碱性成纤维细胞生长因子促进脑室管膜前下区细胞增殖的实验研究

目的:观察从室管膜前下区(anteriorsubventricularzone,SVZa)沿喙侧迁移流(rostralmigratorystream,RMS)至嗅球通路上碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)的表达情况。方法:应用地高辛标记的酶标原位杂交技术显示新生7d大鼠脑内室管膜前下区经迁移流至嗅球区域中bFGFmRNA的表达情况。结果:新生7d大鼠的脑内广泛表达bFGFmRNA,尤以SVZa,RMS和嗅球区域最为明显,其强度又以SVZa最强,阳性细胞数量最多,密度最大,嗅球最弱。在嗅球区阳性产物主要沉积在细胞质内,而在SVZa和RMS区则以核内较多。结论:bFGF对于维持SVZa区神经干细胞(neuralstemcell,NSC)的增殖状态密切相关,而NSC为了保持自身的增殖状态则表达了较高含量的bFGF。在SVZa区bFGF主要以促进细胞增殖为主,而在嗅球区bFGF则以促进细胞分化为主。     

转化生长因子β对大鼠神经干细胞增殖和分化的调控作用

目的：研究转化生长因子β对新生(P0天)大鼠脑室管膜前下区(anterior subventricular zone,sVZa)神经干细胞增殖、迁移和分化的调控作用。方法：应用地高辛标记的cRNA探针核酸分子原位杂交技术显示新生大鼠脑内转化生长因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)的mRNA表达。结果：新生大鼠的脑内广泛表达TGF-β mRNA，尤以SVZa区经喙侧迁移流(rostral migratory stream，RMS)至嗅球的通路上最为明显，其强度又以SVZa区最强，阳性细胞数量最多，密度最大，RMS区域相对较弱，嗅球又见增多。细胞核和细胞质内均可见到阳性产物，但阳性产物主要沉积在胞核内。结论：SVZa区神经干细胞表达了较高含量的TGF-β，提示TGF-β参与了维持SVZa区神经干细胞的增殖状态，使SVZa区的神经干细胞处于适度稳定的增殖状态，而嗅球区表达量较高的TGF-β则可能主要参与促进细胞分化。     

转化生长因子β对大鼠神经干细胞增殖和分化的调控作用

目的:研究转化生长因子β对新生(P0天)大鼠脑室管膜前下区(anteriorsubventricularzone,SVZa)神经干细胞增殖、迁移和分化的调控作用。方法:应用地高辛标记的cRNA探针核酸分子原位杂交技术显示新生大鼠脑内转化生长因子β(transforminggrowthfactor-β,TGF-β)的mRNA表达。结果:新生大鼠的脑内广泛表达TGF-βmRNA,尤以SVZa区经喙侧迁移流(rostralmigratorystream,RMS)至嗅球的通路上最为明显,其强度又以SVZa区最强,阳性细胞数量最多,密度最大,RMS区域相对较弱,嗅球又见增多。细胞核和细胞质内均可见到阳性产物,但阳性产物主要沉积在胞核内。结论:SVZa区神经干细胞表达了较高含量的TGF-β,提示TGF-β参与了维持SVZa区神经干细胞的增殖状态,使SVZa区的神经干细胞处于适度稳定的增殖状态,而嗅球区表达量较高的TGF-β则可能主要参与促进细胞分化。     

嗅茎切断对脑室下层细胞迁移的影响

背景在成年大鼠的脑室下层存在神经元前体细胞,这些细胞持续不断沿着嘴侧迁移流不停地向嗅球迁移并分化嗅球内的中间神经元,阻断嘴侧迁移流对这些细胞的迁移以及分化是否产生影响尚不得而知.目的探讨嘴侧迁移流阻断对脑室下层细胞迁移的影响.设计随机对照实验.单位中国科学技术大学生命科学学院;徐州医学院人体解剖学教研室.材料实验于1997-09/1999-01在徐州医学院动物实验中心完成,选用成年雄性SD大鼠25只.随机分为嗅茎切断30 d组(n=10)和60 d组(n=15,其中5只作免疫组织化学).方法在嗅球后切断嗅茎,手术30,60 d后将动物灌注固定处死,制作脑的连续石蜡切片,计量嗅球后份平面嘴侧迁移流的细胞密度和横截面积、用免疫组织化学的方法对嘴侧迁移流内的细胞进行定性分析.主要观察指标嗅茎后份平面的细胞密度,横截面积和唾液酸-神经细胞黏附分子的表达.结果纳入25只SD大鼠,因手术动物死亡和嗅茎切断手术失败,用于分析的动物只有13只,30 d组5只,60 d组8只(其中用于免疫组织化学的3只).①嗅茎切断后嗅茎后份平面嘴侧迁移流形态学及数量变化在Nissl染色的切片上,嘴侧迁移流细胞较密集,染色深,和周围组织区别明显.未见明显的核固缩、核碎片等细胞死亡的特征.嗅茎切断30 d组和60 d组手术侧嗅茎后份平面的细胞密度均高于对照侧(P＜0.01),60 d组手术侧嘴侧迁移流在嗅茎后份平面的相对细胞密度高于30 d组手术侧的细胞密度(P＜0.01).两组手术侧横截面积均大于对照侧(P＜0.01),但嗅茎切断60 d组和30 d组手术侧无差异(P＞0.05).②嗅茎切断手术后嘴侧迁移流细胞的免疫组织化学反应嗅茎切断60 d后,嗅茎后份平面嘴侧迁移流内积聚的细胞表现为多唾液酸-神经细胞黏附分子阳性.结论切断嗅茎导致嘴侧迁移流内神经元前体细胞在切断平面的尾侧积聚,这些集聚的细胞可能发生分化.     

嗅茎切断对脑室下层细胞迁移的影响

背景：在成年大鼠的脑室下层存在神经元前体细胞,这些细胞持续不断沿着嘴侧迁移流不停地向嗅球迁移并分化嗅球内的中间神经元,阻断嘴侧迁移流对这些细胞的迁移以及分化是否产生影响尚不得而知.目的：探讨嘴侧迁移流阻断对脑室下层细胞迁移的影响.设计：随机对照实验.单位：中国科学技术大学生命科学学院;徐州医学院人体解剖学教研室.材料：实验于1997-09/1999-01在徐州医学院动物实验中心完成,选用成年雄性SD大鼠25只.随机分为嗅茎切断30 d组（n=10）和60 d组（n=15,其中5只作免疫组织化学）.方法：在嗅球后切断嗅茎,手术30,60 d后将动物灌注固定处死,制作脑的连续石蜡切片,计量嗅球后份平面嘴侧迁移流的细胞密度和横截面积、用免疫组织化学的方法对嘴侧迁移流内的细胞进行定性分析.主要观察指标：嗅茎后份平面的细胞密度,横截面积和唾液酸-神经细胞黏附分子的表达.结果：纳入25只SD大鼠,因手术动物死亡和嗅茎切断手术失败,用于分析的动物只有13只,30 d组5只,60 d组8只（其中用于免疫组织化学的3只）.①嗅茎切断后嗅茎后份平面嘴侧迁移流形态学及数量变化：在Nissl染色的切片上,嘴侧迁移流细胞较密集,染色深,和周围组织区别明显.未见明显的核固缩、核碎片等细胞死亡的特征.嗅茎切断30 d组和60 d组手术侧嗅茎后份平面的细胞密度均高于对照侧（P＜0.01）,60 d组手术侧嘴侧迁移流在嗅茎后份平面的相对细胞密度高于30 d组手术侧的细胞密度（P＜0.01）.两组手术侧横截面积均大于对照侧（P＜0.01）,但嗅茎切断60 d组和30 d组手术侧无差异（P＞0.05）.②嗅茎切断手术后嘴侧迁移流细胞的免疫组织化学反应：嗅茎切断60 d后,嗅茎后份平面嘴侧迁移流内积聚的细胞表现为多唾液酸-神经细胞黏附分子阳性.结论：切断嗅茎导致嘴侧迁移流内神经元前体细胞在切断平面的尾侧积聚,这些集聚的细胞可能发生分化.     

半乳凝素1对脑损伤大鼠室管膜下区内源性神经干细胞原位增殖及迁移的影响

背景：半乳凝素1表达于室管膜下区的星形胶质细胞中并诱导其分化，分化的星形胶质细胞可明显提高脑源性神经生长因子的产生。目的：观察侧脑室注入半乳凝素1对脑缺血损伤大鼠内源性神经干细胞增殖、迁移的影响。设计、时间及地点：细胞学体内观察实验，于2007-03／11在佳木斯大学神经科学研究所完成。材料：纯利，清洁级成年Wistar大鼠48只，随机分为模型组、药物组，24只／组。半乳凝素1为北京晶美生物工程公司产品。方法：两组大鼠均采用线栓法制作局灶性大脑中动脉闭塞模型。造模后24h，药物组经右侧侧脑室注入10μL浓度为0．2g／L的半乳凝素1，模型组注射等肇生理盐水。分别于缺血再灌注后3，7，14，28d处死大鼠，取脑组织制作石蜡切片，处死前1d腹腔注射BrdU。主要观察指标：免疫组织化学染色检测大脑室管膜下区BrdU和巢蛋白阳性细胞的表达。结果：模型组缺血再灌注3d后大脑室管膜下区BrdU、巢蛋白阳性细胞开始增加，7d增殖达高峰，14d后表达开始下降，28d后下降至最低。药物组缺血再灌注3d后大脑室管膜下区两种阳性细胞均明显增加；7d增殖达高峰，半定量分析BrdU、巢蛋白阳细胞数分别是模型组的2倍和1．5倍，且BrdU阳性细胞向腹外侧迁移，巢蛋白阳性细胞胞体变大，突起增长，并有向外侧迁移进入脑实质的迹象；14d后开始下降；28d降至最低，但仍明显多于模型组（P〈0．05）。结论：经侧脑室注入半乳凝素1在大鼠脑缺血后可激活内源性神经十细胞原位增殖，并存在由增殖区向外周脑实质迁移的趋势。     

室管膜前下区神经干细胞向神经元分化中骨形成蛋白2及DLX5的作用

背景:目前神经干细胞应用的最大障碍还在于分化的调控,而对干细胞分化调控机制尚知之甚少.室管膜前下区是目前公认的神经干细胞富集区之一.在此区的神经干细胞可以长距离迁移到嗅球而保持神经干细胞不分化,最后在嗅球分化为中间神经元.骨形成蛋白2及DLX5在室管膜前下区神经干细胞向嗅球迁移分化过程中起着重要作用.目的:研究室管膜前下区神经干细胞的构筑及迁移特点,以及目前国内外有关骨形成蛋白2及DLX5在此区神经干细胞迁移分化中的作用,希望对神经干细胞的分化调控机制有一定的认识.方法:由第一作者利用中文检索词"神经干细胞,室管膜前下区,骨形成蛋白2,DLX5"及英文检索词"neural stem cells,SVZa,BMP-2,DLX5",在PubMed数据库(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)、中国期刊全文数据库(www.cnki.net/index.htm)、万方数据库(http://www.wanfangdata.com.cn)中检索1997-01/2009-01关于骨形成蛋白2、DLX5在室管膜前下区神经干细胞向神经元分化中作用的文献.排除内容陈旧或重复文献.结果与结论:初检得到121篇文献,中文86篇,英文35篇.最后对符合标准的28篇文献作进一步的分析.结果提示,室管膜前下区神经干细胞具有其独特细胞构筑和长距离迁移的特点,骨形成蛋白2及DLX5在其迁移分化过程中起着重要作用,但其具体作用机制仍不清楚.     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后神经干细胞影响的初步研究

目的：观察中药补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后内源性神经干细胞(neural stem cells，NSC)反应的影响探讨其可能机制。．方法：84只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组，采用线栓法复制大鼠脑缺血模型，分别给予不同处理，于术后12h，1，3，5，7d处死动物，运用免疫组织化学方法检测脑缺血后各组NSC的激活。另取5只大鼠为正常对照组。结果：正常大鼠脑组织中存在少量NSC，主要分布在皮质区；脑缺血后，NSC增殖，以皮质、缺血周围区增加明显，健侧海马区可见NSC激活；1d开始增多，5d达高峰，模型组1，3，5，7dNSC数分别为(10．3&;#177;1．3)，(14．2&;#177;1．7)，(18．3&;#177;1．2)，(16．4&;#177;1．6)个，补阳还五汤则分别为(10．8&;#177;1．1)，(15．4&;#177;1．4)，(23．5&;#177;1．1)，(22．0&;#177;1．4)个，两组比较NSC数在5，7d时间点差异有非常显著性意义(P&;lt;0．01)。’结论：局灶性脑缺血后，NSC激活、增殖。补阳还五汤能促进NSC的增殖。     

幼年大鼠脑室下区N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位2B的表达及其细胞类型

背景：神经干细胞表达有N-甲基-D-天冬氨酸受体（N-methy-D-aspartic acid receptor,NR）亚单位2B,深入研究其在幼年大鼠脑室下区的表达情况有助于揭示该区神经干细胞增殖、分化、迁移的机制。目的：观察NR2B在幼年大鼠脑室下区的表达及表达高峰期所在的细胞类型。方法：取出生后7,14,21,28dSD大鼠,制备5μm厚脑组织冰冻切片,观察脑室下区NR2B的表达,及其在出生后14d大鼠脑室下区所在的细胞类型。结果与结论：免疫组化结果显示NR2B在出生后7,14,21,28d大鼠脑室下区存在差异表达,于出生后14d时表达达高峰,以侧脑室外侧角旁表达最高;免疫荧光双标染色可见NR2B在脑室下区与胶质纤维酸性纤维蛋白、巢蛋白、β-Ⅲ微管蛋白共定位,以室管膜细胞最明显;而与NeuN在脑室下区无共定位。说明NR2B在幼年大鼠脑室下区的表达存在时空变化,可能在神经发生中发挥作用。     

HD02对前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化蛋白的作用

目的 观察神经干细胞(neural stem cell，NSC)增殖分化相关蛋白Notehl、hes5、MashI、NeuroD在HD02促进慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化中的作用。方法 雄性SD大鼠30只，分为正常对照组(6只)、模型对照组(12只)、HD02组(12只)，后两组又分成缺血后15，30d小组，每组各6只，制作SD大鼠前脑缺血模型，利用Western blot方法检测NSC增殖分化相关蛋白变化。结果 与正常对照组比较，造模后15，30d、慢性前脑缺血大鼠Nsc增殖分化相关蛋白表达水平显著升高(t=7．42—38．16，P&;lt;0．01)；与模型对照组比较，HD02可明显表达明显增加Notchl，hes5，Mashl，NeuroD表达水平(t=3．17—36．55,P&;lt;0．05或P&;lt;0．01)。结论 HD02能增加慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化相关蛋白表达，这可能与HD02促进NSC增殖分化有关。     

基质细胞衍生因子 1 对内源性神经干细胞的趋化迁移作用简

背景：目前研究表明,基质细胞衍生因子1在参与趋化迁移内源性神经干细胞中起着非常重要的作用,但其具体迁移机制尚不明确。目的：观察外源性基质细胞衍生因子1对大鼠内源性神经干细胞的趋化迁移作用及海马区神经干细胞的激活增殖情况。方法：通过向SD大鼠海马区上大脑皮质内注射外源性基质细胞衍生因子1（注射量为5μL,质量浓度为500μg/L）建立动物模型,于3,7,14,21 d后灌注取脑,通过石蜡切片免疫组织化学检测大鼠皮质内注射区及海马区nestin阳性细胞表达情况,并设实验对照组与空白对照组。结果与结论：石蜡切片免疫组织化学显示：实验组注射区周围及海马区nestin表达阳性细胞的数量随时间推移逐渐增多,3,7 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞少量表达,14 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞进一步增多,并向注射区形成明显的迁移趋势,21 d时注射区及海马区nestin表达阳性细胞更多。实验对照组及空白实验组未见上述表现。结果表明外源性基质细胞衍生因子1可能诱导海马区神经干细胞的增殖分化,参与内源性神经干细胞的趋化迁移过程。     

幼年大鼠脑室下区N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位2B的表达及其细胞类型

背景:神经干细胞表达有N-甲基-D-天冬氨酸受体(N-methy-D-aspartic acid receptor,NR)亚单位2B,深入研究其在幼年大鼠脑室下区的表达情况有助于揭示该区神经干细胞增殖、分化、迁移的机制。目的:观察NR2B在幼年大鼠脑室下区的表达及表达高峰期所在的细胞类型。方法:取出生后7,14,21,28dSD大鼠,制备5μm厚脑组织冰冻切片,观察脑室下区NR2B的表达,及其在出生后14d大鼠脑室下区所在的细胞类型。结果与结论:免疫组化结果显示NR2B在出生后7,14,21,28d大鼠脑室下区存在差异表达,于出生后14d时表达达高峰,以侧脑室外侧角旁表达最高;免疫荧光双标染色可见NR2B在脑室下区与胶质纤维酸性纤维蛋白、巢蛋白、β-Ⅲ微管蛋白共定位,以室管膜细胞最明显;而与NeuN在脑室下区无共定位。说明NR2B在幼年大鼠脑室下区的表达存在时空变化,可能在神经发生中发挥作用。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后神经干细胞影响的初步研究

目的:观察中药补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后内源性神经干细胞(neuralstemcells,NSC)反应的影响探讨其可能机制。方法:84只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组,采用线栓法复制大鼠脑缺血模型,分别给予不同处理,于术后12h,1,3,5,7d处死动物,运用免疫组织化学方法检测脑缺血后各组NSC的激活。另取5只大鼠为正常对照组。结果:正常大鼠脑组织中存在少量NSC,主要分布在皮质区;脑缺血后,NSC增殖,以皮质、缺血周围区增加明显,健侧海马区可见NSC激活;1d开始增多,5d达高峰,模型组1,3,5,7dNSC数分别为(10.3±1.3),(14.2±1.7),(18.3±1.2),(16.4±1.6)个,补阳还五汤则分别为(10.8±1.1),(15.4±1.4),(23.5±1.1),(22.0±1.4)个,两组比较NSC数在5,7d时间点差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:局灶性脑缺血后,NSC激活、增殖,补阳还五汤能促进NSC的增殖。     

头穴丛刺法调控大鼠脑梗死后内源性神经干细胞增殖迁移分化的实验研究

目的：本实验通过观察头穴丛刺法对室管膜下区(SVZ)的神经干细胞(NSC)增殖、迁移、分化的调控作用,探讨该疗法促进成年神经再生、修复和重建神经网络的理论机制。方法： 大鼠注射荧光染料Dil以预标记室SVZ细胞;栓线法制备大鼠局灶性脑缺血模型。将造模成功的Wistar大鼠随机分成4组：模型组12只,头针组12只,头针丛刺法组12只,假手术组4只。采用脉冲式的BrdU标记方法标记新生细胞;采用激光共聚焦显微镜检测预标记原始SVZ NSC后,再检测双重免疫荧光染色所确定的分化的细胞。结果：①模型组、头针组、头穴丛刺法组均可见Dil标记的SVZ细胞迁移至梗死周边的纹状体和皮质,并且分化成神经元或胶质细胞,头穴丛刺法组Dil/BrdU/NeuN或Dil/BrdU/GFAP标记的细胞明显增多,与其他两组比较有显著性差异（P<0.01）;②头穴丛刺法组BrdU/NeuN及BrdU/GFAP阳性细胞表达均多于其他两组,组间比较有显著性差异（P<0.01）。结论：①头穴丛刺法能促进脑缺血后SVZ 区神经干细胞增殖,并且随时间递增减少其增殖衰减;②此法可促进Dil标记的SVZ细胞均迁移至梗死周边的纹状体和皮质,并且分化成神经元或胶质细胞;③此法能促进局灶性脑缺血后SVZ NSC的迁移和分化。     

嗅鞘细胞和神经干细胞联合移植阿尔茨海默病大鼠脑内的增殖和定向分化

背景:阿尔茨海默病大鼠脑内神经元减少,神经干细胞移植后增殖和向神经元分化能力有限。目的:观察联合移植嗅鞘细胞和神经干细胞在阿尔茨海默病大鼠脑内,嗅鞘细胞对神经干细胞的增殖和向胆碱能神经元分化的影响。方法:体外培养嗅鞘细胞和神经干细胞,移植前用5-溴脱氧尿嘧啶核苷标记神经干细胞。将生理盐水,神经干细胞和神经干细胞+嗅鞘细胞分别移植入阿尔茨海默病模型大鼠海马。移植7,14,21,28d后,进行大鼠脑组织切片免疫组织化学染色检测BrdU和ChAT阳性表达。结果与结论:联合移植组神经干细胞的增殖和分化情况明显优于其他两组,联合移植组BrdU阳性细胞数和ChAT阳性细胞数明显高于神经干细胞移植组和生理盐水组(P<0.01)。提示嗅鞘细胞能促进移植的神经干细胞在阿尔茨海默病大鼠脑内增殖和向胆碱能神经元的分化。     

人神经干细胞异种移植示踪检测分析

目的摸索人胎脑神经干细胞（hNSC）在动物移植研究中理想的示踪检测方法，探讨hNSC移植后的命运，为新生儿缺氧缺血性脑损伤的干细胞治疗提供依据。方法用添加表皮生长因子＋碱性成纤维细胞生长因子＋白血病抑制因子的N2培养基从流产的人胚胎前脑组织培养出神经干细胞球，通过免疫荧光技术检测神经干细胞巢蛋白（Nestin）抗原标志和细胞分化潜能以鉴定其干细胞属性。取体外培养6d的神经干细胞集落，进行PKH26标记后培养和分化示踪。将培养14 d的神经球移植到缺氧缺血性脑病的新生鼠侧脑室，12只鼠分为PKH26标记示踪组（4只）、免疫反应检测组（4只）和对照组（4只），于移植后第4、7、14天杀鼠取脑，全脑切片，行抗人细胞核抗体（抗-hNuc）和抗人神经丝抗体（Anti-hNF）的特异性免疫反应检测及PKH26的荧光观察。结果体外培养获得典型人胎脑神经干细胞球。PKH26能高效标记神经干细胞，标记的阳性率〉95％，标记分子可伴随干细胞增殖、迁移和分化，但不进入细胞突起，仅位于胞体。Anti-hNuc免疫荧光检测和PKH26示踪结果显示：植入脑室的hNSC，4d即可迁移到嗅球、额叶皮层内侧中央前区、海马、枕叶皮层等部位的颗粒层内，小脑蒲氏细胞层有单层标记细胞排列，中脑区域也有广泛的标记细胞分布，损伤灶区有明显多的移植细胞分布。抗-hNF检测结果显示：在大脑皮层的颗粒层有阳性反应细胞，彼此间有连接发生。结论可用PKH26对体外培养获得的hNSC进行标记示踪。Anti-hNuc可用于检测移植细胞在受体鼠脑内的分布，抗-hNF可用于检测移植细胞的成神经元分化及神经元问发生的连接。hNSC经脑室途径移植缺氧缺血性损伤的新生大鼠脑，可快速迁移到全脑多处远距离部位，并构建神经元连接，损伤灶区对移植细胞有牵引作用。     

去大脑皮质血管后对成年大鼠海马齿状回神经干细胞的影响

背景：脑缺血、癫痫等损伤可刺激成年海马的齿状回颗粒细胞下层(subgranular zone，SGZ)神经干细胞增殖分化。去大脑皮质血管状态下引起碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)表达增多是否是刺激SGZ神经干细胞增殖的主要原因之一呢?目的：探讨去皮质血管对成年大鼠海马齿状回SGZ神经干细胞增殖、分化的影响以及去大脑皮质血管状态下bFGF的表达情况。设计：随机对照实验研究。地点和对象：实验地点：北京中医药大学基础医学院科学试验中心。成年Wistar雄性大鼠33只，随机分为正常组(15只)和模型组(18只)。干预：采用去Wister大鼠脑皮质血管脑缺血模型及免疫组织化学方法观测大鼠海马齿状回溴化脱氧尿核苷(bromodeoxyuridine，BrdU)，Tuj-1，Vimentin，Nestin，增殖细胞核抗原(proliferation neuclear antigen，PCNA)，bFGF的表达情况。主要观察指标：大鼠海马齿状回的BrdU，Tuj-1，Vimentin，Nestin，PCNA，bFGF的表达情况。、结果：去大脑皮质血管后成年大鼠SGZ中BrdU，Tuj-1，PCNA阳性细胞的数目增多。模型组大鼠齿状回BrdU免疫阳性细胞数目[去在脑皮质15d为(46．667&;#177;6．614)个／脑片，去大脑皮质30d为(14．111&;#177;3．408)个／脑片]与正常组[9．556&;#177;1．236)个／脑片]比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。模型组大鼠齿状回Tuj-1阳性细胞数目[去大脑皮质15d为(18．778&;#177;2．224)个／脑片，去大脑皮质30d为(31．333&;#177;2．646)个／脑片]与正常组[(6．778&;#177;1．481)个／脑片]比较，差异有显著性意义(P&;lt;0．01)。齿状回bFGF表达上调，相反Vimentin阳性细胞减少。结论：成年大鼠海马SGZ神经干细胞在脑缺血情况下，通过上调bFGF的表达，可能通过自分泌、旁分泌等方式作用于其受体，促进其自我更新和多向分化能力。     

碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子对恒河猴骨髓源性神经干细胞的体外诱导增殖作用

目的：探索骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells，BMSCs)体外诱导分化为神经干细胞(nerve stem cells，NSCs)的增殖条件，比较碱性成纤维细胞生长因子(base fibroblast growth factor，bFGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)对神经干细胞生长曲线的影响，为BMSCs在神经科学领域内的应用提供参考。方法：以恒河猴骨髓中分离出的BMSCs为实验对象，实验组利用NSC培养基和bFGF，EGF生长因子，进行体外培养、诱导、增殖。对照组用神经干细胞培养基进行培养增殖。Nestin及CD133作为免疫细胞化学鉴定NSCs的细胞标志。结果：原代培养第6天时多数细胞表现为Nestin及CD133抗原阳性，此后实验组及对照组细胞数量开始明显扩增，但实验组增殖更为明显，bFGF+EGF组从第8天时的(96．30&;#177;8．78)&;#215;10^4增加到第18天时的(1407.90&;#177;26.62)&;#215;10^4，并且增殖开始的时间较对照组提前2dc．NSCs在10d后有少量细胞向神经元和神经胶质细胞分化。结论：bFGF与EGF联合应用能够促使NSCs增殖时间提前及增殖效能显著提高。另外，bFGF和EGF还具有诱导NSC向神经细胞分化的作用。     

HD02对前脑缺血大鼠神经干细胞增殖分化蛋白的作用

目的观察神经干细胞(neuralstemcell,NSC)增殖分化相关蛋白Notch1、hes5、Mash1、NeuroD在HD02促进慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化中的作用。方法雄性SD大鼠30只,分为正常对照组(6只)、模型对照组(12只)、HD02组(12只),后两组又分成缺血后15,30d小组,每组各6只,制作SD大鼠前脑缺血模型,利用Westernblot方法检测NSC增殖分化相关蛋白变化。结果与正常对照组比较,造模后15,30d、慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化相关蛋白表达水平显著升高(t=7.42～38.16,P<0.01);与模型对照组比较,HD02可明显表达明显增加Notch1,hes5,Mash1,NeuroD表达水平(t=3.17～36.55,P<0.05或P<0.01)。结论HD02能增加慢性前脑缺血大鼠NSC增殖分化相关蛋白表达,这可能与HD02促进NSC增殖分化有关。     

PSA-NCAM与大鼠海马区神经细胞的发生

背景:已有大量动物实验表明在成熟动物的大脑存在神经细胞的可再生区域,海马齿状回产生的新生神经细胞可以迁移到颗粒层,分化为有功能的神经细胞.目的:通过对神经干细胞的特性及其分化、迁移及存活的影响因素的探讨,为脑损伤的治疗提供了新思路.方法:分别以"神经干细胞、PSA-NCAM、脑梗死","Neural stem cells、PSA-NCAM、Cerebral Infarction"为检索词,应用计算机检索CNKI期刊全文数据库及Pubmed 数据库1996/2009有关文章.纳入PSA-NCAM与大鼠海马区神经细胞发生文献.排除与研究目的无关和内容重复者.保留48篇文献做进一步分析.结果与结论:目前大量研究表明在海马齿状回、侧脑室下区、嗅球等部位仍然存在神经再生能力,在这些部位存在大量神经干细胞,这些神经干细胞具有增殖分化再生的功能,中枢神经存在大量促进神经干细胞增殖、分化、迁移的细胞因子,其中PSA-NCAM为其中之一.