P53与P21基因蛋白在脑星形细胞瘤的表达

用Ｐ５３，Ｐ２１单克隆抗体免疫组化法检测ＰＴ３，Ｐ２１基因蛋白在３２例脑星形细胞瘤的表达。结果，Ｐ５３呈型表达，阳性率为６２．５％；Ｐ为浆型表达，阳性度为７８．１％；两者阳性率及表达强度均随肿瘤分级增加而增加，其中１８例共同表达阳性。表明致癌基因的激活常伴抑癌基因的失活，两者起协同作用；     

rasp21在大肠良恶性病变中的表达及意义

目的 探讨ｒａｓ癌基因在大肠腺瘤,大肠癌组织中的表达及意义,方法 应用免疫组织化学ＬＳＡＢ法,检测５４例大肠癌,１７例大肠腺瘤和３１例正常粘膜中的ｒａｓｐ２１的分布,结果 癌组织及腺瘤组织均有ｒａｓｐ２１过量表达,阳性率分别为５７．４％和２９．４％,均高于正常粘膜（Ｐ〈０．０５）,在大肠癌淋巴结转移组ｐ２１阳性表达高于非淋巴结转移组（Ｐ〈０．０５）。结论 ｒａｓｐ２１的过量表达与大肠癌的发生及淋巴     

p21、IGF-Ⅱ在肝细胞癌和肝硬化组织中的表达水平及其与肝细胞不典型增生的关系

目的：探讨p21、胰岛素样生长因子Ⅱ（IGF—Ⅱ)在肝硬化、肝细胞癌组织中表达的意义及其与肝细胞不典型增生(LCD)的关系。方法：用免疫组化S—P法检测单纯肝硬化、癌旁肝硬化及肝细胞癌(HCC)p21、IGF—Ⅱ表达情况：结果：癌旁肝硬化、单纯肝硬化、癌组织p21的阳性表达率分别为92．86％、68％、54．55％；癌旁肝硬化、单纯肝硬化、癌组织IGF—Ⅱ的阳性表达率分别为75％、74％、36．36％。肝硬化与HCC之间差异有统计学意义(P＜0．05)；IGF-Ⅱ与p21阳性表达呈正相关关系；HBsAg的阳性或伴LCD改变的肝硬化，p21、IGF—Ⅱ阳性率均高于HBsAg阴性或不伴有LCD改变的肝硬化(P＜0．05)。结论：①在肝细胞癌变演化过程中p21、IGF—Ⅱ可能发挥协同作用；②LCD是一群具有肿瘤增殖潜能的癌前细胞群，尤其有p21、IG7—Ⅱ共同过度表达者，有发生HCC的高度危险。     

Ras和p16基因在肝癌组织中的表达与临床意义

目的：观察基因ras和p16在肝癌组织中的表达，探讨其在肝癌术后复发及预后中的作用。方法：应用免疫组化S－P法，检测53例手术切除肝癌组织和12例正常肝组织的ras和p16表达及与肝癌临床病理指标、术后复发及预后的关系。结果：（1）ras在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率分别为66．0％和34．0％，ras表达与肿瘤大小、有无肝内转移密切相关（P均＜0．05）。ras阳性、阴性表达病例3年复发率分别为68．8％、38．9％，3年生存率分别为37．1％、66．7％（P＜0．05）。（2）p16在肝癌和正常肝组织中的阳性表达率各为47．2％、100．0％，p16表达与有无肝内转移、组织分化密切相关（P均＜0．05）。p16阳性、阴性表达病例3年复发率分别为48．0％、67．9％，其3年生存率分别为64．0％、32．1％（P均＜0．05）。（3）ras和p16在肝癌中的表达密切相关（P＜0．01），p16阳性ras阴性与p16阴性ras阳性表达病 列3年复发率分别为35．7％、79．2％，3年生存率分别为71．4％、29．2％，差异有极显著性（P＜0．01）。结论：联合检测p16和ras的表达可作为判断肝癌术后复发及预后的有效指标，多基因分析比单基因分析更有价值。     

p21和c-myc蛋白在肝细胞癌与癌旁肝组织中表达的对比研究

本文用连续切片免疫组化法检测了肝细胞癌及癌旁组织ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白的表达。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白在肝癌及癌旁组织的阳性率分别为５３．３％和９６．７％；４０％和８６．７％；两者表达率均以癌旁组织为高（Ｐ＜０．０１）。ｐ２１和ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性信号形态呈浆膜和／或核型；其表达均以近癌组织的癌旁肝细胞为强，肝硬变结节尤甚。本文结果进一步支持ｒａｓ和ｃ－ｍｙｃ癌基因异常激活和表达与肝细胞癌发生具相关性的观点。     

P21和P27蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义

目的探讨P21和P27蛋白在卵巢癌组织中的表达及其意义。方法应用免疫组织化学方法检测10份正常卵巢组织、10份良性卵巢肿瘤以及30份恶性卵巢肿瘤组织中P21和P27蛋白的表达。结果正常卵巢组织、良性肿瘤组织P21、P27蛋白阳性表达率与卵巢癌组织比较,差异有显著性(P=0.014、0.004)。P21和P27蛋白在恶性卵巢肿瘤中的表达与临床分期有关(P=0.024、0.008),而与组织学类型、组织分化程度、有无腹水、淋巴结有无转移无关(P=0.067～0.562)。3种组织中P21和P27蛋白的表达呈正相关(P=0.039)。结论P21和P27蛋白表达异常可直接影响细胞周期转化,促进卵巢癌的发生。联合检测P21和P27蛋白对卵巢癌的预后评估和指导治疗有积极的意义。     

消痰散结方对胃癌组织中P21ras及P185蛋白表达的影响

目的 :探讨消痰散结方对胃癌组织中P2 1ras及P185蛋白表达的影响。方法 :30只BALB/c无胸腺裸鼠 ,建立人胃腺癌SGC 790 1原位移植模型 ,在模型建立次日随机分为对照组 (生理盐水腹腔注射 )、化疗组 (5 Fu腹腔注射 )、中药组 (消痰散结方腹腔注射 ) ,共给药 3周 ,12周左右脱颈椎处死。应用Envision免疫组织化学方法检测各组胃癌组织中P2 1ras及P185蛋白的表达情况。结果 :P2 1ras在中药组肿瘤组织细胞膜上的阳性表达率为2 6 .7% ,与对照组 (5 2 .0 % )相比具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;化疗组的阳性表达率为 2 7.5 % ,与对照组比较具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;中药组与化疗组相比 ,差异不显著。P185在中药组肿瘤组织细胞膜上的阳性表达率为31.1% ,与对照组 (5 6 .0 % )相比具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;化疗组的阳性表达率为 30 .0 % ,与对照组比较具有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;中药组与化疗组相比 ,差异不显著。结论 :消痰散结方对SGC 790 1胃癌组织中P2 1ras及P185蛋白表达有明显的下调作用 ,这可能是消痰散结方抑瘤抗转移作用的一个重要环节     

P21^r^a^s蛋白在大肠癌癌旁粘膜腺瘤及正常粘膜中的表达

采用免疫组织化学方法检测Ｐ２１ｒａｓ在大肠癌、癌旁粘膜、腺瘤及正常粘膜中的表达，并用显微图像分析仪定量测定Ｐ２１ｒａｓ蛋白在大肠癌、癌旁粘膜、癌旁粘膜增生区及腺瘤中的相对含量。结果显示Ｐ２１ｒａｓ在上述组织中均有表达，正常粘膜的表达率为１３．３３％（２／１５），明显低于大肠癌５７．５７％（１９／３３）、癌旁粘膜４８．４８％（１６／３３）及腺瘤６３．６４％（７／１１）。定量分析发现Ｐ２１ｒａｓ蛋白在腺瘤中相对含量最高，癌旁粘膜比大肠癌及癌旁增生区低，而大肠癌与癌旁增生区无差别。结果说明Ｐ２１ｒａｓ在大肠肿瘤的发生发展中起作用，但不能作为判断肿瘤良恶性的指征。     

EB病毒相关胃癌组织中P53及P21蛋白的表达

目的探讨Epstein-Barr病毒(EBV)感染、P53和P21蛋白表达异常在胃癌发生发展中的作用以及三者相关性。方法应用免疫组化技术检测13例EBV相关胃癌(EBVaGCs)、45例临床指标与之匹配的EBV阴性胃癌(EBVnGCs)以及58例相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达。结果胃癌组织P53蛋白阳性率明显高于癌旁组织,差异有极显著性(χ2=50.000,P<0.01)。EBVnGCs组织中P53蛋白阳性率与EBVaGCs相比差异无显著性(χ2=0.072,P>0.05);但EBVaGCs组织P53蛋白过表达率明显低于EBVnGCs组织,差异有极显著性(χ2=7.259,P<0.01)。胃癌组织P21蛋白阳性率明显低于癌旁组织,差异有极显著性(2χ=12.500,P<0.01)。EBVnGCs与EBVaGCs组织P21蛋白阳性率无明显差异(P>0.05)。胃癌组织中P21与P53蛋白共同表达率较高,但无显著相关性(2χ=1.323,P>0.05,r=0.202 5)。结论P21蛋白表达存在p53依赖性和p53非依赖性两条途径;胃癌组织中EBV感染与P53蛋白的异常表达有关,而与P21蛋白异常表达无显著相关性。     

高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞c-myc和p21基因表达的影响

目的 :探讨高浓度葡萄糖对人腹膜间皮细胞 c- myc和 p2 1基因表达的影响。方法 :体外培养的人腹膜间皮细胞经含 1.5 %、2 .5 %、4 .2 5 %葡萄糖的 M199培养基培养 2 4 h,以正常 M199培养基和含 4 .2 5 %甘露醇的 M199培养基为对照。应用半定量 RT- PCR检测 c- m yc、p2 1基因 m RNA表达。结果 :2 .5 %葡萄糖组、4 .2 5 %葡萄糖组间皮细胞 c- myc和 p2 1m RNA的表达量显著高于 1.5 %葡萄糖组、M199对照组及 4 .2 5 %甘露醇渗透压对照组 (P<0 .0 5 ) ;而 1.5 %葡萄糖组、M199对照组及 4 .2 5 %甘露醇渗透压对照组间间皮细胞 c- myc和 p2 1m RNA的表达量无显著差异 (P>0 .0 5 ) ,且葡萄糖浓度越高 ,c- myc和 p2 1m RNA表达量越高 (r=0 .96 8,0 .96 7,P<0 .0 1)。结论 :高浓度葡萄糖能上调 C- myc和 P2 1m RNA基因表达 ,这种作用与葡萄糖浓度呈正相关。     

Ki-P21ras蛋白原核表达质粒的构建、表达及纯化的研究

目的：构建Ki—ras—PET—28a（＋）原核表达质粒，并表达、纯化得到Ki—P21ras蛋白。方法：人工合成Ki—ras基因cDNA的蛋白编码CDs区序列，并在其正义链5′加上BamHⅠ酶切位点，3′加上HindⅢ酶切位点，经过BamHⅠ和HindⅢ双酶切后纯化回收得到具有粘性末端的Ki—ras cDNA，将PET-28α（＋）同样经过BamHⅠ和HindⅢ双酶切后纯化回收得到与Ki—ras cDNA有相同粘性末端的线形片段，通过T4DNA连接酶将具有粘性末端的Ki—ras cDNA与酶切后的PET-28α（＋）定向连接，构建重组质粒Ki—ras—PET—28a（＋），经酶切和测序鉴定。将鉴定正确的Ki—ras—PET—28α（＋）转入感受态细菌BL21（DE3）中诱导表达，利用组氨酸“标签”（His-Tag）对P21ras进行亲和层析纯化。结果：测序分析证实，克隆人PET-28α（＋）的Ki—ras序列与Genbank登录号为“M54968”的Ki-ras cDNA序列一致，将重组质粒Ki—ras—PET—28α（＋）转化BL21（DE3），IPTG诱导目的蛋白表达。SDS—PAGE和蛋白纯化结果表明，Ki—ras—PET—28α（＋）在大肠杆菌中获得可溶性高表达，经Ni^2＋-NTA-树脂柱亲和层析纯化得到了PAGE纯的ki—P21ras蛋白，Western-Blot分析证实其免疫活性。结论：成功构建了原核表达载体Ki—ras—PET—28α（＋），并经表达、纯化得到具有生物活性的P21ras蛋白，为研究P21ras在肿瘤发病中的作用和机制以及抗P21ras细胞内抗体的研究奠定了基础。     

人肺癌及癌旁组织p21蛋白表达的免疫组化检测

以相当于 ras p21蛋白一段氨基酸序列的合成肽的单克隆抗体 EB_(24?),用 ABC 免疫组化技术检测50例福尔马林固定-石腊包埋的人肺癌组织切片的 p21蛋白表达。46例癌组织的 p21表达,比癌旁病理形态证明“正常”的肺泡及正常肺泡明显增强.其中以肺腺癌最为显著。42例非小细胞肺癌中38例呈阳性反应(90.5%),强阳性约占60%;而8例小细胞肺癌中只有1例阳性(12.5%)。一般说肺腺癌对化疗最不敏咸.小细胞肺癌对化疗较为敏感。这种差别与 p21的表达是否有关联值得进一步探讨。     

子宫内膜癌细胞rasP~(21)、P~(53)表达、DNA含量和临床病理特征及预后的关系

为探讨ｒａｓ癌基因和Ｐ５３抗癌基因表达产物、ＤＮＡ含量及其它临床病理因素对子宫内膜癌预后的影响，本文采用单因素、Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ生存曲线和ＳＰＳＳ多元相关与逐步回归软件将患者年龄、临床期别、病理类型、临床分型、组织学分级、肌层侵犯深度、局部免疫反应、ＤＮＡ指数（ＤＩ）、Ｓ期细胞比率（ＳＰＦ）、增殖指数（ＰＩ）、Ｐ２１荧光指数（Ｐ２１ＦＩ）、Ｐ５３荧光指数（Ｐ５３ＦＩ）和Ｐ５３免疫组织化学表达强度等１３个因素与生存的关系进行了分析。结果表明：Ｐ５３表达强度和临床期别为最有意义的预后指标，Ｐ５３表达强阳性和临床Ⅲ期与短生存期有关；另外，肌层侵犯超过２／３、乳头状腺癌和年龄大也提示不良预后。     

ras基因产物p21和C－erbB－2基因产物p185在膀胱癌中表达研究

应用免疫组织化学方法对正常膀胱组织和膀胱癌组织中Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因产物ｐ１８５和ｒａｓ基因产物ｐ２１蛋白的表达水平进行检测。结果在５例正常膀胱组织中未见这两种蛋白表达。５８例膀胱癌中ｐ１８５和ｐ２１蛋白阳性表达率分别为６５；５％和６２．１％。阳性表达的ｐ２１和ｐ８５蛋白均定位于膀胱癌细胞膜上，ｐ２１和ｐ１８５蛋白阳性表达率与膀胱癌的病理分级，临床分期及患者术后生存期有关。提示ｐ１８５和ｐ２１蛋白阳性表达，膀胱癌的发生和发展有关，并且有可能成为膀胱癌预后的客观指标。     

P^21和PCNA在肝硬变组织中表达的研究

目的：探讨Ｐ２１、ＰＣＮＡ的相关关系及它们在肝硬变、肝细胞不典型增生（ＬＣＤ）、肝细胞癌（ＨＣＣ）形成中的作用。方法：运用Ｓ－Ｐ法对６０例单纯肝硬变（不伴癌）、３０例癌旁肝硬变及２７便ＨＣＣ的Ｐ２１、ＨＢｓＡｇ及ＰＣＮＡ表达情况进行实验研究。结果：癌旁肝硬变组织、单纯肝硬变组织、癌组织Ｐ２１阳性率分别为９０％、６８．３３％、６２．９６％,癌旁肝硬变与单纯肝硬变,癌旁肝硬变与癌组织之间判别有显著性意     

再生障碍性贫血红细胞膜蛋白SDS－PAG电泳分析

为了探讨慢性再生障碍性贫血（ＣＡＡ）患者红细胞膜蛋白组分的异常改变，用ＳＤＳ－ＰＡＧ电泳法分析了ＣＡＡ患者和健康人各２０例，实验性溶血性贫血（ＨＡ）兔，再生障碍性贫血（ＡＡ）兔和正常兔各２０只的红细胞膜蛋白的生化组分。结果显示ＣＡＡ患者的膜蛋区带Ⅲ和区带Ⅳ均明显短于正常人，其中有８例所有区带均缩短，有１２例带Ⅰ－Ⅶ缩短。经光密度计扫描计算各区带蛋白质百分含量显示，ＣＡＡ患者的带Ⅰ－Ⅶ低于健康人，带Ⅷ高于健康人，差异均有高度显著性（Ｐ＜０．０１）。所有模型兔与正常兔比较带Ⅳ缩短比带Ⅲ更明显，其它谱带也有不同程度的改变。这些结果表明ＣＡＡ患者红细胞膜蛋白组分有异常改变。     

p53、mdm2蛋白在睾丸肿瘤中的表达及意义

目的　探讨 p53、mdm2蛋白在睾丸肿瘤中的表达及其临床价值。 方法　应用免疫组化技术法检测 42例睾丸肿瘤 p53、mdm2蛋白阳性表达水平。结果　发现 p53、mdm2蛋白表达阳性率分别为 45 .2 % (1 9/ 4 2 )和 61 .9% (2 6/ 4 2 ) ,其阳性率与肿瘤病理分级和临床分期呈显著正相关 (P <0 .0 1 ) ,p53蛋白阳性表达与mdm2蛋白阳性表达呈高度正相关 (P <0 .0 1 )。结论　p53、mdm2蛋白检测有助于判断睾丸肿瘤的恶性程度及预测患者的预后。     

甲状腺肿瘤ras-p21及EBV LMP-1的表达及意义

目的研究ras癌基因及EBV感染在甲状腺癌中的意义。方法应用SABC免疫组化法对88例甲状腺肿瘤(乳头状癌34例,滤泡性癌17例,髓样癌5例,未分化癌8例,腺瘤24例)进行研究,观察ras癌基因蛋白产物p21及EBvLMP-1的表达情况。结果甲状腺癌p21的表达与甲状腺肿瘤良恶性有关,甲状腺癌p21阳性率(62.5％)明显高于甲状腺腺瘤(33.3％)(P<0.05)。甲状腺癌p21与组织学分型无关。LMI-1在甲状腺癌中的表达率为15.6％,癌周组织无表达。结论ras癌基因突变为甲状腺癌发生中的早期事件,p21检测可作为甲状腺滤泡性肿瘤良恶性鉴别的辅助指标,提示EBV感染与甲状腺癌的发生有关。     

口腔鳞癌K-ras基因测序分析及p21~(ras)蛋白的表达

目的:探讨K-ras基因在口腔鳞癌中的序列改变和p21ras蛋白的表达。方法:采用聚合酶链反应直接测序检测口腔鳞癌K-ras基因外显子1、2突变,免疫组织化学法检测口腔鳞癌组织、癌旁正常组织p21蛋白的表达。结果:30例口腔鳞癌中4例(13.3%)存在K-ras基因突变,突变方式为C→T转换,突变位点在第6位和第79位密码子,口腔鳞癌组织p21ras蛋白阳性率为73.3%(22/30),高于癌旁正常组织20%(6/30)。结论:口腔鳞癌中K-ras基因的突变谱较广,K-ras基因突变和p21蛋白表达与口腔鳞癌发生发展有关。     

胃癌组织中P53及P21蛋白的表达

①目的探讨P53和P21蛋白异常表达在胃癌发生发展中的作用。②方法应用免疫组化技术检测58例胃癌及相应癌旁组织中P53和P21蛋白的表达。③结果胃癌组织P53蛋白阳性表达率为86.21%(50/58),癌旁组织P53蛋白均为阴性表达,胃癌组织P53蛋白阳性表达率明显高于癌旁组织,差异具有极显著性(P=0.000)。胃癌组织P21蛋白阳性表达率为62.07%(36/58),癌旁组织P21蛋白阳性表达率为89.66%(52/58),胃癌组织P21蛋白阳性表达率明显低于癌旁组织,差异有极显著性(2χ=12.5,P<0.01)。胃癌组织中P21与P53蛋白共同阳性表达率为56.9%,但两者无相关性(χ2=1.323,r=0.203,P>0.05)。④结论P53和P21蛋白表达异常与胃癌发生有关。