不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株产酸力的实验研究

目的比较不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株对蔗糖进行酵解产生有机酸的能力。方法从不同龋敏感的3~5岁学龄前儿童口腔变异链球菌中选取66株变异链球菌临床分离株,用气相色谱法测定高龋、中龋和无龋儿童口腔变异链球菌不同基因型临床分离株产生各有机酸的量。结果不同龋敏感儿童不同基因型变异链球菌临床分离株产生有机酸的量的差异有统计学意义（P<0.05）,同一龋敏感儿童变异链球菌携带不同基因型菌株产酸量的差异也有统计学意义（P<0.05）,携带基因型数目越多的菌株其产酸量越多。变异链球菌临床分离株产生乳酸、乙酸、甲酸的量的差异有统计学意义（P<0.05）,乳酸多于乙酸和甲酸。结论不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株产酸力不同,携带基因型数目越多的菌株其产酸力越强。     

不同龋敏感儿童口腔不同基因型变异链球菌临床分离株在不同pH条件下产生GTF能力的比较研究

目的:探讨不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株在不同pH条件下产生GTF的能力.方法:从不同龋敏感儿童口腔变异链球菌中选取66株临床分离株,常规复苏、增菌并配制相同密度的菌悬液后,接种于不同pH值(以0.5为间隔,pH 5.0～7.0)的含2.5 g/L葡萄糖和0.05％ Tween 80的TYC培养基中厌氧培养18h;采用Somogyi法测定还原糖含量,计算酶活性.结果:在同一pH条件下,不同龋敏感儿童口腔变链菌GTF活性的差异具有统计学意义(P＜0.05),龋敏感性越高,GTF活性越大;同一龋敏感儿童口腔变链菌不同基因型菌株GTF活性的差异也具有统计学意义(P＜0.05),GTF活性随基因型的增加而增加;当pH5.5时,高龋、中龋儿童携带一种基因型菌株GTF活性显著下降(P＜0.05).结论:不同龋敏感儿童口腔变异链球菌不同基因型菌株在不同pH条件下GTF活性不同,携带基因型越多的菌株GTF活性越高.     

不同龋敏感儿童变异链球菌临床分离株耐酸能力的实验研究

目的:比较不同龋敏感儿童口腔中变异链球菌临床分离株耐酸能力的差异。方法:以高龋、中龋和无龋儿童口腔中分离得到的变异链球菌为实验菌株,以ATCC25175国际标准株作对照,经常规复苏、增菌后,配制相同浓度的菌悬液,pH在7.0～6.0时各菌株间的耐酸能力无显著差异(P>0.05),而当pH在5.5～5.0时,分别在不同pH(以0.5为间隔,pH 4.0～7.0)的BHI液体培养基中培养48 h后,用紫外分光光度计在540 nm处测定吸光度,比较细菌的生长情况。结果:高、中龋病人口腔中分离出的变异链球菌临床分离株和国际标准菌株的耐酸能力明显高于无龋者口腔中分离出的变异链球菌,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:高龋儿童口腔中变异链球菌临床分离株具有高致龋性。     

变异链球菌临床株表面相关蛋白表达差异的初步分析

目的：?探讨变异链球菌临床株在中性条件下表面相关蛋白的表达差异,进一步了解龋病的发生和发展过程。方法???在pH7.0条件下采用Homer法提取临床分离株的表面相关蛋白,经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）电泳和二维电泳（2DE）确定蛋白质表达的差异条带及位点,差异位点由基质辅助激光解析电离飞行时间（MALDI-TOF）质谱分析,并结合数据库进行检索和鉴定蛋白质。结果???经过对电泳图谱的分析发现：593号菌株存在14个高表达蛋白质位点和8个特异蛋白质位点,其中丙酮酸激酶、ABC运载体（腺苷三磷酸结合蛋白）特异表达,葡糖基转移酶高表达。结论???两菌株在中性条件下出现了某些蛋白质的高表达和特异表达,可能是致龋性存在差异的原因。     

高致龋性变异链球菌临床分离株的初步筛选

目的 初步筛选高致龋性变异链球菌临床分离株。方法 通过检测41株变异链球菌临床分离株的产酸能力、耐酸能力、黏附能力和合成细胞外多糖能力,初步筛选出高致龋性变异链球菌临床分离株。结果 不同的变异链球菌临床分离株体外致龋能力不同,其中3株产酸能力、耐酸能力、黏附能力和合成细胞外多糖能力均较高,提示可能为高致龋性变异链球菌临床分离株,另外3株产酸能力、耐酸能力、黏附能力和合成细胞外多糖能力均较低,提示可能为低致龋性变异链球菌临床分离株。结论 通过筛选可能获得了高致龋性变异链球菌临床分离株。     

变异链球菌LuxS突变株的构建及其耐酸性的测试

目的:把构建好的含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒转入变异链球菌进行luxS的敲除以形成luxS突变株,同时测试变异链球菌失去luxS基因后在pH 3.0酸性环境中的生长情况.方法:把含有luxS基因两侧同源序列的重组质粒(pMD-19TUKD)转化入变异链球菌UA159中,利用间源重组,等位基因交换进行luxS基因敲除,再对此突变株进行PCR的检测,利用测试A值、梯度稀释和平板计数法,对变异链球菌luxS突变株和野生型的变异链球菌在pH 3.0酸性环境下生存情况进行比较.结果:成功的构建了变异链球菌luxS的突变株,并且变异链球菌失去luxS基凶后,在酸性环境下的生存能力相对于野生型的变异链球菌低.结论:LuxS基因对变异链球菌的耐酸性起着重要作用.     

变异链球菌转肽酶A基因型与乳牙高龋的相关性

目的在控制乳牙龋危险指标的前提下,探讨乳牙高龋与变异链球菌(简称变链菌)转肽酶A(srt A)基因型的关系。方法采用ABI Variant Reporter软件对121株分离于高龋儿童的变链菌和121株分离于无龋儿童的变链菌srt A基因测序结果进行基因型分析。采用单因素分析方法分析srt A基因型数量、srt A各基因型以及社会、行为变量在两组中的频率分布情况,采用多因素Logistic回归方法控制混杂因素,分析变链菌srt A基因型与乳牙高龋的相关性。结果共发现15种基因型,其中无龋组中9种,高龋组中11种。3A基因型在无龋组中的突变率高于高龋组(P=0.033),3E基因型在高龋组中的突变率高于无龋组(P=0.037)。多因素分析结果表明:高月龄、低出生体重、过长的母乳喂养时间、高固体糖摄入频率、较高的可视菌斑百分率、较少的srt A 3A基因型与乳牙高龋相关。结论在有变链菌定植的儿童中,变链菌srt A 3A基因型与乳牙龋易感性相关。此外,月龄、出生体重、母乳持续喂养时间、固体糖摄入频率、可视菌斑等因素也参与早期儿童龋的发生、发展。     

变形链球菌(血清型C)临床分离株AP-PCR基因分型

目的 探讨变形链球菌（血清型C）菌珠基因型与龋发生的关系。方法 用Chelex法撮细菌染色体DNA,经多次实验自行确立AP－PCR最佳反应条件,并对278株来自不同龋敏感个体的临床分离株进行AP－PCR基因型分析。结果 278株变链菌临床分离株共区分出105种基因型,无龋个体84．21％携带1种基因型,而高龋患者95％携带2种或2种以上基因型。结论 变链菌菌株间存在明显的遗传多态性,个体携带变链球菌基因型的种数与其致龋性密切相关。     

不同pH对变异链球菌体外生物膜形成的影响

目的：了解变异链球菌临床株体外生物膜形成规律以及不同pH对生物膜形成的影响。方法：采用微孔板培养,染色、分光光度测定法（A630）绘制体外不同pH条件下（pH=7.0～5.0）593号、18号菌株以及变异链球菌标准株（ATCC25175）的生物膜生长曲线。结果：体外变异链球菌各株在pH=5.0时均不能形成生物膜;pH=7.0时细菌生物膜形成表现为缓慢的非线性生长,12～24h生物膜开始成熟,24～36h出现一相对的生长停滞期;pH=5.0时对已形成12h的变链菌生物膜生长有明显的抑制作用,但经历12h的酸休克后各菌株的生物膜均能恢复生长。结论：变异链球菌在体外pH=7.0时于12～24h形成稳定的生物膜,该生物膜能抵抗一定程度的酸（pH=5.0）攻击,而浮游状态的细菌则不能。     

新疆维吾尔族儿童乳牙龋与变形链球菌基因型相关性的初步研究

目的 探讨新疆维吾尔族不同龋敏感儿童口腔中变形链球菌幕冈多态性与乳才龋发生的关系,以期为新疆维吾尔族儿童乳牙龋危险性预测和防治提供依据.方法 选取新疆乌鲁小齐市3～5岁维吾尔族高龋(龋失补牙数≥5)和无龋(龋失补牙数=0)儿童各17名为研究对象,收集唾液样本,轻唾一杆菌肽琼脂培养基分离培养变形链球菌.典型菌落行革兰染色...     

Comparative genome hybridization of Streptococcus mutans strains

The basis for genotypic and phenotypic variation within Streptococcus mutans is poorly understood but the availability of the genome sequence of strain UA159 provides an opportunity for comparative studies. Genomic DNA prepared from nine strains of S. mutans was used to probe a microarray consisting of oligonucleotides representing 1948 open reading frames of S. mutans UA159. A total of 385 (20%) of the UA159 open reading frames were found to be absent from one or more of the test strains. Absent open reading frames frequently occurred in blocks of adjacent open reading frames and represented regions previously experimentally detected by polymerase chain reaction, predicted genomic islands and insertion sequence elements as well as novel open reading frames. Approximately half appear to involve foreign DNA acquired by horizontal transmission. The results indicate the existence of distinct core and dispensable genomes and may help explain the phenotypic and genotypic variation within S. mutans.     

Antimicrobial susceptibility of 1042 strains of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus: comparison from 1985 to 1989

A total of 1042 strains of Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus isolated between 1985 and 1989 were tested to study the evolution of their sensitivity to penicillin, amoxycillin, amoxycillin/clavulanic acid, cefuroxime, tetracycline, erythromycin, spiramycin, acetyl spiramycin, lincomycin and clindamycin. The strains were taken from stock cultures and isolated from human saliva and dental plaque. The minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by an agar dilution method. Except for spiramycin and acetyl spiramycin, all the antibiotics inhibited 100% of the strains with concentrations less than or equal to 2 micrograms/ml. Microorganisms from both species underwent a slow progressive loss of sensitivity to all the antibiotics over a 5-year period of study, showing statistically significant results in most cases.     

Isolation and characterization of low-pH fluoride-resistant mutants of Streptococcus mutans

Stable fluoride-resistant mutants of Streptococcus mutans GS-5 were isolated at pH 6.0 and pH 5.0. Fluoride-resistant mutants isolated at pH 5.0 demonstrated greater resistance to sodium fluoride at pH 7.2 and pH 5.0 than did mutants isolated at pH 6.0. At pH 6.0, resistance levels of the mutants isolated at both pH 6.0 and 5.0 were similar. The average generation time for the mutants isolated at pH 6.0 was 54 min, while the average generation time for mutants isolated at pH 5.0 was 77 min.     

同一口腔中c血清型变形链球菌高、低毒力株的筛选

目的：由同一高龋者口腔中分离出c血清型变形链球菌高致龋毒力的菌株和低致龋毒力的菌株，为变形链球菌的比较基因组研究奠定基础。方法：从4个方面比较24株c血清型变形链球菌临床分离株对唾液包被羟基磷灰石的黏附能力、产酸和耐酸能力以及合成胞外多糖的能力。结果：筛选出位于同一口腔中的高、低毒力株。结论：同一口腔中存在着2株或2株以上致龋能力不同的c血清型变形链球菌。     

变形链球菌耐氟菌株、远缘链球菌耐氟菌株与亲代菌株基因组AP-PCR的比较

目的：利用随机引物聚合酶链反应(AP-PCR)技术，对变形链球菌、远缘链球菌和耐氟菌株的基因组进行比较，判定变形链球菌耐氟突变、远缘链球菌耐氟突变后，遗传型是否发生改变方法：采用AP-PCR技术，经多次实验自行确立AP-PCR反应条件，对变形链球菌、远缘链球菌及耐氟闲株的基因组进行比较结果：变形链球菌耐氟菌株、远缘链球蒲耐氟菌株的基因组已发生改变。结论：变形链球菌耐氟突变、远缘链球菌耐氟突变后，已具有自身的遗传性。     

Arbitrarily primed polymerase chain reaction for fingerprinting the genotype identification of mutans streptococci in children with Down syndrome

This study investigated the possible intrafamilial similarity of mutans streptococcal strains in some families with a child with Down syndrome using chromosomal DNA fingerprinting. The isolates were genotyped using arbitrarily primed polymerase chain reaction with the OPA 02 and OPA 03 primers. The results showed that five children with Down syndrome harbored mutans streptococci genotypes different from those of their mothers. A matching of genotypes was observed within the control pair (mother/child without Down syndrome). After six months, new samples were collected from all participants. Analysis showed that samples from children with Down syndrome were colonized by a new strain of Streptococcus mutans that did not match the previously collected one. The results suggest the S. mutans indigenous bacteria change more than once in children with Down syndrome.     

变形链球菌在日托儿童口腔中水平传播的初探

目的 通过对日托儿童口腔中变形链球菌（S.mutans）水平传播的研究,为儿童龋的早期预防提供新思路。方法 选择32名3～4岁日托儿童,根据是否患龋分为有龋组和无龋组。用无菌牙签采集牙面菌斑,MSB琼脂培养,微量生化反应鉴定分离S.mutans菌落,纯培养后提取基因组DNA,用AP-PCR检测其基因多态性,对来自不同个体的具有相似AP-PCR扩增图谱的菌株再进行DNA指纹分析。结果 32名受检儿童中,变形链球菌的检出率为78.1%;有龋组和无龋组的变形链球菌检出率分别为100%和69.6%。在检出变形链球菌的25名儿童中,携带有2种及以上基因型的儿童占88%;有龋组为88.9%,无龋组为87.5%,OR值为1.143,二者之间的差异无统计学意义。DNA指纹分析表明,有2种基因型变形链球菌分别在2名儿童口腔中重复检出。结论 变形链球菌在日托儿童中可能存在水平传播,但其基因型检出数目与龋的发生关系不明显。