胰腺导管腺癌中SFRP4的表达及其临床意义

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白4(secreted frizzled-related protein 4,SFRP4)在胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)中的表达及其临床意义。方法在30组配对的PDAC肿瘤组织和癌旁正常组织中,利用RT-PCR检测SFRP4mRNA表达水平。应用免疫组化SP法检测205例PDAC组织芯片中SFRP4蛋白表达水平,并分析SFRP4的表达与PDAC临床病理特征及患者预后的关系。结果在PDAC组织中,SFRP4的mRNA和蛋白表达水平均显著高于配对相邻癌旁正常组织。RT-PCR检测显示,SFRP4 mRNA表达水平在90%(27/30)的PDAC组织中显著增加(P=0.007 2)。免疫组化染色结果显示,SFRP4蛋白表达水平在56.5%(116/205)的癌组织中升高,但仅在28.8%(59/205)的癌旁组织中高表达。此外,SFRP4蛋白表达与PDAC临床病理特征无相关性。Kaplan-Meier生存分析显示SFRP4高表达与患者不良预后相关(x~2=3.467,P=0.024)。结论 SFRP4有望成为PDAC新的预后标志物。     

miR-101在胰腺癌组织中的表达水平及对癌细胞侵袭能力的影响

目的:检测分析胰腺癌组织和胰腺癌细胞株中微小RNA(miRNA)的表达情况及对胰腺癌细胞侵袭能力的影响。方法:收集临床患者胰腺癌组织、癌旁组织标本及4种典藏胰腺癌细胞株,用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测所有样本中miR-101的表达水平;采用Transwell侵袭试验检测miR-101对胰腺癌细胞株PANC-1和MIA PaCa-2的侵袭能力,同时采用Western Blotting检测转染miR-101的模拟物(mimic)后胰腺癌细胞株MIA PaCa-2的Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶2(Rhoassociated coiled coil forming protein kinas,ROCK2)蛋白表达水平。结果:4种胰腺癌细胞株中miR-101表达量较正常胰腺细胞明显降低(P0.05),胰腺癌组织中miR-101表达量也明显低于癌旁组织(P0.05)。转染组miR-101的胰腺癌细胞株PANC-1和MIA PaCa-2的侵袭能力较未转染组明显减弱(P0.05),转染组胰腺癌细胞株MIA PaCa-2中ROCK2蛋白表达也显著低于未转染组(P0.05)。结论:胰腺癌组织和胰腺癌细胞株均低表达miR-101,可能靶向抑制ROCK2蛋白,减弱胰腺癌细胞的侵袭能力。     

miR-141-3p在前列腺癌患者血清中的表达及对骨转移的调控机制

目的研究分析miR-141-3p在前列腺癌患者血清中的表达水平以及对骨转移的调控机制。方法选取2017年1月至2019年1月于我院肿瘤科就诊的85例前列腺癌患者作为研究对象,根据患者的疾病分类进行分组,其中45例局限性前列腺癌患者作为观察A组,40例激素敏感性骨转移前列腺癌作为观察B组,并选取同期于我院诊断的43例良性前列腺增生患者作为对照组,比较观察A组、观察B组以及对照组患者miR-141-3p血清中的表达水平;并将观察A组与观察B组85例前列腺癌患者按照骨转移灶个数进行再次分组,分为无骨转移灶、0～2个骨转移灶、3～5个骨转移灶以及5个以上骨转移灶组,分析4组患者血清中miR-141-3p-3p与前列腺骨转移的相关性;并根据人前列腺癌细胞株PC-3与正常小鼠前列腺组织、小鼠前列腺癌骨转移组织进行分析miR-141-3p的潜在靶基因对前列腺癌骨转移的调控。结果与对照组比较,观察A、B组患者前列腺癌组织miR-141-3p表达水平差异有统计学意义(P0.05),且观察A组明显高于观察B组,差异有统计学意义(P0.05);观察A、B组患者血清中miR-141-3p表达水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05),且观察A组明显高于观察B组,差异有统计学意义(P0.05)。血清中miR-141-3p表达水平与前列腺骨转移个数呈正相关关系(r=0.517,P0.05);人前列腺癌细胞株DU145、PC-3中,miR-141-3p mimics组miR-141-3p表达水平高于miRNA-NC组,差异有统计学意义(P0.05);miR-141-3p可诱导人前列腺癌细胞株DU145、PC-3侵袭能力增加;人前列腺癌细胞株DU145、PC-3中,miR-141-3p mimics组IL11表达水平低于miRNA-NC组,差异有统计学意义(P0.05);正常小鼠前列腺组织与前列腺癌细胞株中IL11与miR-141-3p表达水平呈负相关关系(r=-0.644,P0.05);小鼠前列腺癌骨转移组织中IL11与miR-141-3p表达水平呈负相关关系(r=-0.580,P0.05)。结论 miR-141-3p的血清表达可作为前列腺早期诊断治疗的生物学标志物,且miR-141-3p可作为患者骨转移的分子标记物,其miR-141-3p可通过IL11完成对前列腺癌骨转移的调控。     

荷瘤小鼠卵巢癌细胞miRNA和髓源性抑制细胞的检测及相关性分析

目的检测卵巢癌荷瘤小鼠癌组织miR-21-5p、miR-155-5p、miR-218-5p、miR-222-3p、miR-494-3p的水平和外周血和脾脏中髓源性抑制细胞(MDSC)的数量,并分析它们的相关性。方法 12例卵巢癌荷瘤小鼠的癌组织和癌旁组织,实时荧光定量PCR检测癌组织和癌旁组织中miR-21a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p、miR-222-3p、miR-494-3p的水平,流式细胞术检测上述荷瘤小鼠中外周血和脾脏中MDSC的表达。采用Spearman法分析MDSC和microRNA的相关性。结果与正常小鼠相比,荷瘤小鼠外周血和脾脏中的MDSC明显增加。miR-21a-5p、miR-218-5p和miR-222-3p在癌组织中含量高于癌旁组织,相反miR-155a-5p和miR-494-3p在癌组织中的表达低于癌旁组织。miR-222-3p与MDSC的数量无相关性,miR-494-3p的水平与MDSC的数量负相关,miR-21a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p在癌组织与癌旁组织的表达差值与MDSC的数量呈正相关。结论卵巢癌荷瘤小鼠癌组织中miR-21a-5p、miR-155a-5p、miR-218-5p、miR-494-3p水平和外周血及脾脏中MDSC的数量有一定的相关性。     

NF-κB及其调控的miRNA在宫颈癌移植瘤及癌旁组织中的活化和表达

目的分析宫颈癌移植瘤小鼠的癌与癌旁组织中miR-15b和miR-16的表达状况以及NF-κB信号通路在宫颈癌癌旁组织活化情况,为宫颈癌的诊断和治疗提供新思路。方法建立小鼠宫颈癌移植瘤模型,取癌组织与癌旁组织,以及正常的脂肪组织,用实时荧光定量PCR方法检测miR-15b和miR-16的表达,用免疫组化检测NF-κB(P65)蛋白的表达及定位。结果移植瘤造模成功。miR-15b在宫颈癌组织中表达为32.21±3.67,明显高于癌旁组织的25.16±1.86和正常组织的1.00±0.12(P0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P0.05);miR-16在宫颈癌组织中表达为28.63±2.34,明显高于癌旁组织的22.16±1.76和正常组织的1.00±0.12(P0.05),癌旁组织也显著高于正常组织(P0.05)。在正常脂肪组织中,NF-κB(P65)蛋白主要定位于胞质,而在癌组织与癌旁组织中,NF-κB(P65)蛋白主要位于胞核。结论 NF-κB通路及其相关的miR-15b和miR-16可能参与了宫颈癌发生的早期分子事件。     

miR-155在哮喘患儿痰液的表达及对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的探讨miR-155在哮喘患儿及哮喘小鼠中的表达及其对气道炎症的作用。方法应用realtime PCR方法检测哮喘患儿和健康儿童痰液,以及卵清蛋白诱导的哮喘小鼠和正常小鼠肺组织中miR-155的表达;化学合成miR-155模拟物与阴性对照,并分别鼻滴至哮喘小鼠,HE染色验证哮喘小鼠模型的成功建立,免疫荧光方法和western blot方法检测各组小鼠肺组织TNF-α与NF-κB的蛋白表达。结果与对照组相比,哮喘患儿痰液及哮喘小鼠肺组织中miR-155表达显著降低(P0.01);HE染色显示哮喘模型组小鼠炎症细胞浸润明显高于正常对照组,哮喘小鼠模型成功建立。miR-155模拟物滴入后,哮喘小鼠肺组织TNF-α与NF-κB的蛋白表达显著降低(P0.01)。结论 miR-155在支气管哮喘患儿及支气管哮喘小鼠模型中低表达,miR-155模拟物能够抑制哮喘小鼠的气道炎症。     

miR-124靶向调节STAT3基因对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨miR-124及STAT3在甲状腺乳头状癌组织中的表达,以及抑制或过表达miR-124对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测17例患者甲状腺乳头状癌组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,Western bolt法检测STAT3蛋白的表达。将miR-124 inhibitors及miR-124 mimics转染至甲状腺乳头状癌Kl细胞株,Western blot方法检测转染后STAT3蛋白的表达变化,CCK-8方法和克隆形成实验检测转染后Kl细胞的增殖和侵袭情况。结果 miR-124在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显低于癌旁组织,STAT3蛋白在甲状腺乳头状癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P0.01)。转染miR-124 inhibitors的K1细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著升高,细胞内STAT3蛋白表达亦明显升高(P0.01);转染miR-124 mimics的K1细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著降低,细胞内STAT3蛋白表达亦明显降低(P0.01)。结论 miR-124抑制甲状腺乳头状癌Kl细胞的增殖和侵袭可能与下调STAT3的表达相关。     

基于miR-155 / SOCS1 轴研究复方甘草酸苷治疗特应性皮炎小鼠的作用 机制

目的:基于miR-155/SOCS1轴研究复方甘草酸苷治疗特应性皮炎(AD)小鼠的作用机制。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、miR-155 agomir组、miR-155 agomir阴性对照组、复方甘草酸苷组、复方甘草酸苷+miR-155 agomir组。除对照组外,其余各组小鼠采用耳背涂布卡泊三醇(MC903)溶液法建立AD小鼠模型。观察各组小鼠耳部临床特征并进行皮炎评分;HE检测各组小鼠耳组织病理情况;ELISA检测各组小鼠血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-6、IgE水平,qRT-PCR法检测各组小鼠耳部出现组织中miR-155、SOCS1 mRNA水平;Western blot检测各组小鼠耳部组织中SOCS1蛋白表达。结果:与对照组比,模型组小鼠耳部出现明显红斑、充血红肿、耳组织表皮层增生、棘细胞层变厚、毛细血管扩张、组织水肿充血、大量炎症细胞浸润等症状,耳部皮炎评分、血清IgE及TNF-α、IL-6水平、组织miR-155水平升高(P0.05),SOCS1 mRNA及蛋白水平降低(P0.05)。与模型组相比,miR-155 agomir组小鼠上述症状加重,耳部皮炎评分、血清IgE及TNF-α、IL-6水平、组织miR-155水平升高(P0.05),SOCS1 mRNA和蛋白表达降低(P0.05);miR-155 agomir阴性对照组小鼠各指标差异无统计学意义(P0.05);复方甘草酸苷组小鼠上述症状减轻,耳部皮炎评分、血清IgE及TNF-α、IL-6水平、组织miR-155水平降低(P0.05),SOCS1 mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。与miR-155 agomir组相比,复方甘草酸苷+miR-155 agomir组小鼠上述症状减轻,耳部皮炎评分、血清IgE及TNF-α、IL-6水平、组织miR-155水平降低(P0.05),SOCS1 mRNA和蛋白表达升高(P0.05)。与复方甘草酸苷组相比,复方甘草酸苷+miR-155 agomir组小鼠上述病理症状加重,耳部皮炎评分、血清IgE及TNF-α、IL-6水平、组织miR-155水平升高(P0.05),SOCS1 mRNA和蛋白表达降低(P0.05)。结论:复方甘草酸苷可通过下调miR-155表达、上调SOCS1表达减轻AD小鼠炎症反应。     

miR-132抑制舌癌细胞增殖、侵袭及迁移

为研究miR-132在舌癌中的表达情况,收集病理诊断确诊为舌癌的20例患者舌癌组织及癌旁组织,通过RT-PCR检测miR-132在舌癌及癌旁组织中的表达水平。应用mimics转染CAL-27细胞株,采用平板克隆、MTT实验检测miR-132过表达组、对照组舌癌细胞的增殖活性。Transwell实验研究miR-132与舌癌细胞迁移作用的关系。结果显示,miR-132在舌癌组织中的表达水平(0.56±0.05)显著低于癌旁组织(1.43±0.12,P0.001)。舌癌组织中miR-132的表达水平随着病理分级恶性程度的升高而降低(P0.05)。细胞克隆形成实验及MTT实验结果显示,miR-132 mimics组的细胞活性及增殖明显受抑制(P=0.003 2,P0.001)。Transwell实验显示,miR-132 mimics组的细胞过膜数量[(89±15)/视野]明显低于对照组[(380±25)/视野](P=0.002)。提示miR-132在舌癌组织中表达下降,miR-132在舌癌的增殖和转移过程中发挥重要作用,其可作为舌癌的潜在临床预后标志物,为舌癌的预后判断及治疗提供参考。     

miR-124靶向调节STAT3基因对骨肉瘤细胞增殖和侵袭的影响

目的探讨miR-124及STAT3在骨肉瘤组织中的表达,以及miR-124对骨肉瘤MG-63细胞增殖和侵袭的影响。方法 Real-time PCR法检测67例患者骨肉瘤组织及对应的癌旁组织中miR-124的表达,免疫组织化学方法检测STAT3蛋白的表达。使用脂质体将miR-124抑制剂及miR-124模拟物转染至骨肉瘤MG-63细胞株,以无关序列作为阴性对照。Western blot方法检测转染后STAT3蛋白的表达变化,采用MTT方法与Transwell实验检测转染后MG-63细胞的增殖侵袭能力变化。结果 miR-124在骨肉瘤组织中的表达明显低于癌旁组织(P0.01);STAT3蛋白在骨肉瘤组织中的表达明显高于癌旁组织(P0.01);转染miR-124抑制剂的MG-63细胞增殖侵袭能力与对照组相比显著升高,细胞内STAT3蛋白表达亦明显升高;转染miR-124模拟物后则得到相反的结果(P0.01)。结论 miR-124抑制骨肉瘤MG-63细胞的增殖和侵袭可能与下调STAT3的表达相关。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Modes of Inheritance of Errors of Refraction

Eighteen families in which both parents had refractions within the range of +4·0 D to −4·0 D and axial lengths seen in emmetropia (22·3-26·0 mm) showed coefficients of correlation of the order 0·5 indicative of polygenic inheritance. Such coefficients were seen for axial length (0·407) and for the cornea (0·487), but not for the lens (which is known to be yoked to the axial length). No such coefficients were seen in 19 families in which one of the parents had axial length outside the emmetropic range (nine families with long axes and 10 with short axes).

The pattern of polygenic inheritance for emmetropia (completely correlated optical components) and errors of refraction up to 4·0 D (inadequately correlated components: correlation ametropia) follows that seen in stature and other measurable characters. In contrast the high refractive errors with their abnormal axial lengths (component ametropia) are—like the extremes in stature—pathological anomalies with monofactorial inheritance.