荔枝核多糖脱蛋白工艺的研究

[摘要] 目的：优化荔枝核多糖的脱蛋白工艺。方法：采用木瓜蛋白酶法、沙维积法(Sevag法)、三氯乙酸法、酶-Sevag联合法、酶-三氯乙酸联合法和三氯乙酸-Sevag联合法等六种方法。对荔枝核多糖脱蛋白进行工艺研究。以多糖保留率和脱蛋白率为指标，比较六种方法的脱蛋白效果。结果：酶法条件为酶用量4%、反应时间1h、pH值为6，反应温度45℃，Sevag试剂处理3次后，蛋白去除率高达91.45%，多糖保留率为71.42%，结论：不同脱蛋白法对荔枝核的脱蛋白效果有明显差异，酶-Sevag联合法的脱蛋白效果最佳。     

北青龙衣总多糖脱蛋白工艺比较

目的:优选北青龙衣总多糖的脱蛋白工艺。方法:以蛋白质脱除率和总多糖保留率为指标,通过单因素试验和正交试验比较Sevage法、三氯乙酸法(TCA)、木瓜蛋白酶法、酶-Sevage联用法及酶-TCA联用法对北青龙衣总多糖的脱蛋白质效果。结果:木瓜蛋白酶-TCA法除蛋白效果最好,最佳脱蛋白条件为木瓜蛋白酶用量3%,酶解时间2 h,酶解温度60℃,p H6,TCA质量分数6%。蛋白质脱除率84.76%,总多糖保留率82.48%。结论:不同脱蛋白质法对北青龙衣总多糖中蛋白质脱除效果有明显差异,酶-TCA法效果最佳且操作简便、耗时短。     

龙葵多糖脱蛋白工艺的比较研究

目的优选龙葵多糖脱蛋白的最佳工艺。方法以多糖保留率、蛋白脱除率为指标,采用正交试验确定Sevag法、三氯乙酸法(TCA法)、酶法的最佳工艺条件,并进行比较。结果三氯乙酸法(TCA法)为最佳脱蛋白方法,最佳工艺条件为用3%的三氯乙酸溶液调节pH至2.5,萃取时间20分钟,萃取次数1次,此时蛋白脱除率87.118%,多糖保留率88.983%。结论 TCA法对龙葵多糖具有较好的脱蛋白效果,且操作简便,工艺稳定,多糖保留率高,可在龙葵多糖的分离纯化中推广使用。     

麻黄多糖中蛋白含量测定及脱蛋白方法的比较

目的：建立麻黄多糖中蛋白的含量测定方法,比较不同脱蛋白方法的蛋白脱除效果。方法：水提醇沉提取麻黄多糖,Sevag法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-Sevag法去除蛋白,考马斯亮蓝法测定蛋白质含量。结果：麻黄多糖脱蛋白前的蛋白含量为26.30%,Sevag法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶-Sevag法脱蛋白后的蛋白含量分别为15.00%,6.80%和1.70%;三种方法的蛋白脱除率分别为42.97%,74.14%和93.54%。结论：木瓜蛋白酶-Sevag法的脱蛋白效果较好,考马斯亮蓝G-250染色法操作简便,准确性好,不失为多糖中蛋白含量测定的一种好方法。     

穿山龙多糖脱蛋白工艺研究

目的:筛选穿山龙多糖脱蛋白的最优工艺。方法:以穿山龙多糖保留率和蛋白脱除率为考察指标,研究4种脱蛋白方法对穿山龙多糖脱蛋白的影响。结果:确定木瓜蛋白酶法结合Sevage法为最佳工艺,工艺条件为:酶解温度55℃,木瓜蛋白酶用量2.0%,酶解时间122 min,1次Sevage;在此条件下,穿山龙多糖蛋白脱除率为91.24%,多糖保留率为80.12%。结论:木瓜蛋白酶结合Sevage法是一种良好的穿山龙多糖脱蛋白方法。     

金银花多糖脱蛋白方法的研究

目的 优选金银花多糖除蛋白工艺.方法 以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,选用了3种方法:Sevag法、酶法和酶-Sevag法对金银花多糖提取物进行脱蛋白处理.结果 Sevag法、酶法、酶-Sevag法的蛋白脱除率分别为85.72%、73.28%、84.50%,多糖损失率分别为56.57%、31.22%、29.35%.结论 酶-Sevag法是金银花多糖除蛋白有效,可行方法.     

女贞子多糖除蛋白工艺的研究

目的筛选女贞子多糖除蛋白的最佳工艺。方法以除蛋白率和多糖损失率为指标,比较了3种不同的除蛋白方法(Sevag法、三氯乙酸法和三氯乙酸-Sevag法)的效果,并用正交试验优选出最佳工艺。结果女贞子多糖除蛋白的最佳工艺为以1倍量10%三氯乙酸溶液除蛋白1次,静置2h,离心。结论优选出的除蛋白方法效果较好,为女贞子多糖的制备工艺的进一步研究提供了参考。     

响应面法优选铁皮石斛总多糖脱蛋白工艺

目的:优选铁皮石斛总多糖的胰蛋白酶联合Sevage法脱蛋白工艺,为该有效部位的深度开发和综合利用提供参考。方法:以总多糖保存率和蛋白脱除率为评价指标,通过单因素试验比较Sevage法、木瓜蛋白酶法、胰蛋白酶法和胰蛋白酶联合Sevage法;以蛋白脱除率为指标,酶解时间、酶用量、酶解温度和粗多糖溶液与Sevage试剂体积比为考察因素,利用BoxBehnken响应面法优化条件。结果:胰蛋白酶联合Sevage法具有较高的总多糖保存率及蛋白脱除率;最佳工艺条件为酶解时间1.5 h,酶用量0.21 g·m L-1,酶解温度63.25℃,总多糖溶液-Sevage试剂(4.27∶1);蛋白脱除率(87.15±7.93)%,总多糖保存率(81.32±8.54)%。结论:不同方法对铁皮石斛总多糖的脱蛋白效果有明显差异,胰蛋白酶联用Sevage法的效果最佳。     

天麻多糖水提及脱蛋白工艺优化

目的:摸索天麻多糖水提和脱蛋白工艺条件,为天麻多糖提取纯化的工业化提供理论依据。方法:采用正交实验研究了温度、物料比、时间对天麻多糖(GPS)提取工艺的影响;对比了两种不同的脱蛋白方法(Sevag法和酶-Sevag法)在天麻多糖纯化工艺中的应用。结果:水提最佳工艺为物料比1∶40,浸提温度120℃,浸提时间3 h。酶-Sevag法相对于Sevag法除蛋白效果好,且多糖得率高。     

半夏多糖脱蛋白工艺研究

目的:筛选半夏多糖除蛋白的最优工艺。方法:以半夏多糖保留率和蛋白脱除率为考察指标,研究3种脱蛋白方法对半夏多糖脱蛋白的影响,并用正交试验优选出最佳工艺。结果:确定了胰蛋白酶结合三氯乙酸的脱蛋白方法,最优脱蛋白工艺为:在胰蛋白酶最适酶解条件下酶解,酶解液与TCA溶液(5%)的体积比为4:1,振摇时间10 min,静置时间30 min;在此条件下半夏多糖蛋白脱除率为94.96%,多糖保留率为91.51%。结论:优选出的脱蛋白方法可以有效的去除蛋白,纯化多糖,为半夏多糖制备工艺的进一步研究提供了参考。     

基于《黄帝内经》与《难经》论述“调腹通络”的理论基础

“调腹通络”技术是中医基础理论指导下，基于临床五迟、五软病康复实践的总结，分为“调腹”与“通络”两部分。通过对《黄帝内经》《难经》经典整理、溯本求源，从发育迟缓病症、痿软无力病症等，以及对冲脉理论、神阙理论、从阴引阳及从阳引阴理论、解结理论的整理，深入认识五迟、五软与肾、肝、脾的关系，进一步优化“调腹通络”思路与技术的奠定基础，进而科学、合理的指导临床康复治疗。     

“秦药”的现代研究概况

陕西历史悠久,文化底蕴深厚,在历史上较长时期一直简称为"秦"。陕西药用植物资源丰富,秦皮、秦艽、"十大秦药"[子州黄芪、宝鸡柴胡、洋县元胡、商洛丹参、汉中附子、略阳杜仲、宁陕天麻、宁陕猪苓、澄城黄芩、佛坪山茱萸和略阳黄精(并列第10名)]及"太白七药"等大宗品种和特色草药均是"秦药"的代表性品种。"秦药"为陕西及其周边地区所产的道地药材,是陕西具有潜在发展价值与优势的产业之一,也是支撑我国医疗卫生事业和健康服务业的重要组成部分。对"秦药"的种质资源、人工栽培、基地建设、品种选育、化学成分、质量控制等研究进展进行整理与论述,并对"秦药"的发展进行展望。     

蝉蜕HPLC定量分析方法的建立和质量评价研究

目的建立蝉蜕Cicadae Periostracum中乙酰多巴胺二聚体A和B的定量分析方法,并用于蝉蜕药材的质量评价。方法建立HPLC-UV方法,并进行方法学验证,同时对4个基原40批市售药材的2种乙酰多巴胺二聚体进行含量测定,并进行聚类分析。采用优化的Alltima C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水流动相,2种成分能与其他色谱峰分开,并达到基线分离,在测定浓度范围内线性关系良好,平均加样回收率在97.53%～102.75%,方法精密度和重复性的RSD均小于5%,样品在24 h内稳定;依据2种乙酰多巴胺二聚体含量进行聚类分析。结果所建立的分析方法简便,准确度和精密度良好,能作为蝉蜕药材常规定量评价方法;40批蝉蜕药材可聚为3类,但2种乙酰多巴胺二聚体的含量没有基原特征性。黑蚱蝉基原的蝉蜕商品中乙酰多巴胺二聚体的含量差异较大,可能与不同来源的商品污染泥沙的量不同有关。结论山蝉、华南蚱蝉和蟪蛄基原的蝉蜕含有较高的乙酰多巴胺二聚体,且整体色谱特征与黑蚱蝉基原蝉蜕相似,是蝉蜕药材的潜在资源,严控泥沙应该是保证蝉蜕药材质量稳定一致的主要措施。     

气相色谱-串联质谱法结合QuEChERS法快速检测中药中50种农药残留

目的 建立运用气相色谱-串联质谱（GC-MS/MS）法快速筛查460份中药材及其中药饮片（43份）中常用的50种农药残留。方法 通过对比《中国药典》2020版中药中农药残留的前处理方法,优选中药中50种农药残留的适配性前处理方法。中药样品经乙腈溶剂提取,以Qu ECh ERS法处理,采用GC-MS/MS测定,内标法定量。结果 在460份检测样品中共检出农药残留66份,总检出率为14.3%,检出禁用农药6份,检出率为1.3%,43份中药饮片中农药残留检出率为11.6%,未检出禁用农药。农残的检出是季节性分布集中出现在第3、4季度,农贸市场和种植地的农残检出率明显高于医院和药店,并且存在农残超标情况。中药中根类和叶类受污染最重,中药材全草类中农药残留最多,检出率为20.4%,其次为叶类18.3%和根茎类16.3%,中药饮片中农残最高为叶类,检出率为15.4%,全草类检出率为11.1%、根茎类检出率为6.2%,全草类、根茎类和叶类存在样品中检出多种农药残留的现象。结论 该方法简单快速、灵敏度高、重现性好、准确度高,可快速筛查中药中农药残留,为保障中药质量提供参考。     

不同比例甘草配伍祖师麻抗大鼠佐剂性关节炎的实验研究

目的 观察不同比例甘草配伍祖师麻对大鼠佐剂性关节炎（AA）模型的治疗作用,筛选两者配伍比例,探讨其配伍意义。方法 采用足跖皮内注射弗氏完全佐剂制备AA模型,将140只模型大鼠随机分成14组：模型组,雷公藤多苷片组,祖师麻低、中、高剂量组,甘草低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：1）低、中、高剂量组,祖师麻-甘草（3：2）低、中、高剂量组,另取10只正常大鼠为对照组,给药组大鼠造模前2 d开始ig给药,连续给药31 d,观察各组大鼠体质量变化,计算足肿胀度、关节炎指数（AI）,采用ELISA法检测大鼠血清炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）的水平,观察大鼠膝关节组织病理变化,通过免疫组化法测定大鼠膝关节滑膜组织中血管内皮生长因子（VEGF）、巨噬细胞游走抑制因子（MIF）的表达。结果 与模型组比较,祖师麻组、祖师麻甘草配伍组能够明显抑制AA大鼠体质量减轻的趋势,对抗AA大鼠足肿胀度及AI的增加,降低异常升高的血清TNF-α、IL-1β水平,改善关节病理组织变化,减少滑膜组织VEGF、MIF的表达,其中以祖师麻-甘草（3：2）配伍组效果最优。结论 祖师麻甘草配伍后,对AA大鼠各项指标改善作用显著,作用优于单用祖师麻,其最佳配伍比例为祖师麻-甘草（3：2）。调节血清炎症细胞因子TNF-α、IL-1β及滑膜组织VEGF、MIF的表达,可能是祖师麻甘草配伍治疗类风湿性关节炎机制之一。     

千金子制霜前后提取物对大鼠肠道菌群的影响

目的研究千金子制霜前后提取物对正常大鼠肠道菌群的影响,为进一步阐明千金子制霜减毒机制提供参考。方法大鼠ig高、中、低剂量的千金子生品和霜品提取物,采用平板菌落计数法考察千金子制霜前后大鼠粪便中4类代表性肠道菌群双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌、肠球菌的数量变化。结果平板菌落计数实验结果表明,ig千金子生品与霜品提取物后大鼠出现菌群失调现象,且千金子霜品较生品引起的菌群紊乱程度低,在低剂量给药时可使条件致病菌肠球菌和大肠杆菌的数量减少。结论千金子制霜前后提取物均会影响肠道菌群的生物多样性,影响肠道菌群平衡,且千金子制霜后对4类肠道菌群的作用减弱,引起肠道菌群紊乱程度减小,这与千金子霜品泻下作用缓和的研究结果相一致,表明从肠道微生态角度考察千金子制霜前后对肠道菌群的干预作用,可揭示制霜与肠道菌群数量变化可能存在相关性。     

中药及活性成分促进伤口愈合的研究进展

由于生长因子类生物制剂药物在治疗伤口愈合中的局限性,从传统中药中挖掘缓解炎症反应、促血管生成、重塑上皮组织、加速伤口愈合的中药及其活性成分,对治疗慢性伤口有积极意义。除传统的活血止血类药物如丹参Salviae Miltiorrhizae Radix et Rhizoma、三七Notoginseng Radix et Rhizoma、姜黄Curcumae Longae Rhizoma、乳香Olibanum等及其活性成分外,清热药如积雪草Centellae Herba、黄连Coptidis Rhizoma,补益药中黄芪Astragali Radix、淫羊藿Epimedii Folium等及其活性成分,复方托里消毒散、生肌化瘀汤等在伤口愈合各阶段都具有积极的调控作用。通过对活血止血类、清热类、补益类药物及其活性成分和复方治疗伤口愈合作用机制进行综述,为了解中药药效物质在治疗慢性伤口的相关研究提供参考和依据。     

星点设计-效应面法优化芷芎散温敏凝胶的处方及其鼻黏膜渗透特性研究

目的 制备并优化芷芎散鼻用温敏凝胶的处方,并考察其体外释放机制和鼻黏膜渗透特性。方法 利用星点设计-效应面法优化泊洛沙姆温敏凝胶基质处方,然后经Franz扩散池法考察欧前胡素、阿魏酸的体外释放机制及其离体家兔鼻黏膜渗透特性。结果 最优处方为泊洛沙姆407（P407）20%、泊洛沙姆188（P188）6.5%,欧前胡素接近零级释放模型,阿魏酸接近Higuchi模型,处方对欧前胡素和阿魏酸的透过鼻黏膜均具有促进作用。结论 优化所得的处方为芷芎散新给药途径制剂的开发提供基础。     

半夏曲炮制中4种优势微生物的生理生化特性及黄色素含量测定

目的研究半夏曲中4种优势微生物的生理生化特性,测定炮制过程中不同时间点各样本的黄色素含量,为揭示半夏曲炮制机制奠定基础。方法以半夏曲中筛选出的4株优势菌枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis、宛氏拟青霉Paecilomyces variotii、丝衣霉菌Byssochlamys spectabilis、黑曲霉Aspergillus niger为研究对象,分别测定它们的最适宜生长温度、pH值,利用糖类的产酸能力以及产淀粉酶、蛋白酶、黄色素的能力,同时测定半夏曲炮制过程中5个不同时间点样本的黄色素含量。结果枯草芽孢杆菌、宛氏拟青霉、丝衣霉菌、黑曲霉生长的最适温度分别为35℃、29℃、29～31℃、39℃,最适pH值分别为7.0、7.0、7.5、7.0。4种菌均具有产淀粉酶和蛋白酶的能力,宛氏拟青霉、丝衣霉菌具有产黄色素能力。5个不同时间点样品的黄色素质量分数分别为69.875、69.875、71.750、119.500、137.875μg/g。结论 4种优势微生物在半夏曲炮制中可能起重要作用。     

配伍药物与pH值环境对大黄蒽醌类成分溶出变化的影响规律

目的 研究配伍药物与pH值环境对大黄药对中蒽醌类成分溶出变化的影响规律。方法 首先检测与大黄配伍的药物（醋甘遂、牡丹皮、黄芩、黄连、附子、枳实、厚朴）单煎液的pH值,然后在相同pH值的水溶液中加入大黄进行煎煮,采用UV-Vis法和HPLC法测定此pH值的水煎液中蒽醌类成分的量,与大黄药对共煎液中蒽醌类成分的量进行比较。结果 UV-Vis法检测结果显示,大黄与黄连配伍时,总蒽醌的溶出量最低,而大黄与黄芩配伍时总蒽醌的溶出量最高。用盐酸水溶液提取大黄,总蒽醌的溶出量随pH值升高而增加;HPLC法测定结果显示,在测定的7个药对中,黄连与大黄配伍时,蒽醌类成分溶出量最低,而附子与大黄配伍时,蒽醌类成分的溶出量最高。使用不同pH值的盐酸水溶液提取大黄时,蒽醌类成分的量在pH值为5.6时最高。结论 大黄在煎煮过程中,与其配伍的药物和pH值环境均会引起蒽醌类成分溶出量的变化,但是不同药物配伍后形成的pH值环境与用盐酸调整的pH值环境对蒽醌类成分产生的影响存在不一致性,pH值环境对其影响较大。