收集有淋巴结转移的非特殊型浸润性乳腺癌160例,采用免疫组化EnVision法检测TGF-β1和p53在乳腺原发癌及相应淋巴结转移癌间质中的表达,并结合临床病理特征及预后进行相关性分析。结果 在乳腺原发癌和相应淋巴结转移癌之间,TGF-β1和p53的间质表达一致率均为87.5%（140/160）,两者的表达呈正相关（r=0.603,r=0.604,P均<0.001）。生存分析显示,在乳腺原发癌和相应淋巴结转移癌间质中,p53阳性患者的生存率低于p53阴性患者（χ²=7.163,χ²=6.894,P均<0.05）;而TGF-β1表达与患者总生存率无关（χ²=0.181,χ²=1.065,P均>0.05）;TGF-β1和p53均阳性者的总生存率低于TGF-β1阳性和p53阴性者（χ²=5.616,χ²=4.796,P均<0.05）。Cox单因素分析结果显...     

恶性肿瘤中MNX1反义RNA 1的作用及机制研究进展

<正>长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA)是一类广泛存在于细胞核和细胞质内、长度在200 nt以上、缺少开放阅读框、不参与或很少参与蛋白质编码、主要从蛋白编码基因的反义链及间隔区转录出来的RNA^[1-6]。已有大量研究证实,lnc RNA涉及调控多种生物学功能,比如细胞增殖、凋亡及血管生成^[7-9]。表达异常的lnc RNA与诸多肿瘤的发生发展密切相关^[10-11]。