雌激素对脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡的干预

目的探讨雌激素在脑创伤后的作用。方法按照Marmarou建立大鼠创伤性损伤(TBI)模型,采用硫代巴比妥酸法测定氧自由基中间产物丙二醛(MDA),免疫组合法检测细胞凋亡相关基因Caspase-3的表达,原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡。结果雌激素治疗组海马CA1区MDA和Caspase-3及TUNEL阳性细胞均低于创伤组。结论大鼠创伤后雌激素通过抗氧化作用抑制神经细胞凋亡而起到脑保护作用。     

微 RNA-24过表达对缺血性脑梗死大鼠的脑保护作用及对神经细胞凋亡的影响

目的研究微 RNA(miR)-24过表达对缺血性脑梗死( ICI)大鼠的脑保护作用及对神经细胞凋亡的影响,并探讨相关机制。方法 2020年 1月至 2022年 1月将 45只大鼠以随机数字表法分为健康组(注射生理盐水)、脑梗死组(注射生理盐水)、梗死过表达组(注射 miR-24 agomir)、脑梗死低表达组(注射 miR-24 antagomir)、脑梗死阴性对照( NC)组(注射 miR-24-NC)。注脑射后 24 h建立 ICI模型,最终各组均纳入 8只。建模成功后 1、3d评价大鼠神经功能;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应( qRTPCR)检测脑组织 miR-24 mRNA表达; TTC染色法检测脑梗死体积;免疫组织化学染色法检测脑皮质神经元核抗原( NeuN)表达;蛋白质印迹法检测脑组织 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)、 Bcl-2相关 X蛋白( Bax)蛋白表达。结果与脑梗死组( 2.06±0.25)分、(1.72±0.19)分比较,建模后 1、3d脑梗死过表达组 Zea-longa神经功能评分( 0.98±0.11)分、(0.82±0.09)分降低,脑梗死低表达组(2.71±0.24)分、(2.36±0.21)分升高( P<0.05)。与健康组 0.56±0.12比较,脑梗死组脑组织 miR-24 mRNA表达 0.21±0.03降低(P<0.05);与脑梗死组比较,脑梗死过表达组脑组织 miR-24 mRNA表达 1.38±0.26升高( P<0.05)脑梗死低表达组 0.06±0.01降低(P<0.05)。与脑梗死组( 40.31±5.30)mm3(292.20±35.60)个 /视野、 0.13±0.02、0.52±0.06比脑梗死过表达组脑梗死体积较(21.25±4.93)mm3缩小,脑梗死皮质区 NeuN性表达神经元数目( 385.20±45.13)个 /视野增加,脑组织 Bcl-2蛋白表达 0.54±0.07升高, Bax蛋白表达 0.36±0.04降低,脑梗死低表达组脑梗死体积( 50.56±6.14)mm3增大,脑梗死皮质区 NeuN阳性表达神经元数目(154.40±17.91)个 /视野减少, Bcl-2蛋白表达 0.05±0.01降低, Bax蛋白表达 0.69±0.07升高( P<0.05)。结论 miR-24过表达可阳、改善 ICI大鼠神经功能,缩小脑梗死体积,减少神经元凋亡,可能通过调节脑组织 Bcl-2、Bax蛋白表达来实现。     

纳洛酮对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究纳洛酮在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的保护机制。方法：腔内线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型。16只雄性Wistar大鼠随机分为缺血组及纳洛酮治疗组，采用TUNEL法检测各组大鼠脑组织于缺血再灌注各2．5h后神经细胞凋亡情况。结果：大鼠脑缺血再灌注2．5h后凋亡的神经细胞主要分布在梗死灶边缘，纳洛酮治疗组细胞凋亡数量低于缺血组(P＜0．05)。结论：纳洛酮具有减少大鼠脑组织缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的作用。纳洛酮具有抗脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

神经生长因子对大鼠脑皮质神经细胞凋亡的影响

目的研究神经生长因子（ＮＧＦ）对大鼠脑皮质神经细胞凋亡的影响。方法用原代培养的大鼠胎鼠脑皮质细胞,建立了Ｎ－甲基－Ｄ－门冬氨酸（ＮＭＤＡ）、缺氧／缺糖诱导的神经细胞凋亡模型,并观察了ＮＧＦ的保护作用。结果ＮＭ－ＤＡ３００μｍｏｌ·Ｌ－１与细胞作用２０ｍｉｎ及细胞缺氧／缺糖培养１０ｈ可诱导细胞凋亡。提取细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳呈现典型的ＤＮＡ梯状条带,应用流式细胞仪检测,在Ｇ１峰前出现一个“Ｇ１亚峰”,凋亡细胞所占比例为５０．２％及４５．７％,同时出现细胞核染色体聚集、断裂及细胞空泡样变等形态变化。ＮＧＦ（５０,１００μｇ·Ｌ－１）能使ＤＮＡ梯状电泳条带不明显或消失,降低凋亡细胞数,并使细胞超微结构损伤减轻或基本恢复正常。结论ＮＧＦ能拮抗ＮＭＤＡ及缺氧／缺糖诱导的神经细胞凋亡。     

大鼠脑创伤后ERK通路对皮质神经细胞c-fos蛋白表达及凋亡的影响

目的:探讨细胞外调节激酶(ERK)信号转导机制在颅脑创伤中的作用。方法:建立大鼠重型弥漫性颅脑创伤(TBI)模型,92只雄性SD大鼠分为创伤组和对照组,其中创伤组又分为伤后10min、30min、3h、6h、24h、48h和72h7个时相组,采用免疫组化、蛋白印迹方法分别定性、定量检测以上两组ERK的表达,用免疫组化法检测c-fos蛋白表达,用原位末端标记法检测凋亡细胞。结果:创伤组p-ERK1/2和c-fos的表达及TUNEL阳性细胞在不同时间大多高于对照组:创伤组p-ERK1/2蛋白表达在伤后10min已较对照组明显升高(P<0.05),伤后6h达高峰,24h仍有大量表达,仍明显高于对照组(P<0.01),至伤后48h降至对照组水平(P>0.05);创伤组c-fos免疫反应性在伤后10min开始升高(P<0.01),伤后6h达高峰(P<0.01),48h以后明显减弱,但仍高于对照组(P<0.01);镜下对照组未见TUNEL阳性细胞,创伤组伤后3h偶见TUNEL阳性细胞,6h明显增多,48h达高峰,均显著高于对照组(P<0.01)。结论:大鼠脑创伤后ERK通路过度激活,可能通过诱导c-fos蛋白表达,进而导致神经细胞凋亡。     

七叶皂苷钠对大鼠脑缺血损伤中神经细胞凋亡的影响

目的观测七叶皂苷钠对大鼠大脑中动脉闭塞缺血半球梗死面积及凋亡细胞数月的影响.方法选用健康雄性SI)大鼠.以头端烫圆的40)尼龙线由左侧颈总动脉插入,阻塞左侧大脑中动脉.建立缺血2 h再灌注22 h动物模型.再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠(5 mg/kg)为治疗组.注射生理盐水(10ul/g)为对照组.对视交叉部冠状脑组织块行TTC染色,测定其吻端梗死面积百分比对邻近脑组织块行原位末端转移酶标记(TUNEL).计数缺血半球凋亡细胞数目.结果治疗组和对照组大鼠脑梗死面积分别为(8.1 5士5.0)%和(22.1 4±7.7)%(P＜0.01);细胞凋亡数目分别为70±23和225±78(P＜0.01).结论再灌注即刻腹腔内注射七叶皂苷钠对大鼠短暂性、局灶性脑缺血具有保护作用;这种神经保护作用在一定程度上与抑制神经细胞凋亡有关系.     

美洛宁对大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡及记忆功能的影响

目的研究美洛宁对大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡及学习记忆功能的影响.方法采用Marmarou的方法建立大鼠重型闭合性颅脑创伤模型,将成年Wistar大鼠288只随机分为脑创伤组、美洛宁治疗组、假手术组,每组又分别分为伤后3,6,12,24,48,72、168及336 h等8个时相组,另取12只作为正常对照组.美洛宁治疗组经致伤后,给予腹腔注射美洛宁(30 mg@kg-1@d-1),直至各时相点处死;脑创伤组、假手术组及正常对照组在相同时间给予等量的生理盐水腹腔注射作为对照.各组均在相应的时间点处死取材进行原位细胞凋亡检测.另取48只大鼠随机分为脑创伤组、美洛宁治疗组、假手术组及正常对照组,进行水迷宫测试.结果美洛宁能够使海马区神经细胞凋亡的高峰明显下调,使水迷宫测试的潜伏期明显缩短.结论美洛宁能够有效的抑制大鼠重型颅脑创伤后海马区神经细胞凋亡,明显改善学习记忆障碍.     

赛庚啶对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及对神经细胞凋亡的影响

目的:探讨赛庚啶(Cyproheptadine,CYP)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法:利用Longa线栓法制作大鼠局灶性脑缺血3h再灌注3、6、24、48h模型,TTC染色观察脑梗死体积,图像分析系统测定脑梗死范围,紫外分光光度仪测定血清乳酸脱氢酶(LDH)含量,TUNEL法检测凋亡神经细胞,免疫组化法测定脑细胞Caspase-3的表达。结果:与模型组比较,CYPI、II组的脑梗死绝对容积及梗死百分比显著减小(P<0.01),由于缺血再灌注导致的血清LDH含量升高显著降低(P<0.01),凋亡神经细胞及Caspase-3阳性表达产物明显减少(P<0.01)。结论:CYP对大鼠脑缺血再灌注损伤具有保护作用,抑制神经细胞凋亡过程,其机制与CYP抑制血清LDH升高及减少Caspase-3表达有关。     

尤瑞克林对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察尤瑞克林对缺血性脑卒中大鼠bcl-2、bax蛋白表达的影响,探讨尤瑞克林抑制神经细胞凋亡保护缺血性脑损伤的可能作用机制,为尤瑞克林治疗缺血性脑卒中在临床上的应用提供更深层次的理论依据。方法选用健康SD大鼠,随机分为假手术组、单纯缺血组、尤瑞克林低、中、高3个剂量组,每组12只。制作大鼠局灶性脑缺血模型,术后30min及23.5h尤瑞克林低、中、高剂量组舌下静脉注射尤瑞克林3.75×10-3、8.75×25-3、17.25×10-3PNA单位/kg,余2组以同样给药途径予等剂量0.9%氯化钠溶液。24h后行神经功能缺损评分;免疫组化法行凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白定量分析。结果单纯缺血组动物神经功能缺损评分最为严重,尤瑞克林不同剂量组神经功能缺损评分均明显低于单纯缺血组(P<0.05或<0.01)。尤瑞克林各组与单纯缺血组比较,bcl-2蛋白表达升高(P<0.05或<0.01)、同时bax蛋白表达降低(P<0.05或<0.01),且随剂量升高呈量效关系。结论尤瑞克林对缺血性脑损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高bcl-2蛋白表达、抑制bax蛋白表达而减轻细胞凋亡来减少脑缺血后迟发性神经元损伤。     

通络救脑注射液对脑缺血大鼠脑皮质梗塞灶Glu及其NMDA受体表达的影响

目的：观察通络救脑注射液对脑缺血大鼠脑皮质梗塞灶Glu及其NMDA受体表达的影响。方法：采用三氯化铁致大脑中动脉血栓形成大鼠脑缺血模型，免疫组织化学方法及图像分析，统计使用t检验。结果：模型组大鼠脑皮质梗塞灶Glu及其NMDA受体表达与假手术对照组比较明显增强，通络救脑注射液各组大鼠脑皮质梗塞灶Glu及其NMDA受体表达与模型组比较明显降低。结论：通络救脑注射液能明显降低Glu及NMDA受体在脑缺血大鼠脑皮层梗塞灶的表达。     

雌激素对脑缺血保护作用的分子机制

许多临床及基础研究显示雌激素对脑缺血具有保护作用 ,它能通过多种途径增加缺血区的血流量 ,减少再灌注损伤 ,有利于残存的神经元恢复功能。本文主要从分子机制方面阐述 ,雌激素能抑制缺血区肿瘤坏死因子 α(TNF α)等炎性细胞因子及粘附分子的表达 ;能作用于钙通道抑制钙离子超载和兴奋性氨基酸释放 ;诱发BCL 2等抗凋亡蛋白的表达 ,而且各途径之间关系密不可分。明确雌激素对脑缺血保护作用的确切机制 ,将更好地指导其临床应用     

黄芪、尼莫地平对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡的影响

目的：研究黄芪、尼莫地平单独及联合应用对大鼠脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的影响。方法：建立SD大鼠脑缺血再灌注模型,将60只SD大鼠随机分为5组,未手术组（0组）予以正常剂量麻醉剂;对照组（1组）予以0.9%NaCl溶液2ml;黄芪治疗组（2组）予以黄芪注射液6ml/kg,分别于术前12h及30min,术后每隔12h注射1次,直至48h后;尼莫地平治疗组（3组）,缺血前30min给予尼莫地平;黄芪联合尼莫地平治疗组（4组）,缺血前予以尼莫地平、手术后予黄芪,每组各12只。每组使用不同药物后进行对照,采用原位末端凋亡荧光法检测凋亡细胞。结果：0、1、2、3、4组凋亡细胞数分别为0.8±0.4、48.5±11.3、33.5±10.2、30.2±8.6、25.3±9.2。表明治疗各组与对照组相比细胞凋亡数明显减少,差异有统计学用意义（P〈0.05）。联合用药组与单独给药组差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：黄芪、尼莫地平联合用药可以明显抑制脑缺血再灌注时神经细胞凋亡的发生,减少凋亡细胞数目,减轻脑缺血再灌注时对脑细胞的损害。     

大蒜新素对肾型高血压大鼠和老年大鼠脑皮质微粒体ATPase活力的影响

目的研究大蒜新素（ａｌｌｉｔｒｉｄｉ,Ａｌｌ）对肾型高血压大鼠和老年大鼠脑皮质微粒体ＡＴＰａｓｅ活力的影响。方法用两肾一夹法建立大鼠Ｇｏｌｄｂｌａｔｔ肾型高血压模型;以钼酸铵定磷,采用光电比色法测定ＡＴＰａｓｅ活力。结果肾型高血压大鼠和老年大鼠中,脑皮质微粒体中Ｎａ＋,Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力比成年大鼠中显著降低,Ｍｇ２＋ＡＴＰａｓｅ无明显改变。大蒜新素（１５ ｍｇ·ｋｇ．ｄ－ｌ ｉｇ, ６０ ｄ）可显著提高肾型高血压大鼠和老年大鼠脑皮质微粒体中Ｎａ＋,Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力,而对Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ无明显影响。结论大蒜新素对大鼠脑皮质微粒体的Ｎａ＋,Ｋ＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ２＋,Ｍｇ２＋－ＡＴＰａｓｅ活力的提高可能有利于大蒜新素防治脑缺血作用。     

神经节苷酯对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的影响

目的研究神经节苷脂(GM)对大鼠脑缺血神经细胞凋亡的抑制作用及可能机制。方法线栓法制作大鼠大脑中动脉栓塞模型,♂SD大鼠,随机分成假手术组、模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组,缺血48 h后各组大鼠神经功能缺陷评分,测定脑组织一氧化氮(NO)的含量,检测脑细胞凋亡率,分析脑缺血区诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和Caspase-3 mRNA的表达。结果与假手术组比较,模型对照组、GM低、中、高剂量治疗组神经功能缺陷评分、NO含量、凋亡率、iNOS和Caspase-3表达量均增加,差异有统计学意义(P<0.05);与模型对照组和GM低剂量治疗组比较,GM中、高剂量治疗组均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);模型对照组和GM低剂量治疗组之间差异无统计学意义(P>0.05),GM中剂量治疗组和高剂量治疗组之间差异也无统计学意义(P>0.05)。结论神经节苷酯减少iN-OS生成,抑制细胞凋亡,对缺血神经细胞产生保护作用。     

丹参酮ⅡA对新生大鼠缺血缺氧性脑损伤后神经细胞凋亡的保护作用及机制研究

<正>新生儿缺血缺氧性脑损伤(hypoxia ischemic brain damage,HIBD)是引发新生儿死亡及神经系统功能障碍的主要原因之一,发病率高,严重影响患儿的生存质量。目前国内外治疗HIBD的主要方法为亚低温治疗[2],但该法在降温和复温幅度、方式等方面差异较大,患儿在治疗后死亡率仍高达50%,且伴严重神经系统受损、心肺功能下降及肝肾损害[3],因此,亚低温疗法存在较大的争议和挑战。目前其他     

双参通脉滴丸对缺血再灌注损伤性大鼠脑梗死面积及神经细胞凋亡的影响

目的:研究双参通脉滴丸对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织梗死面积和神经细胞凋亡的影响及该影响是否存在剂量依赖性。方法:采用双侧颈总动脉阻断的方法建造大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将大鼠随机分为假手术组、模型组、双参通脉滴丸(高、中、低剂量)组。采用TTC染色法测定脑组织梗死面积,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测脑组织凋亡神经细胞。结果:双参通脉滴丸(高、中、低剂量)组TTC染色法测定脑组织梗死面积与模型组比较差异显著,与假手术组无统计学意义;采用TUNEL法检测脑组织凋亡神经细胞数与模型组比较有差异,与假手术组相近。结论:双参通脉滴丸能减轻大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织梗死面积,抑制脑神经细胞的凋亡,并且其作用存在剂量依赖性。     

钙蛋白酶活性对颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆的影响

目的:探讨钙蛋白酶活性对重型闭合性颅脑创伤大鼠海马神经细胞凋亡和学习记忆功能的影响.方法:采用重型闭合性颅脑创伤模型.将120只SD大鼠随机分为创伤组、治疗组、假手术组及对照组,前3组各36只分为伤后6、12、24、48、72 h 5个时相组,每亚组6只,进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,余6只进行Morris水迷宫测试;对照组12只,其中6只进行钙蛋白酶活性测定及凋亡检测,另6只进行Morris水迷宫测试.治疗组各亚组在致伤前1 d经侧脑室注射MDL 28170(10μL),创伤组、假手术组及对照组给予生理盐水(10μL).结果:创伤组大鼠海马在伤后6h钙蛋白酶活性升高,于24 h达到高峰,治疗组各时相点海马区钙蛋白酶活性均较创伤组明显下调(P＜0.01);创伤组大鼠伤后6 h海马CA2区即出现少量凋亡阳性细胞,伤后24 h明显增多,于伤后72 h达高峰;治疗组凋亡细胞密度高峰较创伤组明显下调(P＜0.01);定位航行能力测试结果表明治疗组搜索安全岛潜伏期较治疗组明显缩短(P＜0.01);空间探索能力测试结果表明治疗组于第四象限的航行时间较创伤组明显延长(P＜0.05).结论:脑创伤后钙蛋白酶活性增加可能参与了神经细胞凋亡与学习记忆功能障碍的过程.     

促红细胞生成素对低出生体质量新生大鼠缺氧缺血后脑神经细胞凋亡的影响

目的 探究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对低出生体质量(low birth weight,LBW)新生大鼠缺氧缺血后脑神经细胞凋亡的影响.方法 2019年1—8月,选取自广东省医学实验动物中心购买的80只LBW新生大鼠以随机数字表法分为空白对照组、模型组、低剂量EPO组、高剂量EPO组,每组各20只;除空白对照组外,各组大鼠均采用结扎左侧颈总动脉并吸入80 mL/L氧气2 h制作为新生大鼠制成缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)动物模型;低剂量EPO组和高剂量EPO组于造模前、造模后7 d连续腹腔注射EPO(2500 IU·kg-1·d-1和5000 IU·kg-1·d-1),空白对照组和模型组腹腔注射等量的生理盐水;完成给药后24 h处死大鼠,使用HE染色法检测大鼠大脑皮层改变情况;使用TUNEL法检测大鼠神经细胞凋亡情况;使用蛋白质印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达情况;使用流式细胞仪检测大鼠脑神经细胞凋亡情况.结果 HE染色结果显示,空白对照组大鼠大脑皮层细胞密集、排列有序,层次清晰、分明;模型组大鼠大脑皮层细胞明显肿胀坏死、空化、间隙增宽;低剂量EPO组大鼠大脑皮层细胞轻度水肿、排列较为稀疏;高剂量EPO组大鼠大脑皮层洗白间隙增宽不明显、细胞层次较为分明、有序;TUNEL法结果显示,空白对照组、模型组、低剂量EPO组、高剂量EPO组大鼠神经细胞凋亡率分别为(10.21±2.00)％、(65.85±10.48)％、(40.32±5.22)％、(20.79±2.33)％,相比空白对照组,模型组神经细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白相对表达量显著升高,Bcl-2蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);相比模型组使用EPO处理各组神经细胞凋亡率、Bax、Caspase-3、Cas-pase-9蛋白相对表达量显著降低,且高剂量EPO组低于低剂量EPO组(P<0.05),Bcl-2蛋白相对表达量显著升高,且高剂量EPO组高于低剂量EPO组(P<0.05).结论 EPO可以通过抑制凋亡蛋白的表达并促进抑凋亡蛋白的表达,保护LBW新生大鼠缺氧缺血后脑神经细胞.     

Variabilin对急性胰腺创伤大鼠模型PLA2的抑制效应及保护作用研究

目的研究variabilin在急性胰腺创伤大鼠模型体内抑制PLA2的效应及其保护作用。方法建立急性胰腺创伤大鼠模型，分别设立variabilin给药组（试验组）及生理盐水给药组（对照组），测定其在模型体内抑制血清及组织内PLA活性的效应。另对照给药后72h内各组大鼠一般情况变化、腹腔CT表现、胰腺组织光镜和电镜下病理改变。结果Variabilin在伤后24h胰腺创伤大鼠模型体内即可表现出较强的抑制血清和胰腺细胞内PLA2的作用（P〈0.01），CT扫描显示其可减轻胰腺组织肿胀，光镜和电镜下结果证实其具有保持创伤后胰腺细胞形态完整性、减轻细胞器损伤的作用。结论Variabilin腹腔内应用于急性胰腺创伤大鼠模型，可在体内抑制血清及组织内PLA2的活性，具有良好的创伤保护作用。