Notch1、P21~(WAF1/Cip1)及活化caspase3在肝细胞癌中表达的相关性

目的研究Notch1、P21WAF1/Cip1及活化caspase3在肝细胞癌中表达的相关性。方法利用免疫组织化学检测60例肝细胞癌(HCC)和15例正常肝组织中Notch1、P21WAF1/Cip1及活化caspase3的表达。结果HCC中Notch1、P21WAF1/Cip1及活化caspase3的阳性率和阳性表达强度显著低于正常肝组织(P0.01);Notch1、P21WAF1/Cip1及活化caspase3的表达强度与HCC分级和肿瘤大小密切相关,肿瘤分化愈差和肿瘤直径愈大,3种蛋白表达愈弱(P0.01);在HCC中,P21WAF1/Cip1和活化caspase3的表达强度与Notch1表达强度呈显著正相关(r分别为0.76和0.71)。结论提示Notch1信号通路可能是通过影响细胞周期和细胞凋亡在HCC发生发展过程中发挥负性调控作用。     

抑癌基因PTEN与pAkt在肝细胞肝癌中表达及其意义

目的研究肝细胞癌（HCC）中抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因（PTEN）与磷酸化丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶B（pAkt）表达及其意义。方法采用免疫组化S—P法检测65例HCC及癌旁组织中FFEN与pAkt表达并分析两者与肝癌患者年龄、临床分期、病理类型及侵袭转移性之间关系。结果HCC中PTEN蛋白阳性率明显低于癌旁肝组织，且随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而显著下降（P〈0．05）；pAkt在HCC中表达率明显高于癌旁肝组织，且其表达率随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而增加（P〈0．05）；肝癌及癌旁组织中，FFEN与pAkt表达均呈负相关（P〈0．01）。结论PTEN与pAkt表达与肝癌组织恶性程度相关，联合检测PTEN与pAkt在癌组织中表达情况，可作为肿瘤预后评估指标之一。     

葡萄糖转运蛋白1、缺氧诱导因子-1α和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性研究

目的探讨葡萄糖转运蛋白1（Glutl）、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Ki-67在肝细胞癌中的表达及其相关性。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学Envision法检测171例肝细胞癌组织、55例癌旁组织、22例正常肝组织中Glutl、HIF-1α和Ki-67的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果Glutl、HIF-1α和Ki-67在171例肝细胞癌组织中的阳性表达率分别为15．2％、19．9％和66．1％,明显高于其在癌旁肝组织（1．8％、1．8％和5．5％）和正常肝组织（均阴性）中的表达率（P〈0．05）。Glutl和HIF-1α表达与肝细胞癌分化程度和TNM分期有关（P〈0．01,P〈0．05）;Ki-67表达与肝细胞癌分化程度有关（P〈0．01）。肝细胞癌组织中Glutl与HIF-1α的表达呈正相关（r1=0．553,P〈0．05）;Glutl、HIF-1α与Ki-67均呈正相关（r2=0．560,r3=0．613,P〈0．05）。结论Glutl、HIF-1α和Ki-67在肝细胞癌的发生发展中起着不同程度的作用,联合检测Glutl、HIF-1α和Ki-67可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。     

肝癌端粒酶逆转录酶表达与端粒酶活性相关性及临床意义

目的 探讨肝细胞肝癌（HCC）中端粒酶逆转录酶（hTERT）蛋白表达情况与端粒酶活性的相关性及其临床意义。方法 采用免疫组化S-P法检测52例HCC癌组织及相应癌旁组织中hTERT蛋白表达，并用TRAP-ELISA法检测上述组织中的端粒酶活性。结果 HCC癌组织中hTERT蛋白与端粒酶活性表达阳性率分别为86．5％（45／52）和80．8％（42／52），它们与相应癌旁组织比较差异均有显著性（P〈0．01）；且癌组织中hTERT蛋白阳性表达与端粒酶活性呈高度正相关（r=0．761，P〈0．001）。hTERT蛋白阳性表达与患者的性别、年龄、有无乙肝、肝硬化、肝功能、肿瘤包膜、病理分级及分期等临床指标无关，而与HCC肿瘤大小有关（P〈0.05）。结论 HCC癌组织中hTERT蛋白过度表达，可能参与肝癌端粒酶活性的调控，而在HCC发生、发展中起重要作用。hTERT蛋白表达与端粒酶活性均可作为HCC诊断的特异性指标。     

基质金属蛋白酶-9及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1在肝细胞癌中的表达及意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及组织基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）在肝细胞癌（HCC）中表达的意义。方法：收集HCC手术切除标本42例，采用免疫组化法检测MMP-9及TIMP-1的表达。结果：正常对照组中MMP-9、TIMP-1的表达均为阴性。MMP-9及TIMP-1在HCC中表达的阳性率分别为73．8％和69．0％，两者的阳性表达与患者年龄、性别、AFP是否阳性、HbsAg是否阳性、肿瘤大小、病理分级无关（P〉0．05）。有癌栓组MMP-9阳性率为100％，无癌栓组阳性率为63．3％，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。包膜完整组MMP-9阳性率为33．3％，包膜不完整组阳性率为84．8％，组间差异有统计学意义（P〈0．01）。TIMP-1在以上2组间差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论：MMP-9和TIMP-1的表达与HCC关系密切，检测HCC中两者的表达，可作为判断HCC侵润转移的指标。     

几种肝病患者的性激素水平变化的研究

为探讨肝细胞癌（HCC）患者的性激素水平及其可能所起的作用，我们对64例男性肝病患者和正常男性对照20人的血清睾酮（T）、雄烯二酮（△4－A）、雌二醇（E2）、促卵泡生成素（FSH）和黄体生成素（LH）进行了检测。其中，HCC伴肝硬化（LC）患者15人；HCC不伴LC患者9人；LC患者30人；继发性肝肿瘤患者10人。结果显示：各组原发性肝病患者的血清T水平均低于正常（P＜0．01），而继发性肝肿瘤患者则正常；LC组患者的血清E2较正常水平显著增高（P＜0．01），LC伴HCC组患者与正常组E2水平增高（P＜0．05），HCC不件LC组、继发性肝肿瘤组患者与正常人相比E2无明显变化。结果表明：低水平T与原发性肝细胞癌（PMQ有关，在PHC的发生和发展中可能起一定的作用。     

P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1基因蛋白在沥青烟暴露小鼠肺组织中的表达

[目的]探讨沥青烟对小鼠肺组织形态及基因蛋白P53、P21^WAF/CIP1和Cyclin D1表达的影响。[方法]建立沥青烟亚急性染毒小鼠模型，将120只昆明种健康小鼠随机分为3组，即1个对照组和2个染毒组，染毒组进行不同浓度（55、165mg,／m^3）和不同时间（30、60d）染毒，光镜下观察肺组织形态改变，采用免疫组化S-P法，对P53、P21、Cyclin D1染色，观察P53、P21和Cyclin D1基因蛋白表达。[结果]不同浓度、不同时间染毒小鼠肺组织形态有不同程度改变，高浓度染毒组出现不典型增生。小鼠肺组织P53基因蛋白表现为低浓度染毒30d组，未见阳性表达；高浓度染毒60d组呈强阳性表达（P〈0．01）。P21^WAF/CIP1基因蛋白表达低浓度染毒30d呈阳性表达；高浓度染毒60d组表达明显下调（P〈0．01）。Cyclin D1基因蛋白表达同P53基因蛋白表达。[结论]随着染毒浓度和染毒时间的增加，肺组织增生逐渐明显，P53和Cyclin D1基因蛋白的表达呈上升趋势，P21^WAF/CIP1呈下降趋势。     

肝细胞癌中热休克蛋白70、多药耐药相关蛋白和增殖核抗原的表达研究

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在肝细胞癌（HCC）中的表达以及与多药耐药相关蛋白（MP．P）和增殖核抗原（PCNA）表达的关系。方法采用免疫组化对44例HCC中HSP70、MAP和PCNA的表达进行了检测。结果44例HCC中有30例可检出HSP70（阳性率6812％）,有24例可检出MRP（阳性率53．6％）,有34例可检出PCNA（阳性率77．3％）。HSP70在分化较好和分化不良的HCC中的阳性率分剐为54．2％和85％,两者相比差异显著（Χ^2=4．5,P〈0．05）。MRP和PCNA与HCC组织分化程度无关（Χ^2=2．4,X22=3．5,P〉0．05）。HSP70表达与MRP和PCNA表达有一致性（Χ^2=24,X22=29．2,P〈0．01）。结论肝细胞癌是HSP70高表达肿瘤．其表达与MRP和PCNA表达密切相关．可能和HCC的耐药和发展有关。     

肝细胞癌中热休克蛋自70、多药耐药相关蛋白和增殖核抗原的表达研究

目的探讨热休克蛋白70（HSP70）在肝细胞癌（HCC）中的表达以及与多药耐药相关蛋白（MP．P）和增殖核抗原（PCNA）表达的关系。方法采用免疫组化对44例HCC中HSP70、MAP和PCNA的表达进行了检测。结果44例HCC中有30例可检出HSP70（阳性率6812％）,有24例可检出MRP（阳性率53．6％）,有34例可检出PCNA（阳性率77．3％）。HSP70在分化较好和分化不良的HCC中的阳性率分剐为54．2％和85％,两者相比差异显著（Χ^2=4．5,P〈0．05）。MRP和PCNA与HCC组织分化程度无关（Χ^2=2．4,X22=3．5,P〉0．05）。HSP70表达与MRP和PCNA表达有一致性（Χ^2=24,X22=29．2,P〈0．01）。结论肝细胞癌是HSP70高表达肿瘤．其表达与MRP和PCNA表达密切相关．可能和HCC的耐药和发展有关。     

乳腺癌中组蛋白乙酰化与p21^WAF1的表达研究

目的探讨乳腺癌中乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1的表达变化及其意义。方法采用HE染色鉴定乳腺癌的病理形态变化;应用免疫组织化学法检测p21^WAF1在80例乳腺癌组织与80例正常乳腺组织中的表达;免疫印迹法检测乙酰化的组蛋白H3、H4及p21^WAF1蛋自在80例乳腺癌组织及80例正常乳腺组织中的表达。结果·HE染色可见,与正常的乳腺组织相比,乳腺癌组织结构及细胞形态有明显的异型性。免疫组化结果显示：p21^WAF1。在80例乳腺癌组织中有49例阳性表达（61．25％）;而80例正常乳腺组织中只有3例弱阳性表达（3．75％）,两种组织中的表达差异有统计学意义（P〈0．05）。免疫印迹法结果表明,p21^WAF1蛋白在乳腺癌中的表达高于正常组织,乳腺癌组为0．78±0．095、正常乳腺组为0．65±0．055;乙酰化的组蛋白H3、H4在正常乳腺组织中的表达比乳腺癌组织高,其中乙酰化的组蛋白H3正常乳腺组为2．35±0．340、乳腺癌组为1．07±0．067,乙酰化的组蛋白H4正常乳腺组为3．44±0．202、乳腺癌组为1．11±0．086,两者表达差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论组蛋白乙酰化与p21^WAF1蛋白的表达变化与乳腺癌的发生发展有关。     

抑癌基因ING_1、P21/WAF_1、P53蛋白在宫颈癌中的表达

目的: 研究ING1、P21 /WAF1、P53基因蛋白在宫颈癌组织中的表达、意义及相互关系。方法: 对 69例宫颈癌鳞状上皮组织、21例宫颈原位癌组织、18例宫颈不典型增生组织应用免疫组化法, 检测P33ING1、P21 /WAF1 和P53的表达情况,并选择 10例正常宫颈组织作对照。分析各指标间的相关性。结果: P33ING1在正常宫颈组织中表达全部为阳性, 而宫颈不典型增生组织中P33ING1的阳性表达率为 72 2% (13 /18); 宫颈原位癌组织中P33ING1的阳性表达率为 57 1% (11 /21); 宫颈浸润癌组织中P33ING1的阳性表达率为 59 4% ( 41 /69 )。PING1在原位癌、浸润癌的表达明显低于正常组织和不典型增生 (P<0 01 )。P33ING1与P21 /WAF1、P53表达有相关性 (P<0 01)。结论: ING1 是抑癌基因, 其蛋白P33ING1在宫颈癌中低表达, 对宫颈癌的发生、发展起重要作用。P33ING1、P21 /WAF1、P53表达具有相关性。     

燃煤型砷中毒皮肤病变中P16,P21^WAF1／CIP1,CyclinD1蛋白 …

目的 探讨砷中毒与皮肤病变的关系。方法 用免疫组织化学法检测燃煤型砷中毒患者皮肤病变中Ｐ１６、Ｐ２１＾ＷＡＦ１／ＣＩＰ１、ＣｙｃｌｉｎＤ１蛋白的表达情况。结果 Ｐ１６的表达强度和密度随患者皮肤病变程度的加重而逐渐减弱,Ｐ１６蛋白在癌变组（Ａ组）、癌前病变组（Ｂ组）和过度角化组（Ｃ组）中普遍缺失表达,明显低于一般增生病变组（Ｄ组）和正常组;Ｐ２１＾ＷＡＦ／ＣＩＰ１、ＣｙｃｌｉｎＤ１的表达强度和密度随     

肝癌细胞中抑制Galectin-3基因表达对细胞增殖及侵袭能力的影响及机制研究

目的 探讨Galectin-3基因在肝癌细胞中的表达及抑制其表达对肝癌细胞增殖和侵袭能力的影响及机制。 方法 RT-PCR检测人肝癌细胞MHCC-97H、HepG2、SMCC-7721及人正常肝细胞HL-7702中Galectin-3基因的mRNA表达;Control、NC-siRNA、Galectin-3-siRNA转染HepG2细胞,48 h后Western blot检测各组细胞中Galectin-3、MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes1的蛋白表达;CCK8实验和流式细胞仪分别检测细胞的增殖和侵袭能力。 结果 MHCC-97H、HepG2、SMCC-7721细胞中Galectin-3的mRNA表达均显著高于正常肝细胞HL-7702中的Galectin-3的mRNA表达,差异有统计学意义(P<0.01),Galectin-3在HepG2细胞中的表达最高,选择作为后续的研究对象;转染siRNA后能显著抑制Galectin-3基因的表达;Galectin-3-siRNA组细胞存活率、细胞侵袭数及MMP-2、MMP-9、Notch1、Hes1蛋白表达均低于对照组和NC-siRNA组,差异有统计学意义(P<0.01)。 结论 抑制肝癌细胞中Galectin-3基因表达能显著降低癌细胞的增殖及侵袭能力,其机制与Notch1信号通路的调控有关。     

肝硬化、肝细胞肝癌中PTEN的表达及其临床意义

目的:探讨PTEN在肝硬化、肝癌组织中的表达及其临床意义.方法:用S-P免疫组织化学方法分别检测71例肝细胞性肝癌(HCC)15例肝硬化及10例正常肝脏PTN蛋白表达.结果:10例正常肝组织中PTEN蛋白均为阳性表达.HCC中PPTEN蛋白的阳性率为69.0%(49/71),明显低于肝硬化组(93.3%)及正常肝组织(100%)(P<0.01).PTEN蛋白在高分化、中分化、低分化肝细胞性肝癌中的阳性率分别为73.5%、69.6%和57.1%,肝细胞性肝癌中PTEN蛋白阳性表达率与肿瘤的组织分化及其它临床病理因素无关(P>0.05).肝癌PTEN蛋白阳性表达率与有无合并肝硬化无关(P>0.05).结论:PTEN表达缺失在肝细胞性肝癌的发生和发展过程中发挥重要作用,检测PTEN蛋白表达有助于肝细胞性肝癌的诊断.     

上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21~(WAF1/CIP1)蛋白、PCNA蛋白的表达及其相关性

目的:探讨上皮性卵巢癌中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达及其相关性,为卵巢癌的临床诊断及治疗包括基因治疗提供实验依据。方法:采用Eli Visionplus免疫组化研究40例上皮性卵巢癌组织、15例正常卵巢组织、25例良性上皮性卵巢肿瘤组织、7例交界性上皮性卵巢肿瘤组织中P73蛋白、P21WAF1/CIP1蛋白与PCNA蛋白的表达。结果:随着上皮性卵巢癌病理学分级及临床分期增高,①P73蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间差异无统计学意义,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);②P21WAF1/CIP1蛋白表达率降低,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05);③PCNA蛋白表达率增高,差异有统计学意义(P0.05);但不同病理类型之间无统计学差异,在良性上皮性卵巢肿瘤与上皮性卵巢癌差异有统计学意义(P0.05)。结论:①P73蛋白、PCNA蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率升高,并随恶性程度增高而增高。②P21WAF1/CIP1蛋白表达在上皮性卵巢癌中阳性率降低,并随恶性程度增高而降低,与P73蛋白表达呈负相关。     

肝癌组织中转化生长因子beta1表达与Treg浸润的关系及临床意义

目的 探讨肝癌组织中转化生长因子beta1表达与Treg浸润的关系及临床意义.方法 采用免疫组织化学染色的方法检测213例肝癌组织、癌旁肝组织中TGF-β和Foxp3表达.结果 肝癌组织中TGF-β低表达组92例,高表达组121例,高表达阳性率为56.81％;癌旁组织中TGF-β低表达组44例,高表达组169例,高表达阳性率为79.34％,癌组织和癌旁高表达率差异有统计学意义(P=0.0000).肝癌组织中Foxp3细胞平均密度为2.76个/HP,癌旁极少见或未见.肝癌组织中TGF-β与Foxp3表达呈正相关(r=0.221,P=0.027).肝癌组织中TGF-β和Foxp3表达在患者血浆AFP浓度高水平组高于低水平组(P=0.017 6, 0.028 1).结论 TGF-β在肝癌瘤旁组织较之肝癌组织表达更为明显,而Treg侵润则与之不相符,在肝癌组织中TGF-β的表达,与肿瘤局部组织中的Treg侵润具有一定的正相关性,与临床特征相关联可见患者血清AFP水平与TGF-β及Foxp3表达具有一定的相关性.     

环氧化酶-2基因在肝细胞癌中的表达及其意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在肝细胞癌发生发展中的作用及其意义.方法用免疫组织化学的方法检测41例肝细胞癌组织、16例乙型肝炎后肝硬化组织及5例正常肝脏组织中COX-2蛋白的表达情况,并分析COX-2蛋白表达与肝细胞癌临床生物学特征的关系.结果COX-2蛋白在肝细胞癌和肝硬化组织中的表达率分别为61.0%（25/41）和56.3%（9/16）,正常肝脏组织中无表达,与以上各病变组织COX-2蛋白表达差异有显著性（P＜0.05）;而在肝硬化组织与肝细胞癌组织COX-2蛋白表达差异无显著性（x^2=0.11,P＞0.05）.COX-2蛋白表达与肝细胞癌组织分化程度、癌肿转移状况有关（x^2=10.3,4.81,P＜0.05）.结论COX-2蛋白在肝硬化、肝细胞癌组织中表达上调,在肝细胞癌发生发展过程中可能起重要作用.     

黄曲霉毒素B1诱导性大鼠肝癌超微结构观察及N-ras表达变化

目的探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)诱导性大鼠肝癌模型超微病理特征及N-rasmRNA表达变化规律。方法 40只Wistar大鼠分为正常对照组(12只)和诱癌组(28只)用AFB1(400μg/kg)间断腹腔注射雄性Wistar大鼠制作肝癌模型,电镜观察大鼠肝组织超微结构。应用RT-PCR技术检测对照组大鼠肝组织,损伤病变、早期癌变和癌变肝组织中N-ras mRNA表达水平。结果本组大鼠肝癌模型中,肝细胞呈变性损伤,异型性到癌变;线粒体由增生肿胀到枯竭、空泡变;糖原颗粒呈逐渐减少等特征性变化。观察到典型肝细胞吞噬细胞现象。N-rasmRNA在早期癌变组织、癌变组织中表达水平均显著高于对照组大鼠肝组织和损伤病变肝组织(F=5.47,P=0.019;后者F=6.98,P=0.006)。结论 AFB1诱导性大鼠肝细胞出现变性、异型性及癌细胞渐变的超微结构特征,N-ras异常表达参与大鼠肝细胞癌变机制。