氧化苦参碱对癫痫大鼠学习记忆功能及海马神经元的影响

目的观察氧化苦参碱(oxymatrine,OXY)对青霉素(penicillin,PEN)致痫大鼠学习记忆功能和海马神经元形态的影响。方法成年SD大鼠48只随机分为生理盐水对照组(normal saline,NS)、癫痫模型组(epilepsy,EP)、氧化苦参碱组(OXY)和苯巴比妥钠阳性对照组(PBS),腹腔注射青霉素诱导大鼠癫痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,观察大鼠海马区神经元细胞形态学改变。结果通过Morris水迷宫视频跟踪系统观察各组大鼠在A区和C区停留的时间和在A区和C区游泳路径的长度,PBS组和OXY组在A区的停留时间和在A区的游泳路径比EP组明显增长(P<0.05),对大鼠空间记忆能力有所改善。NS组神经细胞结构正常;EP组可见神经细胞肿胀、细胞器的损伤等改变;PBS组变性坏死程度较轻,大部分神经细胞胞膜都较完整;OXY组神经元细胞肿胀明显减轻,细胞器等损伤能够得到改善。结论 OXY可以对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面起到保护作用。     

氧化苦参碱对癫痫大鼠学习记忆功能的影响

目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OXY)对青霉素(Penicillin,PEN)致痫大鼠学习记忆功能和海马区p-JNK表达的影响。方法成年SD大鼠随机分为生理盐水对照组、青霉素致痫(EP)组(800万U.kg-1)、氧化苦参碱组(147.45mg.kg-1)和苯巴比妥钠(10mg.kg-1)阳性对照组,腹腔注射青霉素诱导大鼠癫痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,免疫组化检测大鼠海马区p-JNK阳性细胞数。结果与EP组相比,OXY组大鼠空间记忆能力明显改善;海马组织内p-JNK阳性细胞数明显降低。结论 OXY可以对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面起到保护作用。     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠学习记忆及海马p-JNK表达的影响

目的观察氧化苦参碱(Oxymatrine,OXY)对青霉素(Penicillin,PEN)致痫大鼠学习记忆和海马神经元p-JNK表达的影响。方法成年SD大鼠24只随机分为生理盐水对照组(Normal saline,NS)、癫痫模型组(Epilepsy,EP)、OXY组和JNK抑制剂组(SP600125,SP),腹腔注射青霉素诱导大鼠癫痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,免疫组化测定海马组织内p-JNK阳性细胞数。结果与EP组对比,OXY组大鼠逃避潜伏期和穿越平台次数明显减少(P<0.05);海马组织内p-JNK阳性细胞数明显降低(P<0.05)。结论 OXY可能通过抑制JNK信号通路的活化发挥对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面的保护作用。     

氯胺酮对神经痛大鼠模型海马NR2B亚单位表达的影响

目的研究亚麻醉剂量氯胺酮对神经痛（NP）大鼠模型的镇痛作用及对海马NR2B亚单位的影响。方法采用坐骨神经慢性压迫法（CCI）制备大鼠NP模型。大鼠随机分为4组（n=6）：假手术组（SO组）、模型组（NP组）、K1、K2组。K1和K2组于CCI术后7～31d每天分别腹腔注射氯胺酮10、20mg／kg。各组分别于术前1d和术后3、7、21、31d测定大鼠术侧后爪痛阈;术后第31天,用RT—PCR和Westernblot的方法检测大鼠海马组织中NR2BmRNA和蛋白的表达水平。结果与SO组比较,NP、K1组和K2组术后痛阈明显降低（P〈0．05）。手术对侧海马组织中NR2B表达水平增高（P〈0．05）。与NP组比较,K1组和K2组术后痛阈升高（P〈0．05）,海马的NR2B蛋白表达降低（P〈0．05）。结论亚麻醉剂量氯胺酮可以部分反转NP模型痛觉过敏和海马的NR2B亚单位表达增高。     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠海马神经递质的影响

目的观察氧化苦参碱（Oxy）对青霉素（PEN）致痫大鼠大脑海马谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）神经递质的影响。方法腹腔注射PEN制备癫痫动物模型,采用免疫组化SABC法测定腹腔内注射Oxy后癫痫大鼠海马Glu和GABA阳性细胞数目。结果腹腔注射Oxy的实验组癫痫大鼠海马Glu平均阳性细胞数低于未注射Oxy的模型组,而实验组GABA平均阳性细胞数高于模型组（P〈0．05）。结论Oxy抗癫痫作用机制与兴奋性神经递质Glu和抑制性神经递质GABA的作用有关。     

氧化苦参碱对肺纤维化大鼠肺内Th1/Th2平衡的影响

目的：观察博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化肺内Th1/Th2状态,以及氧化苦参碱（OMT）对肺纤维化大鼠的干预作用。方法：气管内注射博来霉素制作大鼠肺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠分组为正常对照组、模型组、氧化苦参碱治疗组。治疗组于造模后第2天起予腹腔注射氧化苦参碱注射液,直至处死。每组在造模后第3、7、14、28天随机处死6只,观察肺组织病理变化,计算机图形自动分析系统（C IAS）评估肺纤维化程度;检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织匀浆γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）。结果：与正常组比较,模型组表现为明显肺泡炎,炎性细胞浸润、严重肺纤维化。治疗组与模型组比较,肺泡炎和肺间质的纤维胶原组织增生均减轻（P〈0.05）。模型组第14、28天肺HYP含量高于同期正常组（P〈0.05）;治疗组第28天肺HYP含量明显低于同期模型组（P〈0.05）。与正常组比较,模型组IFN-γ均降低（P〈0.05）,但治疗组各时间点IFN-γ水平较模型组升高（P〈0.05）,且与正常组比较无统计学差异（P〉0.05）。正常组、治疗组和模型组各时间点IL-4含量均无统计学差异（P〉0.05）。结论：博莱霉素肺纤维化大鼠体内存在Th1反应不足现象,氧化苦参碱能减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其可能与纠正肺纤维化大鼠Th1/Th2的失衡有关。     

μ型阿片肽受体对癫痫敏感大鼠海马NR2B表达的影响

目的探讨μ型阿片肽受体（MORs）介导大鼠癫痫敏感性形成过程中海马NMDA2B受体（NR2B）表达变化。方法红藻氨酸（KA）皮下注射建立大鼠癫痫发作模型,采用脑立体定位及微渗透泵技术,海马内微量注射MORs激动剂PL017,或和拮抗剂β-FNA。7d后通过阈下剂量KA检测大鼠癫痫发作敏感性,应用原位杂交方法观察海马CA1区锥体细胞及齿状回颗粒细胞NR2B表达变化。结果PL017可显著增加大鼠海马CA1区锥体细胞和齿状回颗粒细胞NR2BmRNA（＋）神经元数及平均灰度。β-FNA则明显降低两个脑区的NR2BmRNA（＋）神经元数及平均灰度。结论MORs介导癫痫发作敏感性形成机制与NR2B表达上调有关。     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠学习记忆及海马P-JNK表达的影晌

摘要：目的观察氧化苦参碱（Oxymatrine,OXY）对青霉素（Penicillin,PEN）致痫大鼠学习记忆和海马神经元P-JNK表达的影响。方法成年SD大鼠24只随机分为生理盐水对照组（Normalsaline,NS）、癫痫模型组（Epilepsy,EP）、OXY组和JNK抑制剂组（SP600125,SP）,腹腔注射青霉素诱导大鼠癜痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,免疫组化测定海马组织内P-JNK阳性细胞数。结果与EP组对比,OXY组大鼠逃避潜伏期和穿越平台次数明显减少（P〈0．05）;海马组织内P-JNK阳性细胞数明显降低（P〈0．05）。结论OXY可能通过抑制JNK信号通路的活化发挥对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面的保护作用。     

氯胺酮对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达和学习记忆能力的影响

目的研究氯胺酮对成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达和学习记忆能力的影响。方法成年雄性昆明小鼠分为生理盐水组（16ml／kg）、氯胺酮K1组（50mg／kg）、氯胺酮K2组（100mg／kg）和氯胺酮K3组（200mg／kg）。氯胺酮K3组又分为K3a组（6h）、K3b组（12h）和K3c组（24h）,每组各10只,每组连续腹腔注射不同剂量氯胺酮7天,每天1次。采用Y迷宫进行记忆能力测试;提取海马组织总蛋白,免疫印迹检测P—ERK1／2表达。结果与生理盐水组相比,K1组和K2组成年小鼠学习记忆保持率、P—ERK1／2表达的差异无统计学意义（P〉0．05）,而K3组成年小鼠学习记忆保持率、P—ERK1／2表达均低于生理盐水组、K1组和K2组（P〈0．05）。结论过量氯胺酮可能通过抑制成年小鼠海马神经元P—ERK1／2表达损害其学习记忆能力。     

NMDA受体亚单位NRl、NR2A、NR2B在生后大鼠海马的免疫组织化学表达

目的：观察大鼠海马NMDA受体亚单位NRl、NR2A、NR2B三种蛋白质的生后发育变化。方法：生后不同时段的SD大鼠各5只，作HE染色，NRl、NR2A、NR2B组化反应染色。结果：生后各时间点海马结构各区锥体细胞及颗粒细胞胞体中均有NR1、NR2A、NR2B的表达，NR2B还在锥体细胞的顶树突中有较强表达。NRl与NR2B在Pld和P4d，两者在CA3区的表达均高于CAl区，Plw后两者在CAl区的表达则高于CA3区，在P2w～P3w其表达至峰值。而NR2A在Pld、P4d时其在海马结构各区的表达较高，随发育时间表达下降，约在P4w降至谷底。整个发育过程中。NRl在海马各区的表达始终高于NR2A和NR2B的表达。提示生后早期中NRl、NR2A、NR2B的表达具有发育性时空差异。     

锰对PC12细胞生长增殖及对ERK信号转导通路的影响

目的:研究不同浓度的锰对PC12细胞生长增殖及细胞外信号调节蛋白激酶1/2 (ERK1/2)信号转导通路的影响. 方法:体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC12细胞,以100～900 μmol/L MnCl2染毒后进行四唑盐比色实验(MTT)筛选锰的细胞毒性剂量,平板克隆形成实验观察MnCl2对细胞的抑制作用. Western blot检测ERK1/2及磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶1/2 (p-ERK1/2)表达情况. 结果:MTT、平板克隆形成实验结果显示100～900 μmol/L MnCl2对细胞的生长增殖有不同程度的抑制作用(P<0.05). Western blot结果显示随着染锰浓度的增高,PC12细胞p-ERK1/2表达量与对照组相比有显著性差异(P<0.05). 结论:一定浓度的MnCl2对PC12细胞的生长增殖有明显的抑制作用,这一作用可能是通过下调胞内p-ERK1/2表达实现的.     

妊娠大鼠吸入异氟烷、七氟烷对子代海马MAPK信号传导的影响

目的 观察大鼠妊娠前后暴露于最低肺泡有效浓度(1MAC)的异氟烷或七氟烷是否会引起子代海马中与MAPK信号转导通路相关的指标的变化.方法 大鼠妊娠前后吸入麻醉药模型的建立,Western方法检测子代大鼠海马中p-ERK1/2及PKCα蛋白的表达.结果 子代海马p-ERK1/2及PKCα蛋白的表达与对照组相比无明显差异,而母体于妊娠6、10、14和18d暴露于1MAC值的异氟烷或七氟烷,可使子代大鼠0、7、14d海马p-ERK1/2蛋白的表达显著减少(t=2.63,P＜ 0.01),PI组较PS组表达减少(t=2.13,P＜ 0.05),而这种变化于出生后28d消失.结论 大鼠妊娠前后暴露于1MAC的异氟烷或七氟烷引起的子代大鼠海马中MAPK信号转导通路相关的指标发生变化.     

丹参素对肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

目的:观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB(Platelet derived growth factor-BB,PDGF-BB)刺激大鼠肝星状细胞(Hepatic stellate cell,HSC)增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1,2(Phosphoryhted extracellular signal-regulated kinase 1/2,P-ERK1/2)表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制.方法:四甲基偶氮唑盐法检测大鼠HSC增殖活性;免疫细胞化学染色法测定大鼠HSC Ⅰ型胶原合成的表达;Western blot测定大鼠肝星状细胞P-ERK1/2的表达.结果:丹参素有抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原表达,p-ERK1/2表达的作用.结论:丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关.     

缺氧-复氧肾小管上皮细胞损伤的信号传导机制

目的 探讨肾小管上皮细胞在缺氧-复氧(H-R)损伤后的信号传导机制.方法 将不同方法处理的人近曲肾小管上皮细胞(HK-2)分为对照组、模型组和PDTC组,模型组和PDTC组再分别分成缺氧6、12、24 h组、缺氧24 h后分别复氧6、12、24 h组;检测细胞成活率、NF-κB p65蛋白表达、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)mRNA及蛋白表达情况.结果 与对照组比较,模型组随缺氧时间延长细胞数量逐渐减少,24 h达高峰(P＜0.05),复氧后细胞数量略有增加;随缺氧时间延长NF-κB p65阳性蛋白表达增多,复氧6h组达高峰(P＜0.05);ICAM-1 mRNA及蛋白表达随H-R时间延长渐增高(P＜0.05).PDTC组中NF-κBp65蛋白和ICAM-1 mRNA及蛋白表达较模型组有明显下降(P＜0.05).结论 H-R诱导HK-2细胞中NF-κcB p65的活化,从而上调ICAM-1 mRNA及蛋白表达.     

ERK1／2信号通路对亚急性帕金森病MPTP模型小鼠黑质COX-2，PGE2表达的影响

目的：研究ERK1/2信号通路对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）所致帕金森病（PD）小鼠模型中脑黑质环氧合酶-2（COX-2）和前列腺素E2（PGE2）的表达调控作用,探讨多巴胺（DA）能神经元变性失活的可能机制.方法：采用MPTP制备亚急性PD小鼠模型,应用免疫组织化学和免疫蛋白印记法观察小鼠黑质酪氨酸羟化酶（TH）,COX-2,PGE2以及磷酸化ERK1/2（p-ERK1/2）的表达变化;并观察给予ERK特异性抑制剂U0126对上述因子变化的影响.结果：模型组小鼠出现典型PD样症状,在MPTP第3次注射后1h,黑质区p-ERK1/2阳性细胞数明显增加,在MPTP第5次注射后24h,黑质区出现大量COX-2,PGE2阳性细胞,伴有约50%的TH阳性神经元丢失;给予ERK特异性抑制剂U0126后小鼠PD样症状减轻,p-ERK1/2,COX-2,PGE2阳性细胞数明显减少,MPTP第5次注射后24h,TH阳性细胞数较对照组仅下降25%.结论：ERK1/2通路可能参与调控COX-2及PGE2的表达而在PD发病过程中发挥重要作用,抑制ERK信号通路对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的分子机制探讨

目的 通过建立大鼠慢性脑缺血模型,观察NR1、NR2B在海马和皮层的表达水平,探讨乌龙丹改善慢性脑缺血大鼠学习记忆功能的部分作用机制.方法 采用双侧颈总动脉永久性结扎制作大鼠慢性脑缺血模型,造模3周后存活大鼠随机分为假手术组、模型组、银杏叶组、乌龙丹高剂量组、乌龙丹低剂量组(n=12),Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力,Western blot法检测大鼠海马和皮层NR1、NR2B的表达水平.结果 模型组大鼠学习记忆能力较假手术组和乌龙丹给药组明显降低(P＜0.05,或P＜0.01);模型组皮层及海马区NR1、NR2B表达水平与假手术组比较,比值显著降低(P＜0.01).乌龙丹高剂量组和银杏叶组皮层及海马与模型组比较NR1、NR2B表达均增高(P＜0.01);但与假手术组比较,NR1、NR2B表达水平比值降低,差异也具有统计学意义(P＜0.01).结论 乌龙丹改善大鼠慢性脑缺血学习记忆功能可能途径之一:一定程度上提高海马和皮层区NR1、NR2B的表达水平.     

血小板源性生长因子诱导大鼠心脏成纤维细胞胶原合成的信号转导途径研究

①目的探讨细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)途径在血小板源性生长因子(PDGF)刺激大鼠心脏成纤维细胞胶原合成中的作用。②方法分离培养新生大鼠心脏成纤维细胞。免疫细胞化学法、Western blot法检测Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。③结果与对照组相比,在PDGF刺激下,大鼠心脏成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达增加,PD98059 25μmol/L预孵育1小时能够抑制PDGF的刺激作用。④结论PDGF能够通过ERK1/2途径调节大鼠心脏成纤维细胞的胶原合成。     

ERK1/2抑制剂对高糖高胰岛素诱导的肥大心肌细胞的影响作用

目的：探讨体外培养中ERK1/2抑制剂对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞的肥大是否具有抑制作用。方法：新生Wistar大鼠心肌细胞在含有10%小牛血清的DMEM中培养72h后，换用无血清培养基并分别加入高糖高胰岛素、高糖高胰岛素+ERK1/2抑制剂培养48h，未加入任何药物的心肌细胞在无血清培养基中继续培养48h作为对照。检测心肌细胞肥大指标：心肌细胞表面积、总蛋白含量的变化；并检测心肌营养素1（CT-1）mRNA的表达。结果：高糖高胰岛素可增加心肌细胞表面积、总蛋白含量以及CT-1 mRNA表达。ERK1/2抑制剂可部分抑制心肌细胞的肥大，降低心肌细胞表面积和总蛋白含量，但对CT-1 mRNA表达的影响不明显。结论：ERK1/2抑制剂对高糖高胰岛素诱导的心肌细胞肥大具有一定的抑制作用，其作用机制可能是ERK1/2抑制剂通过作用于CT-1下游或独立于CT-1之外的信号分子而参与了高糖高胰岛素诱导心肌细胞肥大的过程。     

TTF1调控ERK信号转导通路的作用

[目的]探讨TTF1调控ERK信号转导通路的作用.[方法]建立人肝癌HepG2裸鼠移植瘤模型,取40只随机分为阴性对照组、紫杉醇组、TTF1小剂量组、TTF1中剂量组及TTF1大剂量组,每组各为8只,药物干预21 d后处死裸鼠,采用Western blot技术检测肿瘤组织ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达.[结果]TTF1对人肝癌HepG2裸鼠移植瘤的生长有抑制作用;ERK1/2蛋白表达未见明显变化,p-ERK1/2蛋白表达随着TTF1剂量的升高而减少.[结论]TTF1对肿瘤生长有抑制作用,其机制可能与通过调节ERK信号转导通路有关.     

哮喘患者血清被动致敏对人气道平滑肌细胞ERK信号传导途径的影响

目的 研究哮喘患者血清被动致敏后,细胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)磷酸化的变化,以探讨ERK信号传导途径在哮喘发病中的作用.方法 免疫细胞化学法及免疫印记法检测ERK蛋白及其磷酸化(p-ERK)水平.结果 哮喘患者血清被动致敏后,ERK蛋白的表达无明显变化,而p-ERK的表达明显升高(n=4,P<0.05).结论 哮喘患者血清被动致敏后,HASMCs的ERK磷酸化显著增强,此变化可能是哮喘形成和发生的机制之一.