贵州地区非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤与EB病毒的关系

目的 探讨非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤与EB病毒的关系。方法 采用原位杂交、免疫组织化学方法分别检测63例贵州地区非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤中的EBER1／2、LMP－1蛋白。结果 63例B细胞淋巴瘤中,6例EBER1／2（＋）（9．5％）,其中有4／13例上呼吸道淋巴瘤（30．8％）;仅有1／63例（1．6％）LMP－1（＋）。结论 非免疫缺陷相关性B细胞淋巴瘤与EB病毒的相关性小,其致瘤作用的发挥可能与机体的免疫状态有关。     

bcl-2基因产物在EB病毒相关性T细胞淋巴瘤中的表达

目的：探讨抗凋亡基因产物blc－2与鼻咽部T-细胞淋巴瘤发生与EB病毒感染的关系。方法：应用双温PCR技术和免疫组化（SP法）检测18例鼻咽T-细胞淋巴瘤组织中EB病毒DNA和抗凋亡基因产物bcl-2的表达。结果：15例EB病毒DNA阳性病例中7例出现blc－2表达（46.67％）,3例EB病毒DNA阴性病例中有1例bcl-2呈阳性反应（33．33％）。两组间无显著差异（P＞0．05）。结论：鼻咽T细胞淋巴瘤发病可能与EBV感染有关。bcl－2基因产物在鼻咽T-细胞淋巴瘤中异常表达与EB病毒感染无明显关系。     

应用组织芯片技术检测淋巴瘤患者EB病毒表达及意义

目的 探讨福建地区淋巴瘤与EB病毒(EBV)感染的关系.方法 应用组织芯片结合原位杂交技术检测121例淋巴瘤患者EB病毒的表达.结果 霍奇金淋巴瘤(HL)EBER(epstein-barr virus early RNA,EBER)阳性者均为经典型HL,检出率为52.2%(24/46);HL各型中检出率以LD型最高,3例均为阳性,MC型检出率83.3%(15/18),NS型和LP型分别为35.7%(5/14)和14.3%(1/7);非霍奇金淋巴瘤(NHL)中T细胞淋巴瘤检出率40.0%(20/50),其中鼻型结外NK/TCL检出率高达100%(9/9),结内、结外T细胞淋巴瘤检出率分别为18.2%(6/33)、82.4%(14/17),两组之间EBV感染率有明显差异(P<0.01).结论 福建地区淋巴瘤的发病与EB病毒的感染有一定的关系,其中以HL中MC和LD及NHL中的T-NHL与EB病毒的关系较为密切.而且T细胞淋巴瘤EBV感染有部位和类型倾向性的特点.     

池州市艾滋病患者机会性感染与CD4+T细胞计数间的关系

目的探讨池州市HIV／AIDS（acquired immunede ficiency syndrome,AIDS）患者机会感染特点及其与CD4＋T细胞计数间的关系。方法回顾性分析池州市2005年1月—2012年2月65例HIVAIDS患者临床资料,总结患者机会感染特点、不同CD4’T细胞计数水平发生机会感染的差异;分析机会感染特点与CD4＋T细胞计数间的关系,统计学采用PearsonChi-Square检验。结果65例患者中发生机会性感染36例,感染率55．38％（36／65）。CIM＋T细胞≥200个／L的4例（19．05％）（4／21）;100〈CIM＋T细胞〈200个／L的7例（53．85％）（7／13）;50／L〈CD4＋T细胞≤100个／L的14例（53．85％）（14／20）;CD4＋r细胞≤50个／L,11例（100．00％）（11／11）。CD4＋T细胞〉100个／L,感染部位多数为2个或2个以下;而CIM＋T细胞≤100个时,多发生2个以上部位感染。常见机会感染有肺孢子菌肺炎（Pneumocystis pneumonia,PCP）、肺结核、结核性胸膜炎、肠结核、巨细胞病毒视网膜炎、淋巴瘤、消化道真菌感染、隐球菌性脑膜炎、带状疱疹和败血症。结论池州市HIV／AIDS患者机会感染发病率高,多部位感染、混合感染常见;随着CD4＋T细胞数量减少,机会感染的发病率、累及部位增加     

T细胞淋巴瘤与EB病毒关系的研究

收集贵州地区１００例Ｔ细胞淋巴瘤进行了ＥＢ病毒检测，用免疫组织化学方法确定肿瘤细胞的Ｔ细胞表型；用聚合酶链检测ＥＢ病毒特征的ＤＮＡ序列（ＥＢＶ－ＤＮＡ），用原位杂交法检测ＥＢ病毒编码的ＲＮＡ（ＥＢＥＲ１／２），研究结果表明，贵州地区Ｔ细胞淋巴瘤与ＥＢ病毒关系极为密切，ＥＢ病毒在鼻咽部Ｔ细胞淋巴瘤中起着一定的作用，淋巴母细胞性性Ｔ细胞淋巴瘤与ＥＢ病毒有一定的关系。     

CD56在非霍奇金淋巴瘤中的表达和意义

目的探讨CD56在非霍奇金淋巴瘤中NK/T细胞淋巴瘤的表达和意义。方法应用组织形态学及免疫组织化学分析对29例我院既往诊断的恶性淋巴瘤组织进行HE、PSA染色,同时作CD56的免疫表型分析。结果10例弥漫性大B淋巴瘤和6例外周T细胞淋巴瘤肿瘤细胞CD56表达均阴性,12例NK/T细胞淋巴瘤CD56表达阳性,1例NK/T细胞淋巴瘤可疑。结论CD56可作为非霍奇金淋巴瘤中NK/T细胞淋巴瘤分类鉴别的重要指标。     

早期NK/T细胞淋巴瘤79例患者的治疗结果和预后因素回顾性分析

<正>NK/T细胞淋巴瘤属于结外非霍奇金淋巴瘤(NHL)的一种少见类型,占NHL的5%¹5%。其发病可能与CD56表达及EB病毒感染相关的分子机制有关[1],具体机制尚不明确。由于NK/T细胞淋巴瘤多原发于鼻腔,因此称鼻腔NK/T细胞淋巴瘤,而原发于鼻以外(鼻咽、口咽、硬腭、舌根等)的NK/T细胞淋巴瘤则称鼻型NK/T细胞淋巴瘤。由于此类淋巴瘤具有其本身特殊的特点,其临床特点有别于其他类型的淋巴瘤。既往考虑NK/T细胞淋巴瘤为淋巴瘤的一种亚型,习惯性思维以化疗为主,但是预后差,5年生存率30%15%。其发病可能与CD56表达及EB病毒感染相关的分子机制有关[1],具体机制尚不明确。由于NK/T细胞淋巴瘤多原发于鼻腔,因此称鼻腔NK/T细胞淋巴瘤,而原发于鼻以外(鼻咽、口咽、硬腭、舌根等)的NK/T细胞淋巴瘤则称鼻型NK/T细胞淋巴瘤。由于此类淋巴瘤具有其本身特殊的特点,其临床特点有别于其他类型的淋巴瘤。既往考虑NK/T细胞淋巴瘤为淋巴瘤的一种亚型,习惯性思维以化疗为主,但是预后差,5年生存率30%⁴0%。为了进     

鼻腔T细胞性非霍奇金氏淋巴瘤32例临床研究

目的 探讨原发于鼻腔T细胞性非霍奇金氏淋巴瘤（Non—Hodgkin＇s Lymphoma,NHL）的临床特点及治疗效果。方法收集我院1997年1月至2004年12月收治的鼻腔T细胞性NHL32例，按照Ann Arbor分期Ⅰ期24例，Ⅱ期6例，Ⅳ期2例；根据WHO分类PTCL-U（外周T细胞淋巴瘤,非特异性）占22例。结外NK／T细胞淋巴瘤，鼻型10例。初诊时PS状态（ECOG）为0～1者占96．7％（31，32）；有B症状者占37．5％（12／32）；结外侵犯〉1个部位者37．5％（12／32）：LDH增高者占28．1％（9／32）。23例患者采用化、放疗联合治疗，9例采用单纯化疗。化、放疗联合治疗和单纯化疗患者均采用标准CHOP方案化疗。结果化疗有效率为56．2％（18／32），其中CR率为37．5％（12／32）；23例化疗联合放疗的患者有效率为100．0％，其中CR率86．9％（20／23）。全组1年、3年、5年生存率分别为52．9％、41．2％、18.3％。化疗联合放疗组5年生存率高于单纯化疗组；局限在鼻腔（Ⅰ期）患者5年生存率高于有淋巴结转移及全身播散（〉Ⅰ期）患者。结论原发于鼻腔T细胞性NHL采用CHOP方案化疗疗效不佳，预后不良．联合放疗有助于改善预后。     

EB病毒感染儿童淋巴细胞亚群的变化

Epstein-Barr（EB）病毒感染是儿科常见的一种病毒性疾病，症状多变，病情轻重不一，可累及全身多个系统，可以出现典型的传染性单核细胞增多症及其他复杂的临床表现或隐性感染。细胞免疫在对EB病毒活化的监视和清除受感染的靶细胞中起着关键性作用。笔者应用流式细胞术对EB病毒感染儿童进行淋巴细胞亚群包括B细胞（CD19^＋），总T细胞（CD3^＋），辅助性T细胞（CD4^＋），细胞毒性／抑制性T细胞（CD8^＋），自然杀伤细胞（NKC，CD16＋56^＋）进行检测，以观察EB病毒对儿童免疫系统的影响。     

CD56在急性髓细胞白血病的表达及意义

目的：探讨CD56在急性髓细胞白血病（AM L ）患者中的表达及意义。方法采用多色流式细胞术对102例初诊A M L的患者进行免疫表型检测,分析CD56在A M L患者中的表达及其与其他分化抗原的相关性。结果102例AM L患者中,23例（22.5％）表达CD56。伴有淋系抗原表达的AML（Ly＋ AML）组CD56表达率高于Ly －AML组（χ2＝9．54,P＜0．01）,Pearson相关性分析显示,CD56的表达与伴淋系抗原的表达呈正相关（ r＝0．304,P＜0．05 ）,而与年龄、性别、CD7、CD34、CD117及人类白细胞抗原 DR 的表达无明显相关性。CD56＋ AML 组的完全缓解（CR）率低于CD56－AML组（42.1％ vs ．74.5％）（χ2＝6．91,P＜0．05）。多因素Logistic回归分析显示,CD56是影响AML 患者 CR率的独立危险因素（P＜0．05）。CD56＋ AML 的无病生存期（DFS）较CD56－AML短（χ2＝18．97,P＜0．01）。COX回归多因素分析结果提示,CD56是影响AML患者DFS的独立危险因素（P＜0．01）。结论 CD56＋ AML患者CR率明显降低,DFS明显缩短,预后较差。CD56可作为评估AML患者预后的指标。     

Different roles of IL-15 from IL-2 in differentiation and activation of human CD3+CD56+ NKT-like cells from cord blood in long term culture

The abundantly available source of stem cells and the low incidence of graft-versus-host disease (GVHD) made cord blood an attractive alternative source of hematopoietic stem cells for transplantation. Besides T cell and NK cell, NKT cell played an important role in low incidence of GVHD during allogeneic transplantation. IL-2 and IL-15 can stimulate T cell and NK cell proliferation, survival and activation in vitro. But they exhibited different effects on the GVHD during allogeneic transplantation. In this study, we explored the different effects of exogenous IL-2 and IL-15 on the expansion of CD3+CD56+ NKT-like cells by in vitro long term culture of cord blood mononuclear cells (CBMCs). The results showed that CD3+CD56+ NKT-like cells were derived from CD34-CD56- CBMCs and IL-2 improved CD3+CD56+ NKT-like cell expansion more strongly than IL-15. Interestingly, CD3+CD56+ NKT-like cells from IL-15-cocultured CBMCs had significantly lower apoptotic frequency and higher levels of activation markers (CD161, CD25, and IFN-gamma) than those from IL-2-cocultured CBMCs. The anti-apoptotic and activating effects of IL-15 on CD3+CD56+ NKT-like cells from CBMCs might possibly explain the pathogenic role of IL-15 in GVHD during allogeneic transplantation.     

自身免疫病患者外周血CD34+细胞动员、采集和纯化研究

目的：探讨自身免疫病患外周血造血干细胞动员、采集和纯化的效果及安全性。方法：对17例确诊自身免疫病患予环磷酰胺＋粒细胞集落刺激因子（G－CSF）动员外周血干细胞，CliniMACS系统对其中11例患外周血单个核细胞进行CD34^ 细胞阳性分选，流式细胞仪检测分选前后CD34^ 细胞纯度及淋巴细胞各亚群。结果：1例动员中并发尿崩症，2例动员失败。11例分选后CD34^ 细胞纯度平均96．1％，回收率70．14％；CD3^ 、CD19^ 、CD14^ 细胞分别去除10^3/kg,10^2/kg,10^3/kg。结论：对自身免疫病患采用环磷酰胺＋G－CSF方案动员外周血干细胞方法可靠，安全性好；外周血干细胞的纯化方法可获得高纯度和高回收率的CD34^ 细胞，并极大限度的去除T、B等细胞。     

消癌平注射液联合化疗对中晚期肺癌患者CD4~+CD25~+FOXP3~+调节型T细胞的影响

目的探讨消癌平注射液联合化疗对中晚期肺癌患者CD4+CD25+FOXP3+调节型T细胞的影响。方法 71例Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌患者随机分为治疗组与对照组,治疗组36例采用化疗联合消癌平注射液;对照组35例单独采用化疗,两组化疗均采用GP方案。完成2周期后,通过流式细胞仪测定两组患者治疗前后外周血中CD4+CD25+FOXP3+调节型T细胞比例。结果治疗后治疗组患者CD4+FOXP3+T细胞占CD4+T细胞及CD4+CD25+T细胞的比例分别为(6.2±2.4)%和(27.6±6.0)%,而对照组分别为(8.2±0.5)%和(32.1±7.6)%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD4+T细胞占总淋巴细胞的比例,治疗组较对照组明显提高(P<0.05)。结论消癌平注射液是一种较为理想的免疫增强剂,联合化疗可明显改善非小细胞肺癌患者的细胞免疫功能。     

The C3435T mutation in the human MDR1 gene is associated with altered efflux of the P-glycoprotein substrate rhodamine 123 from CD56+ natural killer cells.

P-glycoprotein (PGP) is a membrane protein which determines drug disposition in humans (e.g. digoxin). It is also expressed in various leukocyte lineages with highest expression in CD56+ natural killer cells. Recently, a polymorphism in exon 26 (C3435T) of this gene was shown to correlate with intestinal PGP expression and function in humans. Carriers homozygous for this polymorphism (TT) showed more than two-fold lower PGP expression and higher digoxin plasma concentrations compared to the CC group. However, it is not known whether this mutation in the MDR1 gene is also associated with altered PGP function in peripheral blood cells. We therefore assessed efflux of the PGP-substrate rhodamine 123 from CD56+ natural killer cells. Leukocytes were isolated from whole blood of 10 CC, 10 CT and 11 TT healthy Caucasian individuals. Using flow cytometry, rhodamine fluorescence was determined in CD56+ cells. Moreover, MDRI mRNA was quantified in leukocytes by real-time polymerase chain reaction. Subjects with CC genotype revealed a significantly lower rhodamine fluorescence (i.e. higher PGP function) compared to individuals with TT genotype (51.1 +/- 11.4% versus 67.5 +/- 9.5%, p < 0.01). Heterozygous individuals had an intermediate rhodamine fluorescence (61.4 +/- 6.3%). MDR1 mRNA normalized for cyclophilin was lowest in the TT population (1.29 +/- 1.01), intermediate in heterozygous subjects (1.60 +/- 0.76) and highest in the CC group (1.91 +/- 0.94; not significant). In summary, subjects being homozygous for C in position 3435 of the MDR1 gene have a more pronounced efflux of rhodamine from CD56+ natural killer cells and a higher MDR1 mRNA expression in leukocytes than subjects with the TT genotype. Measurement of rhodamine efflux using flow-cytometry from peripheral blood cells allows assessment of genetically determined differences in P-glycoprotein function.     

肿瘤干细胞标志物CD133和CD44在肾母细胞瘤中的表达及意义

目的 探讨肿瘤干细胞标志物CD133和CD44在肾母细胞瘤中的表达及其意义。方法 收集2010年1月至2017年10月在安徽省立医院未行放化疗而直接进行手术治疗的肾母细胞瘤患者手术切除组织标本,病理诊断同步进行免疫组织化学方法检测组织中CD133和CD44阳性信号强度和阳性细胞数目,计算免疫组织化学评分。同时收集临床病理参数,分析免疫组织化学评分与临床病理参数之间是否存在相关性。结果 共收集肾母细胞瘤患儿64例,其中男性30例,女性34例。年龄中位数为36个月,其中46例年龄≤36个月,18例年龄>36个月。肿瘤大小（最大直径）2～19 cm,中位数为6.5 cm,其中32例≤6.5 cm,另外32例>6.5 cm。58例表现为预后好的病理特征,6例表现为预后差的病理特征。根据NWTS的分期,24例为1期,26例为2期,4例为3期,8例为4期,2例为5期。免疫组织化学评分结果显示,44%（28/64）的标本为CD133阳性,13%（8/64）的标本为CD44阳性。CD133的免疫组织化学评分与肾母细胞瘤NWTS分期有正相关性（r=0.813,P<0.05）;在女童中CD133评分高于男童（P<0.05）;CD133评分与患者的年龄、肿瘤的大小及病理特征无相关性（P>0.05）。结论 CD133在肾母细胞瘤中高表达,其表达水平与肾母细胞瘤的发生及恶性程度存在关系。     

血清RF、 anti-CCP及14-3-3η蛋白联合检测对类风湿关节炎的诊断价值

目的 评价血清抗环瓜氨酸肽抗体 （anti-CCP）、 类风湿因子 （RF） 及14-3-3η蛋白联合检测对类风湿关节炎 （RA） 的诊断价值。方法 选取RA患者94例作为RA组， 年龄、 性别相匹配的疾病对照组和健康对照组各40例。采用酶联免疫吸附试验检测所有受试者的血清14-3-3η和anti-CCP， 散射免疫比浊法检测RF水平。将以上3个指标分别进行串联和并联试验， 采用敏感度、 特异度、 阳性预测值、 阴性预测值、 准确度及约登指数 （YI） 分析各试验方案对RA的诊断效能。结果 在anti-CCP、 RF及14-3-3η蛋白3个指标中， anti-CCP的准确度 （87.4%）、 YI （0.753） 最高， 同时敏感度 （84.0%） 也最高， 是最好的RA诊断指标； 双项目检测方案中， anti-CCP与RF并联的准确度 （87.4%） 和 YI （0.742） 最高， 同时敏感度 （90.4%） 也较高， 是较为理想的组合； 三项目检测方案中，［（14-3-3η+anti-CCP） /RF］、［（14-3-3η+RF） /anti-CCP］、［（14-3-3η/RF） +anti-CCP］ 和 ［（14-3-3η+anti-CCP） / （14-3-3η+RF） / （anti-CCP+RF）］ 的准确度 （87.4%、 87.9%、 87.4%、 87.9%） 及YI （0.745、 0.756、 0.757、 0.760） 在联合检测方案中较高， 而 ［（14-3-3η+anti- CCP） /RF］、［（14-3-3η+RF） /anti-CCP］ 和 ［（14-3-3η+anti-CCP） / （14-3-3η+RF） / （anti-CCP+RF）］ 的敏感度 （88.3%、 89.4%、 87.2%） 较 ［（14-3-3η/RF） +anti-CCP］ 的敏感度 （81.9%） 高， 是较为理想的组合。结论 在anti-CCP、 RF及14- 3-3η蛋白3个指标中， anti-CCP准确度、 YI和敏感度最高。联合检测方案 ［（14-3-3η+ anti-CCP） /RF］、［（14-3-3η+ RF） /anti-CCP］、［（14-3-3η+anti-CCP） / （14-3-3η+RF） / （anti-CCP+RF）］ 的准确度和YI较高， 兼有较高的敏感度。     

新辅助化疗前和化疗后乳腺癌组织中CD44+/CD24-/乙醛脱氧酶1细胞表型的变化及意义

目的 探究新辅助化疗(NAC)前后乳腺癌组织中CD44+/CD24-/乙醛脱氢酶1(ALDH1)+细胞表型的比例变化及其临床意义.方法 选取153例经空芯针穿刺活检明确病理诊断的乳腺浸润性导管癌患者为研究对象,临床Ⅱa～Ⅲb期,取NAC前后乳腺癌灶组织,应用免疫组织化学(IHC)单染及双染技术检测并比较化疗前后乳腺癌组织中ALDH1+、CD44+CD24-表型以及两者重叠表达的情况,并分析其与乳腺癌临床病理特征及化疗效果的关系.结果 NAC前患者乳腺癌组织中AL-DH1+/CD44+/CD24-表型的比例为7.2％,化疗后ALDH1+/CD44+/CD24-表型比例为22.9％,两者差异有统计学意义(χ2=14.737,P<0.001);化疗前CD44+/CD24-/ALDH1+表型的表达与肿瘤大小(χ2=5.889,P=0.015)、脉管癌栓(χ2=15.223,P<0.001)、HER-2(χ2=4.036,P=0.045)有显著相关性.NAC前表型为ALDH1+/CD44+/CD24-的患者NAC后有效率(81.8％)明显高于非ALDH1+/CD44+/CD24-表型的患者(45.4％)(χ2=5.748,P=0.017).结论 NAC可促进AL-DH1+/CD44+/CD24-的表型比例升高,ALDH1+/CD44+/CD24-的表型与化疗有效率相关,ALDH1+/CD44+/CD24-表型有可能可以作为预测乳腺癌患者NAC疗效的临床指标.     

CD34阳性细胞内部结构观察

目的利用电子显微镜以及原子力显微镜观察比较健康人和初发急性髓细胞白血病患者来源的CD34阳性细胞内部结构。方法将健康人和初发急性髓细胞白血病(M2b)患者各1例骨髓中提纯出来的CD34阳性细胞制成树脂包埋块,利用超薄切片机切成厚度为60nm的薄片,分别进行透射电子显微镜和原子力显微镜观察。结果研究对象纯化前CD34阳性细胞平均比例为(1．63±0．25)％,纯化后的平均比例为(95±2．4)％。电子显微镜和原子力显微镜均可观察健康人和初发急性髓细胞白血病患者的CD34阳性细胞内部结构,不能发现两种来源细胞有特异性差别。当原子力显微镜成像范围在10μm×10μm时,可分辨出核仁和部分细胞质内线粒体等细胞器;当原子力显微镜成像范围在2μm×2μm时,细胞内部结构变模糊,被细小的树脂颗粒所掩盖,不能分辨细胞结构。结论电子显微镜和原子力显微镜均可观察细胞的内部结构,不能发现健康人和初发急性髓细胞白血病患者两组来源的CD34阳性细胞内部有特异性差别,原子力显微镜观测细胞内部结构效果并不优于电子显微镜。     

过敏性紫癜患儿外周血CD4~+CD25~+CD127~-调节性T细胞表达及意义

目的探讨过敏性紫癜(schonlein-henoch purpura,HSP)患儿治疗前后外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达及其临床意义。方法采用免疫荧光流式细胞技术检测56例HSP患儿治疗前后及20例健康儿童外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值。结果 HSP患儿治疗前CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值明显低于治疗后组和正常对照组(P<0.01),HSP治疗后组CD4+CD25+CD127-调节性T细胞表达值与正常对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSP治疗前患儿外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达值较正常对照组明显降低,而在治疗有效后升高,说明调节性T细胞可能参与了HSP的发病和病情的发展。而CD4+CD25+CD127-Treg细胞水平的检测可作为对HSP患儿预后判断的一个有效指标。