HPV16-E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及临床应用

目的 研究人乳头瘤病毒16型E6蛋白（human papillomavirus-16 E6 protein,HPV16-E6）在宫颈病变组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法 采用免疫组化S-P法检测HPV16-E6蛋白在宫颈正常组织、慢性炎症、宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）、浸润癌上皮中的阳性表达情况.结果 HPV16-E6在正常宫颈、宫颈炎、CIN,宫颈癌各组中,阳性表达率分别为0.5%、38.35%、46.15%、71.11%,4组比较差异有统计学意义（χ2=27.50,P〈0.01）.经χ2分割后比较（α′=0.007143）,宫颈癌组、CIN组、宫颈炎组的阳性率显著高于正常宫颈组（P〈0.05）,宫颈癌组的阳性率显著高于宫颈炎组（P〈0.01）.HPV16-E6与年龄、病理类型、宫旁或脉管浸润相关（P〈0.05）.结论 HPV16-E6与宫颈癌的启动、发生、发展及侵袭转移均密切相关.HPV疫苗对于宫颈癌的防治有广泛的应用前景.     

HPV16-E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及临床应用

目的：探讨16型人乳头瘤病毒（HPV16）E6蛋白在宫颈病变组织中的表达及其意义。方法：选择2009年12月～2010年12月于本院妇科门诊检查后临床诊断为宫颈炎、宫颈上皮内瘤变（CIN）、宫颈癌、宫颈正常的患者,分别为12例、20例、27例、10例,采用免疫组化SP法检测病变组织标本HPV16-E6蛋白表达情况。结果：HPV16-E6蛋白在正常宫颈上皮、宫颈炎、CIN、浸润性宫颈鳞癌中的阳性表达率分别为0（0/10）、33.3%（4/12）、45.0%（9/20）、66.6%（18/27）,组间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。病变组织的HPV16-E6蛋白阳性表达率显著高于正常宫颈组织（P〈0.05）,其中宫颈癌的阳性表达率最高,显著高于宫颈炎和CIN。结论：HPV16-E6蛋白表达与宫颈病变有重要联系,HPV16-E6蛋白的检测可以作为宫颈癌前病变转归的指标。     

p16和IMP3在宫颈上皮病理改变中的表达及意义

目的：研究p16和IMP3在宫颈上皮内瘤变（CIN）和鳞状细胞癌中的表达,探讨它们在CIN和鳞状细胞癌中的诊断价值。方法采用免疫组织化学方法检测20例慢性宫颈炎、97例CINⅠ、78例CINⅡ、68例CINⅢ和24例宫颈鳞状细胞癌中p16和IMP3的表达。结果 p16在慢性宫颈炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ和宫颈鳞状细胞癌阳性表达率分别为10%、55.7%、97.4%、97.1%和91.7%。p16在慢性宫颈炎与低级别CIN中的阳性表达率有显著性差异（P〈0.01）,在高级别CIN和宫颈鳞状细胞癌中的表达明显高于低级别CIN和慢性宫颈炎,有显著性差异（P〈0.01）;而在高级别CIN和宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率没有差异（P〉0.05）。IMP3在慢性宫颈炎和CINⅠ中不表达,在宫颈高级别上皮内瘤变（CINⅡ和CINⅢ）的阳性表达率分别为16.7%和23.5%,在宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率为91.7%,有显著性差异（P〈0.01）。结论 p16的表达强度在宫颈上皮内瘤变到宫颈鳞状细胞癌的发展过程中逐步升高,IMP3表达主要在病变的晚期阶段。 p16和IMP3结合应用有助于宫颈上皮内瘤变和宫颈鳞状细胞癌的诊断和分级。     

HPV16、18E6蛋白表达在宫颈癌组织中的意义

目的评价HPV16、18早期蛋白E9表达在宫颈癌组织中的应用价值。方法采用SP免疫组化染色法,检测50例宫颈鳞状细胞癌,40例慢性宫颈炎及40例正常宫颈组织中HPV16、18E6蛋白表达。结果癌组中E6的阳性率为68%(34/50),慢性宫颈炎中5%(2/40),正常宫颈组织中均为阴性,良恶性组HPV16、18E6的阳性率差异有显著意义(P<0.05)。结论HPV16、18E6感染与本地区宫颈癌病因学密切相关,E6单抗可作为预测HPV16、18感染及判断早期宫颈癌的标记之一。     

宫颈上皮内瘤变及宫颈癌140例临床分析

目的探讨宫颈上皮内瘤变（CIN）及宫颈癌多种诊断方法同时应用的临床意义。方法对妇科普查的140例诊断为宫颈上皮内瘤变、宫颈癌的患者进行细胞学筛查、HPV检测及病理学检查的资料进行回顾性分析。结果140例经TBS分类：非典型鳞状细胞29例、CINⅠ59例、CINⅡ32例、CINⅢ19例、鳞癌10例、腺癌1例,经阴道镜活检及宫颈锥切最终病理诊断：慢性宫颈炎10例、CINⅠ67例、CINⅡ28例、CINⅢ25例、鳞癌19例、腺癌1例、HPV（高危型）检测阳性率：慢性宫颈炎10％．CINⅠ20．97％、CINⅡ89．4％、CINⅢ96％、浸润癌100％。结论宫颈抹片细胞学检查、HPV（高危型）检测、宫颈多点活检及锥切等多种方法联合检查可以明显提高诊断的准确率。     

人乳头瘤病毒检测在宫颈癌筛查中的作用

目的：了解生殖道人乳头瘤病毒高危型（HPV16／18）感染与宫颈病变、宫颈癌的关系,以便早期发现和治疗宫颈上皮内瘤样变（CIN）和原位癌。方法：利用膜式液基薄层细胞学（TCT）技术筛查与病理学诊断相结合,以宫颈炎为对照组,对宫颈炎和高危患者（如ASCUS、CIN、宫颈原位癌）共685例进行HPVl6／18型荧光定量PCR检测。结果：高危患者中HPV16／18感染率为64．2％（124／193）,其中宫颈癌、CINⅢ和CINⅡ的HPV16／18感染率为97．2％（69／71）,CINⅠ感染率为52．0％（26／50）,ASCUS感染率为40．3％（29／72）,宫颈炎对照组感染率为11．2％（55／492）,宫颈炎和高危患者两组结果比较有统计学差异（P〈O．005）,高危患者中〈40岁感染率为69．0％（40／58）,≥40岁感染率为62．2％（84／135）,两组结果比较无统计学差异（P〉0．05）。结论：高危型HPV16／18感染与宫颈病变,特别是宫颈癌、宫颈癌前病变的发生有明显的相关性,并且病变越重,HPV的感染率越高。提示宫颈癌的防治重点应放在高危型HPV感染者,并且宫颈病变的发生与年龄无相关性。     

人宫颈病变组织中HPV16E7蛋白、Rb蛋白、E2F1蛋白的相关性研究

目的:探讨HPV 16E 7在各类宫颈病变中的表达及其在宫颈癌变中的作用机制。方法:采用免疫组化学方法对10例慢性宫颈炎、10例宫颈湿疣、45例宫颈上皮内瘤变、20例宫颈浸润癌及10例正常宫颈标本行HPV 16E 7、R b及E 2F 1的测定。结果:R b在宫颈癌中阳性表达率明显降低,E 2F 1则在宫颈癌及高度鳞状上皮内病变组的阳性表达率增高,且E 2F 1的阳性表达率和HPV 16E 7呈正相关。结论:HPV 16E 7与E 2F 1的直接结合,导致肿瘤发生。     

宫颈癌变进程中凋亡基因表达与HPV感染的相关性研究

目的 探讨宫颈癌组织中凋亡相关基因Bcl-2、bax表达及宫颈上皮内瘤变组织中人乳头瘤病毒感染与Bcl-2、bax表达的关系.方法 应用免疫组织化学方法对宫颈正常上皮、CIN和宫颈癌共1 83例进行Bcl-2和bax蛋白表达的检测;PCR检测正常上皮和CIN组织中HPV16、18型的存在.结果 Bcl-2表达阳性率在从低级别CIN组到高级别CIN组逐渐增高,而bax的表达与之相反(P＜0.05);CIN Ⅱ、CIN Ⅲ的Bcl-2的阳性表达率与HPV感染呈正相关;Bcl-2和bax在宫颈癌的表达率明显高于正常宫颈上皮(P＜0.01);宫颈鳞癌Bcl-2表达与肿瘤分化程度呈正相关.结论 HPV感染可能与诱导Bcl-2的过度表达,抑制细胞凋亡,促进组织增殖有关,从而在宫颈癌发生、发展中起重要作用.     

宫颈鳞癌中高危人乳头状瘤病毒和P53 MDM2 P16INK4A表达的关系

目的探讨浸润性宫颈鳞癌（ISCC）中人乳头状瘤病毒（HPV）16/18、31/33感染及P53、MDM2、P16INK4A蛋白的表达,研究各指标的相关性及在宫颈鳞癌发生、发展中的作用.方法利用组织芯片、原位杂交和免疫组织化学SP法对照检测106例ISCC、10例宫颈上皮内瘤变（CIN）,10名正常宫颈鳞状上皮（NCE）中HPV16/18、31/33和P53、MDM2、P16^INK4A的表达,应用SPSS12.5统计软件分析结果.结果 HPV16/18、31/33和P53、P16INK4A蛋白在ISCC的表达高于CIN和NCE组,差异有统计学意义,HPV31/33表达与淋巴结转移相关（P＜0.05）;P53蛋白与组织学分级、淋巴结转移相关（P＜0.05）;P16^INK4A表达与组织学分级呈正相关（P＜0.05）;MDM2蛋白与临床各参数均无相关性（P＞0.05）.结论宫颈鳞癌的发生发展中高危HPV和突变型P53起重要作用,p53的下游基因MDM2是作为癌基因在宫颈鳞癌恶性进展过程中起作用,而p16^INK4A可能不是单纯作为抑癌基因在起作用.     

关于Tollip在宫颈癌发生过程中的作用及机制探讨

目的探讨Tollip在宫颈癌发生过程中的作用机制。方法 2012年~2014年,收集正常宫颈组织、CIN1、CIN2、CIN3及宫颈浸润癌癌组织各80例,对比HPV感染情况,检测宫颈鳞状上皮凋亡,Cyclin D1、c-myc、p53表达。取细胞分为正常鳞状上皮组,Siha组,Siha+Tollip质粒转染组,Siha+空质粒对照组,进行Tollip的细胞转染实验。结果 TLR4、My D88与宫颈鳞状上皮凋亡(r=0.484、0.427)、HPV感染(r=0.671、0.405)、P53(r=0.487、0.581)存在相关性(P<0.05)。正常鳞状上皮组、Siha组、Siha+Tollip质粒转染组、Siha+空质粒对照组的细胞增殖、培养第3代贴壁生长比重差异显著。Tollip过表达对象,P53表达明显上调。结论 Tollip在宫颈癌发生过程中可能通过调节TLR4、My D88、NF-KB、P53表达,最终影响细胞凋亡、宫颈上皮内瘤病变与宫颈癌的发生。     

宫颈细胞癌及宫颈上皮内肿瘤组织中HPV16感染与hTERT、Ki67表达的关系

目的研究宫颈鳞状细胞癌与宫颈上皮内肿瘤组织中HPV16感染情况与h TERT和Ki67在组织中表达的关系。方法以2008年1月至2013年10月在我院进行治疗的73例妇科肿瘤患者和同期内在我院进行常规妇科检查的35例正常患者的宫颈组织为研究标本。研究采用免疫组化技术,组织芯片技术以及原位杂交方法等。结果病理宫颈组织(除CINⅠ以外)中检测出的HPV16阳性率均比正常宫颈组织高(P<0.05)。病变宫颈组织中CINⅡ、CINⅢ、原位癌、宫颈浸润鳞癌的h TERT表达以及Ki67表达均高于正常宫颈组织(P<0.05)。浸润鳞癌组织中的h TERT表达量显著高于原位癌组织中的h TERT表达量(P<0.01)。浸润鳞癌、原位癌的Ki67表达量比正常宫颈组织中的Ki67表达量检测值高(P<0.05)。HPV16阳性患者h TERT表达显著高于HPV16阴性患者(P<0.01),且HPV16感染情况与h TERT表达情况呈显著正相关关系(r=0.372)。HPV16感染情况与Ki67表达也存在统计学意义(P<0.05),而HPV16感染情况与Ki67表达无相关性(r=0.092)。此外,在病理宫颈组织中h TERT表达与Ki67表达有统计学意义(P<0.05),但存在显著正相关关系(r=0.396)。结论 HPV16感染可能导致CIN的发生并逐步发展为SCC,而HPV16感染后组织中h TERT、ki67表达会发生改变,通过h TERT、ki67指标检测有助于宫颈癌癌前发现,对治疗和判断预后也有一定的作用。     

PTEN和p53在宫颈浸润癌和癌前病变组织中的表达及意义

目的探讨PTEN和p53在宫颈鳞癌组织及宫颈上皮内瘤变组织中蛋白表达及其意义。方法采用免疫组化SP法检测30例宫颈炎组织、50例宫颈上皮内瘤变(CIN)、30例浸润宫颈癌组织中PTEN基因和p53的表达。结果 PTEN在慢性宫颈炎、CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、浸润性宫颈鳞癌组织中,阳性表达率分别为100%、92%、73.33%、40%、36.67%,表达率逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05)。PTEN表达与宫颈鳞癌病理分期有关(P<0.05),宫颈癌p53阳性的中PTEN缺失为70.83%,而p53阴性PTEN的缺失为61.54%,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PTEN和p53可能在宫颈癌的发生、发展中起重要作用,测定宫颈CIN中PTEN可作为宫颈癌的高危人群筛选指标,PTEN与p53检测还可作为宫颈癌的预后指标。     

维吾尔族妇女子宫颈病变中抑癌基因和人乳头瘤状病毒表达相关性研究

目的 探讨抑癌基因人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源的基因(PTEN)、人乳头瘤病毒(HPV)与新疆维吾尔族妇女子宫颈病变的相关关系.方法 选取维吾尔族妇女正常或炎症的子宫颈组织标本30例为对照组,宫颈病理标本按病变程度及病理学诊断分为宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅰ组、CINⅡ～Ⅲ组各30例、宫颈鳞癌组织30例子宫颈鳞癌组采用免疫组化SP法检测PTEN蛋白表达,采用聚合酶链反应(PCR)检测HPV阳性率.结果 PTEN的蛋白表达率在正常或炎症的子宫颈组织、CIN Ⅰ、CINⅡ～Ⅲ、宫颈鳞癌组织中分别为83.3％ 、73.3％、56.7％、23.3％,子宫颈鳞癌组阳性表达率明显减少,与前3组比较差异有统计学意义(P＜0.05).4组HPV阳性率分别为43.3％、56.7％、76.7％、93.3％,HPV阳性率和子宫颈病变程度呈正相关(P＜0.05).结论 新疆维吾尔族妇女子宫颈病变组织中PTEN蛋白水平表达减少,与其宫颈病变呈负相关关系;是子宫颈组织恶变的信号.HPV感染与子宫颈病变的严重程度呈正相关,HPV感染在子宫颈病变的发展过程中起到了极大的促进作用,是子宫颈癌致病因素之一.     

泸州地区妇女HPV感染与宫颈病变程度的关系

目的分析泸州地区妇女不同宫颈病变程度与人乳头瘤病毒（HPV）感染的关系。方法采用基因芯片技术对泸州地区783例妇女不同程度宫颈病变样本分为慢性宫颈炎、CINI、CINII、CINⅢ、乳头状瘤及宫颈癌6组,并行HPV基因分型检测。结果783例宫颈病变样本的总感染率为54．79％（429／783）,其中宫颈癌感染率84．07％（95／113）,显著高于其余各组（P〈0．05）;慢性宫颈炎感染率为42．21％（168／398）,显著低于除CINI组以外的各组（P〈0．05）;乳头状瘤组感染率79．31％（23／29）,显著高于慢性宫颈炎及CINI组（P〈0．05）。429例阳性患者样本中,高危感染率80．89％（374／429）,其中乳头状瘤组感染率显著低于其余各组（P〈0．05）,宫颈癌感染率显著高于其余各组（P〈O．05）。HPV阳性患者亚型分布中,仅高危型感染者乳头瘤样病变感染率显著低于其余各组（P〈0．05）,仅低危感染者乳头状瘤感染率显著高于其余各组（P〈0．05）。结论泸州地区宫颈病变妇女高危HPV感染与宫颈癌及宫颈上皮内瘤变有关,并有随宫颈病变程度加重而升高的趋势。低危HPV感染为尖锐湿疣等良性性传播疾病的主要病原因子。     

宫颈鳞癌中癌基因C-myc与相关蛋白E_2F-1P15~(INK4b)的表达及临床意义的研究

目的探讨宫颈鳞状细胞癌癌变过程中C-myc基因与其相关蛋白E2F-1、P15INK4b的表达以及与宫颈鳞癌临床病理特征的相关性。方法选取60份宫颈鳞癌、61份宫颈上皮内瘤变(CIN)组织(其中CINⅠ～Ⅱ级31份,CINⅢ级30份)和21份正常宫颈组织。所有病例制成组织芯片,采用原位杂交技术检测各组宫颈病变中C-mycmRNA的表达情况;免疫组织化学法(Elivison二步法)检测各组中E2F-1、P15INK4b蛋白的表达。统计学方法采用χ2检验和Spearman等级相关分析。结果随着宫颈从正常组织到发生CINⅠ～Ⅱ、CINⅢ直至发展为鳞状细胞癌,C-mycmRNA、E2F-1和P15INK4b蛋白的阳性表达率显著增高,差异有统计学意义(P<0.05)。C-mycmRNA在2组间的表达差异均有统计学意义。E2F-1蛋白的阳性表达在CINⅢ与宫颈鳞癌组之间差异有统计学意义。P15INK4b蛋白的阳性表达在CINⅠ～Ⅱ与CINⅢ、CINⅢ与鳞癌组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。C-mycmRNA与E2F-1、P15INK4b的阳性表达均呈正相关(P<0.01)。E2F-1与P15INK4b的阳性表达呈正相关(P<0.01)。结论 C-myc癌基因在子宫颈鳞状细胞癌的发生、发展过程中起重要作用,其高表达预示子宫颈鳞状细胞的不良转化。C-myc癌基因与E2F-1、P15INK4b蛋白共同作用于CINⅢ向浸润性鳞癌的发展过程。     

宫颈鳞状细胞癌组织中Bcl-2与血管内皮生长因子的表达及相关性

目的探讨凋亡抑制基因Bcl-2与血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在宫颈鳞状细胞癌中的表达,以及二者表达与宫颈鳞状细胞癌中生物学行为的相关性。方法分别对45例宫颈鳞状细胞癌中组织、34例CIN组织和10例正常宫颈组织,采用免疫组织化学法检测Bcl-2的表达,免疫蛋白印迹(Western Blotting)法检测VEGF蛋白的表达,并采用DNA原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数(AI)。结果 Bcl-2和VEGF蛋白在45例宫颈鳞状细胞癌组织中的阳性表达率分别为51.11%和62.22%,均显著高于CIN组织(11.76%和5.88%)(P<0.05);而在正常宫颈组织二者均无表达。同时,Bcl-2在VEGF表达阳性的宫颈鳞状细胞癌组织中呈高度表达,Bcl-2和VEGF的表达密切相关(χ2=5.148,P<0.05)。结论提示Bcl-2可能参与宫颈鳞状细胞癌的发生和发展;Bcl-2可能通过上调VEGF的表达而促进宫颈鳞状细胞癌的转移,同时VEGF也可能通过诱导Bcl-2的表达而抑制肿瘤细胞的凋亡。     

宫颈癌组织NF—κB的表达及其与HPV16／18感染的关系

目的：观察核转录因子-κB （ nuclear factor kappa-B,NF-κB）在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测80例宫颈癌（ CSES ）、70例子宫颈上皮内瘤样变（ CIN）及50例正常子宫颈组织（ NCE） NF-κB蛋白的表达水平,采用原位杂交法检测80例CSES组织HPV16/18的感染情况。结果在CSES、CIN及NCE中,NF-κB蛋白阳性表达率分别为72 w．5％、18．6％、0, CSES组织NF-κB的表达水平显著高于CIN和NCE（ P ＜0．05）。 NF-κB表达与宫颈癌不同的病理分级、临床分期、淋巴结转移状况及HPV16/18感染有关（ P ＜0．05）,与患者年龄和组织学类型无关,且二者表达呈明显正相关（ r ＝0．884, P ＜0．05）。结论宫颈癌患者存在NF-κB的过表达,且与HPV16/18感染密切相关,二者协同作用共同促进了宫颈癌的发生发展,可作为宫颈癌治疗的潜在靶点。