CD8^＋CD28^-T细胞在原发性肝癌患者外周血的表达及意义

目的探讨原发性肝癌（PHc）患者外周血中CD8^＋CD28^-T细胞在PHC细胞免疫中所发挥的作用。方法采用流式细胞技术对38例PHC患者及40例健康对照人群外周血中的CD8^＋T细胞表面CD28分子的表达进行检测。结果38例PHC患者与40例正常对照组外周血测定结果比较发现：PHC患者外周血中CD8^＋测定值较正常对照组显著增高;CD8^＋CD28^-较正常对照组明显增高;而PHC患者外周血中CD8^＋CD28^＋与正常组比较明显下降,统计学差异均具有显著性。结论CD8^＋CD28^-T细胞在PHC患者外周血中增生活跃,提示高表达的CD8^＋CD28^-T细胞在肝癌免疫应答中具有重要意义。     

CD4+CD25+调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化

目的探讨CD4^＋CD25^＋T细胞在特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者发病机制中的作用。方法应用流式细胞术检测ITP患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞、CD4^＋CD25^highT细胞、CD4^＋FOXP3^＋T细胞、CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞的数量；实时荧光定量PCR检测外周血FOXP3 mRNA的表达水平。将ITP患者和正常人CD4^＋CD25^highT细胞与自身CD4^＋CD25^-T细胞混合培养，检测CD4^＋CD25^high T细胞免疫抑制功能。结果ITP患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞约占CD4^＋T细胞的（15．64±5．82）％，明显高于正常对照组（9．30±3．95）％（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞比例为（1．53±0．66）％，与对照组[（1．36±0．55）％]比较差异无统计学意义（P〉0．05）；CD4^＋FOXP3^＋T细胞和CD4^＋CD25^＋FOXP3^＋T细胞分别为（1．82±1．42）％和（1．25±0．94）％，均明显低于对照组[（3．90±1．37）％和（2．65±0．92）％]（P值均〈0．01）。ITP患者外周血FOXP3 mRNA表达水平较正常人明显下调（P〈0．01），CD4^＋CD25^high T细胞的抑制活性较正常人减弱（P〈0．01）。结论ITP患者中CD4^＋CD25^＋T细胞FOXP3表达水平降低，抑制活性减弱。     

CD3-CD16+CD56+细胞在脐血与成人外周血中的初步研究

目的探讨脐血、成人外周血中自然杀伤（NK）细胞分化（CD）抗原百分含量的并同，分析在进行脐血（CB）与成人外周血（PB）造血干细胞移植（HSCT）时的利弊。方法采用流式细胞术（FCM），双色荧光素单克隆抗体标记，检测CB与PB中的NK细胞分化抗原（CD3^-CD16^＋CD56^＋）的百分含量。结果成人外周血中自然杀伤细胞分化抗原的百分含量明显高于脐血，经统计学处理两者差别具有显著性意义（P〈0．01）。结论脐血中NK细胞的含量与成人外周血存在不同程度的差异。这可能与两者进行造血干细胞移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）、移植物抗白血病（GVL）作用的强弱相关。     

CD4^+T细胞老化与冠状动脉粥样硬化性心脏病严重程度的相关性研究

目的探讨稳定型冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary heart disease,CHD)和急性ST段抬高型心肌梗死(ST segment elevationmyocardialinfarction,STEMI)患者外周血CD4^+T细胞正性共刺激分子表达及老化情况。方法纳入2016年9月1日至2016年10月31日首都医科大学附属北京地坛医院年龄>18岁的受试者,根据临床症状分为对照组36例、稳定性冠状动脉(冠脉)疾病(stable coronary artery disease,SCAD组13例、STEMI组18例。流式细胞学检测对照组、SCAD组和STEMI组患者CD4^+T细胞表面CD28、CD27、OX40、4-1BB的表达率,CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分率,并进行组间比较。检验STEMI组上述指标与Genisi评分的相关性。结果与对照组CD4^+T细胞比较,STEMI组和SCAD组4-1BB表达率显著增高,SCAD组OX40表达率显著增高,STEMI组的CD28百分率和CD4^+CD28^-CD27^-T细胞百分率分别显著降低和增高。STEMI组CD4^+T细胞的CD28和CD27表达率均与Gensini评分负相关,而CD4^+CD28^-CD27^-T细胞百分率与Gensini评分正相关。CD4^+CD28^+T细胞及CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分率与Gensini评分独立相关。结论 STEMI患者CD4^+T细胞显著老化,且CD28分子表达降低及CD4^+CD27^-CD28^-T细胞百分比增高与STEMI患者冠状动脉狭窄程度独立相关。     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的检测及其临床意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞水平及临床意义。方法采用流式细胞仪对25例AIHA患者治疗前后和15例正常对照者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋T细胞的比例进行了检测。结果25例AIHA患者治疗前CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^＋细胞的比例与正常对照组比较明显降低,（4．47±2．11）％VS（9．82土2．98）％（P〈0．001）,治疗后CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例与治疗前比较显著升高,（7．60±2．50）％VS（4．47±2．11）％（P〈0．001）,但仍低于正常人,（7．60±2．50）％VS（9．82±2．98）％（P〈0．05）。治疗后完全缓解患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与治疗无效组比较明显升高,（9．55±2．36）％VS（5．68±2．67）％（P〈0．05）,无效组患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞占CD4^-T细胞的比例与正常时照组比较仍然降低,（5．68±2．67）％vs（9．82±2．98）％（P〈0．01）。结论AIHA患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的比例较正常对照明显降低,有效治疗后得到恢复,提示CD4^＋CD25^＋调节性T细胞可能参与了疾病的发生。     

支原体肺炎患儿淋巴细胞亚群的变化及意义

目的观察支原体肺炎患儿外周血淋巴细胞亚群的变化及临床意义。方法采用流式细胞仪检测20例支原体肺炎患儿和14例健康儿童淋巴细胞亚群（CD3^＋、CD3^＋CD4^＋、CD3^＋CD8^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD3^-CD19^＋、CD3^-CD（16＋56）^＋）。两组年龄、性别差异无统计学意义。结果支原体肺炎患儿CD3^＋细胞明显降低（P〈0．01）、CD3^＋CD8^＋细胞降低（P〈0．05）、CD3^-CD19^＋细胞升高（P〈0．01），较对照组差异有统计学意义；CD3^＋CD4^＋、CD4^＋／CD8^＋、CD3^-CD（16＋56）^＋细胞较对照组差异无显著意义（P〉0．05）。结论支原体肺炎患儿存在细胞免疫失调，主要表现为CD3^＋、CD3^＋CD8^＋细胞降低，CD3^-CD19^＋细胞升高。     

急性白血病儿童外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞和NK细胞的变化及其在白血病免疫中的意义

本研究观察急性白血病患儿外周血CD4^＋CCD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）及自然杀伤细胞（nature killer cell,NK）在不同病程阶段的变化,了解白血病患儿的免疫状态,以探讨CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞在急性白血病肿瘤免疫中的意义。建立流式细胞术检测外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞和NK细胞的方法：检测急性白血病初诊患儿25例、完全缓解患儿28例及20例正常健康对照者外周血CD4^＋CD25^＋Treg细胞及NK细胞的数量及比例。结果表明：初诊组、完全缓解组及对照组外周血CD4^＋CD25^＋CD127^＋占CD4^＋T细胞的比例分别为（9．55±2．41）％,（8．54±2．51）％和（6．25±0．85）％,在初诊患儿组和缓解患儿组高于正常对照组,且在初诊患儿组高于完全缓解组（P〈0．05）;同时,与正常对照组比较,急性白血病患儿的NK细胞数量减少,完全缓解后患儿组NK细胞数量仍低于正常对照（4．11±3．87％和10．41±7．20％w14．06±5．95％,P〈0．05）。结论：联合应用CD4、CD25及cDl27检测Treg细胞简便可行、重复性好、检测结果可靠、准确,CD4^＋CD25^＋CD127^＋T细胞可较好地反映CD4^＋CD25^＋Treg细胞的比例。急性白血病患儿外周血中Treg细胞数量升高,NK细胞数量降低,表明急性白血病患儿NK细胞免疫功能处于抑制状态。Treg细胞可能在白血病的发生、发展中起一定作用,参与NK细胞的调节可能是Treg细胞在白血病免疫中的一个环节。     

银屑病患者外周血CD3^＋CD（16＋56）^＋NK T细胞和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性T细胞显著减少

目的分析银屑病患者外周血中CD3^＋CD（16＋56）＋自然杀伤T细胞（NK T）和CD3^＋CD4^-CD8^-双阴性（DN）T细胞的变化。方法应用三色流式细胞术分析结合CD45/侧向散射信号（SSC）和CD3/SSC设门分析外周血淋巴细胞亚群并应用Flow Count（荧光球进行绝对计数。结果银屑病组NK T细胞的比例3.58%±2.09%,显著低于健康对照组7.73%±5.8%（P〈0.01）;银屑病组NK T细胞绝对数（72.68±51.18）细胞/mm^3也显著低于健康对照（193.15±160.09）细胞/mm^3（P〈0.01）。银屑病组DN T细胞绝对数（78.92±58.67）细胞/mm^3同样显著低于健康对照组（148.33±118.00）细胞/mm^3（P〈0.01）;而其比例在两组间差异无统计学意义。银屑病组总T细胞（1 254.73±411.73）细胞/mm^3和抑制性T细胞（Ts）（465.23±212.65）细胞/mm^3均分别显著低于健康对照组[T：（1 721.72±712.45）细胞/mm^3;Ts：（800.23±581.79）细胞/mm^3],P值均〈0.01,银屑病组CD4/CD8比值显著升高（P〈0.05）。结论银屑病患者外周血NK T细胞和DN T细胞显著减低。我们推测这两类细胞的异常减低与银屑病患者体内免疫调节功能失衡有关。     

肺癌患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布及临床意义

目的检测肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的分布，探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测45例肺癌患者和30例健康对照者外周血中的CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化，并通过体外淋巴细胞增殖实验对肺癌患者CD4^＋CD25^＋调节性T细胞进行鉴定。结果（1）肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋T细胞比例明显增高（P〈0．05），但治疗后其比例明显下降（P〈0．05）；（2）肺癌患者CD4^＋CD25^＋T细胞能抑制CD4^＋CD25^-T细胞的增殖和干扰素γ的分泌。结论肺癌患者外周血中CD4^＋CD25^＋调节性T细胞比例明显增高，其动态监测有助于肺癌患者免疫状态及疗效评价。     

CD3^-CD16^＋CD56^＋细胞在脐血与成人外周血中的初步研究

目的探讨脐血、成人外周血中自然杀伤（NK）细胞分化（CD）抗原百分含量的并同，分析在进行脐血（CB）与成人外周血（PB）造血干细胞移植（HSCT）时的利弊。方法采用流式细胞术（FCM），双色荧光素单克隆抗体标记，检测CB与PB中的NK细胞分化抗原（CD3^-CD16^＋CD56^＋）的百分含量。结果成人外周血中自然杀伤细胞分化抗原的百分含量明显高于脐血，经统计学处理两者差别具有显著性意义（P〈0．01）。结论脐血中NK细胞的含量与成人外周血存在不同程度的差异。这可能与两者进行造血干细胞移植后发生移植物抗宿主病（GVHD）、移植物抗白血病（GVL）作用的强弱相关。     

CD4~＋ CD25~＋细胞和CD8~＋ CD28~-调节性T细胞在原发性肝癌患者外周血中的水平变化

目的研究原发性肝癌（HCC）患者外周血中CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞的表达及意义。方法采用流式细胞仪测定93例HCC患者和24名健康人外周血中的CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞水平。结果 HCC患者外周血中的CD4＋ CD25＋细胞[（14.39±4.58）%]和CD8＋ CD28-调节性T细胞[（24.05±5.64）%]表达均显著高于对照组[（8.37±1.73）%、（15.93±4.84）%,P〈0.05];CD8＋CD28-调节性T细胞与HCC的分期呈正相关（r=0.463,P〈0.001）。结论 CD4＋ CD25＋细胞和CD8＋ CD28-调节性T细胞在HCC患者外周血中呈高表达,且CD8＋ CD28-调节性T细胞与HCC的病情及预后相关。     

小剂量利妥昔单抗治疗慢性特发性血小板减少性紫癜疗效分析

目的 探讨小剂量利妥昔单抗(抗CD20单抗)治疗慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)临床疗效、安全性及患者免疫学改变.方法 采用小剂量利妥昔单抗(100 mg,每周1次,共4次)治疗26例对糖皮质激素和免疫球蛋白治疗无效的慢性ITP患者,检测治疗前后血常规,免疫球蛋白和血小板相关抗体及淋巴细胞亚群CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD3~- CD56~+、CD4~+ CD25~+、CD4~+ CD25~+ FOXP3~-、CD4~+ CD25~+ FOXP3~+和CD19~+CD20~+细胞.结果 26例患者,完全缓解(CR)6例(23.1%),有效(R)10例(38.5%),其中l例复发,无效(NR)10例(38.5%).中位随访时间5.5(0.8-8)个月,起效和达CR中位时间分别为27(1-104)d和41(4-109)d.治疗前后免疫球蛋白定量和CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD3~- CD56~+、CD4~+CD25~+、CD4~+ CD25~+ FOXP3~+细胞计数差异无统计学意义.治疗后的CD4~+CD25~+FOXP3~-细胞计数比治疗前降低(P<0.05).治疗后的CD19~+CD20~+细胞计数与治疗前相比明显减少(P<0.01).治疗后血小板相关抗体PAIgG比治疗前减低(P<0.05).26例患者均无明显的不良反应.结论 小剂量利妥昔单抗可能是一种高效、安全治疗ITP的药物,但其最佳用药方案、长期疗效以及不良反应仍有待临床进一步观察.     

大肠癌患者外周血CD4^＋CD25^＋CD127^lo/-调节性T细胞的含量及临床意义

目的探讨大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-调节性T细胞（Treg）的变化及意义。方法流式细胞术检测36例大肠癌患者及30例健康人外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg的变化；ELISA检测同一标本血清中转化生长因子β（TGF—β）的表达水平。结果36例大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg占CD4^＋、淋巴细胞的比例为（6．92±1．31）％，与正常对照组（4．91±1，24）％相比差异有显著性（P〈0．05）。20例腺癌、7例黏液癌、9例未分化癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例分别为（6．81±1．52）％、（6.99±1．21）％、（7．08±1．17）％，各组间比较差异无显著性（P〉0．05），均高于对照组的（4．91±1．24）％，差异有显著性（P〈0，05）。IV期大肠癌患者外周血CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg高于Ⅱ期大肠癌患者（P〈0．05）。大肠癌组外周血清中TGF—β水平显著高于正常对照组，随着TGF—β水平增加，CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg比例逐渐增高，两者呈正相关。结论大肠癌患者外周血中CD4^＋、CD25^＋、CD127^lo/-Treg表达增高，与临床分期相关，但与组织学分类无关，导致机体免疫抑制，可能参与大肠癌发生。     

丙型肝炎患者T细胞CD28表达的探讨

目的 探讨丙型肝炎病毒携带者外周血T淋巴细胞上的CD28表达在丙型肝炎病毒感染免疫耐受机制中的作用。方法 采用流式细胞技术（FCM）用三色标记法检测40例丙肝患者和30例正常人群外周血T细胞CD28的表达。结果 丙肝患者外周血中CD28^＋CD8^＋的表达显著高于正常健康对照组，CD8^＋，CD28^＋CD8^＋T细胞则显著低于正常健康对照组。结论 CD28对丙肝患者的免疫功能及愈后判断有一定的意义。     

急性冠脉综合征患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的变化及其临床意义

目的 探讨急性冠脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者的外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（CD4^＋CD25^＋Treg）和CD4^＋CD25^＋曲T细胞（CD4^＋CD25^＋^high Treg）的水平及其临床意义。方法 采用流式细胞术检测15例急性心肌梗死患者、20例不稳定性心绞痛、11例稳定性心绞痛和16例健康体检者（对照组）的外周血CD4^＋CD25^＋Treg和CD4^＋CD25^＋^high Treg的水平。结果 ACS患者CD4^＋CD25^＋Treg占CD4^＋T细胞的比例较稳定性心绞jjl;和对照组显著减少,CD4^＋CD25^＋high Treg占CD4^＋T细胞比例的差异无显著性。结论 ACS患者外周血具有免疫负调节作用的CD4^＋CD25^＋Treg水平减低,可能促进了动脉粥样硬化的进展。     

类风湿关节炎患儿外周血CD4+和CD8+T细胞CD25表达及意义

目的:分析小儿类风湿关节炎患者的外周血CD4 和CD8 T细胞CD25表达水平,并探讨它们在小儿关节炎症发生过程中的免疫病理作用。方法:收集24例类风湿关节炎患儿和16例健康儿童外周血标本,利用流式细胞仪检测CD4 、CD8 T细胞CD25表达,分析它们在疾病发展过程中的作用。结果:类风湿关节炎患儿外周血CD4 、CD8 T细胞CD25表达明显升高,与健康者比较差异有统计学意义(P<0.05),所有患儿均接受了有效的药物治疗,待症状控制后,分析发现患者的CD4 、CD8 T细胞表达CD25水平显著下降(P<0.05)。结论:类风湿关节炎患儿外周血T细胞表达CD25水平明显升高,提示T细胞在关节炎症病变过程中激活、增殖,参与关节滑膜组织及全身免疫应答。     

人外周血Vα24 NKT细胞和CD3~+CD56~+CIK细胞生物学特性的比较研究

目的进一步认识Vα24 NKT细胞和CIK细胞在生物学特性的差异。方法从人外周血单个核细胞扩增NKT细胞和CIK细胞;经免疫磁珠纯化获得高纯度的TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞。运用流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的表型、细胞因子和细胞坏死相关因子的表达情况,并用DIOC18染色及流式细胞术测定纯化后的NKT细胞和CIK细胞的细胞杀伤活性。结果经纯化TCRVα24+Vβ11+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞的纯度均达到>90%;纯化后的Vα24 NKT细胞多数为CD4+和DN NKT细胞,高表达TCRVα24、Vβ11、CD3、CD161,低表达CD56;而纯化后的CIK细胞则以CD8+T细胞为主,高表达CD3、CD56,低表达CD161,几乎不表达TCRVα24和Vβ11。在抗原刺激下,CD3+CD56+CIK细胞的IFN-γ、TNF-α、Perforin、FasL、TRAIL表达水平均高于NKT细胞,但CD3+CD56+CIK细胞几乎不分泌IL-4,而NKT细胞则分泌高水平的IL-4;CD3+CD56+CIK细胞对肿瘤细胞株K562、U937、Jurkat的杀伤率均远远高于NKT细胞。结论TCRVα24+NKT细胞和CD3+CD56+CIK细胞是两类完全不同的细胞群,在抗肿瘤免疫和免疫调节中可能起着不同的作用。     

恶性肿瘤患者伽玛刀治疗前后CD4^＋CD25^＋Treg细胞的变化

目的探讨恶性肿1瘤患者接受伽玛刀治疗前后其外周血CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)比例变化。方法我们通过流式细胞仪检测恶性肿瘤患者伽玛刀术前及术后7~10天,外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例变化。结果恶性肿瘤患者伽玛刀术前及术后7~10天,外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例分别为28.55±5.2%,28.35±4.18%,没有明显差异。结论伽玛刀术后7~10天,恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的比例没有明显变化,提示伽玛刀对肿瘤治疗早期患者细胞免疫功能没有明显改变。     

SARS患者外周血CD4+CD8+T淋巴细胞的变化

目的 观察严重急性呼吸综合征(severe acute respiratory syndrome，SARS)患者外周血CD4^ 和CD8^ T淋巴细胞的变化，探讨SARS患者机体的免疫状况。方法 10位健康人(对照组)和13例确诊为SARS患者于发病第1、2、3、4周采静脉血，用流式细胞仪检测CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞。结果 与对照组比较，SARS患者从发病1至4周外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞百分比均有不同程度的降低，以病程发展的2周左右为最明显。结论 SARS患者外周血CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞有不同程度的降低，机体呈异常的免疫反应。