内质网应激凋亡信号途径在脓毒症脾淋巴细胞凋亡中的作用研究

目的 研究内质网应激凋亡信号途径在脓毒症脾淋巴细胞凋亡中的作用.方法 24只C57BL/6小鼠被随机分为模型组和假手术(sham)组,每组12只.用盲肠结扎穿孔术(CLP)制备脓毒症动物模型,术后24 h处死动物后取脾脏,用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测脾淋巴细胞凋亡,用逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和C/EBP同源蛋白(CHOP)的mRNA和蛋白表达.结果 CLP组脾淋巴细胞凋亡指数较sham组明显增加(52±17比5±3,P＜0.01);且CLP组GRP78和CHOP的mRNA和蛋白表达亦较sham组明显增加(GRP78 mRNA:0.807±0.122比0.314±0.107,CHOP mRNA:0.923±0.085比0.221±0.074;GRP78蛋白:5.216±1.351比2.733±0.421,CHOP蛋白:3.170±1.227比0.403±0.142,P均＜0.01).结论 脓毒症时脾淋巴细胞中存在内质网应激反应,并通过上调CHOP表达的机制诱导凋亡.     

CHOP在内质网应激介导凋亡中的作用

细胞凋亡(apoptosis)又称为程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD),是机体细胞在正常生理或病理状态下及在相关基因调控下发生的一种细胞主动性死亡方式。它是机体用来去除老化细胞及具有潜在性异常生长细胞的一种     

内质网应激与微小核糖核酸在胰岛β细胞凋亡中的作用

正胰岛β细胞功能障碍是2型糖尿病由临床前期向临床期进展的关键环节,主要表现为胰岛素合成分泌的减少以及胰岛β细胞数量的下降。研究显示,2型糖尿病患者的胰岛β细胞数量较同体重指数的肥胖以及非肥胖人群分别减少63%及41%,而β细胞凋亡水平分别是肥胖及非肥胖人群的3倍和10倍[1],因此胰岛β细胞凋亡在2型糖尿病发生发展中具有十分重要的作用。在2型糖尿病中有多种机     

内质网应激与肿瘤细胞的凋亡

内质网（endoplasmic reticulum,ER）是重要的细胞器,是蛋白质合成、折叠、组装和钙离子储存等的场所。多种生理和病理条件下,如缺氧、氧化还原状态的改变等可干扰内质网的功能,并引起未折叠蛋白在ER中堆积,产生内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）。虽然ERS可诱导细胞的生存,然而长时间过强的ERS可诱导细胞凋亡,即内质网应激反应性凋亡。     

内质网应激和肾损伤

内质网应激指大量未折叠蛋白在内质网聚集引发的一系列病理生理反应。内质网应激在肾脏病的发生机制研究中是一个相对较新的领域。越来越多的证据表明内质网应激参与了肾小球和肾小管损伤。这些研究表明内质网应激可能是肾脏病进展的重要机制之一,针对内质网应激的治疗方案也可能是一个突破性进展。文章以内质网应激为切入点,对内质网应激与肾损伤之间的联系进行综述。     

内质网与细胞凋亡

内质网是细胞重要的细胞器,参与蛋白质合成、折叠和寡聚化,还参与脂质代谢、类固醇激素的合成、钙的储存等。内质网应激与细胞凋亡密切相关,现就内质网应激反应、内质网Ca^2＋水平的调节、内质网与Bcl-2家族蛋白及其与疾病的关系等方面进行综述。     

内质网应激与细胞死亡

内质网广泛存在于真核细胞内,目前的研究发现诸多因素可引起内质网应激的级联反应,缺血再灌注、氧化应激、钙超载、高同型半胱氨酸等破坏了内质网腔内的氧化环境均可以引起。内质网应激主要激活三条信号通路,激活通路的结果引起蛋白质合成的暂停、整合应激反应的出现,从而通过Caspase-12、CHOP、JNK等信号通路介导细胞死亡,诱导细胞凋亡。     

重楼皂苷Ⅶ联合顺铂通过内质网应激诱导卵巢癌细胞凋亡

目的探讨重楼皂苷Ⅶ联合顺铂诱导卵巢癌SKOV3细胞凋亡的分子机制。方法从中草药重楼块根中分离提取重楼皂苷Ⅶ,然后联合顺铂处理SKOV3细胞,分为以下4组:0.1μg/ml重楼皂苷Ⅶ+1μg/ml顺铂组、1μg/ml重楼皂苷Ⅶ+1μg/ml顺铂组、10μg/ml重楼皂苷Ⅶ+1μg/ml顺铂组、对照组。培养24h和48h后,MTT法检测细胞增殖率,Hoechst染色检测细胞凋亡率,Real-time PCR检测凋亡相关基因caspase3以及内质网应激相关基因XBP1和ATF4的表达。结果重楼皂苷Ⅶ联合顺铂能有效促进SKOV3细胞凋亡,其凋亡是通过内质网应激激活caspase途径引起的。结论重楼皂苷Ⅶ能有效抑制肿瘤细胞生长,为临床上治疗卵巢癌提供了实验依据。     

GSK2606414对酒精联合棕榈酸诱导AML12细胞凋亡的影响

目的 探究内质网应激抑制剂GSK2606414在预防酒精联合棕榈酸诱导的AML12细胞凋亡的作用及机制。方法 选取C57BL/6雌性小鼠10只,随机分为对照组（n=5）及模型组（n=5）。采用Lieber-DeCarli液体饮食诱导小鼠酒精性脂肪肝模型。免疫组织化学法、蛋白免疫印迹法及实时定量PCR法检测内质网应激相关蛋白活化转录因子4（ATF4）和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的表达水平。使用酒精加棕榈酸处理AML12鼠正常肝细胞24 h后检测ATF4及CHOP的改变情况。利用GSK2606414抑制剂预处理AML12细胞,随后使用酒精加棕榈酸处理,蛋白免疫印迹法检测ATF4及CHOP的表达,TUNEL法检测细胞凋亡情况。结果 血清ALT、AST水平及病理结果均证实酒精性脂肪肝小鼠模型建立成功,模型组ATF4和CHOP蛋白的表达高于对照组（P均<0.001）。酒精加棕榈酸刺激AML12肝细胞后ATF4和CHOP的蛋白表达水平升高（P均<0.001）。使用GSK2606414抑制剂预处理AML12细胞与未预处理组相比,ATF4和CHOP的蛋白表达受到抑制（P均<0.05）,细胞凋亡减少。结论 GSK2606414抑制剂可改善酒精联合棕榈酸诱导的AML12细胞凋亡,其机制可能与其能抑制内质网应激有关。     

内质网应激在缺血再灌注急性肾损伤中的作用

目的 观察缺血再灌注急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)大鼠内质网应激相关凋亡蛋白caspase-12、c-Jun氨基端激酶1(c-Jun N-terminal kinase 1,JNK1)、转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)表达变化,探讨内...     

下肢缺血预处理对未成熟心肌细胞凋亡和内质网应激的影响

背景：近几年来研究发现内质网应激导致细胞凋亡在细胞缺血性损害中起重要作用,成为缺血心肌的研究热点。下肢缺血预处理对未成熟心肌具有明显保护作用,但下肢缺血预处理对未成熟心肌内质网应激细胞凋亡是否存在影响至今未知。目的：探讨下肢缺血预处理对未成熟心肌内质网应激和细胞凋亡的影响。方法：采用兔离体心脏Langendorff灌注模型,24只幼兔随机分为3组：对照组仅灌注KH液180 min;缺血再灌注组心脏灌注20 min后,停灌60 min,复灌100 min;下肢缺血预处理组,反复3次阻断双下肢血流5 min/放5 min,建立Langendorff模型,然后重复缺血再灌注组方法。TUNEL法检测心肌细胞凋亡率、Western blot检测GRP78、Bcl-2、Bax和Fas蛋白表达。结果与结论：下肢缺血预处理组与缺血再灌注组比较,心肌细胞凋亡率明显减少;Bcl-2表达明显增多,GRP78、Bax、Fas表达明显减少。结果表明下肢缺血预处理可能通过调控内质网过度应激GRP78表达以及Bcl-2、Bax、Fas蛋白的表达调控心肌细胞凋亡。     

咖啡因对棕榈酸作用下β细胞增殖和凋亡影响

目的观察咖啡因对游离脂肪酸棕榈酸作用下体外培养的β细胞增殖和凋亡的影响。方法根据不同浓度咖啡因(1、10、25μmol/L)和游离脂肪酸棕榈酸(500μmol/L)同时作用于体外培养胰岛β细胞分为5组:空白组(不含游离脂肪酸)、咖啡因1μmol/L组(含咖啡因1μmol/L+500μmol/L棕榈酸)、咖啡因10μmol/L组(咖啡因10μmol/L+500μmol/L棕榈酸)、咖啡因25μmol/L组(咖啡因25μmol/L+棕榈酸500μmol/L)和PA组(500μmol/L棕榈酸的脂性培养基)。以四甲基偶氮唑蓝(MTT)法反映细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡并计算凋亡率。结果 PA组细胞培养48小时、72小时、96小时于490nm光密度值分别为0.144±0.011、0.184±0.026、0.261±0.033,明显低于空白组(P<0.05)。咖啡因10μmol/L组培养72小时、96小时光密度值分别为0.274±0.031、0.452±0.039;咖啡因25μmol/L组培养72小时、96小时光密度值分别为0.280±0.049、0.463±0.051,显著高于PA组(P<0.05)。培养96小时PA组细胞凋亡率(40.55±20.33)%,较空白组(6.68±1.09)%明显升高(P<0.05)。咖啡因10μmol/L和25μmol/L组细胞凋亡率分别为(19.12±10.56)%和(20.97±9.75)%,较PA组明显下降(P<0.05)。结论游离脂肪酸棕榈酸导致体外培养β细胞增殖活性显著受抑、细胞凋亡增加。在一定浓度范围内,咖啡因可能改善棕榈酸诱导的胰岛β细胞增殖受抑和细胞凋亡。     

内质网应激在百草枯上调缺氧诱导因子1α中的作用

目的：探讨内质网应激在百草枯（PQ）上调缺氧诱导因子1α（HIF-1α）中的作用。方法：将60只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为对照组（10只）和染毒组（50只）,染毒组按照50mg/kg的标准将20%的PQ用生理盐水稀释到1ml进行一次性灌胃,于灌胃后2、6、12、24、48h处死动物取肺组织。提取肺组织总蛋白,采用Western Blotting检测HIF-1α和内质网应激标志物GRP78、XBP1的表达。选择ERS抑制剂4-苯基丁酸进行预处理,再施以PQ暴露,Western Blot和免疫荧光检测肺组织中GRP78及HIF-1α的表达。结果：染毒后2h肺组织中HIF-1α、GRP78和XBP1蛋白表达均较对照组明显升高,随时间延长,逐步增高。采用4-苯基丁酸抑制处理后,与PQ处理组比较,大鼠肺组织中GRP78、HIF-1α表达减少。结论：PQ进入肺组织后,可能通过诱导ERS上调HIF-1α的表达参与肺纤维化。     

缬沙坦对内质网应激介导的高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨缬沙坦对内质网应激介导的高血压大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法选用10只WKY大鼠和20只自发性高血压大鼠为研究对象,并随机将后者分为两组:其中一组行缬沙坦药物干预,余所有大鼠给予等量生理盐水。16周后全部处死并留取标本行TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,免疫组织化学法检测GRP78蛋白的表达水平。结果高血压组大鼠心肌可见大量凋亡细胞且GRP78蛋白表达水平显著升高,缬沙坦干预组两组指标均明显降低。结论缬沙坦可有效抑制内质网应激介导的心肌细胞凋亡。     

丹参素对缺氧/复氧诱导H9C2心肌细胞损伤和内质网应激的改善作用

目的观察丹参素(DLA)通过抑制内质网应激和凋亡对H9C2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)后损伤的保护作用。方法将离体培养的H9C2心肌细胞随机分为3组:对照组、缺氧/复氧组(H/R组)、DLA+H/R组(DLA组)。H/R组先缺氧6h后复氧24h;DLA组于缺氧时给予DLA(10-6M)培养6h,再复氧24h。对照组心肌细胞正常培养至实验结束。ELISA测定细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)和丙二醛(MDA)的含量;Western blot检测细胞中内质网应激蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、Caspase-12、Bax、Bcl-2和SOD的蛋白含量。结果与对照组比较,H/R组细胞LDH、CK-MB和MDA的含量显著升高(P<0.05),GRP78、Caspase-12和Bax蛋白表达明显增加(P<0.05),而Bcl-2和SOD的蛋白含量明显降低(P<0.05);给予DLA可明显改善上述指标的变化。结论H/R可诱导H9C2心肌细胞发生凋亡、氧化应激和内质网应激,引起细胞损伤和凋亡;DLA可以通过抑制凋亡、氧化应激和内质网应激,减少细胞损伤,发挥保护细胞的作用。     

内质网应激介导肝细胞凋亡

肝脏疾病组织学损伤,在细胞水平可分为凋亡和坏死,对肝细胞凋亡的研究无疑将成为治疗肝脏疾病及认识肝移植后组织再生的重要课题.文章将内质网应激与细胞凋亡的关系从内质网应激的作用功能、内质网应激对细胞凋亡的影响、肝细胞凋亡与相关疾病的关系等3方面进行分析.可以看出内质网应激是细胞的一种自我保护机制,但是过度的内质网应激会对细胞造成不可逆的损伤甚至促使凋亡.对于内质网应激与肝细胞凋亡的相关性以及相关程度还存在争论,有待进一步研究.随着对肝细胞疾病与内质网应激关系研究的不断深入,肝脏疾病的治疗将会更加有的放矢.     

内质网应激对2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的影响研究概况

胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能受损被认为是T2DM发生发展的最重要的病理机制。生理状态下随着人们年龄的增长,人体胰岛素的敏感性会降低,胰岛素抵抗十分常见,但是不一定会出现高血糖,而胰岛β细胞功能的衰退一定会出现高血糖。流行病学研究显示,在T2DM初诊时,病人胰岛β细胞功能约为正常人的50%,以后每年以4.5%的速度下滑,且不受饮食及药物等治疗方法的影响,     

内质网应激相关蛋白1对衣霉素诱导HepG2细胞内质网应激的影响

目的研究过表达内质网应激相关蛋白1(SERP1)对衣霉素诱导肝癌HepG2细胞内质网应激的影响。 方法以衣霉素诱导HepG2细胞发生内质网应激,将细胞分为以下5组：正常对照组、衣霉素组、衣霉素＋0.25μg SERP1转染组、衣霉素＋0. 5μg SERP1转染组和衣霉素＋1.0μg SERP1转染组,每组实验重复3次;采用MTT法检测不同浓度与作用时间的衣霉素对HepG2细胞存活率的影响,以吸光度(A)值表示。Western blot法检测各组细胞内内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)以及钙联蛋白的表达水平。采用SPSS 15.0统计软件进行统计学分析,比较蛋白表达水平。 结果与对照组相比,衣霉素处理组HepG2细胞中内质网应激标志性蛋白GRP78、CHOP及Calnexin蛋白表达量显著升高,分别为对照处理组的3.8倍(t＝11.5,P<0.05)、1.3倍(t＝3.498,P<0.05)和1.4倍(t＝4.1,P<0.05),差异均有统计学意义;随着SERP1过表达量的逐渐升高,变化呈现剂量依赖性。随着SERP1转染剂量的增加,各组GRP78蛋白的表达较单独衣霉素处理组分别下降了12%[(1.83±0.29)A值,(1.61±0.13)A值,t＝2.36,P>0.05]、24%和30%[(1.83±0.29)A值,(1.40±0.11)A值,(1.27±0.21)A值;F＝50.56,P<0.05],CHOP蛋白的表达水平分别下降了23%, 29%和34%[(1.0±0.15)A值,(0.79±0.07)A值,(0.72±0.55)A值,(0.67±0.14)A值;F＝9.532,P<0.05],Calnexin蛋白的表达水平分别下降了5%[(1.20±0.18)A值,(1.15±0.13)A值;P>0.05]、24%和28%[(1.20±0.18)A值,(0.92±0.07)A值,(0.87±0.18)A值;F＝8.116,P<0.05]。 结论外源性过表达SERP1蛋白通过下调内质网应激蛋白的表达,降低HepG2细胞内质网应激水平,缓解内质网应激介导的细胞损伤。     

顺铂诱导人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞内质网应激差异的研究

目的研究顺铂诱导人卵巢癌SKOV3和SKOV3/DDP细胞内质网应激的差异。方法顺铂分别作用SKOV3组、SKOV3/DDP组细胞0 h、12 h、24 h。MTT检测两种细胞对顺铂敏感性差异;Western blot方法检测并比较内质网应激相关蛋白表达;RT-PCR方法检测顺铂对各时间点细胞的XBP-1表达。结果顺铂诱导两种细胞内质网应激存在显著差异。顺铂引起SKOV3细胞中内质网应激相关蛋白明显活化;而对SKOV3/DDP细胞中内质网应激相关蛋白没有明显影响;顺铂诱导SKOV3/DDP中XBP-1明显表达上调。结论顺铂诱导的内质网应激相关基因的表达差异可能是卵巢癌细胞耐药机制之一。     

内质网应激在脓毒症中的研究进展

脓毒症发病率高,缺乏有效治疗方法,是重症监护室患者死亡的主要原因。内质网是一种细胞器,发挥促进蛋白质折叠和组装等一系列生理活动的作用。在一定条件下,内质网会失去稳态,导致未折叠或错误折叠蛋白的积累,称为内质网应激(ERs)。ERs与脓毒症及由其引起的器官功能障碍有关。本文综述了目前ERs、未折叠蛋白反应(UPR)信号通路与脓毒症相关的研究进展,同时探讨了ERs作为脓毒症治疗靶点的潜在意义及其未来发展方向。