卵巢切除大鼠椎体松质骨中IL-1β、IL-6免疫组织化学研究

卵巢切除大鼠椎体松质骨中ＩＬ－１β、ＩＬ－６免疫组织化学研究韩利华，王全平，刘建，朱潇玲绝经后骨质疏松症的发病机制目前尚不清楚，研究发现ＩＬ－１、ＩＬ－６等细胞因子参与骨代谢调节。细胞因子主要通过自分泌与旁分泌的方式参与调控骨的吸收与形成，而对骨质疏...     

密骨颗粒对去卵巢大鼠TGF-β1表达的影响

目的 观察密骨颗粒对去卵巢大鼠TGF-β1表达的影响，探讨其对绝经后骨质疏松症的预防机制。方法 运用切除大鼠双侧卵巢方法建立骨质疏松症模型，应用中药密骨颗粒防治12周，采用双能X线骨密度测定法、Elisa、免疫组化SABC法、反转录聚合酶链方法，分别观察其对实验鼠离体骨密度、血清TGF-β1活性及其在骨组织中的蛋白和mRNA表达的影响。结果 中药密骨颗粒可以显著升高骨密度，提高血清TGF-β1活性，上调其在骨组织中的mRNA和蛋白表达水平，其蛋白广泛表达于胫骨干骺端。结论 中药密骨颗粒可通过调节TGF-βI活性及其mRNA表达水平而对去卵巢大鼠骨质疏松有预防或延缓发生的作用。     

荣骨颗粒对去卵巢大鼠骨质疏松症治疗作用的实验研究

目的 探索补肾中药“荣骨颗粒”治疗骨质疏松症的作用机理。方法 摘除大鼠双侧卵巢，正常喂养3个月后造成骨质疏松大鼠模型，按大、中、小剂量分组并灌服荣骨颗粒，对照组分别灌服己烯雌酚和中药骨疏康。3个月后处死所有大鼠，眼球取血，测定血清骨钙素(BGP)、碱性磷酸酶(ALP)、白介素1(IL-1)、白介素6(IL-6)、雌二醇(E2)。结果 荣骨颗粒能使血清BGP、ALP、IL-1、IL-6含量降低，使血清E2水平升高。结论 该药对骨质疏松症之骨吸收．骨形成偶联具有一定的调节作用；能够抑制IL-1、IL-6的分泌，具有促进雌激素分泌效应或类雌激素样作用。本实验从激素和细胞因子层面初步阐述了荣骨颗粒治疗骨质疏松症的作用机理。     

丙泊酚对大鼠脑缺血-再灌注时TNF-α、IL-1β和IL-6水平的影响

目的探讨脑缺血-再灌注损伤中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6)水平的变化及丙泊酚对它们的影响。方法72只成年Wistar大鼠随机分为三组:A组为假手术组(n=8);B组为对照组(n=32),于缺血前10min腹腔注射生理盐水10 ml/kg,据实验要求再均分为4个亚组,均缺血2 h,再分别灌注1、6、12、24 h;C组为丙泊酚组,于缺血前10 min腹腔注射丙泊酚100 mg/kg,亚组分组同B组。观察血中TNF-α、IL-1β、IL-6的浓度变化和血中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的变化以及光镜下缺血大脑组织病理改变。结果 丙泊酚组的TNF-α、IL-1β、IL-6、MDA含量明显低于对照组(P<0.05),而SOD活性高于对照组。光镜结果提示,丙泊酚组局灶性脑缺血-再灌注损伤轻于对照组。结论丙泊酚抑制脑缺血-再灌注时炎性细胞因子的表达,从而减轻该类细胞因子介导的炎性损伤,具有一定的脑保护作用。     

补充雌激素对卵巢切除大鼠血清皮质醇和IGF-1的影响

目的研究成年雌性SD大鼠于卵巢切除后及再补充雌激素后血清皮质醇和类胰岛素生长因子-Ⅰ(IGF-Ⅰ)的变化。方法成年雌性SD大鼠分为假手术对照组、去势组、去势 补充雌激素组。术后5个月处死,采取血清检测雌二醇、皮质醇及IGF-Ⅰ的水平。结果 大鼠卵巢切除后雌激素水平显著降低(P<0.01),而皮质醇水平明显升高(P<0.05),IGF-Ⅰ无明显变化;应用雌激素治疗,可以显著降低血清皮质醇(P<0.01)和IGF-Ⅰ(P<0.01)的水平。结论 卵巢切除及补充雌激素对大鼠血清皮质醇和IGF-Ⅰ有显著影响。     

益坤精胶囊对去卵巢大鼠骨密度和骨组织中IL-6含量的影响

目的观察补肾中药益坤精胶囊对去卵巢大鼠骨密度的影响,并通过其对骨组织微环境中IL-6含量的影响以探讨其作用机制。方法通过切除大鼠双侧卵巢建立绝经后骨质疏松症模型。3月龄SD雌性大鼠50只,随机分为5组:假手术组、去卵巢组、尼尔雌醇组、中药高、低剂量组。去卵巢术后1 w,用灌胃法给服益坤精胶囊10w,以尼尔雌醇和生理盐水作为对照,观察各组大鼠骨密度及骨形态学的改变,并以RIA法检测各组大鼠骨组织培养液中IL6的含量。结果 与假手术组比较,去卵巢组骨密度显著下降(P<0.01),骨小梁稀疏断裂,骨组织中IL-6含量明显增高(P<0.01)。与去卵巢组比较,治疗组骨密度明显增高(P<0.01),但仍低于假手术组(P<0.05)。骨组织中IL-6含量显著下降(P<0.05)。骨形态学亦显著改善。结论益坤精胶囊能够抑制骨组织微环境中IL-6的产生,而起到抗骨质疏松的作用。     

吡格列酮对去卵巢大鼠IL -1β、IL-6、TNF-α水平的影响

目的 本实验通过观察吡格列酮对去卵巢大鼠体重、血脂、FNS、HOMA-IR、E2、BMD 、BALP及PPARγ2、IL-1β、IL-6、TNF-α的影响,探讨其与绝经后骨质疏松的关系及作用的可能机制。方法 选用144只健康雌性3月龄Wistar大鼠作为研究对象,分为去卵巢组及假手术组,两组分别给予生理盐水、吡格列酮4mg/(kg.d)或吡格列酮20mg/(kg.d),在0、4、8、12w不同时间点各取6只大鼠进行各项生化指标的测定,用DPX双能X线骨密度扫描仪检测实验动物骨量的变化, RT-PCR检测PPARγ2 水平,酶联免疫吸附法测定IL-1β、IL-6、TNF-α、BALP水平。结果 1. 去卵巢组大鼠与假手术组比较,体重、TG、CHO、LDL-C、FNS、HOMA-IR、PPARγ2、IL-1β、IL-6、TNF-α、BALP均升高,E2、HDL-C、BMD下降,差异有统计学意义（P＜0.01）。2. 去卵巢组大鼠以不同浓度吡格列酮干预后PPARγ2呈时间和剂量依赖性上升（P＜0.05）,IL-1β、IL-6、TNF-α及BALP水平呈时间和剂量依赖性下降(P<0.05),同时相关性分析结果证实PPARγ2与IL-1β、IL-6、TNF-α呈负相关(-0.5相似文献   

中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响

目的　研究中药葛根对去卵巢大鼠骨代谢生化指标的影响 ,探讨葛根治疗骨质疏松症的药理作用。方法　采用去卵巢大鼠模型 ,分A去势组、B假手术组、C去势服葛根组、D去势服西药组 (阳性对照组 ,程序治疗 ) ,去势 1个月后C、D组服药 50d ,放免法测定血清雌二醇 (E2 )、邻甲酚酞络合酮法测定尿钙 ,ELISA法测定尿脱氧吡啶啉 (Dpd) ,放免法测定血清骨钙素 (BGP)水平 ,组间进行比较。结果　E2 测定B、C、D组高于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 1 ,P <0 0 0 1 )。尿钙测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 1 )。Dpd测定B、C、D组低于A组 (P <0 0 0 1 ) ,C、D组低于B组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1 )。BGP测定B组低于A组 (P <0 0 1 ) ,C、D组高于A组 (P <0 0 1 ,P <0 0 5) ,同时高于B组(P <0 0 0 1 )。结论　中药葛根有增加E2 ,抑制骨吸收 ,促进骨形成 ,对骨质疏松症有治疗作用     

不同浓度的IL-1β和TGF-β1对大鼠肋软骨细胞的影响

目的:研究人白细胞介素-1β(IL-1β)和转化生长因子-β1(TGF-β1,)对体外培养的SD大鼠肋软骨细胞功能的影响.方法:采用免疫组织化学检测不同剂量IL-1β和TGF-β1作用48h后软骨细胞Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达水平.采用RT-PCR方法检测细胞Ⅱ型胶原、aggrccanase-1,2、aggreean的mRNA的表达水平.结果:IL-1β可以促进软骨细胞aggreeanase-1,2的表达,从而降低多聚蛋白聚糖的含量,破环细胞外基质结构,减少II型胶原的含量,使细胞呈现去分化的表现,对软骨细胞起负性生调节作用.低浓度的TGF-β1对软骨细胞起保护的作用;高浓度的TGF-β1(100ng/m1)在促进蛋白多糖表达的同时也促进软骨细胞蛋白多糖的降解,从而打破软骨的代谢平衡,起负性调节的作用.     

白茅苷对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响

目的观察白茅苷治疗去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞功能和骨量的影响并初步探索可能机制。方法通过双侧去卵巢建立骨质疏松大鼠模型;随后随机分为假手术组(Sham)、去卵巢组(OVX)以及白茅苷组(BMG),每组10只;其中BMG组去卵巢大鼠每天给予白茅苷(20 mg/kg)灌胃治疗;待12周治疗结束后分离培养各组大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),使用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红(ARS)染色并使用蛋白质印迹检测BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1蛋白表达;进一步使用Micro-CT和骨生物力学检测观察治疗效果。结果 OVX组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较Sham组明显降低(P0.05);而经过BMG治疗,BMG组大鼠BMSCs向成骨细胞分化后ALP和ARS染色阳性面积以及BMP-2、Runx2、OPN、OCN、ALP和Col1表达较OVX组明显增加(P0.05)。OVX组股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th较Sham组明显降低,而Tb.Sp则明显升高(P0.05)。BMG组左侧股骨最大载荷和弹性模量、BMD、BV/TV、Tb.N和Tb.Th均明显高于OVX组(P0.05),而Tb.Sp明显低于OVX组(P0.05)。结论白茅苷通过促进BMSCs诱导成骨分化来减少去卵巢大鼠骨骨密度、骨量和骨强度下降。     

骨康对去卵巢大鼠骨源性碱性磷酸酶和胰岛素样生长因子的影响

目的:探讨骨康对去卵巢大鼠血清中骨碱性磷酸酶(BALP)和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的影响,及其治疗骨质疏松症的作用机制.方法:6月龄雌性SD大鼠68只按简单随机方法分为空白组和手术组,分别为22只和46只.空白组行假手术,手术组行卵巢切除术.术后3个月后从两组随机各选出10只大鼠行骨密度检查,以确定造模成功.在确定造模成功后,将手术组中剩下的36只大鼠再随机分为3组,每组12只,分别为手术模型组、雌激素组、中药组.空白组中剩下的12只大鼠为空白对照组.对各组进行灌胃给药治疗,灌胃给药容积为10ml/kg,空白对照组、手术模型组灌服蒸馏水;中药组灌服相应的药物,雌激素组给予尼尔雌醇灌胃.治疗3个月后采取动物血清进行实验指标检测,测定动物血清中E2、IGF-1、BALP含量.结果:雌激素组、中药组血清E2、BALP水平高于手术模型组,其差异有统计学意义(P<0.05).而雌激素组与中药组血清E2水平相比较差异无统计学意义(P0.05).中药组血清IGF-1水平高于手术模型组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:中药骨康能提高去卵巢大鼠血清中雌二醇、胰岛素样生长因子、骨源性碱性磷酸酶水平,间接促进成骨细胞增殖,抑制破骨细胞骨吸收,促进成骨细胞的骨形成功能.     

固本增骨方含药血清对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的观察固本增骨方含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的作用并探讨其可能的作用机制。方法制备固本增骨方含药血清,将大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分为空白血清组、5%、10%、20%、30%浓度含药血清组及传统诱导组,分别对各组大鼠BMSCs进行成骨诱导。4周后进行茜素红染色镜下观察各组红色钙结节数量,Western blotting法分析各组BGP、Runx2的蛋白相对表达量,Real-Time PCR检测各组中BGP、Runx2 mRNA的相对表达量。结果各组BMSCs成骨诱导分化后的形态变化各有特点,茜素红染色后镜下观察,红色钙结节数量随含药血清浓度增加而增加,并且浓度为20%时钙结节数量明显多于其他各组(P<0.01);BGP、Runx2的蛋白及mRNA相对表达量在20%浓度含药血清组达最高,且与其他各组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论固本增骨方含药血清能通过BGP、Runx2的转录与表达促进大鼠BMSCs成骨分化,且在20%浓度为最佳。     

普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及血清IL-6的影响

目的 探讨普萘洛尔对去卵巢大鼠骨密度及对血清IL-6水平的影响。方法 50只健康雌性未交配6个月龄SD大鼠随机分为5组,每组10只:①假手术组(sham);②去卵巢(PVX)后雌激素治疗组(O E);③OVX后普萘洛尔治疗组(O p);①OVX后雌激素 普萘洛尔治疗组(O E P);⑤OVX后安慰剂组(OVX);OVX后1周开始经灌胃给予普萘洛尔8 mg·kg-1·d-1、皮下注射17β-雌二醇20μg·kg-1·d-1,共12周。动物处死时留取第3,4,5腰椎、血清标本,进行骨密度分析及血清IL-6水平测定。结果 O P、O E P、O E组的骨密度较手术组(OVX)明显增高(P<0.05),血清IL-6较OVX组明显下降(P<0.01)。结论 普萘洛尔能有效地预防OVX大鼠的骨丢失,同时降低血清IL-6水平。     

密骨胶囊和健脾方对去卵巢大鼠骨结构和力学性能的影响

目的 观察密骨胶囊、健脾方对大鼠骨结构、生物力学性能的影响.探讨补肾、健脾不同功效的中药复方,对骨结构、生物力学性能作用可能存在的差异性.方法 复制切卵巢大鼠骨质疏松模型,随机分为假切组、模型组、密骨胶囊组和健脾方组,术后12周开始灌胃,灌胃12周后取材.测定股骨骨密度、骨生物力学,观察骨组织形态学、骨超微结构.结果 密骨胶囊能提高切卵巢大鼠股骨骨密度(P＜0.05),提高骨生物力学性能(P＜0.05),改善骨的微结构;健脾方能维持大鼠股骨骨密度(P＞0.05),提高骨生物力学性能(P＜0.05),明显改善骨的微结构.结论 补肾中药复方对骨量的提高、生物力学性能改善方面较健脾方显著,而健脾中药复方较之在骨微结构的改善方面更有优势.     

不同加载速度对大鼠骨生物力学特性的影响

本实验观察了在三点弯曲力学实验中,在不同运动速度（５ｍｍ／ｍｉｎ,２０ｍｍ／ｍｉｎ）的加载条件下,即在不同的加载速度时,大鼠肱骨最大载荷、弹性载荷、最大挠度、弹性挠度、最大应力、弹性应力、最大应变、弹性应变８项骨生物力学指标的变化特点。结果表明：与５ｍｍ／ｍｉｎ加载速度相比较,在２０ｍｍ／ｍｉｎ加载速度下,骨最大载荷、弹性载荷、最大挠度、弹性挠度显著增加（Ｐ＜０．０５）;骨最大应力、弹性应力、最大应变、弹性应变无明显变化。提示：三点弯曲力学实验中,在一定范围内提高加载速度,主要影响骨结构力学特性,而对骨材料力学特性无明显影响     

中西医结合治疗对去卵巢大鼠骨生物力学的影响

目的探讨中西医结合治疗对去卵巢大鼠骨生物力学的影响。方法70只3月龄未交配的雌性SD大鼠腹腔手术切除双侧卵巢,按体重随机分为去卵巢组、17α-炔雌醇组、益坤口服液中剂量组、益坤口服液大剂量组2、益坤小剂量 戊酸雌二醇组、益坤小剂量 17α-炔雌醇组,并设假手术组对照。喂养12周后,分离大鼠股骨,三点弯曲实验法测定最大载荷、最大桡度、弹性载荷、弹性桡度及弹性能量吸收,分析天平称骨量。结果大鼠去卵巢后股骨结构力学特性指标均显著下降,各用药组与OVX组相比均有显著上升,其中中西医结合治疗组更加显著(P<0.01)。结论中西医结合治疗可改善去卵巢大鼠骨的生物力学性能,降低其发生骨折的危险性。     

骨髓间质干细胞经静脉移植对大鼠脊髓损伤后TNF-α、IL-1β mRNA表达的影响

目的研究大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)经静脉移植对脊髓损伤(SCI)后肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法运用改良Allen法制备大鼠脊髓外伤性截瘫模型,假手术组6只,损伤组84只随机分为对照组和rMSCs移植组。对照组和rMSCs移植组、假手术组于损伤后10min经尾静脉分别注射PBS1ml和rMSCs单细胞PBS悬液1ml。移植后3h、6h、12h、24h、3d、7d、14d,应用RT-PCR方法检测损伤大鼠脊髓TNF-α、IL-1βmRNA表达变化情况。结果对照组和rMSCs移植组损伤脊髓TNF-α、IL-1βmRNA表达较假手术组有明显增加(P0.05);rMSCs移植组与对照组比较,TNF-α、IL-1βmRNA表达受到明显抑制(P0.05)。结论 rMSCs静脉移植后能改变脊髓损伤区的微环境,使损伤脊髓局部的TNF-α、IL-1β表达程度降低。这可能是减少脊髓继发性损伤,促进损伤大鼠运动功能恢复的机制之一。     

左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的 基于AMPK/mTOR信号通路探讨左、右归丸对去卵巢大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及作用机制.方法 将60只雌性大鼠随机分为六组,其中一组为空白对照(KB组);一组模拟手术过程,灌胃蒸馏水(SHAM组);其余四组进行卵巢切除术,分别灌胃蒸馏水(OVX组)、补佳乐(BJL组)、右归丸(YGW组)和左归丸(ZGW...     

CO2气腹对荷瘤大鼠IL-1β、IL-6和腹膜巨噬细胞功能的影响

目的采用种植性大鼠肝脏肿瘤模型观察CO2气腹对细胞因子和腹膜巨噬细胞功能的影响.方法荷瘤大鼠32只随机分为4组(n=8)对照组(仅麻醉)、开腹组、免气腹组和CO2气腹组.术后2、24 h收集血清,检测血清中的IL-1β、IL-6水平;术后48 h,收集培养腹膜巨噬细胞,检测巨噬细胞产生的TNF-α水平.结果术后2、24 h开腹组IL-6的水平分别为(57.92±2.06)pg/ml,(35.49±1.15)pg/ml,显著高于CO2气腹组(14.64±0.34)pg/ml,(15.39±0.86)pg/ml,免气腹组(24.75±1.53)pg/ml,(17.10±0.97)pg/ml和对照组(17.75±1.60)pg/ml,(14.55±0.25)pg/ml(P＜0.05).术后2 h开腹组IL-1β的水平为(92.63±4.81)pg/ml,显著高于CO2气腹组(57.94±4.46)pg/ml、免气腹组(58.48±3.20)pg/ml和对照组(58.99±2.30)pg/ml(P＜0.05).CO2气腹组腹膜巨噬细胞产生的TNF-α水平为(35.69±3.54)pg/ml,显著低于免气腹组(68.87±4.08)pg/ml、开腹组(82.96±5.39)pg/ml和对照组(66.45±7.96)pg/ml(P＜0.05).结论腹腔镜术后机体应激反应较小,CO2气腹可能抑制腹膜巨噬细胞的功能.