黄独脱毒苗快繁技术的研究

目的 以黄独脱毒苗为试材，研究不同因素对黄独带芽茎段芽增殖和生根的影响，以期对黄独脱毒苗的快繁技术进行优化。方法 采用植物组织培养的方法进行茎尖培养和快繁研究，采用 RT-PCR 法对茎尖脱毒植株进行病毒检测。结果 黄独脱毒苗带芽茎段的最佳培养基是 MS+KT 2 mg/L+6BA 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L；黄独脱毒苗带芽茎段增殖的最佳蔗糖质量浓度和琼脂质量浓度分别是 30 和0 g/L；黄独脱毒苗带芽茎段生根的最佳培养基是 1/2 MS+IBA 0.1 mg/L+NAA 0.5 mg/L+PP₃₃₃ 1 mg/L；黄独试管苗移栽的最好基质是珍珠岩∶蛭石 (2∶1)；黄独试管苗移栽时最佳的PP₃₃₃ 质量浓度是 50 mg/L。结论 首次成功建立了黄独脱毒苗的快繁技术，为黄独脱毒苗的工厂化生产奠定了技术基础。     

黄独带芽茎段增殖和生根的初步研究

目的对黄独带芽茎段的增殖和生根进行初步的研究。方法采用单因子试验和植物组织培养的方法。结果6-BA或KT与NAA组合有利于黄独带芽茎段增殖;蔗糖质量浓度过高将导致黄独带芽茎段愈伤化不利于黄独带芽茎段增殖;液体培养有利于黄独带芽茎段增殖;在一定范围内NAA质量浓度的增加有利于黄独带芽茎段生根,但质量浓度太高将会抑制生根。结论黄独带芽茎段增殖的最佳培养基为MS KT 2 mg/L NAA 1 mg/L或MS 6-BA 2 mg/L NAA 0.5 mg/L;黄独带芽茎段再生的最佳蔗糖量为30 g/L,最佳培养方式为液体培养,最佳的生根培养基为MS NAA 2 mg/L。     

知母组织培养的初步研究

目的 以知母种子为试验材料,对知母的组织培养进行了初步研究,以期建立知母的再生体系。方法 采用植物组织培养和单因子试验的方法对知母无菌体系的建立、分蘖芽的增殖、分蘖愈伤组织的诱导和再分化以及再生苗的移栽进行研究。结果 知母种子最佳的消毒方式是75%酒精处理30 s后用0.1%HgCl₂处理15 min;知母分蘖芽增殖的最佳培养基是MS+KT 1 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母分蘖愈伤组织诱导的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;知母愈伤组织再分化的最佳培养基是MS+KT 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L;知母愈伤组织再生芽最佳的生根培养基是1/2MS+NAA 0.5 mg/L;知母试管苗最佳的移栽基质是腐殖土。结论 本实验建立了知母的再生体系,为知母试管苗的工厂化生产奠定了技术基础。     

北柴胡愈伤组织诱导、分化及不定芽增殖条件研究

目的研究北柴胡叶片、茎段和花芽愈伤组织诱导、分化和不定芽增殖的条件,探讨快速繁殖的新途径。方法选择优良的北柴胡类型,在附加不同种类、不同质量浓度和不同配比外源植物激素的MS培养基中,进行不同外植体愈伤组织的诱导和分化培养以及愈伤组织再生植株的繁殖和生根培养。结果附加2,4-D 1.0 mg/L、KT0.5 mg/L和6-BA 0.5 mg/L的MS培养基最适合于叶片、茎和花芽愈伤组织的诱导,其中以花芽愈伤组织的诱导效果最好;在附加6-BA 1.0 mg/L、NAA 0.03 mg/L和CM 15%、CH500 mg/L的培养基中,愈伤组织的分化率最高;附加6-BA 1.5 mg/L、NAA 0.05 mg/L和CH 250 mg/L的MS培养基为芽苗增殖的适宜培养基;附加NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基是生根的适宜培养基。结论北柴胡的茎段和花芽外植体在适宜的激素组合中均可通过愈伤组织途径分化出不定芽,继而得到正常生长、发育的再生植株。     

罗汉果试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生

目的 为罗汉果Siraitia grosvenorii种质资源的保存提供一条新途径。方法 以继代15 d生长健壮的罗汉果试管苗0.8～1 cm长嫩梢进行预培养,剥取2～3 mm茎尖,25 ℃下60% PVS₂装载,再用100% PVS₂在0 ℃脱水处理,更换新鲜100% PVS₂后投入液氮保存24 h,化冻,用MS+1.2 mol/L蔗糖的液体培养基洗涤,滤纸吸干后接种于MS+1.0 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA+0.1 mg/L GA₃+0.8%琼脂粉+45 g/L蔗糖的恢复培养基上, 25 ℃暗培养7 d, 转入正常光下培养。再生苗生根培养基为1/2 MS+0.2 mg/L NAA+30 g/L蔗糖。结果 嫩梢于MS+0.7 mol/L蔗糖的培养基上预培养3 d,茎尖装载40 min,脱水50 min,液氮保存后于40 ℃水浴中快速化冻,洗涤40 min,恢复培养1 周时存活率最高可达100%,30 d时再生率最高可达78.33%。再生苗转入生根培养基可形成完整植株。结论 罗汉果种质资源的玻璃化法超低温保存操作简单、成活率高、再生植株正常。     

乌头离体培养和快速繁殖

目的建立乌头的快繁体系。方法利用组织培养的方法,设置18种、9种和12种不同激素处理组合的培养基分别诱导乌头不同外植体愈伤组织、诱导愈伤组织丛生芽的分化、诱导再生苗的生根。结果适合乌头茎尖和茎段愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合叶片愈伤组织诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA4.0mg/L PVP(或AC)3.0g/L;适合愈伤组织增殖与丛生芽诱导的培养基为:MS NAA0.2mg/L 6-BA2.5mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L和MS NAA0.1mg/L 6-BA2.0mg/L LH200mg/L PVP3.0g/L。适合诱导生根的培养基为:MS IBA1mg/L AC3.0g/L。结论以乌头茎尖、叶片、茎段及带或不带腋芽的茎段作为外植体进行离体培养,可以实现乌头种苗的工厂化快速繁殖。     

土人参快速繁殖培养基的优化

【目的】采用植物组织培养技术开展土人参快速繁殖和植株再生研究,为建立土人参的快速繁殖再生体系奠定基础。【方法】以土人参的种子、嫩茎和叶片为外植体,采用正交设计法考察不同激素水平对土人参诱导、增殖、生根的影响,获得土人参最佳的诱导、增殖和生根培养基,并进一步将试管苗移栽到野外环境。【结果】以土人参种子作为外植体,选择用MS+3.0 mg/L 6-苄基腺嘌呤(6-BA)培养基培养1~2周后能诱导出优质的丛生芽,再选用MS+3.0 mg/L 6-BA+1.0mg/Lα-萘乙酸(NAA)+1.5 mg/L多效唑(PP333)培养基对其进行增殖培养,可得到鲜质量增长率最大的健壮丛生芽;生根培养基MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L吲哚乙酸(IAA)+1.0 mg/L吲哚丁酸(IBA)能促进丛生芽长出直径大、长度较长、须根及绒毛较多的营养根,得到试管苗;将试管苗进行炼苗与移栽,成活率100%,且与播种栽培比较可显著缩短生长时间。【结论】建立了土人参快速繁殖再生体系。     

怀地黄茎尖培养和植株再生技术的研究

目的　研究怀地黄茎尖培养技术 ,为怀地黄茎尖脱毒苗建立最佳培养条件。方法　利用植物组织培养技术 ,将怀地黄茎尖分别在不同组合的培养基上进行培养 ,诱导其成为完整植株。结果　怀地黄茎尖在MS +6 -BA0 .3mg·L-1+NAA0 .0 2mg .L-1+GA0 .1mg·L-1培养基上能生长成健壮苗 ;在MS +PP3 3 3 1培养基上能生成健壮根系 ,长成完全小植株。结论　利用怀地黄茎尖在合适的培养基上 ,能再生出完整的植株     

九节木离体培养的研究

【目的】采用植物组织培养技术进行植株再生和快速繁殖,为建立九节木的快速繁殖再生体系奠定基础。【方法】以九节木的幼嫩果实和叶片为外植体,以MS为基本培养基,对九节木外植体进行表面消毒,筛选适宜的外植体消毒时间;研究MS及MS辅以活性炭对外植体生长的影响;通过正交试验设计,研究不同种类及浓度配比激素对丛生芽增殖的影响;对获得的试管苗炼苗与移栽。【结果】以果实为外植体较为适宜;采用1 g/L HgCl2对九节木外植体表面消毒15 min效果较好;添加活性炭有利于外植体生长;丛生芽增殖效果较好的培养基为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA;移栽到室内1周,成活率达80.0%。【结论】建立了九节木离体快速繁殖体系。     

总序香茶菜的组织培养与快繁研究

目的对总序香茶菜进行组织培养和离体快速繁殖。方法以总序香茶菜带芽茎段为外植体,在附加有不同种类和不同浓度激素的MS培养基上进行培养。结果最佳芽诱导培养基:MS BA0.05～0.5mg/L NAA0.01～0.05mg/L;最佳芽增殖培养基:MS BA0.5mg/L NAA0.05mg/L(或IAA0.01mg/L);最佳生根培养基:MS NAA0.1mg/L 活性炭0.05%;最佳愈伤组织诱导与生长培养基为:MS 2,4-D1.0～2.0mg/L BA0.1～0.2mg/L。结论成功建立了快速无性繁殖系。     

红树莓植株再生系统的建立

目的 建立红树莓的再生系统,短期内获得量优质种苗。方法 利用红树莓的茎尖和茎段作为外植体,采用正交实验设计筛选培养基。结果 筛选出了红树莓愈伤组织、不定芽不定根的最佳诱导培养基,在实验室建立了程序简单、重复性好的再生系统,实现了红树莓组培苗的快速繁殖。结论 用MS培养基作为基本培养基,附加BA0.2mg/L NAA 1.0-1.5mg/L适用于愈伤组织的诱导;附加BA 1mg/L NAA 0.1-0.2mg/L GA3 6-8mg/L CH 300mg/L适于芽的诱导;附加BA 1mg/L NAA 0.1mg/L GA3 2mg/L适于芽的繁殖;附加IBA 0.1mg/L NAA 0.5mg/L适于根的诱导。     

铁皮石斛快繁技术体系研究

目的 以铁皮石斛Dendrobium officinale带芽茎段为材料,对铁皮石斛的组织培养进行系统研究,以期建立铁皮石斛的快繁技术体系。方法 采用植物组织培养的方法对铁皮石斛外植体的消毒方法、原球茎的诱导、增殖、分化、幼苗生根及瓶苗移栽等进行研究。结果 铁皮石斛外植体最佳的消毒方式为75%乙醇消毒30 s,再用0.1% HgCl₂消毒10 min;铁皮石斛带芽茎段原球茎诱导的最佳培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L NAA＋2 g/L AC,诱导率达到34.98%;原球茎增殖的最佳培养基为MS＋0.5 mg/L 6-BA＋0.8 mg/L 2, 4-D＋2 g/L AC,增殖率达到89.6%;原球茎分化的最佳培养基为MS＋1.2 mg/L 6-BA＋0.2 mg/L IBA＋2 g/L AC,分化率达到89.6%;幼苗生根的最佳培养基配方为1/2 MS＋2.5 mg/L NAA＋15%土豆汁＋2 g/L AC,生根率达到90.4%～92.8%;瓶苗移栽最佳方式为大苗、树皮块苔藓草做基质、基质中添加0.03 mg/L赤霉素,并接种适量菌根真菌Epulorhiza sp.。结论 建立了铁皮石斛的快繁技术体系,为铁皮石斛的工业化生产奠定技术基础。     

獐牙菜的组织培养

目的 针对獐牙菜野生资源受到严重破坏的情况,系统地探讨了通过组织培养为手段进行人工繁殖的方法。方法 将种子接种于诱导培养基上,待其长成小苗后分别取其不带芽茎段、叶和带芽茎段作为外植体,在MS培养基上添加不同的激素配比,改变培养方式。结果 在所有的实验方案中,不带芽茎段是理想的外植体材料。较适宜的初代培养基为MS+BA 0.5 mg/L+蔗糖3.0%,增殖培养基为MS+BA 0.5 mg/L+IBA 0.1 mg/L+蔗糖3.0%,而根的诱导则是在1/2MS+NAA 0.5 mg/L+1.5%蔗糖的培养基上进行。结论 采用组织培养方式可进行獐牙菜的快速繁殖,为确保这一珍稀药用植物资源的保护和可持续利用提供有效途径。     

姜茎尖的离体培养与试管苗快繁

目的 探索姜茎尖组织培养及其试管苗快速繁殖的适宜条件。方法 剥取不大于1mm的姜茎尖生长点为外植体，以MS为基本培养基，附加不同种类和浓度的植物生长物质进行培养。结果 小于0．3mm的姜茎尖可进行良好的分化与生长；在各类激素中，以BA对姜芽分化最为有效，培养基MS BA 1．0mg／L NAA 0．2～0．4mg／L最有利于芽的分化和生长；在生根培养基中添加适量的BA不仅不影响不定根的形成，且能增加成苗数，对不定根的分化和成苗最适的培养基为1／2 MS NAA 0．1mg／L BA 0．15mg／L。结论 试验为姜的茎尖离体培养提供了有效途径。     

巴戟天试管苗培养研究

本文报道了对我国著名的南药之一的巴戟天(Morinda officinalis How)试管苗培养的研究结果,为这种名贵药材的优良种苗的快速大量繁殖和抗性良种的选育提供了新途径。结果表明:(1)对巴戟天外植体(顶芽、腋芽、茎段和叶片)的较好的消毒方法是:外植体经自来水洗净→70%乙醇预处理5秒钟→0.1%HgCl_2溶液中消毒10至15分钟→无茵水漂洗5次,其消毒效果为70～75%,对外植体基本无损伤; (2)顶芽和腋芽的培养效果比茎段和叶片的培养效果好,因此应优先择选顶芽和腋芽为巴戟天试管苗的起始培养物; (3)试管苗的最佳培养程序为:经消毒的顶芽或腋芽在增殖培养基(MS+NAA0.5+BA6.0+GA。1.0+3%蔗糖,单位:mg/L.下同。)中培养40天后可分化出丛生的不定芽(分化率为86.7%),将这些不定芽转入生根培养基(1/2MS+IAA0.2+NAA0.4+1%蔗糖)中培养30天即可分化生根形成完整的巴戟天试管苗,其根分化率为84.6%。试管苗经过两周的沙培室内炼苗后即可移栽盆植,约1～2个月后即可移栽至露天土地种植,移栽成活率大干90%。     

乌头植株再生体系的建立

目的 建立乌头高效再生系统，短期内获得大量优质种苗。方法 以试管苗叶片为外植体，在添加不同激素配比的培养基上培养。结果 培养基MS BAl．0mg/L KT0．5mg/L NAA0．2mg/L最适合于乌头叶片不定芽的分化；培养基MS BAl．5mg/L NAA0．1mg/L有利于芽的增殖；培养基MS BA0．5mg/L NAA0．1mg/L有利于芽的伸长；不加激素的1／2MS培养基有利于根的诱导。结论 采用组织培养方式可进行乌头的快速繁殖，使乌头种苗的工厂化生产成为可能。     

甘肃道地黄芪种苗的离体快繁研究

目的筛选出适于无菌短枝快繁的培养基及研究试管苗移栽驯化技术。方法以MS为基本培养基添加不同质量浓度的BA和NAA,对黄芪的不同外植体进行组织快繁研究。结果一年生植株的带芽茎段在MS BA0.1mg/L培养基上短枝长势最好;一年生植株的新生芽和两年生植株的带芽茎段,在MS BA0.8mg/L NAA0.1mg/L培养基上均能产生丛生芽。将短枝接种于1/2MS 0.1%活性炭或1/2MS NAA1.5mg/L 0.1%活性炭的培养基上,经诱导产生有效根。小苗经沙培驯化后,移栽成活。结论利用蒙古黄芪的无菌短枝快繁优良种苗是一种经济、快速、可行的育苗方式。     

地黄优良品种"85-5"脱毒苗的快速繁殖研究

目的 探索“85－5”脱毒苗的快速繁殖技术。方法 将脱毒苗接种在不同培养基（单位：mg／L）（1．MS）（1．MS＋BA＋0．5．MS＋BA0．5＋NAA0．02；3．MS＋BA0．5＋NAA0．02＋GA30．1；4．1／2MS＋BA0．1；5．1／2MS＋BA0．1＋GA20．1；6．1／2MS＋GA30．1）上，30d后统计新生叶片数、根数以及苗高等。然后选用2号培养基，在不同的培养条件下培养，同上记录有关数据。结果 在1，2和3号培养基上，具茎尖苗主茎发育良好，基部具1－3个腑芽；无茎尖苗腋芽发育， 芽长0．5－1．5cm。4，5和6号培养基上脱毒弱，叶少根多。在相同光照条件下，28℃时，各项测量均显著高于23℃时的值，在相同温度与，低光照培养，叶小苗高，强光则相反。此外，还发现BA和GA3之间存在拮抗作用。结论 在28℃，1000－2000lx培养条件下，采用2号培养基适于“85－5”脱毒苗的快速繁殖。     

高山红景天叶肉原生质体分离培养与植株再生

目的 利用高山红景天组培苗叶片分离得到原生质体,经培养后获得再生植株。方法 研究了外植体前期预处理、外植体大小、酶液配比、酶液中甘露醇浓度等影响原生质分离的相关因素,确定最优分离条件。结果 用于原生质体分离的外植体无需黑暗预培养便可进行原生质体分离,外植体叶片长度大于1.5 cm为宜。获得原生质体的酶液组成为：1.0%纤维素酶Onzuka R-10+0.5%果胶酶Macerozyme R-10+10 mmol/L CaCl2?2H2O+0.1% MES+0.7 mmol/L KH2PO4+0.5 mol/L甘露醇,在25 ℃条件下酶解4 h,原生质体最高产量为39.43×106个/g鲜质量,原生质体活力为78.6%。原生质体培养基为1/2MS+1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L ZT+0.5 mol/L甘露醇+500 mg/L水解酪蛋白。浅层培养40 d时形成小愈伤组织。愈伤组织在MS+1 mg/L 6-BA+0-1 mg/L NAA诱导产生不定芽,不定芽转入1/2MS基本培养基可获完整再生植株。结论 本研究为高山红景天多倍体育种提供了科学依据。     

半夏的病毒危害及脱毒快繁技术研究

目的确定病毒病对半夏植株生长的危害,通过组织培养手段对病毒进行脱毒技术研究。方法采取高温钝化结合茎尖培养的方法,用多种激素诱导茎尖成苗、长根及增殖等。结果用6-BA1.0~2.0mg/L、NAA0.2mg/L诱导成苗可有效地脱去病毒;6-BA2.0mg/L附加适量的NAA和GA3可促进珠芽增殖及试管苗的生长速度;IAA0.2~0.5mg/L可促进半夏根系的发育;6-BA2.0mg/L、GA30.2mg/L配以适当质量浓度的2,4-D和NAA可促进叶片愈伤组织形成丛生苗。结论对半夏病毒病的脱毒率达到80%,脱毒植株叶片的内部结构排列有序、清晰可见。