Pre－S_（2）蛋白T细胞识别的精细特异性

本文采用合成交叠肽扫描的方法在６种不同Ｈ－２单倍型小鼠确定了ｄ／ｙ二种亚型Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别部位。发现：（１）在所观察的６种同类系小鼠均存在对Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白反应的亚型特异性，这可能与Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白分子Ｃ末端的多态性有关；（２）Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别部位在５种同类系小鼠位于Ｃ末端３２个氨基酸残基顺序内，在另一种同类系小鼠则位于Ｎ末端顺序，这与我们先前的理论观测结果相一致；（３）进一步分析发现：不同Ｈ２单倍型小鼠对Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｔ细胞识别是ＭＨＣ分子依赖的；（４）２４－５５肽段的圆二色性表明该肽段内存在一个α－螺旋，可能是其作为Ｔ细胞识别部位的结构基础。以上结果对于设计新一代乙型肝炎疫苗有意义。     

Pre—S（2）蛋白B细胞表位的精细特异性

采用我室建立的短肽点免疫结合试验确定Ｐｒｅ－Ｓ（２）蛋白Ｂ细胞表位的精细特异性。结果发现Ｐｒｅ－Ｓ（２）蛋白的Ｂ细胞识别部位（１４－２４）可进一步区分为两个部分交叠的表位：１４－２１和１８－２４，从而绘出了Ｐｒｅ－Ｓ（２）蛋白Ｂ细胞表位图谱。这对设计新一代疫苗及诊断试剂有指导意义。     

Pre－S_（2）蛋白B细胞表位的精细特异性

采用我室建立的短肽点免疫结合试验确定Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白Ｂ细胞表位的精细特异性。结果发现Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白的Ｂ细胞识别部位（１４～２４）可进一步区分为两个部分交叠的表位：１４～２１和１８～２４，从而绘出了Ｐｒｅ－Ｓ＿（２）蛋白Ｂ细胞表位图谱。这对设计新一代疫苗及诊断试剂有指导意义。     

老年慢性乙型肝炎患者肝组织内Pre－S2蛋白的表达及意义

用免疫组织化学方法和单克隆抗体检测５７例老年慢性乙肝患者肝组织内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白和ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｇ，并与６３例非老年患者进行比较。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白总阳性率为７５．４％（４３／５７），非老年组为５４．０％（３４／６３），两组差异显著。老年组Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性细胞数非常显著地高于非老年组，膜型Ｐｒｅ－Ｓ２阳性率９３．０％（４０／４３），Ｐｒｅ－Ｓ２与ＨＢｓＡｇ符合占９１．２％（５２／５７）。４３例Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白阳性标本中血清ＨＢｅＡｇ阳性５３．５％（２３／４３），ＨＢｅＡｂ阳性４１．９％（１８／４３）。认为老年慢性乙肝肝内Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白表达高于非老年的，Ｐｒｅ－Ｓ２蛋白免疫反应与ＨＢｓＡｇ相似并可能在ＨＢｓＡｇ免疫特性中起作用。     

一种新的病毒蛋白Th细胞表位预测方法

调查了病毒蛋白６３个Ｔｈ细胞表位以分析其氨基酸顺序特征。一个由５个氨基酸组成的模板出现于９６％的表位中。将此模板应用于ＨＢｓＡｇ／Ｐ２５（ａｙｗ）生Ｐｒｅ－Ｓ（２）蛋白的Ｔｈ细胞表位预测，发现所有已经实验证实的表位均可由该模板识别出。提示该模板可能是病毒蛋白Ｔｈ细胞表位的一种重要顺序特征，并可应用于病毒蛋白Ｔｈ细胞表位的预测中。     

人参总皂甙对造血生长因子产生的影响

本文应用造血祖细胞体外培养术和白细胞介素（ＩＬ）生物活性检测术，观察经人参总皂甙（ＴＳＰＧ）刺激的小鼠脾细胞、腹腔巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的集落刺激因子（ＣＳＦ）、ＩＬ－２和ＩＬ－６生物活性。结果表明：ＴＳＰＧ刺激组的ＣＳＦ和ＩＬ－６活性均显著高于对照组，ＴＳＰＧ刺激的脾细胞培养上清液的ＩＬ－２活性明显高于对照组，而ＴＳＰＧ刺激的巨噬细胞和成纤维细胞培养上清液的ＩＬ－２活性与对照组无显著性差     

T细胞受体Vβ基因在识别HSV—2过程中的表达水平和特点

本课题主要研究Ｔ细胞受体（ＴＣＲ）识别抗原后Ｖβ基因发生重排，ｍＲＮＡ表达水平改变。用紫外线处理的单纯疱疹病毒－２型（ＨＳＶ－２）、ＨＳＶ－２及ＰＨＡ分别感染或刺激正常人的ＰＢＬｓ，培养４～６天后，提取ｍＲＮＡ，并采用ＲＴ－ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交发现识别ＨＳＶ－２的ＴＣＲＶβ２、６、７、８基因在体外选择性扩增。在采用ＨＳＶ－２攻击皮肤病患者发作期、缓解期以及再发作期的ＰＢＬｓ时，发现ＴＣＲＶβ基因表达随着病程变化而改变，尤其Ｖβ７亚家族表达水平显著高于其它亚家族基因，这显示了ＴＣＲＶβ基因的变化是恒定特异性的。     

SLE病人外周血Bcl—2／JH基因重排检测的意义

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测３１例ＳＬＥ病人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象和流式细胞仪间接双标记法分析其Ｔ（ＣＤ３）、Ｂ（ＣＤ１９）细胞Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果显示，ＳＬＥ病人Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于正常人（４２．９５％±２８．４７％对比９．９４％±４．９６％，Ｐ＝０．０００４），尤其以活动期ＳＬＥ病人为明显，而Ｂ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达与正常人之间并无统计学差异（７９．２１％±１０．６９％对比８１．９６％±６．９７％；Ｐ＝０．４６０２）。７例ＳＬＥ病人具有典型的Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排（占２２．５８％），且均为ＳＬＥ活动期病人，其Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白表达明显高于无基因重排的ＳＬＥ病人，其Ｂ细胞Ｂｃｌ－２表达并无差异（Ｐ＞０．３９０５）。说明Ｂｃｌ－２／ＪＨ基因重排现象可见于ＳＬＥ，并与Ｔ细胞Ｂｃｌ－２蛋白高表达有关，表明细胞凋亡抑制基因Ｂｃｌ－２在ＳＬＥ发病机制中具有重要作用。     

S层介导嗜水气单胞菌粘附HEp—2细胞

用ＨＥｐ－２细胞作为体外模型，比较嗜水气单胞菌Ｓ层缺失突变株ＴＭ６及其亲本菌株Ｊ－１的粘附力，结果表明Ｊ－１株对ＨＥｐ－２细胞的粘附力明显高于ＴＭ６株。用Ｊ－１株Ｓ层蛋白抗体ＰＲ的Ｆａｂ片段预先与细菌反应，可使Ｊ－１株的粘附菌数下降，且呈剂量依赖关系，但对ＴＭ６株的粘附菌数无影响。用纯化的Ｊ－１株Ｓ层蛋白预先与ＨＥｐ－２细胞作用，亦能抑制Ｊ－１株对ＨＥｐ－２细胞的粘附，对ＴＭ６株也无影响。同时，将ＨＥｐ－２细胞与纯化的Ｊ－１株Ｓ层蛋白混合并孵育，用嗜水气单胞菌ＴＦ７株Ｓ层蛋白抗体ＰＦ１作免疫酶分析，结果表明Ｓ层蛋白可结合在ＨＥｐ－２细胞上。综上可见，Ｓ层是嗜水气单胞菌的一种粘附素。可介导嗜水气单胞菌粘附ＨＥｐ－２细胞。     

Pre－S_2抗原与PHSAR在乙肝诊断中的相关性比较

Ｐｒｅ－Ｓ_２抗原与ＰＨＳＡＲ在乙肝诊断中的相关性比较程新宪，易忠群，赵惠芳，魏瑞全（解放军３２３医院中心实验室，西安７１００５４）前Ｓ２抗原（Ｐｒｅ－Ｓ２）和聚合人血清白蛋白受体（ＰＨＳＡＲ）均为乙肝病毒（ＨＢＶ）复制的指标。它们都位于ＨＢｓＡｇ的?..     

实验性隐睾诱导小鼠生精细胞凋亡的研究

目的 研究手术隐睾所致成年小鼠生殖细胞凋亡及相关调节因子ｂｃｌ－２、ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、变化。方法 以末端脱氧核糖核酸转移酶介导的ｄＵＴＰ缺口末端标记法（ＴＵＮＥＬ）检测凋亡的生殖细胞,生物素－抗生物素蛋白ＤＣＳ体系间接免疫荧光法检测Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ蛋白在曲细精管中的定位、分布。结果 隐睾术后３ｄ,手术侧睾丸重量及细胞凋亡数量与对侧地无明显区别。而６￣１５ｄ,睾丸重量明显减轻,凋亡细胞     

ANALYSIS OF MOTIF IN TCR Vβ HV4 SEQUENCES BINDING SUPERANTIGEN TSST-1

首先对４１种人和小鼠的Ｔ细胞受体β链可变基因编码肽段（Ｖβ）的氨基酸序列进行多序列对准，就Ｖβ之第四高变区（ＨＶ４）片段进行比较，分析与超抗原毒素休克综合征毒素－１（ＴＳＳＴ－１）结合的四种Ｖβ（小鼠Ｖβ３、Ｖβ１５、Ｖβ１７和人Ｖβ２）之ＨＶ４序列内是否存在特定的氨基酸残基排列模式。结果发现：小鼠Ｖβ３和Ｖβ１７的ＨＶ４具有特异的ＲＦＳＡＸＣＸＳＮＳ模式，而小鼠Ｖβ１５和人Ｖβ２的ＨＶ４则含独特的ＫＦＸＩＸＨ模式。提示：与ＴＳＳＴ－１结合的四种Ｖβ所对应的Ｔ细胞识别表位可能不止一个。     

系统性硬化病血管内皮活性因子测定的临床意义

目的：从蛋白分子水平探讨血管内皮活性因子同系统性硬化病的关系。方法：选择４２例ＳＳｃ病人采用放射免疫测定法检测血浆内皮素（ＥＴ）、血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、６－酮－前列腺素Ｆ１α（６－Ｋ－ＰＧＦ１α）,采用Ｇｒｉｓｓ方法检测血浆一氧化氮（ＮＯ）水平,关免疫法检测细胞间粘附分子－１（ＩＣＡＭ－１）、选择素（Ｐ－Ｓ）。结果;所有ＳＳＣ患者均存在高ＥＴ、ＴＸＢ２、ＩＣＡＭ－１、Ｐ－Ｓ血症,存在低ＮＯ、６－     

北方汉族群HLA—A2亚型分布及p53的合成肽体外诱导C …

目的 研究北方汉族人群中ＨＬＡ－Ａ２亚型的分布及树突状细胞提呈基于ｐ５３基因合成肽体外诱导特异性Ｔ杀伤细胞（ＣＴＬ）反应的影响。方法 利用ＰＣＲ－ＳＳＰ技术分析北方汉族人群中ＨＬ－Ａ２基因型及其亚型的分布,并在适当Ａ２亚型背景下,选择与ＨＬＡ－Ａ２０１分子具有高亲和性的２个来自ｐ５３蛋白及１个来自ＨＢＶ核心抗原的蛋白合成多肽,将其分别负载到经体外ＧＭ－ＣＳＦ＋ＩＬ－４刺激增殖的人脐带血树突状细胞（     

人α—干扰素与乙型肝炎病毒前S2嵌合蛋白的表达？…

目的 重组表达人α－干扰素与乙型肝炎病毒前Ｓ２融合蛋白（ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２）,探索治疗ＨＢＶ感染的特异性免疫药物。方法 采用聚合酶链反应（ＰＣＲ０技术扩增出人ＩＦＮ－α２ｂ和ＨＢＶ Ｐｒｅ Ｓ２基因片段,分步克隆获取融合基因,构建ｐＢＶ－ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２重组表达载体,转化Ｅ．ｃｏｌｉ后诱导表达ＩＦＮ－Ｐｒｅ Ｓ２融合蛋白。结果 在Ｅ．ｃｏｌｉ中表达了相对分子质量为２７０００的目标蛋白,后者以     

T-AK细胞和IL-2脂质体联合硒酸酯多糖抗白血病效应的研究

目的研究抗ＣＤ３单克隆抗体与ＩＬ－２共同诱导的Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体（Ｌ－ＩＬ－２）联合硒酸酯多糖（ＫＳＣ）对Ｌ１２１０小鼠白血病的治疗作用。方法用ＤＢＡ／２小鼠建立Ｌ１２１０白血病模型，正常小鼠脾细胞诱生制备Ｔ－ＡＫ细胞，按设计方案转输Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体，ＫＳＣ灌胃，检测ＮＫ细胞活性、脾淋巴细胞增殖活性和ＩＬ－２诱生水平，观察荷瘤小鼠生存期。结果Ｌ１２１０白血病小鼠的免疫功能急剧降低，生存期为１６．４３±１．９２天；转输Ｔ－ＡＫ细胞（５×１０６）和Ｌ－ＩＬ－２（１０４Ｕ／ｋｇ）能部分逆转白血病小鼠低下的细胞免疫功能，生存期延长（２４．７８±３．９４天），并有１４．３％小鼠长期存活；ＫＳＣ（４０ｍｇ／ｋｇ）对Ｔ－ＡＫ／Ｌ－ＩＬ－２的抗白血病作用有明显的增强效应，荷瘤小鼠细胞免疫功能进一步增强，生命延长率、长期存活率分别提高３６％和９９．９％。结论硒酸酯多糖具有生物反应调节剂（ＢＲＭ）样作用；以应用Ｔ－ＡＫ细胞和ＩＬ－２脂质体为主体，硒酸酯多糖为辅佐的生物治疗方案对白血病小鼠具有显著的免疫抑瘤作用     

绿茶儿茶素体内增强小鼠的肿瘤免疫反应

研究绿茶儿茶素（Ｇｒｅｅｎｔｅａｃａｔｅｃｈｉｎ，ＧＴＣ）在小鼠体内对淋巴瘤Ｌ５１７８Ｙ免疫反应的影响。结果表明，ＧＴＣ能（１）促进对Ｌ５１７８Ｙ产生免疫反应的小鼠细胞的特异性增殖，这一作用在ＧＴＣ２ｍｇ／ｄ灌喂的小鼠尤为显著，增殖作用比不灌喂的高６～１０倍；（２）加强特异性ＣＴＬ的诱导；（３）增加ＩＬ－２分泌和ＩＬ－２ｍ－ＲＮＡ表达；（４）培强ＮＫ细胞活性。ＧＴＣ上述作用可能与降低巨噬细胞的抑制     

TSST—1合成肽之超抗原T细胞表位的Vβ特异性鉴定

对两个含有超抗原Ｔ细胞表位的ＴＳＳＴ－１交叠肽之Ｖβ特异性进行了鉴定。结果显示：两合成肽均具备天然ＴＳＳＴ－１分子四种人和小鼠Ｖβ特异性的两种（人Ｖβ２和小鼠Ｖβ１５），表明：两合成肽所含有的超抗原Ｔ细胞表位是ＴＳＳＴ－１特异性的；同时，两合成肽Ｖβ特异性的一致性，对它们的超抗原Ｔ细胞表位可能位于两肽共同序列内的推论无疑是一个有力的佐证。     

哺乳动物的几种培养细胞的动粒蛋白的研究

用来自人类硬皮病中一种称为ＣＲＥＳＴ综合征的自身免疫性疾病病人的抗动粒抗体血清和蛋白质免疫印迹技术，研究了来源于人（ＨＬ６０细胞，ＨｅＬａ细胞以及外周血淋巴细胞）和小鼠（ＮＩＨ３Ｔ３细胞，转化的ＬＡ９０细胞，ＴＣ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞）的６种培养细胞的动粒蛋白。用间接免疫荧光法显示此种ＡＣＡ血清对哺乳动物培养细胞的动粒有特异的染色反应。此种血清在上述细胞中共识别出６种动粒蛋白，我们命名为ＡＡ１（１７     

原癌基因HER2／neu表达产物p185蛋白免疫原性研究

用表达ｐ１８５蛋白ＨＥＲ２／ｎｅｕ转基因３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞裂解物免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，经３次免疫后，免疫小鼠脾细胞对表达ｐ１８５蛋白的３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞呈现较强的增殖反应（平均刺激指数分别为ＳＩ＝３．１５±１．８８），而对未转染ＨＥＲ２／ｎｅｕ基因的３Ｔ３细胞的应答较弱（ＳＩ＝１．１４±０．９７）。并检测到１号免疫鼠脾细胞对３Ｔ３－ＨＥＲ２／ｎｅｕ细胞有特异杀伤作用。免疫鼠血清中出现高水平的抗ｐ１８５抗体（ＯＤ均值＝１．０２±０．１６），较正常对照组（ＯＤ均值＝０．３６±０．１０）有显著差异（Ｐ＜０．００１），表明ＨＥＲ２／ｎｅｕ表达产物ｐ１８５蛋白具有免疫原性，用于免疫小鼠可诱导出对ｐ１８５蛋白的特异免疫应答反应。