培养基对枯草芽孢杆菌产抗酵母活性物质的影响

目的探讨不同培养基对枯草芽孢杆菌产抗菌物质的影响。方法以6种培养基为基础,以酿酒酵母为抑菌活性指示菌,用琼脂孔扩散法测定不同发酵液对酿酒酵母的抑菌活性,对枯草芽孢杆菌合适的培养基和培养条件进行筛选。结果 6种培养基中,枯草芽孢杆菌在马铃薯葡萄糖(PDB)培养基中培养后的发酵上清液对酿酒酵母具有明显的抑制作用,抑菌活性主要在胞外,且PDB培养基有利于芽孢的形成。装液量对枯草芽孢杆菌在PDB培养基中的生长有很大影响,较少的装液量有利于枯草芽孢杆菌芽孢的形成。结论 PDB培养基适合枯草芽孢杆菌产生抗酿酒酵母活性物质。     

产ESBLs、AmpC、KPC酶的葡萄糖不发酵细菌的耐药性分析及临床分布

目的 了解本地区葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌(代表株铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌)在临床标本中的分离与耐药情况,为临床合理使用抗生素提供指导.方法 对临床分离的180株葡萄糖不发酵细菌进行分类鉴定和药敏试验,并用纸片扩散法筛选出产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)及碳青霉烯类水解酶(KPC酶)的耐药菌株.结果 在葡萄糖不发酵细菌的梅成比中,其中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)56株(31.1％),产AmpC酶22株(12.2％),KPC酶2株(1.1％);同时产ESBLs和AmpC酶16株(8.9％),同时产ESBLs、AmpC、KPC酶1株(0.6％).3种主要葡萄糖不发酵细菌对头孢他啶、头孢三嗪、头孢噻肟、哌拉西林的耐药率最高,其中铜绿假单胞菌对阿米卡星、左氧氟沙星、环丙沙星耐药率较低,鲍曼不动杆菌对亚胺培南、左氧氟沙星耐药率较低,嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、环丙沙星耐药率较低.结论 葡萄糖不发酵细菌中泛耐药菌特别是铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌均有较高的多重耐药性,临床上应重视葡萄糖不发酵细菌引起的感染,根据药敏试验结果合理使用抗生素.     

市售川产水豆豉分离株中高产蛋白酶与β-葡萄糖苷酶菌株的菌属鉴定与产酶能力评价

目的 筛选并鉴定72株川产水豆豉分离株中高产蛋白酶及β-葡萄糖苷酶的菌株,为深入研究水豆豉的营养价值及开发其发酵菌株提供实验依据。 方法 采用酪蛋白法和对硝基苯-β-D半乳糖吡喃糖苷(pNPG)法分别测定菌株产蛋白酶和β-葡萄糖苷酶的能力,选出优势菌株,通过形态学、生化特征、16S rRNA和基质辅助激光解析-电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对其进行鉴定。绘制菌株生长曲线和产酶曲线并测得其遗传稳定性。 结果 选择产蛋白酶能力前10名菌株中β-葡萄糖苷酶活力最高者(0.084 U/L)作为优势菌株,表型及分子生物学法鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。菌株生长曲线、产酶曲线符合枯草芽孢杆菌特性,遗传稳定性结果显示其产酶能力能稳定遗传至第9代并于第10代开始下降。 结论 从72株川产水豆豉分离株中筛选出的高产蛋白酶和β-葡萄糖苷酶菌株经鉴定为枯草芽孢杆菌。     

巴曲酶对急性脑梗死患者D-二聚体的动态影响及意义

目的探讨巴曲酶对急性脑梗死患者D-二聚体的动态影响及意义。方法选取30例急性脑梗死患者,给予巴曲酶治疗,动态监测血D-二聚体(D-D)、凝血酶原时间(PT)、血小板计数(p lt)。结果给予巴曲酶治疗后,D-D于1~3d升高最明显,1周后恢复正常,而PT、p lt无明显变化。结论巴曲酶使脑梗死患者纤溶活性增强,巴曲酶治疗脑梗死疗效高、安全性好。     

地黄寡糖对2型糖尿病大鼠肝脏糖代谢关键酶活性及基因表达的影响

目的 通过研究地黄寡糖对2型糖尿病大鼠肝脏糖代谢关键酶活性和基因表达的影响,揭示地黄寡糖治疗糖尿病的机制。方法 Wistar雌性大鼠以高脂饲料喂养2月后,一次性ip链脲佐菌素（STZ）30 mg/kg诱发大鼠2型糖尿病。7 d后大鼠分为模型组、地黄寡糖低和高剂量（100、200 mg/kg）组、二甲双胍阳性对照组,每天ig给药1次,连续4周,另设对照组。给药4周后处死大鼠,取肝脏检测肝糖原的量及葡萄糖激酶（GK）和葡萄糖-6-脱氢酶（G-6-Pase）活性,用RT-PCR技术检测GK和G-6-Pase基因表达。结果 与模型组相比,地黄寡糖能显著增加肝糖原的量（P＜0.01）,增强GK活性（P＜0.01）和基因表达（P＜0.05）,减弱G-6-Pase活性（P＜0.01）及其基因表达（P＜0.05）。结论 地黄寡糖可能通过改善糖尿病大鼠肝糖代谢关键酶活性及基因表达发挥治疗糖尿病作用。     

血凝酶对3P试验结果及D-二聚体水平的影响

目的通过测定血凝酶治疗前后血浆硫酸鱼精蛋白副凝固试验(3P试验)结果及D-二聚体水平,探讨血凝酶对3P试验结果及D-二聚体水平的影响及临床意义。方法 20例出血患者(胃溃疡出血6例,十二指肠球部溃疡4例,蛛网膜下腔出血10例),每天给予血凝酶静脉注射及肌肉注射各1 kU,于用药前、用药期间及用药后检测患者3P试验阳性率、D-二聚体定量、血浆凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)及纤维蛋白原(FIB)浓度。结果血凝酶治疗前全组患者3P试验均为阴性,D-二聚体、PT、TT、APTT、FIB均正常;应用血凝酶后3P试验阳性率增加、D-二聚体平均水平升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),停药3 d后与用药前比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前后PT、TT、APTT、FIB变化差异无统计学意义。结论应用血凝酶治疗后可使患者3P试验阳性率增加,D-二聚体定量升高,停药3 d后血凝酶对3P试验阳性率及D-二聚体定量的影响减小。     

外源赤霉素及脱落酸对太子参中乙烯合成关键酶基因表达的影响

目的探讨外源赤霉素(GA3)和脱落酸(ABA)对乙烯合成关键酶基因表达的影响,为孩儿参栽培过程中生长调节剂的合理使用提供参考。方法构建本地Blast,从转录组数据库中筛选鉴定孩儿参乙烯合成关键酶基因,以外源赤霉素和脱落酸处理盛花期孩儿参,分别于20、40、50、60 d时采集块根,实时荧光PCR法检测乙烯合成关键酶基因的表达。结果筛选得到乙烯合成关键酶基因共6个,命名为PhACO1、PhACO2、PhACO3、PhACS1、PhACS2、PhSAMS。赤霉素和脱落酸均可调节6个基因的表达,其中赤霉素处理后PhACO1、PhACO2、PhACS1、PhSAMS基因表达在各时期均上调,而PhACO3和PhACS2在处理20～40 d时表达上调、50～60 d时下调。脱落酸处理后各基因表达量虽然总体呈现先下调后上调趋势,但具体表现有差别,PhACO1基因在20、60 d表现为上调作用,40～50 d表现为下调作用;PhACO2、PhACO3基因则在20～50 d表现为下调作用,60 d时则表现为上调作用;PhACS1基因20 d表现为下调作用,40～60 d表现为上调作用;PhACS2和PhSAMS基因则均表现为下调作用。结论赤霉素和脱落酸可能通过影响乙烯的生物合成实现对乙烯信号通路的调控,进而调节植物生长,推测在孩儿参不定根生长期用适宜浓度的赤霉素处理,块根膨大期用脱落酸处理可以获得较大的块根,增加太子参产量。     

搅拌对多黏类芽孢杆菌发酵氧传递过程的影响及CFD模拟

以羧甲基纤维素钠水溶液(CMC)为液相,空气为气相,研究了不同桨型组合、体系黏度、气量、桨间距、气体分布器等对搅拌过程中氧传递的影响。结果表明：在CMC体系中,下层用径向流的涡轮斜叶桨、上层用轴向流的翼型桨有利于氧传递。当单位体积功率P/V≥1.5 kW/m3时,涡轮斜叶翼型组合桨（SRT-HI）比传统的双层透平组合桨（RT-RT）的传质系数提高约10%,且高径比越大,SRTHI优势越明显。进一步用CFX11.0进行模拟,得到了不同桨型组合下气液两相的速率、气体和氧传质系数的分布等。并在50 L发酵罐中分别采用SRTHI与RTRT研究了搅拌对多黏类芽孢杆菌HY96-2发酵溶氧影响的热模实验,结果表明,在P/V=1.6 kW/m3条件下采用SRT-HI发酵,过程中体系的溶氧情况明显好于采用RTRT时的溶氧情况。     

葡萄糖酸钙对肌苷发酵的影响

在肌苷的摇瓶发酵过程中，10g／L的葡萄糖酸钙适于肌苷的合成和菌体生长。初始培养基中加入10g／L的葡萄糖酸钙，能够诱导葡萄糖酸激酶的生成，大幅提高其比活，增大磷酸戊糖（HMP）途径的通量。肌苷的产率由10.76g／L提高到18.36g／L。     

基本培养基中芳香族氨基酸和维生素

考察了芳香族氨基酸和维生素对转酮醇酶缺失的枯草芽孢杆菌生长以及D-核糖生产的影响。实验结果表明：L-酪氨酸、L-色氨酸、L-苯丙氨酸、生物素、烟酸、吡哆醛的添加能改善菌体生长,提高D-核糖产量,特别是烟酸作用尤其明显。在单因素实验基础上,采用响应面分析方法对培养基中的维生素添加量进行了优化,确定最佳培养基组成。在此优化培养基中D-核糖质量浓度达到 (23.4±0.39) g/L,与预测结果一致,是不添加维生素时核糖产量的2.31倍,D-核糖对葡萄糖的得率达到0.353 mol/mol。     

枯草芽胞杆菌肌苷发酵过程参数相关分析

基于参数相关的研究方法已成功地应用于多个发酵产品的过程优化,本文通过对枯草芽胞杆菌肌苷生产过程的尾气变化规律、碳氮源消耗和产物浓度的分析和计算,并根据摄氧率(OUR)、二氧化碳释放率(CER)、呼吸熵(RQ)和产物得率(YP/G)的相关性,在工程尺度将发酵过程分为4个阶段,为其他尺度的研究和过程优化提供了线索。     

茉莉酸甲酯对茯苓三萜生物合成的调控研究

目的 探索茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,MeJA)对茯苓三萜生物合成的调控效应及其机制.方法 从MeJA添加量、添加时间角度考察MeJA对茯苓三萜生物合成的调控效应,确定最佳调控策略,在此基础上采用荧光定量PCR(Real time PCR,RT-PCR)技术分析MeJA对茯苓甲羟戊酸途径法尼基焦磷酸合成酶基因(fps)和鲨烯合酶基因(sqs)基因表达水平的影响,揭示其调控机制.结果 MeJA可显著促进茯苓三萜的生物合成,最佳添加策略为发酵4 d添加150μmol/L的MeJA,此时茯苓三萜得率可达20.95 mg/L,为空白组的1.55倍、吐温-80组的1.32倍;RT-PCR结果显示MeJA可使fps、sqs基因表达水平显著上调,分别为吐温-80对照组的1.17倍、788.70倍.结论 MeJA通过显著上调sqs基因表达实现茯苓三萜生物合成的过程强化,为一种有效的促进茯苓三萜合成的外源调控因子.     

pH-酶依赖型肠康宁结肠靶向片的包衣工艺研究

目的：以中药复方肠康宁为研究药物,通过对其包衣工艺的研究,制备得pH-酶依赖型肠康宁结肠靶向片。方法：采用多层包衣法,以盐酸小檗碱体外释放度等为考察指标,对包衣处方中成膜剂及致孔剂种类、成膜剂与致孔剂比例、增塑剂种类及用量、包衣增重进行筛选。结果：该制剂包衣工艺为：取药物制备得素片,取3％果胶溶液,包衣增重4％,得多糖衣;取EudragitE100、加入12％TEC、1．5％PVPK-30、30％滑石粉配置成聚合物浓度为10％的包衣液,包衣增重5％,得酸溶衣;取HPMC,加1％PEG400为增塑剂,加50％乙醇溶解,包衣增重1．5％,得隔离衣;按1：2比例取EudragitL100和Eu—dragitS100混合,加入10％TEC和60％滑石粉,加乙醇溶解,包衣增重5％,得肠溶衣。该制剂在人工胃液2h后未见盐酸小檗碱溶出,在人工小肠液4h后累积溶出率均〈10％,在合酶肠液2h后溶出90％左右。结论：该制剂在体外能达到结肠定位释药的目的。     

浅论方剂配伍及双向调节作用

浅述方剂配伍的重要性及其双向调节作用。     

沼气发酵对病原菌杀灭效果的研究

目的探讨沼气发酵对病原菌的杀灭效果。方法建立中温(37℃)沼气发酵模型,并对4种常见病原体(金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、伤寒沙门氏菌、福氏志贺菌)开展沼气发酵杀菌试验。结果金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌均在48小时时检测不出;伤寒沙门氏菌10天时检测不出;福氏志贺菌30天时仍能检出。结论沼气发酵对病原体有一定的杀灭效果,对革兰氏阳性菌的杀灭效果优于革兰氏阴性菌。     

化学法制取B.S发酵液浓缩乳剂研究

首次应用化学方法制取B.S浓缩乳剂,可在发酵液发酵终止后直接在发酵罐内将发酵液浓缩4—5倍,并一次制成浓缩乳剂。细菌生物活性损失在1%以下,是替代物理浓缩法的理想方法。     

葡萄糖脱氢酶连续监测法的研究

目的建立葡萄糖脱氢酶连续监测法,优化其检测条件。方法按酶连续监测法测定要求,对克隆的枯草芽孢杆菌葡萄糖脱氢酶表达酶液进行测定,确定反应体系的底物浓度、最适pH、反应温度、延滞时间、测定时间、检测范围等。结果以葡萄糖和NAD 为底物时,用连续监测法检测葡萄糖脱氢酶是可行的。当葡萄糖、NAD 的终浓度分别为100mmol/L和2mmol/L时,在反应pH74,37℃,延滞时间30s,测定时间60s等条件下,检测上限可达10000U/L。结论连续监测法能用于测定葡萄糖脱氢酶,快速简便,结果可靠。     

局麻药的神经阻滞作用与pH值的关系研究

目的 比较不同pH值的普鲁卡因和布比卡因溶液对蟾蜍坐骨神经动作电位的幅度、传导速度和腓肠肌收缩力的影响.方法 制备120条蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本,分别用pH值为3、4、5、6、7、8的普鲁卡因和布比卡因溶液浸润,测定浸润前后动作电位的幅度,传导速度和腓肠肌收缩力.结果 pH值为6的普鲁卡因和pH值为7的布比卡因溶液对蟾蜍坐骨神经动作电位的幅度,传导速度和腓肠肌收缩力影响最大.结论 不同pH值的局麻药对蟾蜍坐骨神经的阻滞作用不同.