冷冻切片组织冷冻过度的处理方式

<正>冷冻切片是采用低温冷冻的方法使组织在较短时间变硬切成薄片,其原理是利用物理降温,使组织达到一定的硬度进行切片的方法。冷冻切片需注重温度与切片的关系,温度的变化可影响组织软硬程度,温度升高组织变软,温度降低组织变硬。然而我们在冷冻切片过程中很难精确控制组织冷冻温度,易冷冻过度,切片时组织裂开,甚至变成粉末状,尤其在间质纤维成分较少组织中更为明显,为病理报告的漏、误诊埋下隐患。本文通过对冷冻过度组织采用手捂复温、室温复温和调节样本头温度3种复温方式,旨在找出对冷冻过度组织细胞形态结构影响最小的复温方式。     

如何减少冷冻切片中的类冰晶现象

正术中冷冻切片快速病理诊断是协助临床医师明确病变性质、指导手术方式和范围的重要依据。由于冷冻切片技术、取材范围有限和报告时间短等问题,易导致病理医师延迟诊断,甚至是误诊。高质量的冷冻切片是病理医师准确发出术中快速病理诊断的基础。笔者在临床实践操作中观察到部分冷冻切片组织结构扭曲、细胞挤压变形,存在类冰晶现象,而冰对组织石蜡切片中未见此类现象。     

浅谈冷冻制片中常见问题与处理

冷冻切片是在低温条件下将未经固定的手术切除标本的组织块快速冷冻到一定的硬度,然后进行切片的一种制片方法.冷冻切片的质量在快速病理诊中的作用至关重要,它直接影响病理诊断的正确性.     

如何提高冷冻切片的技术水平

冷冻切片是一种组织不经过脱水、透明处理,不需石蜡包埋的制片方法[1-3].冷冻切片分为直接冷冻切片法和明胶冷冻切片法[4].前者根据组织的制冷方法不同有半导体制冷切片法、甲醇制冷切片法、二氧化碳制冷切片法和低温恒冷箱冷冻切片法.目前,比较常用的方法是低温恒冷箱冷冻切片法.     

冷冻切片的几点技巧

1 肪肪及富含脂肪的组织切片 脂肪及富含脂肪的软组织、畸胎瘤头结节组织等,因水分含量少,不易冻硬,难以切片。将此类标本的组织块夹固于一自制的金属网架内（或在不锈钢组织脱水盒内垫一层脱脂棉,防止组织卷曲）置入液氮罐内的液氮（-196℃）内速冻20～40s,用镊子取出后包埋固定于组织托盘上,在组织四周涂少许OCT将其冻结、切片,染色。     

介绍一种冷冻切片快速染色方法

制作优质的冷冻切片,以缩短染色时间、提高染色细胞的核浆清晰度最为重要。我们试将苏木精。伊红按比例配成混合液使整个染色过程在1min内完成,且不必经过盐酸乙醇分化,染色鲜艳而稳定,现介绍如下。1材料和方法1．1染液配制（1）冷冻固定液：85％乙醇85ml,4％甲醛10ml,冰醋酸5ml。（2）苏木精伊红混合染色液：沉淀酸化伊红Y乙醇应用液1份,哈雷苏木精液3份混合供染色用。1．2切片制作取手术新鲜组织置恒冷式切片机载物台上,－20℃冷冻后6μm切片,玻片附贴切片后即刻用冷冻固定液固定10S,水稍洗,滴加苏木精伊红混合染色液至液体覆…     

不同包埋剂对冷冻切片质量的影响

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的效果及科研的可靠性[1,2].影响冷冻切片质量因素较多,冷冻包埋剂是重要影响因素之一.     

冷冻切片常见问题分析与预防

冷冻切片是借助低温使组织冻结达到一定的硬度进行切片的一种方法。它是术中诊断的一种重要方法。但由于各种原因,影响冷冻切片的质量,拖延病理报告发出的时间,直接影响着病理诊断的及时性、准确性,间接影响着病人的预后。归结起来有以下几方面。１　切片不全或不能切片切片不全是指切出的切片组织切面不完整、有缺损现象;不能切片是指组织块的温度过高或过低不能制作一张完整的切片。切片不全直接影响着冷冻报告切片的准确性。导致切片不全或不能切片的常见的原因有几下几方面。１１　组织内含过多的脂肪或坏死组织　脂肪或坏死组织…     

一种减少冷冻切片组织内冰晶的处理方法

在常规冷冻组织切片中常有大量冰晶存在 ,特别在脑组织冷冻切片中更多见。由于冰晶的产生 ,使组织细胞形态发生了明显改变 ,严重影响临床病理诊断。为此 ,采用组织保护液 -微波 (ｔｉｓｓｕｅｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎｓｏｌｕｔｉｏｎ ＭＷ ,ＴＰＳ ＭＷ )法对组织进行前期处理 ,然后再冷冻制片 ,结果组织切片中冰晶明显减少。现将此法介绍如下。1　材料与方法1 .1　标本来源　术中脑组织活检标本 1 0例 ,将同一组织标本分成 2块。实验组采用ＴＰＳ ＭＷ法处理 ,另一组采用常规冷冻制片法。1 .2　组织保护液的配方　聚乙烯醇 1 2 4 2 ｇ,聚乙…     

冷冻切片常遇到的问题及解决对策

目的 提高制作冷冻切片质量，确保实验结果科学性。方法 通过对切片机工作室温度设置选择，防卷板的调整应用及切片常遇到的问题分析，阐述提高制作高质量冷冻切片的方法。结果 通过对冷冻切片机有关参数的设定，提高了切片质量。结论 冷冻切片常遇到的问题，通过及时调整切片机相应设置，可以便捷解决。     

冷冻切片5min快速制片染色法

冷冻切片整个过程所用时间的快与慢,切片染色质量的好与坏直接影响病理诊断的速度和准确性,如何又快又好地制好一张冷冻切片,一直是困绕病理技术员的难题.我们通过多年的不断摸索和改进,对一些特定的标本,如乳腺肿瘤、卵巢实性肿瘤、子宫肌瘤标本,在接到标本后5 min内制好2张冷冻切片,制片结果符合诊断要求,质量令人满意,现总结报道如下.     

二甲苯脱脂在快速冷冻切片染色中的应用

带有脂肪的组织如用改良固定液快速冷冻制片过程中往往会造成背景模糊、脱水不彻底的现象,影响染色及切片质量,给诊断带来困难,甚至引起严重的不良后果。本文介绍快速冷冻制片过程中染色前加热用二甲苯脱脂,可获得满意效果的体会。     

酵素水溶液在冷冻切片染色分化中的应用

冷冻切片是保证术中病理诊断和进行科学研究的重要手段,切片质量的好坏直接影响快速诊断的结果及科研的可靠性。影响冷冻切片质量的因素很多,分化液是其中之一。酵素又称为酶,具有催化、净化等作用,现今在生产、生活中广泛应用,如清洗、灭菌、净化、美容、减肥等。有关其在病理切片制作中的应用尚未尝试。作者在不同组织冷冻切片染色中利用酵素水溶液分化,以期探索出提高切片染色清晰度、对比度,优化冷冻切片质量的方法。     

线性染色机在快速冷冻切片染色中的应用体会

<正>快速冷冻切片为外科在术中快速活检病理诊断提供有力帮助[1]。其可判别病变的性质(良性、交界性、恶性),为外科医师采取适当的手术方案提供依据。由于术中快速冷冻制片和诊断受到很多因素的制约,延迟性诊断时有发     

骨及钙化组织术中冷冻切片的制片方法

骨及钙化组织，一般先经有机酸或无机酸稀溶液浸渍脱钙，再用流水洗涤24h，除去组织内的酸，然后才能按石蜡切片常规脱水、浸蜡、切片、HE染色。此种方法除酸时间长，而且染色效果并不十分理想，在不同程度上延误了患者的诊断与治疗，而骨及钙化组织由于组织硬，一般临床不用于冷冻切片快速诊断，但快速诊断对骨科手术方式选择的意     

大鼠脑组织厚冷冻切片的经验探讨

正现阶段利用动物模型可以帮助我们发现引起精神疾病临床症状的脑部异常变化,进而为治疗提供重要的理念与依据。动物模型的脑组织切片的特殊染色、免疫组化染色、免疫荧光染色等病理学技术是观察脑部组织异常改变非常重要的方法。如对大鼠脑组织行振动切片高尔基染色,以对神经元的形态进行定性或定量的观察[1]。相关文献中也经常会进行冷冻厚切片(25～50 μm)的制作[2-3]。与临床病理相比,动物实验性研究的冷冻切片病理技术操作及结果展示上会有所不同[4]     

术中冷冻切片快速免疫组化染色及其应用

随着免疫组化技术的不断改进和标准化试剂盒的出现使免疫组化染色的质量不断提高 ,染色时间大大地缩短 ,同时也使术中冷冻切片的快速免疫组化染色成为可能。笔者尝试用标记的葡聚糖聚合物法 (labeleddextranpolymer,LDP)对 4 4例术中冷冻组织样本进行快速免疫组化染色 ,旨在探讨术中冷冻样本快速免疫组化染色在冷冻组织的快速病理诊断中的作用及其可操作性和实用性。1　材料与方法1.1　材料　收集四川大学华西医院病理科 2 0 0 2年 2～ 3月部分术中冷冻切片快速诊断的组织标本 ,包括 16个解剖部位共 4 4例病变组织。其中乳腺 13例 ,腹腔或…     

Lillie-Mayer苏木精在冷冻切片快速进行性染色中应用

恒温冷冻切片是用于术中快速病理诊断的主要制片技术,除了要求技术人员有熟练的操作技能外,更重要的是要求在制作程序及苏木精染液的配制和使用方法上做出有效的选择,才能达到最佳的染色效果.Lillie-Mayer苏木精染液是一种从英国引进的改良配方,应用于冷冻切片的快速进行性染色,全程染色约90 s完成,该方法简化了盐酸乙醇分化的程序,节省了分化和返蓝中所消耗的时间,避免了盐酸乙醇酸化后引起的部分组织脱落掉片的现象.现将我科多年来在冷冻切片的快速染色方法及Lillie-Mayer苏木精染液的配制方法介绍如下.