大鼠肾组织中组织型转谷氨酰胺酶和结缔组织生长因子表达的研究

目的观察依那普利对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织内组织型转谷氨酰胺酶(tTG)、结缔组织生长因子(CTGF)介导的肾间质纤维化的作用。方法采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组(8只)、模型组(8只)、依那普利治疗组(8只)。术后第4周,处死各组大鼠,用苏木素-伊红(HE)、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度;用免疫组织化学方法检测肾组织内tTG、CTGF和Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达部位及蛋白表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠BUN水平显著增加(P<0.01),肾间质纤维组织相对面积显著扩大(P<0.01),肾组织内tTG、CTGF及ColⅠ蛋白质表达均显著上调(P<0.01或P<0.05)。依那普利干预后,上述上调指标都被显著抑制(P<0.01或P<0.05)。结论依那普利具有抗肾纤维化的作用,其机制可能与下调肾组织tTG和CTGF表达有关。     

联合应用PGE_1及缬沙坦对梗阻性肾病大鼠TGF-β_1及HGF表达的影响

<正>慢性肾脏病(CKD)是一类进展性疾病,如不对其进行有效治疗,终将发展到终末期肾病。肾脏间质纤维化与肾功能减退密切相关[1],近年来的研究表明致纤维化因子转化生长因子(TGF)-β1表达增加与抗纤维化因子肝细胞生长因子(HGF)表达降低是间质纤维化的重要因素之一[2],具有肾脏保护作用的前列腺素E1(PGE1)及血管紧张素ⅡⅠ型受体阻滞剂(ARB)能调整TGF-β1[3]及HGF[4]的表达,我们建立以肾小管间质损伤为主要表现的单侧输尿管结扎(UUO)模型,探讨两者联合应用抗间质纤维化的作用及其机制。     

卡托普利对家兔慢性冬眠心肌的保护作用

目的评价血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)-卡托普利对缺血心肌的药理作用。方法建立家兔慢性冬眠心肌(CHM)模型,观察卡托普利对CHM组织间质纤维化、凋亡及心功能的影响。结果卡托普利可抑制CHM组织问质纤维化、减少凋亡细胞、改善心功能。结论卡托普利对缺血心肌具有保护作用。     

黄芪丹参茯苓龟板合剂对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的 探讨黄芪丹参茯苓龟板合剂对肾间质纤维化进展过程的干预作用及其机制.方法 通过单侧输尿管梗阻法建立肾间质纤维化的大鼠模型,实验分为假手术(Sham) 组、单侧输尿管梗阻 (UUO) 组、血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI) 组及黄芪丹参茯苓龟板合剂(中药)组,术后第14天取大鼠肾组织进行常规HE、Masson染色及C...     

酒精性肾间质纤维化

乙醇极易吸收入血 ,可引起多脏器的功能损害如 :肝脏、小肠、胃、胰腺、神经系统等 [1 ,2],对肾脏的损害也越来越受到重视。研究认为 ,酒精造成肾脏的损害可能通过以下环节 :(1)由于肾脏的血供丰富 ,容易导致乙醇、乙醛在肾脏蓄积、浓缩[3];(2)酒精氧化耗能、正常代谢的紊乱、以及毒性的代谢产物等 ,亦可造成肾小管 -间质损害[4];(3)酒精可激活肾组织局部的肾素 -血管紧张素系统 ,使血管紧张素Ⅱ产生增加 ,通过促进成纤维细胞表型转变、炎症反应等途径引起肾间质纤维化 ;(4)酒精诱导产生的多种细胞因子和细胞外基质 (Extracellularma trix,…     

苯那普利对肾病幼鼠纤溶蛋白肾组织定位表达的影响

目的　探讨肾病幼年大鼠肾小球硬化及肾间质纤维化病变进展过程中 ,肾组织尿激酶型纤溶酶原激活物 (u PA )、组织型纤溶酶原激活物 (t PA)及其特异性抑制物 (PAI- 1)蛋白定位表达的特点 ,及予血管紧张素转换酶抑制剂 (ACEI)——苯那普利 (benazepril;lotensin)治疗的影响。方法　采用阿霉素诱导的肾病大鼠为动物模型 ,予 ACEI治疗 12周后测大鼠体重、血压、尿蛋白、及血生化各项指标的变化 ,同时用免疫组织化学染色等方法检测各组肾组织 u PA、t PA和 PAI- 1的蛋白表达的变化特点。结果　肾病大鼠肾组织 PAI- 1表达均高于正常对照组 ,而 u PA、t PA均低于正常组 ;经治疗后肾组织 PA I- 1趋于下降 ,而 u PA、t PA表达趋于增高 (P<0 .0 1)。结论　纤溶系统的平衡紊乱是肾病大鼠肾小球硬化和肾间质纤维化进展中的重要病生理变化之一 ,ACEI治疗可改善 PAs/ PAI- 1的异常表达 ,防止细胞外基质的异常沉积 ,阻止肾小球硬化和间质纤维化病变进展。     

贝那普利联合胰激肽原酶对肾间质纤维化的作用研究

目的研究贝那普利联合胰激肽原酶对实验性肾间质纤维化模型大鼠肾脏是否具有保护作用及其可能的机制。方法 60只SD大鼠分为假手术组(A组)、模型组(B组)、贝那普利治疗组(C组)和贝那普利联合胰激肽原酶治疗组(D组),观察肾组织病理变化,血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血小板源性生长因子(PDGF-B)的表达情况。结果 D组治疗14d后较其余3组,可减少AngⅡ的含量(P<0.05),下调PDGF-B的表达(P<0.05),抑制细胞外基质增生、聚集,减轻肾间质纤维化,延缓肾脏损害,其作用优于单独应用血管紧张素转化酶抑制剂。结论 AngⅡ和PDGF-B参与肾小管间质纤维化改变。     

芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠的实验研究

目的探讨芪红合剂对肾间质纤维化的防治作用。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化动物模型,以公认有肾脏保护作用的血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)为阳性对照,测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),免疫组织化学法测肾组织纤维蛋白溶解酶原激活物抑制因子(PAI)-1、纤维连接蛋白(FN)的表达。结果芪红合剂能降低血BUN、Scr水平,显著抑制PAI-1、FN的表达,减轻肾间质纤维化程度。PAI-1分别与FN、肾间质纤维化面积显著相关。肾间质纤维化面积分别与BUN、Scr相关。结论芪红合剂有早期防治肾间质纤维化作用。     

福辛普利对慢性肾功能衰竭幼鼠凝血纤溶变化的干预影响

目的探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)——福辛普利干预治疗对幼年大鼠慢性进展性肾脏病变过程中肾组织组织型纤溶酶原激活物(tPA)、组织型纤溶酶原激活物特异性抑制剂(PAI)-1蛋白表达的影响。方法以5/6肾切除SD大鼠为实验动物模型,予ACEI治疗12周后分别检测大鼠体重、血压、血尿生化及残肾组织常规病理和用免疫组织化学染色定性定量评价残肾tPA、PAI-1蛋白表达。结果于5/6肾切除后,大鼠肾功能进行性丧失,表现为尿蛋白、血压、血尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)及血脂增高,残肾组织出现肾小球硬化和间质纤维化。免疫组织化学染色提示肾组织PAI-1表达增高,而tPA表达下降。经ACEI治疗后,大鼠肾功能改善、血压下降、尿蛋白下降、残肾组织tPA蛋白表达增加、PAI-1表达下降。结论ACEI具有改善5/6肾切除大鼠凝血纤溶系统紊乱的作用。     

肾性高血压大鼠胰岛素抵抗与肾间质纤维化相关研究

目的 从肾素.血管紧张素系统(RAS)角度初步探讨胰岛素抵抗(IR)对肾性高血压大鼠肾间质纤维化的影响.方法 SD大鼠行"两肾一夹"手术后随机分为蔗糖喂养组和对照组,蔗糖喂养组蔗糖喂养,对照组正常饲养,18周后处理.于处理前1日测定24 h尿蛋白定量;处理日测定2组血浆空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数、肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、尿素氮和肌酐水平.结果 与时照组相比,蔗糖喂养组空腹胰岛素水平明显增高(P<0.01),胰岛素敏感指数水平明显降低(P<0.01),血浆肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、尿素氮和肌酐水平及24 h尿蛋白定量均明显高于对照组(P<0.01).相关分析显示,24 h尿蛋白定量与血浆空腹胰岛素、胰岛素敏感指数、醛固酮及尿素氮水平呈明显相关.结论 IR状态能够加速肾性高血压大鼠肾间质纤维化的损害,除与血压升高、胰岛素的直接促增殖作用有关外,还可能与HIS引起的肾组织局部RAS的激活有关.     

赖诺普利致高血压患者心肌纤维化消退

高血压时 ,除由心肌细胞肥大致左心室肥大(ＬＶＨ)外 ,尚可发生进行性心肌纤维化 ,从而导致左室舒张功能不全。体内外实验已证实肾素 血管紧张素 醛固酮系统的效应器激素、血管紧张素Ⅱ和醛固酮可刺激成纤维细胞介导的胶原蛋白合成。血管紧张素Ⅱ尚可抑制胶原蛋白酶活性 ,使心肌间质组织中胶原蛋白进行性积聚。本研究旨在评定有ＬＶＨ、心肌纤维化和左室舒张功能不全的高血压患者 ,经ＡＣＥ抑制剂赖诺普利治疗后能否使心肌纤维化消退。35例原发性高血压患者随机接受赖诺普利 ( 1 8例)和氢氯噻嗪 (ＨＣＴＺ ,1 7例 ) ,口服赖诺普利和ＨＣＴＺ…     

转化生长因子β1和α-平滑肌肌动蛋白在肾间质纤维化小鼠肾组织的表达

目的观察转化生长因子β1(TGF-β1)与α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在单侧输尿管梗阻(UUO)小鼠肾间质纤维化模型中肾组织的表达。方法 36只小鼠平均分为假手术组与模型组,术后3、7、14d处死小鼠,取梗阻侧肾组织行HE、Masson染色、免疫组化与RT-PCR检测。结果与假手术组比,模型组TGF-β1及α-SMA表达呈进行性升高,肾间质纤维化程度明显增高(P<0.O1)。结论 TGF-β1及α-SMA在肾间质纤维化过程中发挥重要作用。     

复方积雪草煎剂对单侧输尿管结扎小鼠肾小管间质骨架蛋白α-SMA、vimentin表达的影响

目的：通过对复方积雪草煎剂对单侧输尿管结扎（unilateral ureteral occlusion，UUO）小鼠模型肾小管间质骨架蛋白α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、波形蛋白（vimentin）表达影响的研究，探讨其防治肾间质纤维化的作用和机理。方法：采用小鼠UUO模型，用复方积雪草水煎剂进行灌胃干预，血管紧张素转化酶抑制剂（angiotensin-converting enzyme inhibitor，ACEI）福辛普利作为对照。MASSON染色观察肾组织病理及间质纤维化；肾组织中α-SMA、vimentin表达采用免疫组化和Westem-blotting方法检测；基因表达采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法。结果：UUO模型组和治疗组小鼠肾间质纤维化程度以及α-SMA、vimentin蛋白表达和基因表达水平均较假手术组显著增高，而复方积雪草煎剂、福辛普利治疗组肾间质纤维化和间质骨架蛋白的表达均较模型组显著降低。结论：复方积雪草可显著抑制肾小管上皮细胞或间质细胞的表型转化，提示降低肌成纤维细胞的积聚是其防治肾间质纤维化的重要机制之一。     

曲尼司特对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用

目的探讨曲尼司特对糖尿病大鼠心肌纤维化的作用及其可能机制。方法健康♂SD大鼠一次性尾静脉注射链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,随机分为糖尿病组(DM组),曲尼司特低剂量组(Tra1)及高剂量组(Tra2),造模成功72 h后每天ig给予曲尼司特100 mg.kg-1.d-1及200 mg.kg-1.d-1,同时设立对照组(NC组)。饲养12周。测量血糖、心脏质量指数、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ水平;Masson染色观察心脏形态学变化,免疫组化法和Western印迹法检测心肌组织CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达。结果①与NC组相比,DM组大鼠心脏质量指数、血浆及心肌血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平明显升高(P<0.01),心肌间质纤维化明显,心肌CTGF蛋白、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达增加;②与DM组比较,Tra1、Tra2组大鼠心脏质量指数、血浆及心肌AngⅡ水平均明显下降(P<0.05),心肌间质纤维化减轻,心肌CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白表达减少。结论曲尼司特能降低糖尿病大鼠心肌AngⅡ水平,减少CTGF、Ⅰ型、Ⅲ型胶原蛋白的表达,从而抑制糖尿病大鼠心肌纤维化。     

小鼠内皮型一氧化氮合酶表达的变化与肾间质纤维化的关系

目的探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)在小鼠单侧输尿管梗阻(UUO)模型肾组织中的变化及其与肾间质纤维化的关系。方法 48只小鼠随机均分为UUO模型组和假手术组,每组术后第1、3、7、14天分别处死6只小鼠,观察肾组织的病理改变,检测eNOS和结缔组织生长因子(CTGF)表达,计算管周毛细血管(PTC)密度。结果模型组术后第7天部分肾小管萎缩,纤维化形成;术后第14天肾小管间质纤维化更加明显。假手术组eNOS表达较多,CTGF低表达。与假手术组相比,模型组第7、14天eNOS表达减少(P<0.05),CTGF表达增多(P<0.05),第3-14天PTC密度下降(P<0.05)。结论小鼠UUO肾组织eNOS表达下降参与了肾间质纤维化的进展。     

伊贝沙坦对肾间质纤维的保护及治疗作用实验研究

目的观察伊贝沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质中PDGF-BB介导的肾间质纤维化的影响。方法制作大鼠肾间质纤维化模型,随机分为假手术组、模型组和伊贝沙坦治疗组,术后第7、14天分别处死各组中6只大鼠,检测大鼠肾功能、尿β2-微球蛋白,用免疫组化方法测定肾组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和血小板衍生生长因子(PDGF-BB)蛋白表达,动态观察肾脏病理变化。结果与输尿管梗阻核型(UUO)组比较,治疗组肾间质纤维化明显减轻(P<0.05),肾间质中α-SMA、PDGF-BB表达明显减少(P<0.05)。结论伊贝沙坦可通过下调肾间质PDGF-BB表达减轻肾组织间质纤维化。     

木犀草素对肝纤维化进程中肝细胞上皮间质转化的抑制作用

目的:研究木犀草素抑制肝纤维化进程中肝细胞上皮间质转化的作用。方法:大鼠腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液(1 ml/kg),每周2次,连续12周以复制大鼠肝纤维化模型。30只SD大鼠随机均分为正常对照(等容含5%CMC-Na溶液)组、模型(等容含5%CMC-Na溶液)组、木犀草素(100 mg/kg)组。第1次腹腔注射CCl4后灌胃给药,每天1次,连续12周。HE和VG染色检测大鼠肝组织病理学变化,免疫组化法检测肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF)-β1、波形蛋白(Vimentin)、上皮型E-钙黏蛋白(E-cadherin)的表达。采用门静脉插管Ⅳ型胶原酶原位灌注法分离大鼠原代肝细胞。实验随机均分为空白对照(等容含10%FBS的DMEM溶液)组、模型(等容含10%FBS的DMEM溶液)组与木犀草素高、中、低浓度(40、20、10 mmol/L)组。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测α-SMA、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、E-cadherin、转录因子Snail、白蛋白(ALB)、糖原合成酶(GS)mRNA的表达;Western blot法检测α-SMA、Vimentin、E-cadherin蛋白的表达。结果:与模型组比较,木犀草素组大鼠肝组织α-SMA、TGF-β1、Vimentin表达减弱,E-cadherin表达增强,肝脏病理学程度减轻;木犀草素高、中、低浓度组大鼠肝组织细胞α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Snail mRNA表达减弱,木犀草素高、中浓度组大鼠肝组织细胞E-cadherin、ALB、GS mRNA表达增强;木犀草素高、中、低浓度组大鼠肝组织细胞α-SMA、Vimentin蛋白表达减弱,E-cadherin蛋白表达增强。结论:木犀草素具有明显抗肝纤维化的作用,其机制可能与木犀草素抑制肝细胞上皮间质转化作用有关。     

血管紧张素Ⅱ及其转化酶抑制剂与慢性胰腺炎的研究进展

慢性胰腺炎的病理特征是胰腺纤维化,其主要的效应分子血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)可促进细胞增殖和纤维化的形成。通过研究血管紧张素Ⅱ在胰腺星状细胞、ECM、TGF-β1中的作用,使用血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)或受体拮抗剂可减轻胰腺纤维化程度,奠定了血管紧张素Ⅱ转化酶抑制剂在胰腺纤维化防治上的基础。     

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对人肾小管细胞MCP-1mRNA表达的影响

近年来研究表明,肾脏局部肾素血管紧张素系统(RAS)的激活在慢性肾病进展中起着十分重要的作用,肾小管上皮细胞在促进小管间质炎症反应和纤维化形成中起十分关键的作用[1,2].单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是趋化因子家族的重要一员,在肾脏的炎症反应中对炎症细胞的趋化和激活有重要影响.文献中曾报道血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)可以诱导系膜细胞MCP-1 mRNA表达[3],但AngⅡ对小管上皮细胞MCP-1表达影响如何,文献报道尚少.因此,本实验通过体外培养的人近端肾小管细胞(HPTC),探讨AngⅡ对HPTC MCP-1 mRNA表达的影响,以进一步阐明AngⅡ、MCP-1在介导肾间质纤维化中的作用机制,为临床合理应用RAS阻断剂治疗慢性肾病提供理论依据.     

组蛋白脱乙酰基酶与肾间质纤维化的关系及药物干预研究

目的研究在幼年大鼠肾间质纤维化模型——单侧输尿管结扎(UUO)模型中组蛋白脱乙酰基酶(HDAC1,HDAC2)和转化生长因子-β1(TGF-β1)组织定位表达趋势、相关性及可能的病理意义,及应用HDAC抑制剂丙戊酸钠的干预效果。方法采用单侧输尿管结扎方法制备幼鼠肾间质纤维化模型,以第1、3、5、7、14天为观察点,采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色评价各组各时间点肾小管受损的程度,用免疫组织化学法检测大鼠肾组织中HDAC1、HDAC2及TGF-β1蛋白定位,表达趋势及相关性研究。统计学方法采用单因素方差分析和Pearson相关分析。结果模型组HDAC1、HDAC2、TGF-β1与肾小管间质损伤程度均明显高于对照组(P<0.05);TGF-β1的随着时间的延长,表达强度增强,各时间点组内比较差异有统计学意义(P<0.05),HDAC1和HDAC2表达在第7天到达高峰,第14天时反而有所下降(P<0.05);丙戊酸组各时间点的表达明显低于模型组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05);HDAC1、HDAC2与TGF-β1、肾小管间质损伤程度呈正相关。结论在幼年大鼠肾小管间质损伤过程中,HDAC1、HDAC2和TGF-β1的表达上调有重要的致病意义,而丙戊酸钠有明显的干预效应。