Galectin-3表达抑制对BT-549细胞系增殖和凋亡影响观察

目的：观察抑制Galectin-3表达与BT-549细胞系增殖和凋亡的关系,探讨利用RNA干扰技术作为三阴性乳腺癌基因治疗方法的可行性。方法：设计并化学合成Galectin-3小干扰片段并顺势转染乳腺癌细胞系BT-549（为Galec—tin-3siRNA组）,以未转染细胞为空白对照,以转染阴性干扰为阴性对照,荧光倒置显微镜和实时定量PCR验证干扰结果,XTT方法观察干扰后24、48、72和96h各组细胞增殖吸光度（A值）,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验和Tral2swell实验比较不同组间细胞迁移和侵袭情况,以上实验均重复3次。结果：空白对照组、阴性对照组和Galectin一3siRNA组Galectin-3mRNA相对含量分别为（0．078±0．003）、（0．069±0．004）和（0．015±0．001）,差异有统计学意义,F=486．97,P〈O．001。XTT法检测结果显示,同一组不同时间点之间差异有统计学意义,P值均〈O．00l;同一时间点各组之间差异亦有统计学意义,P值均〈O．001。随着时间推移,空白组和阴性对照组细胞继续生长,Galectin-3siRNA组细胞生长抑制,数量逐渐减少,干扰时间和实验分组之间存在交互效应,F=26．43,P〈0．001。流式细胞仪检测结果显示,Galectin-3siRNA组、空白对照组和阴性对照组凋亡率分别为（26．83±2．15）％、（2．73土0．18）％和（5．86土0．51）％,差异有统计学意义,F=24537．92,P〈0．00l。空白对熙组、阴性对照组和Galectin-3siRNA组愈合率分别为（91．47±4．39）％、（82．36土3．68）％和（52．26士1．95）％,差异有统计学意义,F=213．71,P〈0。001。转染Galectin-3siRNA的乳腺癌细胞浸润穿过Matrigel膜的细胞数（169．36±23．71）要比空白对照组（480．80土30．80）和阴性对照组（320．70±28．12）的细胞数显著减少,差异有统计学意义,F=115．20,P〈0．001。结论：Galectin-3siRNA成功转染入BT-549细胞,并抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,降低其迁移侵袭能力,为三阴性乳腺癌基因治疗提供实验依据。     

miR-145靶向Six1对胃癌侵袭的影响及分子机制

目的探讨微小RNA-145（mill-145）、Six1在胃癌组织及胃癌细胞株中的表达,miR-145靶向Six1对人胃癌细胞株侵袭的影响及分子机制。方法选取2017年1月至11月长沙市第四医院经胃镜＋病理组织学确诊的进展期胃癌患者60例,采用实时荧光定量PCIR（qRT—PCR）检测miR-145mRNA及Six1在60例胃癌及配对癌旁组织中的表达,并分析其相关性。在胃癌细胞株MKN-45、BGC．823和SGC-7901中转染miR-145模拟物,qRT-PCR法检测3种胃癌细胞株中miR-145mRNA相对水平,选取miR-145mRNA表达水平最高的SGC-7901胃癌细胞株行后续实验。设模拟物组（转染mill-145模拟物）、NC组（转染miR-145阴性对照）和空载体组（不加入任何寡聚核苷酸）,采用Transwell实验检测胃癌细胞侵袭能力;小管形成实验验证促血管形成能力;Westernblotting法检测胃癌细胞株SGC-7901下游蛋白Six1、上皮钙黏着蛋白（E-cadherin）和波形蛋白（vimentin）表达水平。MirTrap系统及荧光素酶报告实验验证miR-145是否靶向Six1基因。结果胃癌组织及癌旁组织中miR-145mRNA分别为0．579±0．086、1．009±0．121,差异有统计学意义（t=-22．498,P〈0．001）;Six1分别为2．516±0．208、1．041±0．227,差异有统计学意义（t=37．119,P〈0．001）;miR-145mRNA与Six1表达呈负相关（r=-0．728,P〈0．001）。过表达miR-145后,模拟物组、NC组和空载体组中,胃癌细胞穿膜细胞数分别为48．550±3．716、82．800±3．797、87．467±8．023,差异有统计学意义（F=87．789,P〈0．001）,模拟物组与Nc组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）。模拟物组、NC组和空载体组中,人脐静脉内皮细胞的成管数分别为24．333±1．211、34．167±2．041、36．500±3．209,差异有统计学意义（F=47．103,P〈0．001）,模拟物组与Nc组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）。模拟物组、NC组和空载体组中,胃癌细胞SGC-7901中Six1表达量分别为1．392±0．072、2．426±0．099、2．371±0．079,差异有统计学意义（F=289．517,P〈0．001）,模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）;模拟物组、NC组和空载体组中,E．eadherin表达量分别为4．001±0．132、2．714±0．181、2．653±0．218,差异有统计学意义（F=106．572,P〈0．001）,模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）;模拟物组、NC组和空载体组中,vimentin表达量分别为1．634±0．132、3．349±0．102、3．501±0．185,差异有统计学意义（F=389．032,P〈0．001）,模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）。MirTrap系统验证模拟物组、NC组和空载体组中靶标Six1mRNA水平分别为1．101±0．097、0．582±0．037、0．573±0．032,差异有统计学意义（F=138．922,P〈0．001）,模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）。荧光素酶报告实验Six1野生型重组载体组双荧光比值,模拟物组、NC组和空载体组分别为7．324±0．415、10．755±0．481、10．430±0．309,差异有统计学意义（F：129．345,P〈0．001）,模拟物组与NC组及空载体组相比差异均有统计学意义（均P〈0．001）。而模拟物组、NC组和空载体组Six1突变型重组载体组双荧光比值分别为10．938±0．091、11．077±0．126、11．028±0．205,差异无统计学意义（F=1．318,P=0．297）。MirTrap系统及荧光素酶报告实验验证miR-145靶向Six1基因。结论miR-145mRNA及Six1在胃癌及癌旁组织中差异表达,呈负相关;miR-145通过靶向Six1基因抑制胃癌细胞侵袭、血管形成及上皮问质转化。     

高强度超声对人类乳腺癌细胞内游离钙的影响及对细胞生长的抑制作用

目的探讨高强度超声（HIU）对人类乳腺癌细胞内游离钙浓度的影响及对细胞生长的抑制作用。方法用HIU（50W／cm^2）干预体外培养的人类乳腺癌细胞MCF-7及MDA—MB-231。用钙离子（Ca^2＋）荧光探针检测干预后细胞内Ca^2＋浓度,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测干预后细胞生长抑制率,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡率。结果HIU干预10、20、30S后,细胞内Ca^2＋浓度随干预时间的增加而升高,MCF-7细胞分别为（572±20．1）、（670±18．9）、（815±16．3）nmol／L（F=663．65,P〈0．001）,MDA—MB-231细胞分别为（582±16．3）、（687±19．7）、（843±14．8）nmol／L（F=863．06,P〈0．001）;周期向G0～G1分布,二种细胞G0～G1比例为分别为（60．5±5．5）％、（66．3±7．0）％、（74．5±8．2）％（F=8．17,P=0．002）和（58．5±6．3）％、（66．1±6．3）％、（71．2±7．9）％（F=7．51,P=0．003）;凋亡率逐渐上升,二种细胞凋亡率分别为（7．3±1．7）％、（13．2±3．5）％、（19．3±3．7）％（F=18．73,P〈0．001）和（6．3±1．8）％、（11．4±2．3）％、（16．4±3．3）％（F=19．26,t9〈0．001）;干预后细胞生长抑制率明显增加,二种细胞生长抑制率分别为（9．2±2．2）％、（243±3．9）％、（48．6±5．5）％（F=117．16,P〈0．001）和（9．0±1。7）％、（22．3±3．5）％、（41．6±6．4）％（F=71．25,P〈0．001）。结论HIU干预在一定作用时间内使细胞内Ca^2＋浓度升高,促使细胞周期向G0～G1转化,凋亡率及细胞死亡率明显上升.     

甲状腺乳头状癌组织SDF-1和TFF3表达临床意义分析

目的：分析三叶因子3（trefoilfactor3,TFF3）和基质细胞诱导因子-1（stromalcellderivedfactor1,SDF-1）在甲状腺乳头状癌（papillarythyroidcarcinoma,PTC）和癌旁组织中的表达及意义,为PTC的早期诊断及预后评价提供有价值的资料。方法：采用免疫组织化学和原位杂交技术检测组织芯片（PTC和癌旁各31例）内TFF3、SDF-1蛋白和mR-NA的表达,以SPSS18．0分析其阳性率和平均光密度值与临床病理特征的关系。结果：1）PTC中TFF3蛋白阳性率为83．87%,明显高于癌旁组织25．81％,x2=21．10,P〈0．001;TFF3阳性率与TNM分期（x2=12．30,P〈0．001）和淋巴结转移（x2=5．589,P=0．043）有关。PTC内TFF3的平均光密度（averageopticaldensity,AOD）值为0．49±0．01,高于癌旁0．22±0．06,t=3．448,P〈0．001;有淋巴结转移者为0．57±0．06,高于无淋巴结转移者0．44±0．05,t=2．234,P=0．039;临床Ⅲ／Ⅳ期为0．59±0．07,高于Ⅰ／Ⅱ期0．47±0．05,t=2．167,P=0．041。2）、PTC中SDF-1蛋白阳性率为87．10％,高于癌旁组织16．13％,x2=31．26,P〈0．001;有淋巴结转移者为100．00％,高于无淋巴结转移者75．00％,x2=4．306,P=0．041;临床Ⅲ／Ⅳ期阳性率为100．00％,明显高于临床Ⅰ／Ⅱ期63．64％,x2=8．35,P=0．04;〉45岁为100．00％,明显高于≤45岁63．64％,x2=8．35,P=0．04。癌内SDF-1的AOD值为0．59±0．07,高于癌旁0．28±0．08,t=3．987,P=0．0007;有淋巴结转移者为0．65±0．06,高于无淋巴结转移者0．52±0．05,t=2．458,P=0．009;临床Ⅲ／Ⅳ期为0．66±0．06,高于Ⅰ／Ⅱ期0．50±0．05,t=2．762,P=0．006。3）原位杂交显示,TFF3mRNA和SDF-1mRNA与蛋白表达一致,阳性率虽低于相应蛋白（x2=19．37,P〈0．001）,但明显高于癌旁组织,x2=26．35,P〈0．001。4）PTC中TFF3与SDF-1蛋白表达水平呈正相关,r=0．971,P=0．004。5）31例PTC可区分为典型PTC21例（67．74％）、滤泡型7例（22．58％）和高细胞型3例（9．68％）3个亚型。SDF-1和TFF3蛋白阳性率依次为典型PTC（86．96％与86．96％）、滤泡型PTC（85．71％与71．43％）和高细胞型PTC均为100．00％,不同亚型间SDF-1和TFF3阳性率差异无统计学意义;临床Ⅰ／Ⅱ期滤泡型的SDF-1阳性率为83．33％,明显高于典型PTC（0）,x2=5．63,P=0．025,临床高细胞型PTC的SDF-1阳性率为100．00％,亦明显高于典型PTC（0）,x2=5．00,P=0．046;临床Ⅰ／Ⅱ期高细胞型PTC组织中,TFF3阳性率（100．00％）明显高于典型PTC（0）,x2=5．00,P=0．046;临床Ⅲ／Ⅳ期的3种亚型PTC中,SDF-1和TFF3阳性率均为100．00％,差异无统计学意义。结论：TFF3和SDF-1在PTC组织中高表达与癌的发生和发展有关,对判断PTC的恶性程度和病情进展有重要价值,并对Ⅰ／Ⅱ期滤泡型和高细胞型PTC的诊断有指导意义。     

PRDX1抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡机制探讨

目的：初步探讨过氧化还原蛋白1（peroxirodoxin1,PRDX1）抑制蛋白酶体抑制剂诱导人甲状腺癌细胞凋亡的机制。方法：选取人甲状腺癌细胞,设立随机序列核酸siRNA、siASK1、siPRDX1和siASK1＋siPRDX1组,分别用培养液、lactacystin和MG132培养细胞;用蛋白印迹法检测PRDX1、ASK1、p38、JNK1／2、p-ASK1、p-P38和p-JNK1／2在各组甲状腺癌细胞中的表达;用微小RNA干扰技术转染细胞;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：MG132处理组中,p-ASK1是对照组的1．5倍（F=214．14,P〈0．001）,其下游效应子p-p38和p-JNK1／2分别为对照组的1．34（F=216．75,P〈0．001）和1．94倍（F=1601．68,P〈0．001）;siASK1下调MG132介导的p-ASK1为随机序列组的0．58倍（F=1136．82,P〈O．001）,p-p38为随机序列组的0．73倍（F=507．00,P〈0．001）,p-JNK1／2为随机序列组的0．51倍（F=6087．48,P〈0．001）。甲状腺癌细胞凋亡率降低为34．25％,显著低于于随机序列组的51.98％,F=18．39,P=0．013。MG132处理组中,siPRDX1组甲状腺癌细胞凋亡率为68．99％显著高于随机序列组的49．58％和siPRDX1＋siASK1联合组的41．28％,而siASK1组的甲状腺癌细胞凋亡率为31．85％,显著低于上述两组,组间差异有统计学意义,F=30-13,P〈0．001。结论：PRDX1通过负向调节ASK1活性及ASK1-p38和ASK1-JNK通路,抑制ASK1介导的细胞凋亡进而消减MG132对甲状腺癌细胞毒性效应。     

腹腔镜前列腺癌根治术经腹腔与经腹膜外途径的效果比较

目的比较腹腔镜下前列腺癌根治术（Laparoscopic radical prostatectom,LRP）经腹腔与经腹膜外途径的临床效果。方法对54例前列腺癌患者行经腹腔镜前列腺癌根治术,其中经腹腔39例,经腹膜外15例。对两组患者术前、术中和术后临床参数和并发症发生率、术后肿瘤学和排尿状况等资料进行统计学分析比较。结果54例手术均获成功,经腹腔与经腹膜外两组手术时间分别为（256±45）min和（263±62）min,P=0．96;出血量分别为（335±296）mL和（352±314）mL,P=0．13;切缘阳性15．4％和13．3％,P=0．61;尿失禁23．1％和20．O％,P=0．61,差异均无统计学意义。两组术后留置导尿时间分别为（14．2±2．7）d和（11．2±3．3）d,P〈0．001;肠功能恢复时间分别为（2．8±0．6）d和（2．0±0．7）d,P=0．04;术后住院时间分别为（17．2±3．5）d和（12．2±3．7）d,P〈0．001,两组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论腹腔镜下前列腺癌根治术经腹膜外与经腹腔途径相比具有视野清晰、对腹腔器官影响小、术后恢复快、术后住院时间短等优点,具有临床应用优势。     

泌乳素诱导蛋白表达下调对三阴性乳腺癌细胞裸鼠体内成瘤影响研究

目的：探讨泌乳素诱导蛋白（prolactininducibleprotein,PIP）表达下调对三阴性乳腺癌（triplenegativebreastcancer,TNBC）MDA-MB453细胞在裸鼠体内成瘤的影响。方法：采用脂质体将PIPsiRNA转染至乳腺癌MDA_MB453细胞,蛋白质印迹法检测PIP的表达下调情况。采用4周龄BALB／c雌性裸鼠,建立乳腺癌MDA-MB-453细胞裸鼠皮下种植瘤模型,瘤内注射siRNA-脂质体混悬液,观察PIPsiRNA对肿瘤生长的影响。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中CyclinDl和VEGF的表达情况。结果：PIP表达下调后,其在裸鼠体内成瘤能力明显降低,肿瘤平均体积空白对照组为（1075±65）mm2,阴性对照组为（1095±72）mm2,实验组为（473±56）mm2,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．719,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。空白对照组肿瘤平均体质量为（908士86）mg,阴性对照组为（889±64）mg,实验组为（272±30）mg,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．738,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。肿瘤生长抑制率为71．1％。免疫组化结果显示,PIP表达下调的肿瘤组织中CyclinD1的相对表达量空白对照组为1535±78,阴性对照组为1594±123,实验组为367±72,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．472,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈O．001。VEGF的相对表达量空白对照组为4270±558,阴性对照组为4365±324,实验组为1286±292,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0．758,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P〈0．001。结论：下调PIP基因表达可明显抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞体内成瘤能力,提示PIP可能在乳腺癌发生和发展中发挥重要作用。     

氯化锂对卵巢癌细胞增殖凋亡影响及其机制探讨

目的：观察氯化锂（1ithiumchloride,LiCl）对卵巢癌sKOV3细胞增殖活性及凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法：使用20（A组）、40（B组）和60（C组）mmol／LLiCl处理sKOV3细胞,正常对照组用等体积的细胞培养基培养。采用CCK8法观察LiCl对卵巢癌SKOV3细胞增殖活性的影响;流式细胞仪检测LiCl作用后细胞周期变化及凋亡情况。蛋白质印迹法检测细胞糖原合成酶激酶-3β（glycogensynthasekinase317,GSK-3β）、磷酸化糖原合成酶激酶-317（phos—phorglation—glycogensynthasekinase3β,p-GSK-3β）及有丝分裂阻滞缺陷蛋白2（mitoticarrestdeficient2,MAD2）蛋白表达的变化。结果：不同浓度LiCl分别作用于SKOV3细胞48h后,A组细胞增殖活性为（80．64±1．06）％,与B组（57．18±1．56）％比较,差异有统计学意义,P=0．001;与C组（43．18±6．12）％比较,差异有统计学意义,P〈0．001。B组作用24h细胞增殖活性为（75．12±9．35）％,48h为（57．18±1．56）％,72h为（35．36±1．00）％,与24h组相比,48h组（P=0．158）和72h组（P=0．036）细胞增殖活性降低。LiCl能有效抑制SKOV3细胞增殖,呈时间与剂量依赖性。不同浓度LiCl作用96h后SKOV3细胞的凋亡率相对于对照组升高,A组为（7．82±0．87）％,P=0．037;B组为（21．09±1．57）％,P〈O．001;C组为（27．83士0．47）%,P〈O．001,差异均有统计学意义。不同浓度LiCl作用48h后,细胞出现了明显的G2／M期阻滞,G2／M期的比例由对照组的（10．23±1．50）％依次升高,A组为（19．9±4．16）％,P=0．352;B组为（30．29±0．51）％,P=0．045;C组为（39．32±1．11）％,P=0．009,差异有统计学意义。蛋白质印迹法检测结果显示,LiCl浓度升高,p-GSK-3β蛋白相对表达量升高,A组为（54．39±2．75）％,P=0．019;B组为（72．39土2．89）％,P=0．009;C组为（86．57±2．52）％,P=0．005,差并有统计学意义。LiCl浓度升高,MAD2蛋白相对表达量升高,A组为（52．29土1．34）％,P=0．041;B组为（58．35±1．36）％,P=0．030;C组为（72．07±2．93）%,4,P=0．006,差异有统计学意义。结论：LiCl能有效抑制卵巢癌SKOV3细胞的增殖,并诱导其凋亡;上调MAD2增强有丝分裂检测点功能,最终导致细胞G2／M期阻滞可能是LiCl抑制增殖促进凋亡的机制。     

siRNA介导RRM2沉默对卵巢癌细胞顺铂敏感性影响研究

目的：探讨小干扰RNA（siRNA）介导的核糖核苷酸小亚基M2（ribonucleotidereductaseM2,RRM2）沉默对顺铂（DDP）诱导的卵巢癌耐药细胞株SKOV3／DDP敏感性的影响。方法：采用间歇浓度梯度递增法诱导SKOV3／DDP;将RRM2基因的特异性siRNA转染SKOVa／DDP细胞,另设空白组和SKOV3／DDP-RRM2-neg（阴性组）做为对照;荧光PCR技术和蛋白质印迹法分别检测转染后各组细胞中RRM2基因mRNA和蛋白表达;MTT法检测RNAi对SK-0v3／DDP细胞药物敏感性的影响。结果：成功诱导出卵巢癌DDP耐药细胞株SKOV3／DDP细胞,其耐药系数达到3．6,属低度耐药,但对吉西他滨（Gem）仍敏感。DDP对干扰组、阴性组和空白组细胞48h的ICso分别为（3．00±0．11）、（9．88±0．37）和（10．35±0．03）μg／mL,3者间差异有统计学意义,P〈0．001。干扰组细胞对DDP的敏感度提高了约3倍,其RF为3．3。SKOV3／DDP-RRM2-RNAi667（I）组RRM2mRNA水平下调为74．1％,P=0．010;SKOV3／DDP-RRM2-RNAi480（1I）组RRM2ITIRNA水平下调为55．9％,P=0．016;SKOV3／DDP-RRM2-RNAill79（Ⅲ）组RRM2mRNA水平下调为43．1％,P=0．001。其中,以转染l组基因沉默率（82．33％）最高,P〈0．001;阴性组（0．0086％）与空白组（0．0082％）比较,差异无统计学意义,P=0．133。转染RRM2的不同靶序列72h后RRM2蛋白的表达量最低,I组为0．062±0．006,Ⅱ组为0．314±0．002,Ⅲ组为0．123±0．002,与阴性组（0．715±0．034）和空白组（0．516±0．040）比较均明显降低,但以转染I组细胞的蛋白相对表达量下降最明显,F=658．6,P=0．0033。Gem和DDP联合作用72h时,转染组细胞凋亡率为（96±3．0）％,与其各组比较,差异均有统计学意义,P值均〈0．001。结论：通过RNAi技术可有效抑制RRM2基因在卵巢癌中的转录和翻译水平,增加DDP耐药细胞的药物敏感性,并促进DDP诱导的卵巢癌耐药细胞凋亡,在-定程度上逆转DDP耐药性;RNAi技术联合Gem及DDP作用可有效提高卵巢癌DDP耐药细胞的凋亡率,有望成为铂类耐药的卵巢癌晚期患者-线治疗方案。     

中华肿瘤防治杂志编排规范统计结果的解释和表达

当P〈0．05（或P〈0．01）时，应说明对比组之间的差异具有统计学意义；应说明所用统计分析方法的具体名称，例如：成组设计资料的t检验、两因素析因设计资料的方差分析、多个均数之间两两比较的q检验等，给出统计量的具体值（如：t=3．45，x2=4．68，F=6．79）；在用不等式表达P值的情况下，一般情况下选用P〉0．05、P〈0．05和P〈0．013种表达方式即可满足需要，无须再细分为P〈0．001或P〈0．0001。当涉及总体参数（如总体均数和总体率）时，在给出显著性检验结果的同时，应给出95％可信区间。     

树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗对食管癌移植瘤生长的抑制作用

背景与目的：我们前期的研究表明树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗能有效诱导体外抗食管癌细胞的特异性免疫应答。在此基础上,本研究进一步探讨树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic T lymphocytes．CTLs）对食管癌细胞株EC-109裸鼠皮下移植瘤的体内抑瘤作用及对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法：①采用聚乙二醇法制备树突细胞／肿瘤细胞融合疫苗并诱导抗原特异性CTLs产生。②建立食管癌EC-109细胞裸鼠皮下移植瘤模型,将成功荷瘤的裸鼠随机分为3组,分别以融合细胞激活的CTLs（A组．n=11）、未激活的T淋巴细胞（B组,n=11）以及RMPI-1640培养液（C组,n=11）作为效应细胞进行瘤内注射,每周一次。③4周后处死动物剥离肿瘤组织．测量并比较各组肿瘤组织的平均体积及平均湿重,计算抑瘤率。④免疫组化SP法检测3组裸鼠移植瘤增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）的表达。⑤流式细胞仪检测3组肿瘤细胞周期及细胞凋亡率,比较各组肿瘤细胞的S期细胞平均百分比（S-phase fraction,SPF）以及细胞平均凋亡率。结果：①A组肿瘤组织的平均体积显著小于B组和C组,差异有统计学意义[（881．45±31．14）mm^3 vs．（1493．37±51．67）mm^3,（2065．77±87．55）mm^3,F=950．67．P=0．00],其平均湿重亦显著小于B组和C组,差异有统计学意义[（0．88±0．04）gvs．（1．38±0．07）g,（2．04±0．11）g,F=1335．90,P=0．00];A组抑瘤率明显高于B组,差异有统计学意义（56．86％ vs．32．35％,F=1218．08,P=0．001）。②A组肿瘤的平均PCNA—LI明显低于B组和C组,差异有统计学意义[（26．83±0．95）％ vs．（51．82±1．51）％,（68．93±2．40）％,F=1528．39,P=0．000]。③A组肿瘤细胞平均SPF值明显低于B、C两组,差异有统计学意义[（12．     

微小 RNA-143抑制食管癌细胞株 ECA109的增殖、迁移和侵袭

目的：研究微小 RNA-143（miR-143）在食管癌细胞株 ECA109中的作用。方法 ECA109细胞分为转染阴性对照组、miR-143模拟剂组和 miR-143抑制剂组,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测各组细胞的增殖;Annexin V-FITC ／PI 凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡;Transwell 实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;实时荧光定量 PCR 和 Western blotting 分别检测 K-ras mRNA 及蛋白表达水平。结果转染3 d和4 d 后,与阴性对照组相比（吸光度值分别为0．90±0．02和1．09±0．07）,miR-143模拟剂组 ECA109细胞增殖受抑制（吸光度值分别为0．66±0．05和0．80±0．04）,而 miR-143抑制剂组细胞增殖增加（吸光度值分别为1．13±0．09和1．51±0．08）,各组之间差异有统计学意义（F ＝49．16,P ＝0．000;F ＝100．34,P ＝0．000）。阴性对照组、miR-143模拟剂和抑制剂组的早期凋亡率分别为3．42％±0．72％、11．63％±1．15％和0．94％±0．10％,各组之间差异有统计学意义（F ＝151．61,P ＝0．000）。与阴性对照组相比（迁移细胞数336±13,侵袭细胞数147±16）,miR-143模拟剂组的细胞迁移（148±16）和侵袭（75±10）能力降低,而 miR-143抑制剂组的细胞迁移（510±14）和侵袭（238±16）能力增加,各组之间差异有统计学意义（F ＝470．99,P ＝0．000;F ＝90．04,P ＝0．000）。相对于阴性对照组（1．00±0．00）, miR-143模拟剂抑制 ECA109细胞中 K-ras mRNA（0．22±0．08）及蛋白（0．46±0．08）表达,而 miR-143抑制剂上调 K-ras mRNA（1．55±0．12）及蛋白（1．33±0．05）表达,各组之间差异有统计意义（F ＝131．36,P ＝0．000;F ＝88．17,P ＝0．000）。结论 miR-143在食管癌细胞株 ECA109中发挥抑癌基因作用,下调 K-ras 蛋白表达可能是其发挥抑癌作用的机制之一。     

PET-CT11C-胆碱和18F—FDG显像剂联合对肺占位病变鉴别诊断价值分析

目的：探讨18F-氟化脱氧葡萄糖（18F-FDG）与11C-胆碱PET—CT联合应用在肺部占位性病变鉴别诊断中的价值。方法：选取196例肺部占位性病变患者,注射造影剂18F-FDG和11C-胆碱后行PET—CT检查和诊断,观察2种造影剂PET—CT检查方法的标准摄取值（SUV）以及单独和联合应用的诊断灵敏度、特异性和准确率。结果：良性和恶性患者的18F-FDG（2．20±1．23vs5．29±2．75）及11C-胆碱（0．81±0．79vs3．284-1．76）的SUVmax差异有统计学意义,P〈0．01;18F-FDG和11C-胆碱在良性及恶性患者中差异有统计学意义,P〈0．01。18F-FDG和11C-胆碱PET—CT各自的灵敏度（58．16％vs58．67％）、特异性（78．05％vs84．00％）和准确率（80．61％vs85．20％）差异无统计学意义,P〉0．05。联合诊断的灵敏度、特异性和准确率分别为53．57％（105／196）、90．11％（82／01）和94．39％（185／196）,与单独应用比较,灵敏度差异无统计学意义（P〉0．05）,特异性和准确率均提高,P〈0．01。结论：将18F—FDG和11C-胆碱PET—CT检查联合运用于同-患者进行综合诊断能明显提高肺部占位病变的诊断水平。     

甲状腺癌组织RBP2表达与临床病理因素相关性分析

目的：探讨110例甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）、20例结节性甲状腺肿（nodular goiter,NG）和23倒癌旁组织（precancerous tissue,PT）中RBP2表达与临床参数的关系。方法：免疫组化SP法测定2009—01—12—2012—03-20济宁医学院附属医院收集的NG、PTC和PT组织中RBP2分布的位置、表达及与临床参数的关系。结果：PTC、NG和PT组织中RBP2的阳性表达差异有统计学意义,x2=-17．201,P〈0．001。在PTC组织中RBP2的阳性表达率为52．7％,弱阳性表达率为36．2％;在NG组织中RBP2阳性表达率为30．0％,其中83．3％为弱阳性表达;与PT组织相比,RBP2的表达差异有统计学意义x2=-2．261,P=0．024。NG组织中RBP2的表达在年龄（U=-0．481,P=0．630）和性别（x2=-0．825,P=0．409）方面差异均无统计学意义。PT组织RBP2弱阳性表达率为4．3％（1／23）,RBP2的表达在年龄（U=-0．877,P=0．380）、性别（U=-0．594,P=0．552）、临床分期（U=-1．369,P=0．171）和淋巴结转移（U=-0．802,p=0．423）差异均无统计学意义。PTC组织与PT组织相比,两者差异有统计学意义,U=-4．149,P〈O．001;与NG组织相比,两者差异有统计学意义,U=-2．085,P=0．037。PTC组织中无淋巴结转移组RBP2的阳性率与淋巴结转移组之间差异无统计学意义,U=-1．432,P=0．152;RBP2的表达在性别（U=-0．777,P=0．437）、临床分期（U=-1．726,P=0．084）和年龄（U=-L236,P=0．216）之间差异无统计学意义。结论：RBP2是甲状腺肿瘤发生早期及恶性转化的重要标志,其表达的增加可以视作是判断甲状腺肿瘤发生的重要临床参考指标。     

白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞增殖和凋亡影响观察

目的：研究白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤（cutaneous T cell lymphomas,CTCL）Hut78细胞株体外增殖和凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法：用不同浓度的白藜芦醇（5、10和20μmol／L）作用于人皮肤CTCLHut-78细胞,24和48h后MTT检测白藜芦醇对细胞增殖的影响;TUNEL末端标记法和Annexin V—FITC双标记流式法检测白藜芦醇对细胞凋亡的影响。结果：经5、10和20μmol／L浓度的白藜芦醇处理24h后,细胞A值分别为1．202±0．094、0．568±0．019和0．535±0．033,与0μmol／LA值（1．272±1．107）比较,差异有统计学意义,P〈0．01。各浓度作用48h后,细胞A值分别为0．604±0．095、0．314±0．042和0．260±0．055,与0μmol／LA值（0．781±0．020）比较,差异有统计学意义,P〈0．01;与作用24h后同浓度A值比较,差异均有统计学意义,P〈0．01。随着时间和浓度的增加Hut-78细胞生长均受到不同程度的抑制,呈明显的浓度和时间依赖性。经5、lO和20／μmol／L浓度的白藜芦醇处理24h后,HUT-78细胞抑制率分别为（5．28±2．64）％、（53．52±10．86）％和（56．13±10．79）％,与0μmol／L抑制率（0）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;HUT-78细胞凋亡率分别为92．35％、96．39％和98．56％,与0μmol／L凋亡率（55．7％）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;各浓度作用48h后,HUT-78细胞抑制率分别为（22．85±10．98）％、（59．T7±5．44）％和（66．52±7．80）％,与0μmol／L细胞抑制率（O）比较,差异均有统计学意义,P〈0．01;与作用24h后同浓度细胞抑制率比较,差异均有统计学意义,P〈0．01。结论：达到5μmol／L的白藜芦醇对人皮肤T细胞淋巴瘤Hut-78细胞产生明显的抑制增殖作用,白藜芦醇主要通过诱导HuT-78细胞凋亡,其中主要是早期凋亡抑制其增殖。     

Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应（QRT—PCR）及Westernblot方法检测29例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1mRNA的表达。另选取芯片库中60例食管鳞状细胞癌及癌旁组织。免疫组织化学方法检测以上所有89例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1蛋白的表达,分析二者在食管鳞状细胞癌中的表达情况与各临床病理因素之间的关系。结果QRT．PCR结果显示食管鳞状细胞癌中Mel-18mRNA阴性表达率为55．17％（16／29）,Bmi．1mRNA阳性表达率为62．07％（18／29）。Westernblot结果显示,与癌旁组织比较,食管鳞状细胞癌中Mel-18蛋白低表达（0．724±0．095比0．899±0．089,t=2．319,P=0．028）,Bmi．1蛋白高表达（0．980±0．068比0．729-1-0．066,t=2．863,P=0．008）,差异均有统计学意义。免疫组织化学结果显示食管鳞状细胞癌组织中Mel-18的阴性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义[66．3％（59／89）比31．5％（28／89）,X。21．606,P〈0．05];食管鳞状细胞癌中Bmi-1的阳性表达率高于癌旁组织,差异具有统计学意义[74．2％（66／89）比30．3％（27／89）,Х^2=34．249,P〈0．05]。89例食管鳞状细胞癌患者中,Mel-18表达与肿瘤的临床分期（Х^2=8．003,P=0．004）、浸润深度（Х^2=17．094,P=0．001）、淋巴结转移（Х^2=5．156,P=0．026）相关,Bmi-1表达与分化程度（Х^2=14．625,P=0．001）、临床分期（Х^2=7．863,P=0．005）、淋巴结转移（Х^2=5．771,P=0．005）相关。另外,通过QRT—PCR及免疫组织化学检测发现在食管鳞状细胞癌中Mel-18和Bmi-1的表达负相关（r=-0．592,P=0．001;r=-0．285,P=0．007）。结论在食管鳞状细胞癌的发生发展中,Mel-18可能起抑癌作用,而Bmi-1可能起致癌作用,二者可望成为食管鳞状细胞癌明确诊断及判断预后的新指标。     

血管内皮生长因子-C及p63在早期食管癌和上皮瘤变组织中的表达

目的探讨血管内皮生长因子-C（VEGF—C）和p63蛋白在早期食管癌及上皮内瘤变组织中的表达及其临床意义。方法随机选取正常食管黏膜、低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变及早期食管癌组织共146例,应用免疫组织化学EnVision二步法检测VEGF—C和p63蛋白在不同病理阶段中的表达。结果不同病理阶段的VEGF—C表达差异有统计学意义（X^2=47．455,P〈0．001）。正常黏膜与高级别上皮内瘤变（X^2=26．483,P〈0．001）、正常黏膜与早期癌（X^2=36．721,P〈0．001）、低级别上皮内瘤变与高级别上皮内瘤变（X^2=10．025,P〈0．0083）、低级别上皮内瘤变与早期癌（X^2=16．734,P〈0．001）之间VEGF-C的表达量构成比差异均有统计学意义。病理阶段与VEGF-C表达程度间呈正相关（r=0．462,P〈0．001）。不同病理阶段的p63表达量构成比差异有统计学意义（X^2=28．962,P〈0．05）。正常黏膜分别与低级别上皮内瘤变（X^2=12．735,P=0．005）、高级别上皮内瘤变（X^2=20．421,P〈0．001）、早期癌（X^2=20．854,P〈0．001）各组间的p63表达量构成比差异均有统计学意义;病理阶段与p63表达程度间呈正相关（r=0．272,P〈0．05）。结论VEGF—C和p63蛋白与早期食管癌和上皮内瘤变发生显著相关,可作为预警指标。     

TPSA、F／T及PSAD在前列腺癌诊断中的意义

目的探讨血清中总前列腺特异性抗原（TPSA）、血清游离PSA（FPSA）与TPSA比值（F／T）及PSA密度（PSAD）在前列腺癌诊断中的意义。方法对50例健康体检男性、467例良性前列腺增生症（BPH）及116例前列腺癌患者TPSA、F／T及PSAD值的差异进行分析、比较。结果血清TPSA值前列腺癌组（53．26±33．10）高于BPH组（8．12±9．70）及对照组（1．51±1．17）;PSAD值前列腺癌组[（1．59±1．46）ng·ml^-1·cm^-3]高于BPH组[（0．14±0．17）ng·ml^-1·cm^-3]及对照组[（0．08±O．07）ng·ml^-1·cm^-3];而F／T值前列腺癌组（0．22±0．16）低于BPH组（0．27±0．15）及对照组（0．36±0．14）,差异均有统计学意义（P值均〈0．01）。PSA处于4～10ng／ml时,前列腺癌组F／T（0．18±0．13）显著低于BPH组（0．27±0．14）（P〈0．05）;前列腺癌组PSAD[（0．21±0．07）ng·ml^-1·cm^-3]显著高于BPH组[（0．11±0．06）ng·ml^-1·cm^-3]（P〈0．001）。取F／T值0．16、PSAD值0．15ng·ml^-1·cm^-3为临界值时,F／T、PSAD值灵敏度、特异度及阳性预测值分别为81．6％、78．2％、96．1％和53．8％、76．9％、97．9％,诊断效率最高。结论F／T、PSAD是诊断前列腺癌的良好指标,当PSA为4-10ng／ml诊断灰区时,F／T与PSAD对诊断前列腺癌有较好的价值。     

中华肿瘤防治杂志编排规范统计结果的解释和表达

当P〈0．05（或P〈0．01）时,应说明对比组之间的差异具有统计学意义;应说明所用统计分析方法的具体名称,例如：成组设计资料的t检验、两因素析因设计资料的方差分析、多个均数之间两两比较的q检验等,给出统计量的具体值（如：t=3．45,x2=4．68,F=6．79）;