免疫组织化学和荧光原位杂交检测肺腺癌ROS1表达的对比

目的比较免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)和荧光原位杂交(fluorescent in situhybridization,FISH)技术在检测肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因的差异性和一致性,评估IHC在临床上的应用价值。方法应用IHC和FISH技术对332例肺腺癌中ROS1蛋白表达和融合基因进行检测,比较两者检测的结果和相关性,并探讨ROS1融合基因与临床病理特征之间的关系。结果 332例肺腺癌中FISH阳性者13例,阴性者319例,ROS1融合基因阳性率为3.9%;ROS1蛋白表达结果:0者312例,1+者2例,2+者5例,3+者13例,ROS1蛋白过表达率为6.0%;经FISH检测312例ROS1蛋白表达为0的标本无ROS1融合基因,2例1+的标本中也无ROS1融合基因;5例2+的标本中有2例ROS1融合基因,13例3+的标本中11例有ROS1融合基因;IHC检测0和1+、2+、3+标本FISH检测阳性符合率分别为0(0/314)、40%(2/5)和84.6%(11/13);IHC检测ROS1蛋白为2+~3+的标本中72.2%(13/18)显示ROS1融合基因,0~1+患者中无1例有ROS1融合基因(Kappa系数=0.831,P0.01);IHC检测ROS1蛋白表达的敏感性和特异性分别100%和98.4%。结论 IHC检测ROS1蛋白表达和FISH检测ROS1融合基因,两种方法有较高的符合率,一致性较好,IHC有较高的敏感性和特异性,可作为临床检测肺腺癌ROS1融合基因的简单而有效的方法。     

PD-1/PD-L1信号通路与肿瘤免疫逃逸

PD-1及其配体PD-L1、PD-L2广泛表达于多种细胞表面,是一组与免疫负调控有关的共刺激分子。PD-1/PD-L1信号通路的激活有利于肿瘤逃脱机体免疫监视,但具体的肿瘤免疫逃逸机制尚未清楚。就抗PD-1和抗PD-L1抗体疗效而言,仍然需要对肿瘤免疫逃逸机制做更深入的研究。文章就现有研究成果作一综述如下。     

PD-1及PD-L1与肿瘤适应性免疫抵抗的研究进展

程序性死亡蛋白-1(programmed death protein 1,PD-1)与其配体程序性死亡配体1(programmed cell death-ligand 1,PD-L1)属于CD28/B7家族,是近年研究比较透彻的免疫检查点分子。PD-1/PD-L1通过调节外周组织中免疫反应的持续性和效价避免组织损伤并维持对于自身抗原的耐受。肿瘤细胞主动性抑制T细胞的机制称为适应性免疫抵抗(adaptive immune resistance),即肿瘤抗原特异性T细胞企图攻击肿瘤,但肿瘤细胞发生反应性改变(诱导表达PD-L1)从而避免免疫攻击。适应性免疫抵抗过程中的关键分子即为PD-1/PD-L1。PD-1/PD-L1抗体治疗已在临床试验中显示出良好的疗效,使阻断适应性免疫抵抗有望成为重要的肿瘤免疫治疗手段。分析肿瘤活检样本的基线免疫信息能指导制定个体化的免疫治疗方案。本文就PD-1/PD-L1的生物学结构、适应性免疫抵抗机制及相关临床决策等进行综述。     

PD-1/PD-L1参与肿瘤免疫逃逸的研究进展

程序性死亡分子1及其配体(PD-1/PD-L1)是一对负性免疫共刺激分子,正常情况下,组织细胞表面的PD-L1与淋巴细胞表面的PD-1结合后,可抑制淋巴细胞功能,诱导活化的淋巴细胞凋亡,从而在自身免疫耐受及防止自身免疫性疾病中发挥重要作用。多种肿瘤细胞表面也表达PD-L1,肿瘤细胞表达的PD-L1,可与肿瘤浸润淋巴细胞表面的PD-1分子结合,抑制淋巴细胞的功能及细胞因子的释放,并诱导淋巴细胞凋亡,从而抵抗淋巴细胞的杀伤作用,最终导致肿瘤发生免疫逃逸。     

膀胱尿路上皮癌中PD-L1和PD-L2的表达及临床意义

目的 探讨膀胱尿路上皮癌(urothelial bladder cancer,UBC)中程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1,PD-L1)以及程序性死亡配体-2(programmed death-ligand 2,PD-L2)的表达及临床意义.方法 采用免疫组化法检测58例UBC组织中...     

PD-1/PD-L1抑制剂的三维定量构效关系和分子对接研究北大核心CSCD

目的探讨程序性死亡受体-1(PD-1)、程序性死亡受体配体-1(PD-L1)抑制剂的三维定量构效关系和分子对接研究。方法针对现有的小分子化合物进行合理研究,取45个新型o-(联苯-3-基甲/氧基)硝基苯抑制剂进行三维定量构效关系研究,包括使用分子力场分析法(comparative molecular field analysis,CoMFA)和比较分子相似性指数法(comparative molecular similarity indices analysis,CoMSIA),并且对分子对接,观察小分子与5J89蛋白的结合效果。结果Co MFA模型(q^(2)=0.644,r^(2)=0.950)和CoMSIA模型(q^(2)=0.622,r^(2)=0.998)具有一定预测能力。TYR:56、GLN:66氨基酸是影响这些抑制剂活性的主要氨基酸。结论该研究是计算机辅助药物方法在抗肿瘤方面的应用,可为开发PD-1/PD-L1抑制剂作为抗癌药物提供参考。     

PD-1/PD-L在淋巴瘤中的研究进展

淋巴瘤是一组异质性的淋巴造血系统恶性肿瘤。程序性死亡受体1(programmed death-1,PD-1)及其配体(programmed death-ligand,PD-L)在T细胞介导的免疫应答过程中发挥重要作用。PD-1与PD-L1/PD-L2之间的相互作用可引起细胞凋亡以及T细胞耗竭,进而抑制抗肿瘤免疫应答。近年来研究发现以PD-1/PD-L1为靶点的免疫检查点抑制剂可有效地恢复T细胞功能,为肿瘤的治疗带来希望。该文就PD-1/PD-L在淋巴瘤中的免疫组化研究进展作一综述,以期为淋巴瘤的诊疗提供参考。     

基于抗PD-1/PD-L1单抗免疫阻断治疗以及疗效相关标志物的研究进展

肿瘤的免疫疗法是肿瘤治疗的重大突破,基于抗PD-1/PD-L1单抗的肿瘤免疫阻断治疗在临床上取得了越来越广泛的应用。在多种类型肿瘤治疗中,抗PD-1/PD-L1单抗药物在部分患者中获得了持续而明显的效果,多种药物相继上市。文章就抗PD-1/PD-L1单抗免疫阻断治疗以及疗效标志物的研究进展进行综述。     

中国非小细胞肺癌PD-L1检测现状北大核心CSCD

免疫逃逸是新近发现的肿瘤生物学的十大特征之一。而细胞程序性死亡分子1（PD-1）／细胞程序性死亡分子配体1（PD-L1）作为免疫检查点分子,可抑制T细胞活化、下调免疫应答,在免疫逃逸及肿瘤的发生和发展中发挥着重要作用。     

胃肠道腺癌层粘蛋白分布状态的免疫组织化学研究

胃肠道腺癌层粘蛋白分布状态的免疫组织化学研究黄冬雁吴珊张丽红李玉林一、材料和方法１９９２年以来我校手术切除的胃肠道腺癌标本２１例，癌旁正常组织４例，转移淋巴结３例。病人年龄３８～７２岁，平均４９．８岁。病理组织类型均为胃肠道腺癌。腺癌高分化７例，中分...     

胃肝样腺癌的组织病理学和免疫组织化学研究

胃肝样腺癌的组织病理学和免疫组织化学研究李祥周张佃乾乐美兆胃肝样腺癌的组织病理学和免疫组织化学研究@李祥周@张佃乾@乐美兆...     

弥漫大B细胞淋巴瘤中PD-1、PD-L1的表达

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)中程序性死亡受体-1(programmed death-1,PD-1)及程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1,PD-L1)的表达及临床意义。方法采用免疫组化法检测184例DLBCL组织中PD-1、PD-L1的表达,分析两者表达与DLBCL临床病理特征的关系。结果 184例DLBCL中肿瘤细胞PD-1、PD-L1阳性率分别为1. 63%、43. 48%;微环境细胞PD-1、PD-L1阳性率分别为11. 41%、26. 09%。肿瘤细胞及微环境细胞PD-1的表达与患者性别、年龄、Hans分型、CD5、EBER、ALK以及CD30的表达差异均无显著性(P均 0. 05)。非生发中心B细胞样(nongerminal center B-cell-like,non-GCB)型DLBCL肿瘤细胞(47. 55%)及微环境细胞(31. 47%)中PD-L1的阳性率高于生发中心B细胞样(germinal center B-cell-like,GCB)型DLBCL肿瘤细胞(29. 27%)及微环境细胞(7. 32%)(P均0. 05); EBV+DLBCL肿瘤细胞(75. 00%)及微环境细胞(58. 33%)中PD-L1的阳性率高于EBV-DLBCL肿瘤细胞(40. 74%)及微环境细胞(24. 07%)(P均0. 05); CD30+DLBCL(66. 67%)微环境细胞中PD-L1的阳性率高于CD30-DLBCL微环境细胞(27. 00%)(P=0. 005)。结论 PD-L1在non-GCB型以及EBV+DLBCL肿瘤细胞及微环境细胞中有更高的阳性率;且PD-L1在CD30+DLBCL微环境细胞中有更高的阳性率。     

免疫检查点分子PD-L1和B7-H4在卵巢癌组织中的表达及意义北大核心

为探讨免疫检查点分子PD-L1和B7-H4在卵巢癌组织中的表达特点以及临床意义,收集46例手术切除的卵巢癌组织,通过免疫组化染色技术检测PD-L1和B7-H4分子的表达水平和定位,采用χ2检验分析其与样本临床参数之间的关系,Spearman法分析相关性。结果显示,PD-L1和B7-H4分子在卵巢癌组织内中/高表达所占百分比分别为67.4%(31/46)和82.6%(38/46),二者同时中/高表达率为58.7%(27/46)。膜PD-L1中/高表达与病理类型、分化程度有关(P<0.05),膜B7-H4中/高表达与病理类型有关(P<0.05);膜PD-L1与膜B7-H4的表达有相关性(r=0.553,P<0.05),浆PD-L1和浆B7-H4的表达有相关性(r=0.429,P<0.05)。该研究提示,卵巢癌组织中癌细胞膜表面PD-L1中/高表达提示肿瘤分化差,胞膜同时中/高表达PD-L1和B7-H4分子主要集中在卵巢透明细胞癌亚组,PD-L1与B7-H4在胞膜和胞浆的表达具有相关性,在免疫治疗卵巢癌时需考虑PD-L1和B7-H4抗体联合靶向干预。     

肺腺癌5-羟色胺受体的免疫组织化学定位

目的 对人肺腺癌肿瘤组织的5-HTR的定位观察。方法 β型5-HT抗独特型抗体，免疫组织化学PAP。结果 人肺腺癌肿瘤细胞内有大量5-HTR免疫反应阳性物质，结论 肺腺癌细胞上有5-HTR表达，5-HT可能参与人肺腺癌的生长调控。为研究肺腺癌的发生和发展机制以及临床治疗提供有价值的参考。     

PD-L1表达调控与肿瘤免疫治疗的研究进展

程序性细胞死亡蛋白1(programmed cell death protein 1,PD-1)/程序性死亡配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)是导致肿瘤免疫逃逸的重要免疫检查点分子,阻断PD-1/PD-L1可以重新激活细胞毒性T细胞对肿瘤的杀伤作用,是一种重要的肿瘤免疫治疗方式。肿...     

肺腺癌组织中CPNE1蛋白的表达及临床意义

目的探讨Copine 1(CPNE1)蛋白在肺腺癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测CPNE1蛋白在186例肺腺癌组织及30例正常肺组织中的表达;采用RT-PCR技术检测肺腺癌组织及正常肺组织中CPNE1 mRNA的表达。结果在186例肺腺癌组织中68例CPNE1低表达(36.56%),118例呈CPNE1高表达(63.44%),CPNE1在正常组织中均呈低表达。相关性分析结果显示,CPNE1表达与肺腺癌分期、远处转移有关(P0.05),与患者年龄、性别、肿瘤大小等无关。RT-PCR结果显示,肺腺癌组织中CPNE1的表达量显著高于正常肺组织。结论 CPNE1蛋白在肺腺癌组织中的表达较正常肺组织高,且与淋巴结转移、临床分期有关。CPNE1蛋白表达与肺腺癌的发生、发展及预后密切相关,有望成为肺腺癌预后评估的重要指标。     

PD-L1阻断对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及单核细胞功能的影响北大核心CSCD

目的:探讨程序性死亡受体-1配体(PD-L1)阻断对脓毒症小鼠T淋巴细胞凋亡及单核细胞功能的影响。方法:30只8~10周龄清洁级C57BL/6雄性小鼠随机分为3组:sham组、模型组、PD-L1拮抗组,每组10只,模型组、PD-L1拮抗组小鼠采用盲肠结扎穿孔手术(CLP)构建脓毒症小鼠模型,sham组小鼠暴露盲肠后即进行伤口缝合,不结扎。PD-L1拮抗组小鼠术后腹腔注射抗PD-L1抗体(50μg/只),每6 h注射1次,连续4次,sham组和模型组小鼠腹腔注射等剂量生理盐水。流式标记法检测各组小鼠CD3+T细胞表面PD-1和单核细胞CD11b+表面PD-L1表达,HE染色观察组织病理学改变,电镜下观察脾脏和胸腺超微病理结构改变,TUNEL染色检测脾脏和胸腺组织细胞凋亡、流式细胞术检测胸腺组织T淋巴细胞凋亡,ELISA检测Caspase-3和TNF-α、IL-6及IL-10表达。结果:与sham组相比,模型组小鼠CD3^(+)、CD11b^(+)表面PD-1和PD-L1表达、脾脏和胸腺组织细胞凋亡率、T淋巴细胞凋亡率、Caspase-3、TNF-α、IL-6、IL-10蛋白表达显著升高(P<0.05);与模型组相比,PD-L1拮抗组小鼠CD3^(+)、CD11b^(+)表面PD-1和PD-L1表达、脾脏和胸腺组织细胞凋亡率、T淋巴细胞凋亡率、Caspase-3、TNF-α、IL-6蛋白表达明显降低,IL-10表达明显升高(P<0.05)。结论:PD-L1阻断可有效降低脓毒症小鼠T细胞凋亡率,改善其单核细胞功能。     

舒尼替尼抑制小鼠骨髓来源树突状细胞表面PD-L1和PD-L2的表达

目的观察小鼠髓源性树突状细胞(DC)在舒尼替尼刺激下,其表面程序性死亡分子1配体1(PD-L1)和PD-L2的表达变化。方法取小鼠骨髓细胞,对照组加入二甲基亚砜,实验组分别加入(100、200、300)ng/m L舒尼替尼,刺激48 h,用流式细胞术检测DC表面PD-L1和PD-L2的表达水平。结果与对照组相比,实验组中成熟DC(m DC)和总DC(包括m DC和im DC)表面PD-L1的表达水平显著降低;表达PD-L1的未成熟DC(im DC)、m DC和DC百分比均显著降低,表达PD-L2的m DC百分比显著降低;表达PD-L2的DC百分比在100 ng/m L、300 ng/m L舒尼替尼组中显著降低。结论舒尼替尼可显著降低小鼠DC表面PD-L1、PD-L2的表达。     

肺非终末呼吸单元型腺癌的临床病理学观察北大核心CSCD

目的探讨肺非终末呼吸单元（non－TRU）型腺癌的临床病理特征。方法收集南京医科大学附属苏州医院/苏州肿瘤诊疗中心病理科和解放军南京总医院病理科2005年1月至2016年12月72例手术切除的肺non－TRU型腺癌的病例资料,光镜下观察组织学和细胞学特征及其前驱病变,免疫组织化学检测谱系特异性标志物和肿瘤干细胞标志物的表达。应用扩增阻滞突变系统（ARMS）或直接基因测序法检测表皮生长因子受体（EGFR）、KRAS、BRAF、EML4－ALK和ROS1基因。结果non－TRU型腺癌常见于男性（65.3%,47/72）、有吸烟史（68.1%,49/72）、年龄较大（平均61岁）、中央型腺癌（75.0%,54/72）、有肿瘤性坏死（61.1%,44/72）和高级别（73.6%,53/72）腺癌。光镜下,non－TRU型腺癌具有复杂多变的组织学结构,通常表现为大而不规则的、裂隙状腺样或囊泡状结构,腔内充满黏液、坏死的肿瘤细胞碎屑及中性粒细胞,或表现为伴有显著黏液产生的浸润性腺癌。肿瘤细胞具有支气管表面上皮细胞、黏液柱状细胞、多角形细胞或杯状细胞特征。25.0%（18/72）、31.9%（23/72）和38.9%（28/72）的病例伴有纤毛柱状细胞化生（CCCM）、黏液柱状细胞变（MCCC）和细支气管上皮异型增生（BCCD）。免疫组织化学表达细胞角蛋白（CK）7（100%,72/72）、甲状腺转录因子1（TTF1;12.5%,9/72）、Napsin A（5.6%,4/72）、MUC5AC（81.9%,59/72）、MUC5B（87.5%,63/72）、p53（66.7%,48/72）、CK5/6（12.5%,9/72）、p63（18.1%,13/72）、CK20（19.4%,14/72）和CDX2（16.7%,12/72）,肿瘤干细胞标志物表达CD44（43.1%,31/72）、CD133（31.9%,23/72）、β－catenin（58.3%,42/72）、ALDH1（36.1%,26/72）、GATA6（12.5%、9/72）、SOX2（20.8%,15/72）和OCT4（29.2%,21/72）。驱动基因中19例（26.4%,19/72）KRAS突变,2例（2.8%,2/72）EGFR基因突变,1例（1.4%,1/72）EML4－ALK融合基因,未检测到BRAF和ROS1改变。 结论non－TRU型腺癌具有显著的临床病理特征、组织形态学表现、免疫学表型和驱动基因改变,是肺腺癌独立的少见类型。     

肺癌中PD-L1表达和调节性T细胞浸润的关系及意义

目的：探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中程序性死亡受体配体1(programmed death receptor ligand 1, PD-L1)表达和调节性T细胞(regulatory T cell, Treg)浸润的关系及临床意义。方法采用免疫组化法检测78例NSCLC组织中PD-L1表达和Treg浸润情况,分析二者之间的相关性及与NSCLC临床病理特征的关系。结果肺癌组织中PD-L1的表达显著高于癌旁组织(52．5% vs 6．4%),肺癌组织中 Treg浸润亦明显高于癌旁组织[(18．63±16．67)个/HPF vs (2．96±2．97)个/HPF]。晚期肺癌组织中PD-L1的表达高于早期肺癌组织(70．0% vs 41．7%),晚期肺癌组织中Treg浸润亦明显高于早期肺癌组织(73．3% vs 35．4%),有淋巴结转移组中PD-L1表达和Treg浸润均明显高于无淋巴结转移组,PD-L1表达和Treg浸润程度与淋巴结转移及临床分期相关(P<0．05)。肺癌组织中PD-L1表达和Foxp3+Treg的浸润密度呈正相关(rs =0．611,F=78．82,P=0．023)。结论肺癌微环境中PD-L1表达和Treg浸润呈正相关,二者可能共同参与肺癌的进展和免疫逃逸。