山西地区TT病毒感染的分子流行病学研究

目的 了解山西地区不同人群中ＴＴ病毒（ＴＴＶ）感染状况及ＴＴＶ山西分离株基因型分布情况。方法 用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对山西地区不同人群血清标本进行检测,分析其基因型。结果 ２４例慢性乙型肝炎患者、３１例非甲￣庚型肝炎患者、５３例职业献血员、１１２例健康产妇中,ＴＴＶ ＤＮＡ阳性率分别为４１．６６％、２９．０３％、５８．４９％、８．９３％;１８例２￣３岁健康儿童血清,１０例ＴＴＶ ＤＮＡ阳性产     

TTV在肝炎患者中的检测及临床意义探讨

目的研究新近报道与丙氨酸转氨酶异常相关的ＴＴＶ在已知和未知病毒性肝炎中的临床意义。方法设计ＴＴＶ部分基因的特异性引物，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法检测了１０４例病毒性肝炎的ＴＴＶＤＮＡ，并对１例ＴＴＶ阳性标本克隆测序。结果ＴＴＶＤＮＡ序列与日本ＴＴＶ部分基因序列相对应位置的核苷酸同源性为９８．４％。在１０４例肝炎患者中ＴＴＶＤＮＡ阳性检出率为２４．０％（２５／１０４），其中在非甲～戊和庚型肝炎患者中为４８．０％（１２／４２），在甲型肝炎中为１９．０％（４／２１），乙型肝炎为２５．０％（８／３２），丙型肝炎为１１．１％（１／９），９例ＨＧＶＲＮＡ阳性者中未检出ＴＴＶＤＮＡ。值得注意的是重型肝炎ＴＴＶ检出率极高，其中急性重型肝炎６例中阳性为４例（６６．７％），慢性重型肝炎６例中阳性为３例（５０．０％）。结论ＴＴＶ在我国肝炎病人中存在。在重型肝炎中有较高的发生率，可能是未知病毒致急性和慢性及重型肝炎的病因之一。     

套式PCR和原位杂交技术检测肝病患者单个核细胞？…

目的 了解慢性乙型肝炎（中度）和原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ存在情况。方法 采用套式ＰＣＲ以及原位杂交技术检测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）内ＴＴＶ ＤＮＡ。结果 套式ＰＣＲＳＷＩＭ２６例慢性乙型肝炎（中度）患者ＰＢＭＣ内ＴＴＶ ＤＮＡ阳性７例。阳性率２６．９％,非常显著高于健康对照（Ｘ＾１２＝１４．３,Ｐ〈０．００１）;２１例原发性肝癌（ＨＢｓＡｇ阳性）虱ＰＢＭＣ内ＴＴ     

深圳地区不同人群TTV感染情况的调查

目的了解深圳地区不同人群ＴＴＶ的感染情况。方法在ＴＴＶＯＲＦ１保守区设计两对套式引物，建立了检测ＴＴＶＤＮＡ的巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ），用该法对深圳地区９０例一般人群、８８例职业献血员、７９例静脉毒瘾者及２９例非甲庚型肝炎病人进行ＴＴＶＤＮＡ的检测。结果ＴＴＶＤＮＡ在以上４种人群中的阳性率分别为７８％，９０％，４１７％与４４８％，前者与后两者比较差异均有显著性（Ｐ＜００５）。９０例一般人群与８８例职业献血员中，１４例ＴＴＶＤＮＡ阳性者丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）均正常。结论深圳地区一般人群与职业献血员中ＴＴＶ携带者较常见；静脉毒瘾者是ＴＴＶ感染的高危人群；部分非甲～庚型肝炎可能与ＴＴＶ相关     

不同人群庚型肝炎病毒感染状况分析

为了解不同人群庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）感染状况，采用优化的ＨＧＶＮＳ５区两条合成肽为抗原，建立间接酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ），检测了１２０９例不同人群血清中抗－ＨＧＶＩｇＧ，总阳性率为３．８％，其中非Ａ～Ｅ型肝炎患者抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性率最高，为２０．５％，明显高于自然人群的０．８％和其它肝炎患者（Ａ～Ｅ型）的３．３％，丙型肝炎患者中抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性率亦较高，为８．０％。职业献血员抗－ＨＧＶＩｇＧ阳性率３．４％高于义务献血员０．０％。性病患者阳性率为３．６％，有静脉吸毒史的ＨＩＶ感染者阳性率亦较高，为８．０％。结果表明，ＨＧＶ在我国有较高的感染率；ＨＧＶ可能为非Ａ～Ｅ型肝炎的重要致病因子；职业献血员和有血液接触史者ＨＧＶ感染率较高，提示血源应严格筛选     

中国株庚型肝炎病毒C(GBV-C)感染的检测及部分核酸序列测定

国内首次采用合成肽抗原筛查高危人群血液中的庚型肝炎病毒Ｃ（ＧＢＶ－Ｃ）抗体。单采浆站供血者ＧＢＶ－Ｃ抗体阳性率为０．４４％（１１／２５００）；非甲－戊型肝炎患者ＧＢＶ－Ｃ抗体阳性率为６．６７％（２／３０）。抗体阳性血清再用ＲＴ－ＰＣＲ法检测ＧＢＶ－ＣＲＮＡ。部分扩增产物进行了核苷酸序列测定，其核苷酸序列与Ｓｉｍｏｎｓ等报道的ＧＢＶ－Ｃ序列同源性为８９．０９％至９２．４８％。该研究提示，ＧＢＶ－Ｃ可能不是非甲－戊型肝炎的主要致病因子，可能存在ＧＢＶ－Ｃ健康携带者，应尽快研制出ＧＢＶ－Ｃ感染检测试剂盒，以筛选献血员。     

TT病毒的检测及部分核苷酸序列比较

目的 为阐明ＴＴ病毒（ＴＴＶ）流行病学特征和基因级异质性以及血清学诊断试剂的研制提供资料。方法 从健康查体者的血清中提取ＤＮＡ，设计一套引物，采用套式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｌ－ＰＣＲ）检测ＴＴＶ，对其中７例阳性标本进行了克隆测序，并与２株ＴＴＶ的核苷酸序列作了比较。结果 １１１例正常人中ＴＴＶ的感染率为１２．６％。７株中国株ＴＴＶ间的核苷酸同源性为９０．６％～９５．４％，与日本株ＴＸ０１１（Ｏ）     

TT病毒在肝炎患者中的检测及意义

自1997年底,日本学者报道ＴＴ病毒(ＴＴＶ)以来,国内外已相继有ＴＴＶ感染的报道。为了解西安地区ＴＴＶ感染情况,我们采用ＰＣＲ法检测了25例肝炎患者并对3例进行序列分析,证实西安地区也存在ＴＴＶ感染。25例肝炎患者经检测各型肝炎病毒标志,18例为非甲～庚型肝炎,7例为...     

TLMV5‘非编码区基因的克隆与序列分析

目的 调查ＴＴＶ阴性的非甲￣庚型肝炎患者中ＴＴＶ－ｌｉｋｅ ｍｉｎｉ ｖｉｒｕｓ（ＴＬＭＶ）感染情况,对ＴＬＭＶ５’非编码区（５’ＮＣＲ）部分基因进行分子克隆与序列分析。方法 采用巢式ＰＣＲ技术检测５３例ＴＴＶ阴性的非甲－庚肝炎患者血清ＴＬＭＶ ＤＮＡ,对ＰＣＲ产物进行克隆、测序和分析。结果 ５３例病例中ＴＬＭＶ ＤＮＡ阳性３７例（６９．８％）,对其中８株ＴＬＭＶ基因克隆测序,并与Ｔａｋａｈａｓｈ     

用逆转录-套式聚合酶链反应检测我国不同临床型肝炎/肝病患者中庚型肝炎病毒感染

目的为了研究庚型肝炎病毒（ＨＧＶ）在我国的感染状况。方法根据已发表的ＨＧＶ的５’端非编码区（５’－ＵＴＲ区）及螺旋酶区（ＮＳ３区）两段高度保守的基因序列分别设计两套引物，用逆转录－套式聚合酶链式反应（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）检测ＨＧＶＲＮＡ。结果从北京、秦皇岛、河南等地采集各种肝病患者及职业献血员血清３５４份，ＨＧＶＲＮＡ阳性７９份，阳性率为２２．３％。其中已确定的临床型肝炎／肝病患者２５４例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为５０例，阳性率为１９．６％。原因不明的或非甲～戊型肝炎患者４３例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１３例，阳性率为３０．２％。丙型肝炎阳性的职业献血员５７例，ＨＧＶＲＮＡ阳性者为１６例，阳性率为３０．２％。结论提示ＨＧＶ感染在我国多种人群中普遍存在，它不仅可能是引起非甲～戊型肝炎的重要病原之一，也可能是引起输血后肝炎的病原因子     

散发性急性肝炎抗甲型和戊型肝炎病毒IgM抗体的检测与分析

目的 了解北京地区散发性急性甲型和戊型肝炎的年龄分布、肝功能损伤和预后。方法 用酶免疫法（EIA）检测1995年1月至2000年6月北京地区散发性急性肝炎患者抗甲型肝炎病毒IgM(HAV-IgM)和抗戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM）。结果 在203例散发性急性肝炎患者中,有112例为甲和戊型肝炎病毒感染,合计阳性率占55.2％,其中甲型肝炎占22.2%,戊型肝炎占33％。甲、成语地炎患者均有不同程度肝脏损伤,约75％的患者有中至重度的肝功能损伤（ALT值＞500－≥3500U／ml）,比较重症甲型和戊型肝炎患者肝功能损伤程度（ALT值≥1000－≥3500U/ml）。甲型肝炎患者高于戊型肝炎。追踪患者系列血清及观察临床症状,患者均在2－3个月恢复,ALT转为正常,黄疸消退,未发现甲型和戊型肝炎慢性化病例。结论 散发性急笥肝炎患者一半以上是由肠道传染的甲型和戊型肝炎病毒感染引起,甲型肝炎发病年龄主要以青年居多,戊型肝炎发病主要以青壮年为主,大多数甲肝炎病毒感染引起,甲型肝炎发病年龄主要以青年居多,戊型肝炎发病主要以青壮年为主。大多数甲型和戊型肝炎患者有中至重度的肝功能损伤。在我国病毒性肝炎的防治策略上,对散发性的甲、戊型肝炎的预防应引起同样高度重视。     

TTV酶联免疫方法的建立及其初步应用

目的 建立检测TTV的酶免疫技术,了解不同型肝炎患者血清中抗－TTV抗体的分布情况,并结合TTV DNA的检测分析两者的关系。方法 以原核表达的TTV ORF1蛋白为抗原建立检测抗－TTV的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法,采用该方法检测不同肝炎患者中抗－TTV抗体;在套式聚合酶链反应（PCR）方法检测血清标本中TTV DNA。结果 所建立的检测TTV的ELISA方法具有较好的特异性,不同别肝炎患者中抗－TTV抗体阳性率分别为：甲型肝炎患者10.5%（4／38）,乙型肝炎患者12.5%（16／128）,丙型肝炎患者8.3%(7/84),丁型肝炎患者7.7%(30/93),健康人群1.3%(1/78)。统计学分析表明,非甲－庚型肝炎患者抗－TTV阳性率显著高于其他型肝炎患者（P＜0.01）,而正常人群则显著低于肝炎患者（P＜0.05）。抗－TTV阳性率与TTV DNA阳性率存在相关性（P＜0.05）。结论 在不同型肝炎患者中均可检出抗-TTV抗体,但以非甲－庚型肝炎患者阳性率高;TTV抗体可与基因同时存在于患者血清中,抗－TTV抗体可能类似抗－HCV, 是一传染性标志。     

Acute hepatitis E virus infection in Taiwan 2002–2006 revisited: PCR shows frequent co‐infection with multiple hepatitis viruses

Sporadic cases of acute hepatitis E virus (HEV) infection with production of anti‐HEV IgM have been reported occasionally in Taiwan despite no reported outbreaks in the past. This study was undertaken to determine whether serological markers correlated with virus detection. From 2002 to 2006, 72 reported cases of acute hepatitis E seropositive for anti‐HEV IgM in Taiwan were enrolled for investigation. Acute phase serum samples were collected for detection of HEV RNA, HBV DNA, HCV RNA, and GBV‐C RNA by PCR. The results showed that viral sequences of HEV, HBV, HCV and GBV‐C were detected in 54 (75%), 21 (29.2%), 9 (12.5%), and 22 (30.6%) of cases, respectively. Acute hepatitis A co‐infection was excluded in all patients because none were seropositive for anti‐HAV IgM and, nine patients (12.5%) did not seroconvert to anti‐HEV IgG. These results suggest that serum markers did not correlate completely with viremia in the diagnosis of acute HEV infection. Multiple viruses may co‐infect with acute hepatitis E virus in Taiwan. Detection of hepatitis E viremia together with seropositivity for anti‐HEV IgM and followed by seroconversion to anti‐HEV IgG should be included in the diagnostic criteria for HEV infection. J. Med. Virol. 81:1734–1742, 2009. © 2009 Wiley‐Liss, Inc.     

1995至2000年北京地区散发性急性肝炎患者肝炎病毒抗体的检测与分析

目的 了解北京市地区散发性肝炎患者甲型、乙型、丙型和戊型肝炎病毒感染型别分布及重叠感染。方法 用EIA法检测1995斫2月至2000年12月北京地区散发性急性肝炎患者抗－HAVIgM、HBsAg／抗－HBcIgM、抗－HCVIgM/IgG和抗－HEVIgM/IgG。结果 214例散发性急性肝炎患者血清,抗甲、乙、内和戊型肝炎病毒IgM总阳性数155例,戊型肝炎76例。有9名患者检出2种肝炎病毒抗原或抗体阳性,其中在3名肝硬化患者和2名静脉吸毒者同时检测到HBV和HCV抗原或抗体,1例HBsAg阳性者检测到抗－HAVIgM,3例－HCVIgG阳性者中分别检测到2例抗－HBVIgM和1例抗－HEVIgM。肝炎病毒重叠感染的9名患者年龄在31岁至49岁之间。结论 北京地区散发性急性肝炎78％是由消化道传染的甲戊型肝炎病毒引起,戊型肝炎在四种肝炎中位居首位,其次为甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎。肝炎病毒重叠感染多见乙、丙型肝炎病毒合并感染或慢性乙、丙型肝炎患者合并甲型或戊型肝炎病毒感染。在我国对散发性病毒性肝炎的预防应引起高度重视。     

检测病毒性肝炎患者血清中SEN病毒及其临床意义

目的：检测病毒性肝炎患者血清中SEN病毒D和H(SENV-D、SENV-H),并探讨其临床意义。方法：采用巢式聚合酶链反应法（nPCR）检测甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲－戊型肝炎患者血清中SENV-D和SENV-H DNA。结果：在180例病毒性肝炎患者血清中，SENV-D和SENV-H检出率分别为17.2%(31/180)和5.6%(10/180)，总检出率为18.3%(33/180)、甲、乙、丙、戊型肝炎患者的SENV-D/H检出率高于非甲－戊型肝炎患者。从甲、乙、丙、戊型肝炎和非甲－戊型肝炎患者分离的SENV-D/H核苷酸序列，与SENV-D/H原型株比较，其同源性在94％以上。甲、乙、丙和戊型肝炎患者有无SENV-D/H合并感染，其血清生化学指标无明显差异。结论：SENV-D/H可能不是非甲-戊型肝炎的病原，甲、乙、丙和戊型肝炎患者合并感染SENV-D/H并不加重病情。     

从抗-HEV阴性的戊型肝炎病人血清中检测到1株HEV变异株

Objective　To investigate genotypes of hepatitis E viruses isolated from hepatitis E patients with negative anti-HEV. Methods　Acute-phase sera of 22 hepatitis patients with negative anti-HAV IgM, HBsAg, anti-HBc IgM, anti-HCV and anti-HEV were detected for HEV RNA using a RT-nPCR based on a set of degenerate primers derived from open reading frame 2 of HEV. The positive PCR products were directly sequenced. Results　Among 22 acute hepatitis patients, 9(40.9%) were HEV RNA positive. Six PCR products of 9 sera were directly sequenced. Five of them shared the same subtype with HEV Chinese strain (L25595), with the nucleotide identity of 98.0% and the amino acid identity of 99.0%. The remainder, designated HEV LZ-105, was a variant of HEV. The nucleotide and amino acid homology of HEV LZ-105 with HEV(China),HEV(Burma),HEV(Mexico),and the newly identified HEV US-1 and swine HEV was 77.4%,78.1%,74.3%,77.4%,77.1% and 91.0%,91.0%,89.0%,93.0%,93.0%,respectively. Conclusion　A variant of HEV was isolated from a hepatitis E patient with negative anti-HEV.     

Hepatitis E Outbreak in Jaipur due to Genotype IA

Purpose: Suddenly, many cases of fever with jaundice were reported from Sodala area at Jaipur. This outbreak of acute hepatitis at Jaipur Rajasthan was investigated for aetiology and subsequent phylogenetic analysis. Methods: Blood samples were collected from 106 symptomatic patients of acute hepatitis and 39 pregnant females (with or without symptoms of hepatitis) during an outbreak at Jaipur. The samples were tested for hepatitis A virus (HAV) and hepatitis E virus (HEV) by serological and molecular methods (polymerase chain reaction [PCR]). Sequencing of nested PCR product was done for phylogenetic analysis. Hepatitis B surface antigen (HBs antigen), anti-hepatitis C virus (HCV), anti-Leptospira and anti-scrub typhus IgM enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was done for patients negative for HEV and HAV. Results: Among 106 symptomatic patients, HEV IgM was positive in 84/106 (79.2%) patients and HEV RNA in 72/106 (67.9%) patients. Among pregnant women, 6/39 (15.4%) were HEV IgM positive and 5/39 (12.8%) for HEV RNA. One (2.5%) pregnant woman died due to hepatitis. All the isolates belonged to genotype 1A of HEV. All HAV, HEV-negative samples were negative for HBs antigen, HCV antibody, Leptospira and scrub typhus IgM ELISA. Conclusion: The outbreak was due to HEV genotype 1A. The municipal water supply was contaminated and sanitary conditions and waste disposal were poor in the area. Boiling of drinking water, fixing the water supply pipes and frequent hand washing helped in controlling the outbreak.     

328例血清TT病毒DNA及其IgG抗体的检测

目的 了解不同人群中TT病毒（TTV）感染情况。方法 根据Okamoto报道的TTV全序列设计引物,建立TTV DNA套式聚合酶链反应,利用该法对81例正常人、92例献血员、123例甲－庚型肝炎,32例非甲－庚型肝炎病人进行TTV DNA检测,同时用ELISA法检测抗TTV IgG。结果 TTV在以上四种人群中阳性率分别为2．5％、2．2％、19．5％、28．1％,抗TTV IgG的阳性率分别为1．2％、3．7％、26．8％、34．4％。前者与后者两者比较差异存在显著性（P＜0．05）;重叠感染中TTV合并HBV的二重感染率最高为75．0％。结论 不同人群匀存在TTV感染;正常人群和职业献血员存在健康携带状态;甲－庚型肝炎和非甲－肝炎病人为高危人群;TTV可与各型肝炎存在重叠感染;TTV除经血传播外,存在其他传播途径,抗TTV IgG可作为TT病毒感染的检测手段。     

大理地区猪源甲型、乙型、戊型肝炎病毒血清流行病学调查

目的:调查大理地区猪体内甲、乙、戊型肝炎病毒的感染情况。方法:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测屠宰生猪血清标本甲肝血清标志物(HAV-lgG和HAV-lgM)、乙肝血清标记物(HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAbHBcAb)、戊肝血清标志物(HEV-lgG和HEV-lgM)。结果:HAV、HBV和HEV的感染率分别为:91%(162/178),93.9%(185/197),23.6%(42/178);HAV和HBV二重感染率为67.97%(121/178);HAV、HBV和HEV三重感染率为20.2%(36/178);HAV和HEV二重感染率为1.7%(3/178);HBV和HEV二重感染率为2.2%(4/178)。结论:甲、乙、戊型肝炎病毒在猪体内存在感染,同时发现在猪体内甲、乙型肝炎病毒重叠感染常见。