76例晚期血吸虫病患者血清乙型肝炎标志与肝活组织地依红染色HBsAg检测的分析

对76例晚血患者血清HBsAg、抗-HBc、抗-HBs3项乙肝标志与肝活组织地依红HBsAg染色作了对比分析,结果:血清乙肝标志1项以上阳性51例,标志模式多样化,以HBsAg和抗-HBc同时阳性者最多共29例,单项抗-HBc阳性者次之为11例,2例HBsAg和抗-HBs同时阳性,3例HBsAg、抗-HBc和抗-HBs同时阳性,表明存在着不同HBsAg亚型的双重感染或慢性持续性感染出现的抗原—抗体复合物,提示患者免疫功能低下。肝活组织地依红染色HBsAg阳性者共38例,其中25例具有1项以上血清乙肝标志,13例3项血清乙肝标志均阴性。26例具有1项以上血清乙肝标志者,肝活组织地依红染色HBsAg均为阴性,二者并不完全一致。     

简化的免疫过氧化物酶方法

<正> 在肾脏疾病的免疫组织化学诊断中,福尔马林液固定、石腊包埋组织的免疫过氧化物酶染色比冰冻切片免疫荧光染色有许多优点,如能很好地显示组织结构,标本可长期保存和适用于穿刺活检材料。免疫过氧化物酶技术的缺点是操作费时间。作者报道一种简化的间接免疫过氧化物酶方法。此法不包括脱腊和对比染色,全部过程仅需85分     

肝组织内乙型肝炎表面抗原的分布及其显示方法的比较

近年来,随着免疫学及免疫组织化学技术的发展,组织内乙型肝炎抗原(HBAg),特别是乙型肝炎表面抗原(HBsAg)的定位技术,在国内外已得到广泛应用。组织内HBsAg的显示方法有免疫荧光、免疫酶标和地衣红染色法,常规H.E.染色中肝细胞的毛玻璃样变也被视作为HBgAg的形态学指标。本文选取60例各种肝病的肝组     

甲状腺内源性过氧化物酶光镜组织化学染色方法研究

本文用块染石腊切片和冰冻切片法分别显示了小鼠甲状腺内过氧化物酶。并通过观察酶颗粒的分布和显微分光光度计定量测量酶颗粒的数量对两种方法进行了对比研究。两组都可见到阳性过氧化物酶颗粒,酶颗粒主要分布于甲状腺滤泡上皮细胞的胞质中。块染石腊切片组过氧化物酶颗粒分布较密集,染色深。显微分光光度计定量结果显示块染石腊切片组单位面积甲状腺滤泡上皮细胞质中过氧化物酶颗粒数量不低于冰冻切片组。这些结果表明用块染石腊切片的方法显示甲状腺内过氧化物酶也能得到良好的效果。     

肾脏穿刺活检标本免疫荧光制作体会

目的探讨肾脏穿刺活检标本免疫荧光染色制作方法及意义。方法采用直接法检测1006例肾脏穿刺活检组织IgG、IgA、IgM、C3、Fib、C1q免疫荧光染色;其中150例采用间接法检测HBsAg、HBcAg免疫荧光染色。结果在荧光显微镜下观察荧光附着部位与强度（--＋＋＋＋）,对照片阴性。免疫沉积物定位准确、清晰、灵敏度高、特异性强,结果易于判断。结论直接免疫荧光染色法染色步骤简单,对荧光标记物的分布部位、分布形式、荧光强度显示极为明确,可提高各种免疫肾病的检出率,为国际上公认的肾活检病理诊断和研究的重要染色手段,值得推广应用。     

60例小儿乙型病毒性肝炎肝穿刺材料病理研究

对29例小儿慢性迁延型肝炎,23例慢性活动性肝炎及8例急性活动性肝炎进行了光镜、硝酸醛复红及超微结构研究。60例HBsAg皆阳性。研究结果,临床诊断与病理诊断出现很大差异。临床认为,急性肝炎病例很大部分属于慢性,所以确诊肝炎必须行肝穿刺。慢迁肝与慢活肝不仅在光镜有明显的不同病理表现,而在电镜下显示慢活肝变化复杂得多。研究证明,硝酸醛复红证实HBsAg存在效果尚佳。     

妇科疾患病变组织中癌抗原的分布及其意义

用抗小鼠宫颈癌单克隆抗体（Au14-1)对22种人妇科疾患（共46例）病理活检标本作辣根过氧化物酶抗辣根过氧化物酶法（PAP）染色，发现10例宫颈鳞状细胞癌中，8例阳性；2例阴性。6例不同类型的宫颈腺癌中4例为阳性，2例可疑；而宫内膜腺癌和慢性宫颈炎中的腺上皮及宫颈鳞癌中残余的正常腺体均为阴性，表明Au14-1可用于临床作为鉴别宫内膜腺癌与宫颈腺癌的一项较好的参考指标。     

乙型肝炎病毒表面抗原Shikate地衣红染色法

在活检及尸检的肝组织材料中鉴别是否携带HBsAg,用免疫荧光、免疫酶标…的方法特异性很强,但其操作复杂,且基层单位缺乏上述检查方法的特殊仪器和设备。笔者对活检及尸检标本中的陈旧与新鲜肝组织用地衣红染色法观察HBsAg,效果良好,与临床血液检测HBsAg基本相符。     

不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果比较

目的：探讨不同染色方法检测HBsAg阳性患者肾组织中乙肝抗原的效果。方法收集血清HBsAg阳性的肾穿刺患者77例,分别采用免疫荧光法和改良免疫组化法检测肾组织HBsAg及HBcAg阳性表达情况。结果继发于乙肝病毒感染相关的肾小球肾炎（HBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为48.1%及100%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法敏感性为22.2%及70.4%,差异均有统计学意义（均P＜0.01）。非乙肝相关性肾小球肾炎（NHBV- GN）中,HBsAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为98%及96%;HBcAg免疫荧光法及改良免疫组化法特异性为100%及96%,两种方法特异性均较高,差异均无统计学意义（均P＞0.05）。乙肝抗原血症者肾组织HBsAg及HBcAg改良免疫组化法平均阳性强度明显高于免疫荧光法（P＜0.01）。血清乙肝“大三阳”、DNA复制者HBsAg改良免疫组化法检测阳性强度均明显高于“小三阳”及DNA不复制者（P＜0.05或0.01）。结论改良免疫组化染色法提高了乙肝抗原血症者肾组织乙肝抗原的检出率及肾小球疾病尤其是HBV- GN诊断的准确性,同时HBsAg阳性强度还可预测乙肝感染严重程度。     

HBsAg携带者肝组织的免疫病理学研究

应用免疫组织化学染色法从1668例尸检肝组织中检出 HBsAg 携带者(简称携带者)78例,检出率4.7%.以8～12岁及20～29岁组携带率较高.97例生前曾检测过血清 HBsAg 的病例中,血清、肝组织 HBsAg 均阳性者16例;血清阳性、肝组织阴性者1例;血清阴性、肝组织阳性者2例.携带者肝组织的病理变化:肝组织正常和非特异反应性炎占84.6%,慢性迁延性肝炎占7.7%,慢性活动性肝炎占2.6%,早期肝硬化占5.1%.本文中12岁以下携带者 HBcAg 阳性率明显高13岁以上携带者(P<0.025).     

HBeAg阴性和阳性慢性乙型肝炎病人肝脏组织学变化

目的比较HBeAg阴性和阳性慢性乙型肝炎病人肝脏组织学变化情况。方法对266例行肝活检的慢性乙型肝炎病人行免疫组化检测肝组织HBsAg、HBcAg的变化;采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清前S1蛋白、HBV—DNA、HBsAg等的变化。按肝组织炎症、纤维化程度分组,比较HBeAg阳性和阴性的分布,并比较肝组织中HBsAg、HBcAg在HBeAg阳性和阴性组的阳性率。结果HBeAg阳性和阴性组肝组织炎症程度分布比较差异有显著性（Uc=2．716,P〈0．01）。HBeAg阳性和阴性组肝组织纤维化程度分布比较差异无显著性（Uc=1．493,P〉0．05）。HBeAg阳性组血清前S。蛋白、HBV—DNA及肝组织中的HBsAg、HBcAg的阳性率明显高于HBeAg阴性组,差异有极显著性（χ^2=8．47～41．29,P〈0．01）。结论HBeAg阳性组肝组织炎症程度高于阴性组。HBeAg阳性组血清前s。蛋白、HBV—DNA及肝组织中的HBsAg、HBcAg等病毒复制指标的阳性率明显高于HBeAg阴性组。     

新疆肝病患者HDV、HBV感染的免疫组化研究

作者以直接酶标法及过氧化物酶-抗过氧化物酶法(PAP法)对145例新疆各类肝病患者的肝组织进行HDV、HBV感染的免疫组化研究,各类标本中,HBsAg及HBcAg的合计检出率为39.3％,HDAg在HBV血清学标记阳性患者肝组织中的检出率为3.5％。胞浆型HBcAg表达多见于肝组织病变明显区域,HDAg在肝炎后肝硬化组的检出率明显高于HBV感染非肝硬化组(P<0.025),提示肝炎后肝硬化与HDV感染有关。     

区分肾淀粉样变类型的病理染色方法比较

目的分析3种特殊染色及免疫染色方法对区分肾淀粉样变类型的准确性、灵敏度和着色强度的影响,以提高临床的诊治
水平。方法选择30例肾淀粉样变患者的病理切片,采用3种酸化刚果红染色和5种抗原修复法,对轻链蛋白（κ、λ）、淀粉样蛋白
A等指标进行冰冻组织及石蜡组织的免疫荧光、免疫组化染色。使用IPP图像分析系统进行半定量分析及荧光着色半定量分
析,观察比较阳性部位着色的准确性、灵敏度和着色强度效果。结果酸化甲醇刚果红染色法优于酸化Bennhold’s刚果红染色
法、酸化Alkaland’s刚果红染色法,IPP半定量分析冰冻组织的免疫荧光、免疫组化优于石蜡组织（P=0.02）。荧光半定量分析着
色强度相差一个+左右;石蜡组织暴露抗原的方法中蛋白酶K消化优于抗原热修复、胰酶或胃酶消化（P=0.01）。结论酸化甲醇
刚果红染色法在肾组织淀粉样变部位的阳性着色准确性、灵敏度、着色强度和重复率均优于Bennhold’s 刚果红染色法、酸化
Alkaland’s刚果红染色法。起到初步分型及辅助验证免疫荧光染色结果的作用;进行冰冻组织轻链蛋白（κ、λ）及淀粉样蛋白A
免疫荧光染色,更有利于肾淀粉样变的准确分型,如果无冰冻组织也可选用蛋白酶K消化石蜡组织免疫荧光染色。
     

肝活检标本中检测乙型肝炎表面抗原方法的比较

应用地衣红、醛复红染色、免疫荧光和双桥PAP法,对显示石蜡切片肝活检标本中的HBsAg进行了比较。结果表明组化染色中地衣红染色简便、实用。双桥PAP染色显示HBs-Ag阳性率高达90％,且方法具有特异性、敏感性。     

HBsAg和HBcAg在慢性乙肝病毒携带者肝组织中的表达

目的 观察慢性乙肝病毒携带者血清标志物与肝组织HBcAg表达的相关性.方法 对80例慢性乙肝病毒携带者行快速经皮肝穿刺术取肝组织,免疫组化染色检查HBsAg,HBcAg.荧光定量PCR法检测血清HBV DNA.ELISA法检测血清HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc. 结果 血清HBsAg均阳性,血清HBeAg阳性者48例、HBeAg阴性者32例,血清HBV DNA阳性者50例、HBV DNA阴性者30例.肝组织HBsAg阳性者68例、肝组织HBcAg阳性者43例. 结论 慢性乙肝病毒携带者肝组织HBcAg表达与血清标志物HBV DNA、HBeAg有相关性.     

抗-HBc及抗-HBcIgM试剂盒的初步研制

本文介绍用简便方法从HBsAg阳性尸肝中提取HBcAg。用PEG沉淀、DEAE·A_(50)五管提纯法从抗-HBc阳性血清中纯化抗-HBc及市售马抗人IgM诊断血清;用过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶,制成抗-HBc及抗-HBcIgM试剂盒,经与Abbott抗-HBc试剂盒比较结果相符,应用于临床获得良好效果。     

肝病时肝组织内纤维连接蛋白的免疫组织化学研究及意义

本研究采用较为敏感的免疫组织化学技术——过氧化物酶抗过氧化物酶复合体法(PAP法),应用鼠抗人纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)单克隆抗体检测了46例不同肝病肝组织内的FN分布。发现胞浆FN阳性者13例,占28.26％。细胞阳性率及阳性染色强度在不同肝病各不相同,以慢迁     

乙肝病毒标志阴性慢性病毒性肝炎患者HBV-DNA及肝组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义

目的:探讨HDVM阴性慢性肝炎患者血清HBV-DNA及组织中HBsAg、HBcAg检测的临床意义。方法:对24例原因不明的慢性肝炎患者应用酶联免疫,吸附试验(ELISA法)检测血清HBV-M(HBsAG、抗HBS、HBcAg、抗HBc、抗HBc),抗HAV-IGM,抗HCV-IgMI、gG,抗HDV-IgMI、GG,抗HEV-IGMI、GG,抗EBV-IGM,抗CMV-IgM,抗TTV-IgM:应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术对患者进行血清中乙型肝炎病毒基因(HBVDNA)定量检测;应用免疫组化法,通过肝组织活检测定患者肝组织中HBsAg、HBcAg的表达情况。结果:24例HBVM阴性肝病患者中,6例可检测到HBV-DNA,其中5例肝组织中HBsAG、HBcAg同时阳性,1例HBsAg(+)、HBcAg(-);18例血清HBV-DNA阴性患者中用肝组织活检者3例,其中1例肝组织中HBsAg、HBcAg同时阳性。结论:HBVM阴性不能排除乙型肝炎病毒感染,应结合血清HBV-DNA测定及肝组织中HBcAg、HBcAg的检测,以防漏诊、误诊。     

经相同肝实质细胞体积分摊的血清HBsAg水平与肝组织病理进展相关而与HBeAg状态无关

【目的】回顾性研究HBeAg阳性与HBeAg阴性慢性乙型病毒性肝炎之间,血清HBsAg的水平以及经相同肝实质细胞体积（肝细胞数量）分摊计算后血清HBsAg水平的异同。【方法】选取中山大学附属第三医院168例因病情需要而进行了肝穿刺活检及HBsAg定量检测的慢乙肝患者为研究对象。比较其HBeAg阳性与HBeAg阴性之间的血清HBsAg水平,以及经相同肝实质细胞体积（肝细胞数量）分摊计算后的血清HBsAg水平。【结果】血清HBsAg水平在HBeAg阳性和HBeAg阴性慢乙肝患者之间的差异有统计学意义（P=0.028）;而经相同肝实质细胞体积（肝细胞数量）分摊计算后的血清HBsAg水平,在HBeAg阳性和HBeAg阴性慢乙肝之间的差异无统计学意义（P=0.073）。无论HBeAg阳性或HBeAg阴性,其血清HBsAg水平的高低与肝组织炎症程度无相关性（HBeAg阳性：rs=0.020,P=0.876;HBeAg阴性：rs=0.037,P=0.711）;与肝纤维化进展无相关性（HBeAg阳性：rs=0.087,P=0.488;HBeAg阴性：rs=0.144,P=0.148）。而经相同肝实质细胞体积（肝细胞数量）分摊计算后的血清HBsAg水平与肝组织炎症程度呈正相关（HBeAg阳性：rs=0.309,P=0.012;HBeAg阴性：rs=0.389,P<0.001）;与肝纤维化进展呈正相关性（HBeAg阳性：rs=0.490,P<0.001;HBeAg阴性：rs=0.599,P<0.001）。【结论】经相同肝实质细胞体积（肝细胞数量）分摊计算后的血清HBsAg,而非血清HBsAg水平,在HBeAg阳性或HBeAg阴性慢乙肝之间无差异;且均与肝组织炎症分级和纤维化分期程度呈正相关。     

ELISA法检测HBsAg错误结果分析

临床多采用ELISA双抗体夹心法,检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg),其基本原理:包被抗原或抗体后,通过抗原抗体免疫学反应使酶标抗体结合到载体上,使结合的酶标抗体和游离的酶标抗体分离,洗去游离的酶标抗体,加人底物,生成有色产物,在一定温度下一定时间后终止反应,根据颜色深浅进行定性或定量分析.在ELISA方法中,应用辣根过氧化物酶(HRP)作为标记酶最普及,用此方法检测HBsAg时,常出现一些错误的结果即假阳性或假阴性,本文对产生假阳性或假阴性的错误结果进行分析如下.