甜菜碱对脂肪变性HepG2细胞Hcy、SAM／SAH及脂代谢相关基因mRNA表达的影响

目的探讨甜菜碱对脂肪变性HepG2细胞同型半胱氨酸（Hey）水平、S腺苷蛋氨影S腺苷同型半胱氨酸（SAM／SAH）比值及脂代谢相关基因mRNA表达的影响。方法60mg／L油酸作用24h诱导非酒精性脂肪变性HepG2细胞模型,分别按脂肪变性模型组、2．5、5、10mmo／／L甜菜碱组进行干预,同时设空白对照组,每组设3个复孔。各组细胞培养24h后油红O-苏木素染色观察细胞脂滴形成情况,酶法测定甘油三酯（TG）浓度,高效液相色谱法（HPLC）测定Hey浓度和SAM／SAH比值,RT—PCR检测MTP、APOB及DGAT2mRNA的表达。结果与空白对照组比较,脂肪变性模型组的培养基中Hey浓度上升（P〈0．05）;而甜菜碱各剂量组与空白对照组比较则差异均无统计学意义（均P〉0．05）。与空白对照组比较,脂肪变性模型组的细胞内和培养基中TG浓度上升（均P〈0．01）;细胞内的SAM／SAH比值（P〈0．05）、APOB的mRNA水平（P〈0．01）均下降。与脂肪变性模型组的比较,2．5和10mmol／L甜菜碱组细胞内TG浓度均有所增加（均P〈0．05）,5mmol／L甜菜碱组培养基中TG浓度有所增加（P〈0．01）;10mmol／L甜菜碱组的SAM／SAH比值明显上升（P〈0．01）;5、10mmol／L甜菜碱组的APOBmRNA水平明显上升（均P〈0．01）;甜菜碱各剂量组中DAGT2的mRNA表达水平均有所上升（均P〈0．05）。结论甜菜碱能降低脂肪变性HepG2细胞培养基Hey的浓度,增高细胞内SAM／SAH比值,增加APOB的mRNA表达,可能提高细胞脂质清除能力,但同时增加了DGAT2mRNA的表达,可能促进TG合成。     

二甲双胍对大鼠2型糖尿病并发非酒精性脂肪肝治疗作用的实验研究

目的探讨二甲双胍对大鼠2型糖尿病（T2DM）并发非酒精性脂肪肝（NAFLD）的治疗作用。方法高糖高脂饮食结合小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立T2DM并发NAFLD大鼠模型,将成模大鼠随机分为模型组、二甲双胍治疗组,每组16只,并设立正常对照组20只。治疗组给予二甲双胍125mg／（kg·d）灌胃治疗。于实验第16（治疗后8周）、20周（治疗后12周）末分批处死大鼠,检测肝功能、空腹血糖、血清胰岛素和血脂水平,光镜下观察大鼠肝脏组织学形态,分别以免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）法检测肝组织UCP-2蛋白和UCP-2mRNA的表达情况。结果模型组大鼠血清转氨酶、空腹血糖、血清胰岛素及血脂水平均较正常组明显升高,胰岛素敏感指数较正常组明显下降（P〈0．01）;肝脏于第16周末出现不同程度脂肪变性,第20周末出现严重脂肪变性;肝组织UCP-2蛋白表达高于正常组（P均〈0．01）,UCP-2mRNA表达于第16周末[（1．789±0．301）VS（0．245±0．087）,t=11．02,P〈0．011和20周末[（1．989±0．207）VS（0．262±0．058）,t=17．93,P〈0．01]均高于正常组,以20周末更为明显。在16周末（治疗后8周）和20周末（治疗后12周）,治疗组大鼠血清转氨酶、血糖及血脂水平均有改善,胰岛素敏感指数明显升高（P〈0．01或P〈0．05）,肝细胞脂肪变性明显减轻。治疗组肝组织UCP-2蛋白表达在16周末和20周末均明显低于模型组（P均〈0．01）,UCP．2mRNA表达在16周末[（0．665±0．088）VS（1．789±0．301）,t=7．81,P〈0．01]和20周末[（0．610±0．102）VS（1．989±0．207）,t=9．98,P〈0．01]均明显低于模型组,差异有统计学意义。结论二甲双胍可降低T2DM并发NAFLD大鼠肝脏脂肪含量,调控肝脏UCP-2的适度表达,对治疗2型糖尿病并发非酒精性脂肪肝具有一定的作用。     

染料木黄酮对HepG2细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调控作用

目的探讨染料木黄酮（Gen）对HepG2人肝癌细胞胆固醇代谢和SREBP-2通路的调节作用。方法体外培养HepG2细胞,将HepG2细胞在含有0、0．01、0．10、1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen的培养液内分别培养24、48、72h后,用MTT法检测细胞增殖活性。用分别含0、0．01、1．00、10．00、50．00μmol／LGen的完全培养液培养HepG2细胞24h,收集细胞,分别进行细胞内总胆固醇（TC）含量检测、实时荧光定量PCR检测细胞低密度脂蛋白受体（ldlr）、3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（hmgcr）基因的mRNA表达和蛋白印迹法检测核转录因子SREBP-2的表达。结果0．01、0．10、1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen分别作用于HepG2细胞24h,0．01、0．10、1．00μmol／LGen组细胞增殖率高于溶剂对照组（均P〈0．05）;作用48、72h,1．00、10．00、50．00、100．00μmol／LGen组细胞增殖率均低于溶剂对照组（均P〈0．05）。1.00、10．00、50．00μmoL／LGen与HepG2细胞共同孵育24h,HepG2细胞内TC水平分别为（1．81±0．15）、（2．29±0．17）、（2．88±0．08）mmol／L,均高于对照组[（1．44±0．17）mmol／L],且随着Gen浓度升高,呈增加趋势（R2=0．48,P〈0．01）;各Gen实验组的hmgcr和ldlr基因的mRNA表达水平随着Gen浓度升高而升高（R2分别为0．53、0．79,均P〈0．01）。1．00、10．00、50．00μmol／LGen组蛋白表达灰度值均高于对照组（均P〈0．01）。结论染料木黄酮能够调节细胞内胆固醇的代谢,其作用机制可能与调控SREBP-2通路有关。     

糖尿病肾病患者蛋白氧化损伤与血清基质金属蛋白酶-2的相关性分析

目的检测糖尿病肾病患者血清蛋白氧化损伤指标的变化,探讨蛋白氧化损伤在糖尿病肾病发病中的可能机制。方法应用改良后的Witko—Sarsat法和2,4-二硝基苯肼法检测血清晚期氧化蛋白产物（AOPP）水平、蛋白质羰基（PCO）含量,应用ELISA及酶谱法分别检测血清基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达水平和活性。结果DNl组、DN2组AOPP水平明显高于DM组（78．23±19．30VS61．25±12．13、101．59±30．22VS61．25±12．13,F=41．988,P〈0．01）,DNl组、DN2组PCO含量亦明显高于DM组（0．84±0．03VS0．66±0．02、1．05±0．05VS0．66±0．02,F=205．763,P〈0．01）,AOPP、PCO与血清MMP-2的表达水平（r=0．460,0．480,P〈0．05）和活性（r=0．385,0．560,P〈0．05）均呈正相关,多元逐步回归分析表明AOPP、PCO为血清MMP-2表达水平（P〈0．05,P〈0．01）和活性（P〈0．01,P〈0．05）的主要影响因素。结论推测蛋白氧化损伤通过改变MMP-2的表达和活性,影响肾脏基质代谢。     

系统性硬皮病患者外周血CD4^＋T细胞中CD40L表达水平的研究

目的研究系统性硬皮病（SSc）患者外周血CD4^＋T细胞中CIM0配体（CIMOL）的表达水平。方法应用密度梯度离心法分离26例SSc患者（女16例,男10例）和25例正常对照者（女15例,男10例）的外周血单个核细胞,磁珠分选CD4^＋T细胞。RT—PCR检测CD4^＋T细胞中CD40L mRNA的表达水平;流式细胞术检测CD40L蛋白在CD4^＋T细胞中的表达水平。结果SSc女性患者CD4^＋T细胞中CD40L mRNA和CD40L蛋白的表达水平均显著高于正常女性对照组[5．61±1．86vs2．80±0．94,P〈0．01;（6．70±3．55）％vs（2．37±1．39）％,P〈0．05];SSc男性患者CD40L mRNA和CD40L蛋白的表达水平与正常男性对照组相比差异均无统计学意义[2．59±0．89vs1．92±0．56,P〉0．05;（2．06±1．09）％vs（2．13±0．87）％,P〉0．05]。结论女性SSc患者CD^＋T细胞中CD40L表达显著增高,而男性患者无明显改变,提示CD40L仅在女性SSc发病中起着重要的作用。     

Ca2＋／CaN-NFATc信号通路在哮喘大鼠淋巴细胞增殖和活化中的作用

目的探讨Ca2＋／CaN-NFATc信号通路在哮喘大鼠淋巴细胞活化、增殖中的作用。方法哮喘组和CsA（cyclospoin A,CaN的抑制物,环孢菌素A）干预组大鼠以卵蛋白溶液致敏及激发,对照组以生理盐水致敏及激发,无菌分离脾淋巴细胞,加PHA—P（终浓度为5μg／ml）培养24h,CsA干预组同时加入CsA稀释液（终浓度为1．0μg／ml）。检测淋巴细胞内[Ca2＋]i浓度、CaN活性、去磷酸化NFATc蛋白和CyclinE蛋白的表达、细胞周期各时相分布及上清液中IL-4和IL-2的水平。结果与对照组相比,哮喘组淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性[（81．21±14．39）V8（63．66±9．02）]增加（P〈0．05）;CyclinE蛋白的表达量[（0．9327±0．0370）VS（0．8374±0．0637）]增加（P〈0．01）,处于G0／G1期的淋巴细胞比例[（89．3300±3．3850）VS（94．1260±1．4389）]减少,s期[（7．8600±2．8241）VS（4．0270±1．8650）]及S＋G2／M期比例[（10．6700±3．3850）V8（5．8740±1．4389）]增加（P均〈0．01））;上清液中IL4水平[（1．55±0．19）pg／ml vs（0．99±0．12）pg／m1]及IL-4／IL-2比值[（0．81±0．12）vs（0．49±0．49）]增加（P均〈0．01）。CsA可使哮喘大鼠淋巴细胞Ca2＋／CaN—NFATc的活性（47．19±7．16）下降（P〈0．05）;CyclinE蛋白的表达量（0．6840±0．0485）减少（P〈0．01）,使处于S期（4．8600±1．9595）和S＋G2／M期（7．9900±1．9405）的淋巴细胞比例减少,G0／G1期比例（92．2100±1．9267）增加（P均〈0．01）,细胞增殖受到抑制;使上清液中IL-4（0．47±0．09）pg／ml水平减少（P〈0．01）,IL-4／IL-2比值下降（0．78±0．20）;淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性与IL4的水平及CyclinE蛋白的表达量均呈正相关（r=0．711,P〈0．01和r=0．749,P〈0．01）。结论哮喘大鼠淋巴细胞Ca2＋／CaN-NFATc的活性增加;其活性的增加可通过促进IL4的产生和分泌,导致Th1／Th2的失衡,也可通过促进Cyclin E蛋白的表达而引起淋巴细胞的增殖。     

脂易消对NAFLD大鼠肝组织ChREBP mRNA表达的影响

目的：观察脂易消对实验性非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）大鼠肝组织碳水化合物反应元件结合蛋白（ChREBP）mRNA表达的影响。方法：采用高脂饮食制备NAFLD大鼠模型,分低、中、高剂量脂易消治疗组、易善复胶囊阳性对照组、模型对照组、正常对照组。显微镜下观察HE染色后各组肝细胞脂肪变性及肝组织炎性改变情况;使用RT-PCR法检测各组大鼠肝组织ChREBP mRNA的水平。结果：实验结束时模型组体重指数（BMI）明显增高,与正常组比较差异有显著统计学意义（P〈0．01）;而与模型组相比,脂易消各剂量组及易善复组肝指数明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;但高、中、低剂量组与易善复组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。光镜观察显示正常对照组没有发生脂肪变性及炎性浸润;模型组总体肝组织脂肪变性程度与正常组肝组织相比有显著的差异。脂易消组肝组织发生弥漫性肝细胞脂肪变性及轻微的炎性浸润,程度轻于模型组。易善复组肝组织炎性改变程度与脂易消组比较没有明显的差异。结论：脂易消能改善肝细胞脂肪性变及肝组织炎性病变,提高肝组织ChREBP mRNA表达水平,对高脂饮食引起的NAFLD有治疗作用,具有与易善复相似的疗效。     

17-β雌二醇对受力后盆底功能障碍性疾病患者阴道壁成纤维细胞的生物学影响

目的研究雌激素对体外培养的盆底功能障碍性疾病（pelvicfloordysfunction,PFD）患者阴道壁成纤维细胞受力后胶原蛋白I（ColI）、类赖氨酰氧化酶1（LOXLl）和纤维粘连蛋白（FN）表达的影响,探讨其在PFD发病中的作用。方法选取2009年10月至2010年9月河北医科大学第二医院接受手术治疗的女性PFD患者的阴道壁组织12例。采用组织块法和酶消化法进行阴道壁成纤维细胞的原代培养,传代后进行细胞受力,加药,提取细胞mRNA,测定ColI、LOXLl及FN的表达水平。结果受力前、后ColI（1．1872±0．0733VS1．5035±0．0733,t=-4．815,P〈0．01）、LOXLl（0．7724±0．1873VS1．0855-I-0．0805,t=-5．111,P〈0．01）表达上升,其2,!异有统计学意义。FN（0．4290±0．1168VS0．4215±0．0830）的表达比较差异无统计学意义（P〉0．05）。高浓度的17-β雌二醇作用下,ColI（3．0809±0．1862）、LOXL1（1．5863±0．3241）、FN（1．1418±1．0030）的表达均上升,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论17-B雌二醇使受力后的PFD患者阴道壁成纤维细胞合成细胞外基质（Extracellularmatrix,ECM）成分增加。力和雌激素在PFD的发病机制中可能起了比较重要的作用。     

外周血单核细胞血红素加氧酶1表达与糖尿病肾病的氧化应激机制的研究

目的探讨糖尿病肾病患者外周血单核细胞（PBMC）血红素加氧酶-1（HO-1）的表达与糖尿病肾病的关系及其可能机制。方法2型糖尿病患者伴或不伴糖尿病肾病各20例,正常对照组20例。比较各组空腹血糖、糖化血红蛋白（HbAlc）等基本资料,并检测三组血清中丙二醛（MDA）含量、外周血单核细胞活性氧（ROS）水平、HO-1mRNA水平、HO-1蛋白表达水平。结果在正常对照组、糖尿病组、糖尿病肾病组中,血清MDA水平分别为（14．23±5．07）nmoL／ml、（24．90±7．12）nmol／ml、（43．83-i-16．97）nmot／ml,三组相比,差异有统计学意义（F=37．022,P〈0．01）;PBMC的ROS水平分别为113．18±58．59、364．54±88．67、524．35±162．51,三组相比,差异有统计学意义（F=68．369,P〈0．01）;HO．1蛋白表达水平分别为22．84±9．98、36．72±15．85、58．1±15．93,三组相比,差异有统计学意义（F：31．302,P〈0．01）。HO-1mRNA的水平及蛋白表达水平与MDA水平均呈正相关（r=0．407,0．429,P〈0．05）。结论糖尿病肾病患者与糖尿病非肾病患者相比处于更严重的氧化应激状态并诱导的HO-1代偿性增高。提高HO-1表达将可能是改善糖尿病肾病患者氧化应激状态的可能途径。     

琼枝麒麟菜多糖对辐射损伤小鼠细胞因子分泌的影响

目的观察琼枝麒麟菜多糖（EGP）对辐射损伤小鼠细胞因子分泌的影响,为辐射损伤的治疗提供依据。方法将50只小鼠随机分为正常对照组、照射对照组和3个不同剂量EGP[（100、200和400mg／（kg·d）]＋照射组,按每10g体质量0．1mL灌胃,连续10d;正常对照和照射对照组均用等量生理盐水灌胃;7d后除正常对照组外,均进行一次性了射线2Gy照射,20h后检测巨噬细胞产生白细胞介素-1（IL-1）活性,以及血清白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）水平和脾IFN-γ mRNA和蛋白表达量。结果（1）EGP200、400mg／kg＋照射组小鼠巨噬细胞产生IL-1蛋白量（液闪计数,min^-1）分别为2347±254、3111±628,明显高于照射对照组的1327±729（P〈0．01）;（2）EGP200、400mg／kg照射对照组小鼠血清102、TNF—α、IFN-γ（pg／mL）分别为31．62±1．71、124．27±17．28、110．57±15．71和34．30±2．14、136．19±17．94、123．57±14．47,明显高于照射对照组的23．06±1．79、99．76±9．41、88．28±10．62pg／mL（P〈0．05,P〈0．01）;（3）EGP200、400mg／kg＋照射组小鼠脾细胞IFN-γ耐州A和蛋白表达量（灰度值）分别为0．75±0．13、1．08±0．15、1．21±0．13和93247±5627、130154±7279、171467±8678,明显高于照射对照组的0．35±0．10、50096±4815（P〈0．01）。结论琼枝麒麟菜多糖（EGP）可以通过分泌上述细胞因子拮抗辐射损伤。     

EBV—miRNA—BHRF1—1对鼻咽癌细胞p53基因表达的影响

目的通过研究EBV-miRNA-BHRF1—1对鼻咽癌细胞p53基因表达的调控作用,探讨其对鼻咽癌患者基因治疗的应用价值。方法利用已构建好的EBV—miRNA-BHRF1—1表达质粒及空质粒载体,分别作为转染BHRF1—1质粒组和空质粒组,设置加入PBS转染的CNE-2细胞株作为对照组（PBS组）,转染至鼻咽癌细胞株。采用RT—PCR方法检测鼻咽癌相关基因（p53基因）的mRNA水平,Western检测p53蛋白表达水平,并利用CCK-8比色法检测鼻咽癌细胞的生长情况。结果BHRF1-1组细胞BHRF1—1表达量为（0．98±0．05）,高于空质粒组（0．66±0．10）及PBS组（0．65±0．12）（均P〈0．01）,BHRF1-1组、空质粒组、PBS组的细胞p53 mRNA表达量分别为（0．65±0．07）、（0．98±0．06）、（0．99±0．03）,BHRF1—1组均低于空质粒组和PBS组（均P〈0．01）;BHRF1—1组细胞内p53蛋白表达量低于空质粒组和PBS组。BHRF1—1组的细胞增殖抑制率（14．9％）高于空质粒组（11．2％）和PBS组（2．5％）（均P〈0．01）。结论EBV—miRNA—BHRF1—1能有效的调控声3基因mRNA水平及其蛋白翻译水平,并可能对鼻咽癌细胞株的增殖有一定的抑制作用。     

小檗碱对胰岛素抵抗HepG2细胞11β-羟基类固醇脱氢酶1mRNA表达的影响

目的研究小檗碱对胰岛素抵抗模型肝细胞11β-羟基类固醇脱氢酶1（11β-HSD1）mRNA表达的影响。方法应用高浓度胰岛素孵育HepG2细胞24h,建立胰岛素抵抗肝细胞模型。将模型细胞分别置于含不同浓度胰岛素和小檗碱的培养液中培养24h,以葡萄糖氧化酶-过氧化物酶（GOD-POD）法测定培养液中的葡萄糖浓度,计算细胞对葡萄糖的吸收率。应用RT-PCR检测小檗碱作用前后模型细胞11β-HSD1mRNA的表达。结果以含10-7mol／L胰岛素的培养液孵育HepG2细胞24h后,细胞对葡萄糖的吸收明显降低,表明建模成功。模型细胞经高浓度（10μmol／L）小檗碱处理后,葡萄糖吸收率明显增加[（42．53±1．99）％VS（28．16±1．99）％,t=12．9457,P〈0．01],并且高浓度小檗碱与胰岛素对模型细胞有协同促进葡萄糖吸收的作用。模型细胞11β—HSD 1mRNA表达显著高于非胰岛素抵抗细胞（相对表达量：4．60±0．96 vs 0．67±0．42,t=4．9476,P〈0．05）。经高浓度小檗碱干预24h后,模型细胞11β-HSD1mRNA表达降低,与非胰岛素抵抗HepG2细胞相比差异无统计学意义（相对表达量：1．12±0．35VS0．67±0．42,t=1．1394,P〉0．05）。低浓度（1μmol／L）小檗碱则作用不明显。结论浓度依赖性地下调11β—HSD1mRNA表达是小檗碱改善胰岛素抵抗的作用机制之一。     

雌鼠围产期染铅对仔鼠脑组织Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响

[目的]探讨雌鼠围产期染铅对仔鼠中枢神经系统神经细胞内Brn-3a基因转录及蛋白的影响。[方法]雌性大鼠在围产期经饮水染铅，分为低（0．5g/L）、中（1．0g/L）、高（2．0g/L）3个染铅组，对照组饮用蒸馏水。取21日龄仔鼠脑组织进行观察，采用组织原位杂交半定量方法检测Brn-3a基因mRNA转录水平，采用免疫组织化学方法检测Brn-3a蛋白表达水平。[结果]原位杂交检测Brn-3a基因mRNA图像分析结果表明，高铅组与对照组相比，大脑皮质和海马部位平均灰度值升高（P〈0．05），表明mRNA的表达量减弱，海马部位阳性面积比明显下降（P〈0．01）。免疫组织化学图像分析表明，与对照组相比，各染铅组大脑皮质、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa（％）]、平均灰度的差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），并呈剂量依赖性关系。染铅组Brn-3a蛋白表达低于对照组。[结论]大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降，提示在本实验染毒剂量下，铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式。     

高脂饮食对载脂蛋白E缺乏鼠维生素D受体表达及一氧化氮合酶活性影响研究

目的了解高脂饮食对载脂蛋白（apoE）缺乏鼠（apoE^-/-）维生素D受体（VDR）表达及内皮型一氧化氮合酶（eNOS）活性影响,探讨VDR在动脉粥样硬化（AS）形成的意义及可能机制。方法apoE^-／-小鼠与作为对照的C57BLP6J小鼠分别按数字表法分为正常食物组与高脂食物组,采用竞争蛋白结合放射免疫法检测小鼠血25-（OH）D水平,采用免疫荧光化学法及RT-PCR法检测小鼠主动脉VDR表达,应用硝酸还原酶法检测小鼠血一氧化氮（NO）含量和eNOS酶活力。结果高脂饮食进一步加重apoE-/-小鼠As病变、降低血25-（OH）D水平[血25-（OH）D：正常饲料C57BLP6J小鼠、高脂饲料C57BLP6J小鼠、正常饲料apoE。一小鼠、高脂饲料apoE-/-小鼠分别为[（26．44±1．28）ng／mL、（22．68±2．07）ng／mL、（1-7.46±4.2．22）ng／mL、（15．88±0．97）ng／mL,P〈0．01]。高脂饮食进一步上调apoE-/-小鼠主动脉VDR蛋白与mRNA表达水平[VDR蛋白分别为0．244±0．088、0．346±0．132、0．547±0．128、0．768±0．162,VDtlmRNA分另U为、0．228±O．08．3、0．375±0．103、0．451±0．117、0．597±0．131,P均〈0．01]。高脂饮食致apoE一小鼠血NO水平、eNOS酶活力明显增高[NO：（39．74±4．81）μmol／L、（48．1±5．24）ixmol／L、（67．34±6．14）tzmol／L、（86．74±8．05）txmol／L;eNOS：（8．6-t-O．77）u／L、（12．28±1．42）U／L、（15．96-t-O．92）U／L、（18．68±1．15）U／L,P均〈0．01]。血25-（OH）D水平与血浆中NO含量、eNOS酶活力及VDR表达呈负相关（P〈0．01）。结论apoE-/-小鼠血25-（OH）D水平降低,VDR表达量明显上调,血NO含量、eNOS酶活力增高,高脂饮食可进一步降低血25-（OH）13、NO水平,上调主动脉VDR表达,增加eNOS酶活力。高脂饮食、维生素D、apoE相互作用,影响As病变可能与NO、eNOS有关。     

无机砷对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1 mRNA和蛋白表达的诱导作用

[目的]观察亚砷酸钠（sodium arsenite,NaAsO2）对Chang肝细胞株血红素单加氧酶-1（heme oxygenase-1,HO-1）mRNA和蛋白表达的诱导作用。[方法]以5μmol／L和10μmol／L的NaAsO2作用Chang肝细胞株2、6、12h和24h,分别用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western Blot法检测细胞内HO-1的mRNA和蛋白表达情况。[结果]5μmol／L和10μmol／LNaAs02暴露2h开始出现HO-1mRNA的诱导表达;6h的表达水平明显高于对照组和2h暴露组（P〈0．01）。其中,10μmol／LNaAsO2暴露12h和24h的mRNA表达均明显高于该浓度的6h暴露组（P〈0．01）;但24h的HO-1 mRNA表达水平与12h组相比没有明显升高。NaAsO2暴露诱导的HO-1蛋白表达则从6h开始出现,12h组明显高于6h组,24h组明显高于12h组（均P〈0．01）;5μmol／L和10μmol／L NaAsO2分别暴露6、12h和24h的HO-1蛋白表达量分别是对照组的2．80、9．34、18．15和3．97、12．92、23．29倍;此外,10μmol/LNaAsO2暴露12h和24h的HO-1 mRNA和蛋白表达均明显高于对应时间的5μmol／L组（P〈0．01）。[结论]NaAsO2暴露能够有效和持续性诱导Chang肝细胞株HO-1的mRNA和蛋白表达,是无机砷暴露的一种细胞保护性适应性反应。     

低分子肝素对脓毒症大鼠腹主动脉内皮细胞蛋白C受体和蛋白酶活化受体1表达的影响

目的观察低分子肝素（LMWH）对脓毒症大鼠腹主动脉内皮细胞（VEC）蛋白C受体（EPCR）和蛋白酶活化受体1（PARl）表达的影响。方法采用组织贴块法培养24只Wister大鼠腹主动脉VEC,1：3传代至第4代,分为对照组（n=6）、脓毒症组（LPS1μg／ml,n=6）、LMWH组（LPS1μg/ml＋LMWH5μg/ml,n=6）。分别在第1、3、5天采用流式细胞术（FCM）检测VEC表面的EPCR和PARl的表达。结果脓毒症组EPCR和PARl的表达各时间点均较对照组有明显下降（P〈0．05或P〈0．01）,以第5天最为明显（26．53±7．21VS39．26±2．62,q=6．45,P〈0．01：53．214±15．10VS86．54±11．34,q=6．94,P〈0．01）。LMWH组EPCR和PARl的表达各时间点均高于脓毒症组（P〈0．05）;与对照组比较,EPCR在第1天仍有明显降低（40．86±1．63VS45．41.1±2．82,q=3．51,P〈0．05）,但第3、5天接近对照组水平（41．20±3．32VS42．83±2．66,P〉0．05;39．23±3．33VS39．26±2．62,P〉0．05）,PARl各时问点与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论LMWH能有效改善脓毒症内皮细胞EPCR和PARl表达抑制的状态。     

含益生元肠内营养对重症急性胰腺炎大鼠肠紧密结合蛋白occludin的作用

目的探讨早期给予含益生元（低聚半乳糖）肠内营养（EN）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠紧密结合蛋白oecludin蛋白表达以及mRNA表达的作用。方法将64只SD大鼠随机分成8组（n=8）：假手术对照4d和7d组、SAP造模＋肠内营养（SAP＋EN）4d和7d组、SAP造模＋含益生元肠内营养（SAP＋PRE-EN）4d和7d组、SAP造模＋肠外营养（SAP4-PN）4d和7d组。胰腺被膜下均匀注射3．8％牛磺胆酸钠1ml建立SAP大鼠模型,采用免疫组织化学法检测occludin蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测occludinmRNA含量。结果各SAP组oecludin蛋白表达和mRNA含量均显著低于假手术对照组（P〈0．01）,SAP＋EN组和SAP＋PRE-EN组显著高于SAP＋PN组（P〈0．05）,SAP＋PRE．EN组显著高于SAP＋EN组（P〈0．05）。Occludin蛋白表达和mRNA含量呈显著正相关（r=0．83,P〈0．01）。结论含益生元肠内营养可以增强肠黏膜紧密结合蛋白occludin的表达,其作用与上调occludinmRNA水平有关。     

慢性心力衰竭大鼠心肌神经生长因子表达及卡维地洛治疗的影响

目的评价卡维地洛（Carvedilol）对慢性心力衰竭（CHF）大鼠心肌神经生长因子（NGF）表达的影响方法应用阿霉素腹腔注射的方法制作CHF大鼠模型,根据干预药物的不同分组为特拉唑嗪组（CHF—T）、卡维地洛组（CHF—C）、倍他乐克组（CHF—M）和安慰剂组（CHF—P）;10周后透射电镜评价大鼠心肌超微结构,RT—PCR和Western blot方法分别测定大鼠心肌NGF mRNA和蛋白表达水平。结果CHF—P组NGF mRNA和蛋白表达水平比正常对照组明显下降（P〈0．01）;CHF—C组NGF mRNA和蛋白的表达明显高于CHF—P组（P〈0．05）和CHF—M组（P〈0．05）;CHF—C组NGF mRNA和蛋白表达与CHF—T组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论CHF大鼠心肌NGF表达水平明显下调,卡维地洛治疗能够阻止CHF心肌NGF下调,有助于改善CHF大鼠心肌交感神经重构。     

c—Jun氨基末端激酶选择性抑制剂对雌激素诱导致妊娠期大鼠肝内胆汁淤积症的影响

目的探讨c-Jun氨基末端激酶（JNK）选择性抑制剂SP600125对雌激素诱导的妊娠期肝内胆汁淤积症大鼠肝组织内Bsep、Ntcp蛋白的表达情况及血清总胆汁酸浓度的影响。方法将孕15dSD大鼠皮下注射17—13-乙炔雌二醇建立ICP动物模型,并予以SP600125进行干预,检测各组孕鼠血清胆汁酸（TBA）、各组孕鼠肝脏组织c—Jun、胆盐输出泵（Bsep）及胆酸共转运蛋白（Ntcp）的表达水平。结果在ICP模型组中c．Jun的灰度值较正常对照组显著降低（101．05±5．20vs118．99±5．95,P〈0．05）,给予SP600125干预后,干预组Bsep、Ntcp的表达较ICP模型组显著升高,且高干预组升高得更为明显（低剂量干预组Bsep：0．452±0．031V80．291±0．043,Ntcp：0．462±0．015V80．285±0．021,P〈0．05;高剂量干预组Bsep：0．568±0．038VS0．291±0．043;Ntcp：0．605±0．020VS0．285±0．021,P〈0．05）,血清胆汁酸水平下降。结论在雌激素诱导ICP的动物模型中,SP600125可阻止c-Jun／AP-1表达升高,其可能参与了雌激素下调肝脏Bsep、Ntcp的表达机制。     

缬沙坦对急性肺损伤大鼠TGF-β／Smads信号通路的影响

目的观察缬沙坦对急性肺损伤大鼠TGF-β／Smad信号通路的影响。方法24只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组和缬沙坦组三组,每组8只。缬沙坦组于气管内滴注博莱霉素（BLM）生理盐水溶液（5mg／kg）以复制急性肺损伤动物模型,并于造模当天每日给予缬沙坦（20mg／kg）灌胃;模型组以生理盐水代替缬沙坦灌胃;对照组则均用生理盐水代替BLM和缬沙坦。各组动物均于制模开始后第7天处死,分取肺组织行病理切片HE染色观察肺损伤程度、免疫组化技术检测肺组织TGF—β1、Smad2／3和Smad7蛋白的表达水平。结果缬沙坦组大鼠肺组织损伤程度较模型组比较明显减少（P〈0．01）。模型组肺组织内TGF-β1、Smad2／3蛋白表达水平较对照组明显增强（P〈0．01）。缬沙坦组TGF-β1、Smad2／3蛋白表达水平较模型组降低（P〈0．01）。Smad7蛋白在模型组肺组织内表达明显低于对照组（0．23±0．02vs0．36±0．03,P〈0．01）,缬沙坦组Smad7蛋白表达同模型组比较明显增强（P〈0．01）。结论缬沙坦可下调急性肺损伤大鼠肺组织内TGF—β、Smad2／3蛋白表达,上调Smad7蛋白表达,从而阻断TGF-β／Smad信号通路,减轻急性肺损伤程度。