鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响

目的 观察鸡蛋卵黄免疫球蛋白IgY对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响.方法 用鸡卵黄免疫球蛋白IgY经口灌胃,观察小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结果 鸡卵黄免疫球蛋白IgY具有提高小鼠单核吞噬细胞碳粒廓清率及增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬能力.结论 鸡卵黄免疫球蛋白IgY能提高小鼠单核吞噬细胞吞噬功能,具有增强小鼠免疫功能的作用.     

柴葛颗粒剂对小鼠免疫功能的影响

研究柴葛颗粒剂对小鼠免疫功能的影响。方法；巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数镜检计算，免疫器官重量的测定；淋巴细胞Ｅ花结形成的测定，分泌细胞溶血空斑ＱＨＳ法测定我光度法血清溶血素ＩｇＧ，ＩｇＭ含量。结果；柴葛颗粒三个剂量都能增加小鼠吞噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，并呈效关系，能明显增加正常小鼠脾重，Ｅ花结数，与盐水组合组相比有显著性差异，能增加小鼠重量。     

鸡卵黄免疫球蛋白Y的性质

用ＥＬＩＳＡ技术研究了鸡卵黄免疫球蛋白Ｙ（ＩｇＹ）对温度、酸碱度、胃蛋白酶、胰蛋白酶及反复冻融的稳定性。结果表明：ＩｇＹ具有良好的热稳定性，对酸碱具有一定的耐受力，对胃蛋白酶具有良好的抵抗能力（ｐＨ〉４），对胰蛋白酶非常敏感，经１ｈ酶解处理，ＩｇＹ的结合活性完全丧失，ＩｇＹ具有很好的耐反复冻融的特性，即使经过５次反复冻融，其抗原结合活性也几乎未受损失。     

卵黄免疫球蛋白在医学领域中的应用

卵黄免疫球蛋白(IgY)是鸟类、两栖类和爬行类动物的主要免疫球蛋白.IgY稳定性好,具有不激活补体系统、不与类风湿因子和蛋白A、G结合等免疫学特性,且产量高、易提取纯化.该蛋白已广泛应用于兽医学、功能食品和生物制品等方面,且在疾病预防控制和治疗方面开发潜力广阔.本文就从IgY的生物学特性,以及其在免疫诊断和免疫治疗方面的应用作一综述.     

核酸疫苗制备卵黄免疫球蛋白研究进展

卵黄免疫球蛋白（IgY）由于其独特的分子结构和稳定性能,使得IgY的制备成为抗体领域的研究热点。核酸疫苗作为一种新型疫苗,在生产成本、免疫剂量和免疫保护力等方面比大多数传统疫苗更具有优势。核酸疫苗制备IgY结合了两者的优点,比常规免疫方法更具有优势,产生的IgY适用范围也更广。本文综述了一种经济、快速的IgY制备方法：核酸疫苗制备IgY。     

绿脓杆菌鸡卵黄免疫球蛋白体外抑制绿脓杆菌试验研究

目的：研究抗绿脓杆菌鸡卵黄免疫球蛋白体外抑制绿脓杆菌作用。方法：200cuf/ml的绿脓杆菌与不同量的抗绿LgY(0.20、40、70、125mg/ml）混合。在4℃冰箱中放置24小时,用倾注法培养,计算菌落数。结果40mg/ml抗绿脓杆菌IgY有抑菌作用（P＜0．05）,并随抗绿脓杆菌IgY量的增加,细菌菌落数减少。结论：抗绿脓杆菌IgY与细胞结合,抑制细菌生长。     

板党多糖对烧伤大鼠免疫功能的影响

目的 研究板党多糖对烧伤大鼠免疫功能的影响.方法 将30只Wistar成年大鼠随机分为正常对照组、烧伤组、板党多糖组.将烧伤组和板党多糖组大鼠背部皮肤造成体表面积(BSA)20%深Ⅱ度烧伤模型,板党多糖组给予板党多糖治疗.于5d后测定吞噬细胞功能及血浆免疫球蛋白含量.结果 板党多糖组可以显著提高大鼠腹腔吞噬细胞的吞噬能...     

提纯鸡卵黄免疫球蛋白IgY方法的研究

目的:优化抗幽门螺杆菌蛋黄免疫球蛋白IgY提取方法.方法:比较硫酸铵盐和饱和硫酸铵2种方法对卵黄除脂效果的影响,并采用SDS-PAGE对提取产物进行鉴定.结果:pH5.1水稀释法加盐析法(两步硫酸铵法)除脂效果相对较好,获得IgY纯度及得率均较高.结论:水溶稀释法加盐析法(两步硫酸铵法)制备lgY具有纯度高、得率高、特异性强及利用小体积样品获得大量纯化蛋白的优点.     

鸡卵黄抗体的制备及其不均一性

介绍了免疫期卵黄液中白蛋白（牛）抗体效价和亲合力的变化。研究了ＰＨ对稀释卵黄液去脂效果，以及硫酸铵浓度对ＩｇＹ浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白ＩｇＹ的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和ＩｇＹ盐析的最适合条件分别是ＰＨ５．１和２．２ｍｏｌ／Ｌ。经免疫亲和柱层析或金属螯合亲和柱层析后，白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体，还     

p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

目的制备抗p53蛋白卵黄抗体。方法原核表达p53融合蛋白,纯化后免疫产蛋母鸡。结果融合蛋白能有效刺激母鸡产生抗体,末次免疫后其卵黄抗体滴度达到1∶106,并且能维持较长时间。结论本文介绍的方法是一种简便、经济、特异、高效、均一、来源充足的抗体产生方法。     

p53蛋白的原核表达及其鸡卵黄抗体的制备

目的 制备抗p53蛋白卵黄抗体。方法 原核表达p53融合蛋白，纯化后免疫产蛋母鸡。结果 融合蛋白能有效刺激母鸡产生抗体，末次免疫后其卵黄抗体滴度达到1：10^4,并且能维持较长时间。结论 本文介绍的方法是一种简便、经济、特异、高效、均一、来源充足的抗体产生方法。     

抗白色念珠菌鸡卵黄抗体(IgY)的研制

目的：观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度、来源及稳定性。方法：应用白色念珠菌作为抗原免疫25周龄Leghorn鸡，通过改良水溶法（WD）提取蛋黄中抗体IgY，双紫外光测定抗体含量，SDS-APGE电泳检测抗体纯度，Western blot免疫印迹法测定该抗体来源，ELISA检测热处理后的抗体活性。结果：抗体含量13mg/ml蛋黄液，抗体纯度达到95%，Western blot免疫印迹证明该抗体与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性。ELISA检测热处理后的抗体活性，其具有良好的热稳定性。结论：鸡蛋黄内含有丰富的抗体，通过WD水溶提取法可得到高产量，高纯度的特异性抗体IgY，证明其来源于鸡血清中的IgG，对热具有高度稳定性。     

抗内毒素IgY体外拮抗内毒素效应的实验研究

目的观察抗内毒素鸡卵黄抗体(IgY)在体外拮抗内毒素(LPS)的作用.方法①用不同浓度IgY与LPS直接体外中和作用,检测剩余LPS的量,观察二者的量效关系;②以培养的原代人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,加入一定浓度的FITC-LPS及IgY,观察各时相点细胞的荧光强弱变化;③加入一定浓度的LPS及IgY,观察各时相点培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性变化.结果①当二者浓度比为16:1时,有较好的量效关系;②在4、8、12 h 3个时相点,单纯FITC-LPS结合组细胞均显示较亮的荧光,且强弱没有明显的区别,在IgY拮抗组的3个时相点,荧光均有减弱,以8、12 h较明显;③LDH的活性在LPS攻击8 h后明显升高(P＜0.01),IgY拮抗组LDH的活性在8h后明显降低(P＜0.01).结论在体外,特异性IgY有较强的拮抗LPS的作用.     

虫草多肽对小鼠免疫功能的影响

目的研究虫草多肽对小鼠免疫功能的影响。方法分别以41.7、83.3、166.6mg/kg.BW剂量的虫草多肽给小鼠连续灌胃30d,测定各项免疫指标。结果虫草多肽能提高小鼠的抗体生成细胞数和血清溶血素水平,促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能及腹腔巨噬细胞的吞噬能力。促进小鼠的迟发型变态反应,显著提高小鼠的NK细胞活性。结论虫草多肽具有增强小鼠免疫力功能。     

鸡卵黄抗体Fab'的制备及鉴定

目的鸡卵黄抗体（immunoglobulin Y,IgY）的活性片段Fab’免疫原性低,可口服用于预防胃肠道感染。文中制备并鉴定IgY Fab’片段。方法采用胃蛋白酶水解法制备Fab’,对酶与Igy混和质量比、pH值、酶解时间进行优化;采用SDS．聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—polyacrylamide gel electrophoresis,SDS—PAGE）及Western blot对酶解产物进行鉴定。结果胃蛋白酶：IgY的质量比为1：40,缓冲液pH4．2,酶解时间9h的条件下,可得到无pFc片段的特异性抗体Fab’片段。结论获得制备IgY Fab’的最佳条件,得到的Fab’产量高、纯度高,特异性强,是规模化制备特异性Fab’片段的良好的实验方法。     

抗钩虫特异性卵黄抗体的制备与鉴定

目的 制备并鉴定特异性抗十二指肠钩虫鸡卵黄免疫球蛋白(IgY),为分析抗钩虫IgY抗体的作用奠定基础.方法 制备十二指肠钩虫成虫粗抗原,经皮下和肌肉注射免疫25周产蛋海兰母鸡3次,每只鸡每次的免疫剂量为200 μg,初次免疫后28 d进行加强免疫,加强免疫间隔时间为10 d.水稀释法提取卵黄中的IgY,盐析、透析法纯化IgY,BCA法测定蛋白含量,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot分析.ELISA法动态检测抗体效价,观察抗体效价变化.结果 免疫后55 d的每个鸡蛋能提取40~55 mg IgY,经SDS-PAGE和Western blot分析,纯化的IgY有2条主带,分子量分别是35 ku和60 ku,即IgY的轻链和重链.初次免疫后10 d左右出现抗体,至免疫后50~55 d为高峰,效价达到1 ∶ 10 000以上.IgY与人血清抗体均可识别30 ku处钩虫抗原.结论 十二指肠钩虫成虫粗抗原免疫的海兰母鸡能产生高浓度、高效价、特异性的IgY抗体,为分析抗钩虫IgY抗体的作用奠定了基础.     

Extraction of IgY from egg yolk using a novel aqueous two-phase system and comparison with other extraction methods

Egg yolk is an important source of antibodies. The biggest obstacle for isolation of chicken antibodies (IgY) is the removal of lipids, which are present in abundance in egg yolk. We have used a two-phase system to separate egg yolk. The use of an aqueous two-phase system with phosphate and Triton X-100 made separation of lipids and water-soluble proteins possible. Lipids are extracted into the detergent-enriched top-phase, whereas IgY is isolated in the phosphate-enriched bottom-phase. The phosphate:triton system was characterised and optimised using various experimental designs. For the optimised model, the yield of IgY was kept above 97% (11.1-14.9 mg IgY/g egg yolk recovered). The amount of lipids in the bottom-phase was kept below 25% of the total content in the egg yolk added. Hence, the model described provides a method for extracting the IgY-fraction with a high yield and relatively low lipid content.     

新痹痛灵对小鼠免疫功能的影响

目的 观察新痹痛灵对小鼠免疫功能的影响.方法 将小鼠随机分为空白组、阳性药组、新痹痛灵低剂量组、新痹痛灵高剂量组,通过计算廓清指数,观察新痹痛灵对小鼠非特异性免疫方面的影响;采用血清溶血素试验法以及二硝基氯苯诱导的迟发型超敏反应试验法,观察新痹痛灵在特异性免疫方面的作用.结果 新痹痛灵能调整小鼠的碳粒廓清吞噬指数、减少血清溶血素抗体的生成、抑制迟发型超敏反应的发生.结论 新痹痛灵能不同程度的在非特异性免疫和特异性免疫两个方面有免疫抑制作用.     

抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)卵黄免疫球蛋白(IgY)的制备与性质研究

目的观察鸡卵黄中抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)抗体的含量、纯度、来源及稳定性。方法用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)作为抗原免疫Leghorn鸡;通过改良水稀释法提取卵黄中的IgY;双紫外光波长测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度;Western blot免疫印迹法测定该抗体来源;ELISA检测IgY对温度、酸碱度的稳定性。结果抗体含量13.3 mg/mL蛋黄液,抗体纯度达96%;免疫印迹证明IgY与鸡血清中的IgG具有相同的分子量和抗原性;IgY具有良好的热稳定性,对酸碱具有一定的耐受力。结论改良水稀释法能得到高产量、高纯度的特异性IgY,而且有良好的生物学活性。