ANA、ANCA、HLA-B27、anti-dsDNA在诊断免疫相关性葡萄膜炎中的价值

目的：探讨抗核抗体(ANA)、抗中性粒细胞胞质抗体(ANCA)、人类白细胞抗原B27(HLA-B27)、抗双链DNA抗体(anti-dsDNA)在诊断免疫相关性葡萄膜炎中的价值。

方法：选取70例免疫相关性葡萄膜炎患者,收集患者的临床资料,检测患者血清中ANA、ANCA、anti-dsDNA和外周血淋巴细胞HLA-B27的表达水平。

结果：男性患者年龄低于女性(t=2.845,P<0.05); 70例免疫相关性葡萄膜炎患者中,脊柱关节炎、原发性系统性血管炎、系统性红斑狼疮、原发性干燥综合征、类风湿性关节炎及幼年性特发性关节炎分别有42、12、6、5、4、1例,男女之间其中脊柱关节炎和系统性红斑狼疮比例差异有统计学意义(P=0.019、0.008)。ANA阳性率为16%(11/70),ANCA阳性率为10%(7/70),HLA-B27阳性率为59%(41/70),anti-dsDNA阳性率为6%(4/70); 其中,男性的ANA、ANCA、anti-dsDNA阳性率均低于女性(P<0.05),男性HLA-B27阳性率高于女性(χ²=4.427,P<0.05),差异均具有统计学意义。70例免疫相关性葡萄膜炎发病部位主要是前葡萄膜(49%)和全葡萄膜(46%)。ANA主要在系统性红斑狼疮(83%)和原发性干燥综合征(60%)中表达; ANCA在免疫相关性葡萄膜炎中均有表达(除外脊柱关节炎和幼年性特发性关节炎); HLA-B27主要在脊柱关节炎(93%)中表达; anti-dsDNA主要在系统性红斑狼疮(67%)和类风湿性关节炎(25%)中表达。

结论：ANA、ANCA、HLA-B27、anti-ds DNA的阳性率在不同免疫相关性葡萄膜炎的表现类型具有差异,对于免疫相关性葡萄膜炎的分类具有一定的辅助诊断作用。     

急性前葡萄膜炎的HLA-B27阳性与阴性患者的临床对比

目的:用微量淋巴细胞毒试验对急性前葡萄膜炎(acuteanterioruveitis,AAU)HLA-B27抗原基因进行检测,观察HLA-B27阳性与阴性患者的临床特征有无差异及临床意义。方法:用微量淋巴细胞毒试验对100例AAU患者进行HLA-B27检测,并随机抽取20例阳性和20例阴性AAU患者进行临床特征观察。结果:在100例AAU患者中HLA-B27阳性64例,阴性36例,分别抽取的20例经比较,HLA-B27阳性患者多见于男性,单眼多见,以粉尘状KP,发病时视力下降明显,易复发,且并发症多为其特征,激素治疗效果佳。结论:对AAU患者进行HLA-B27检测,对评价葡萄膜炎的病因和预后有一定价值。HLA-B27阳性与阴性患者的临床特征有一定程度差异。     

人类白细胞抗原与急性前葡萄膜炎的相关性

目的:探讨急性前葡萄膜炎(acute anterior uveitis,AAU)与人类白细胞抗原(human leucolyte antigen,HLA-B27)的相关性。方法:应用聚合酶链反应(sequence special prime polymer-ase chain reaction,SSP-PCR)基因检测技术,对AAU患者进行HLA-B27基因检测,观察HLA-B27阳性与阴性AAU临床特征并加以分析。结果:在36例AAU患者中,HLA-B27抗原阳性29例,阳性率81%,37例健康对照组,阳性9例,阳性率24%,两者有显著性差异(χ2=23.12,P<0.01)。结论:HLA-B27与AAU明显相关,HLA-B27阳性与阴性患者有一定程度的差异,常伴有全身脊柱关节病,采用SSP-PCR基因检测技术测定HLA-B27快速、简单、准确性高、客观性强,值得推广应用。     

蛋白酶活化受体2在葡萄膜黑色素瘤中的表达及对细胞增殖和侵袭的影响

目的：探讨蛋白酶活化受体2(protease-activated receptor 2,PAR2)在葡萄膜黑色素瘤(uveal melanoma,UM)中的表达,以及沉默人UM 细胞系M23中PAR2基因对细胞增殖和侵袭的影响。

方法：选取2012-02/2017-12在我院行手术治疗且资料完整的UM患者45例45眼,选取同期因眼部外伤行眼球摘除且葡萄膜正常的患者30例30眼,实时荧光定量PCR术检测UM和正常脉络膜组织中PAR2基因表达,培养M23细胞并分为PAR2干扰组、阴性对照序列组和空白组,实时荧光定量PCR技术检测细胞中PAR2基因表达,MTT法检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移和侵袭能力。

结果：UM组织中PAR2 mRNA相对表达量为1.73±0.13,正常脉络膜组织中PAR2 mRNA相对表达量为1.06±0.10,差异有统计学意义(t=23.732,P<0.01); UM组织中PAR2 mRNA相对表达量与病理学类型、巩膜浸润、视盘受累和眼外生长有关,差异有统计学意义(P<0.05); PAR2干扰组细胞中PAR2 mRNA相对表达量低于阴性对照序列和空白组,差异有统计学意义(P<0.05); PAR2干扰组细胞24、48、72和96h时吸光度A值低于阴性对照组和空白组,差异有统计学意义(P<0.05); PAR2干扰组迁移细胞数和侵袭细胞数低于阴性对照序列组和空白组(P<0.05)。

结论：PAR2在UM组织中呈高表达,且与肿瘤高转移风险有关,特异性沉默M23细胞中PAR2基因表达可有效抑制细胞增殖、迁移及侵袭。     

HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水细胞因子水平的研究

目的通过分析HLA-B27阳性急性前葡萄膜炎患者前房水中细胞因子的浓度,探讨急性前葡萄膜炎的发病机制。方法采用非随机对照临床观察型病例研究,选取2008年10月至2009年3月在我院眼科就诊的HLA-B27阳性前葡萄膜炎患者21例(21眼)为患病组,并选取同期住院行白内障手术的患者19例(19眼)为正常对照组。将所有入选病例通过酶联免疫技术测量前房水中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-10的浓度,并进行组间比较。结果TNF-α在患病组患者前房水中的浓度平均为(29.1±13.9)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(19.8±7.2)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.011)。IFN-γ在患病组患者前房水中的浓度平均为(36.6±27.5)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(14.6±12.9)pg.L-1,2组相比差异有统计学意义(P=0.003)。白细胞介素-10在患病组患者前房水中的浓度平均为(2.4±2.7)pg.L-1,而在正常对照组患者则为(3.3±3.9)pg.L-1,2...     

前葡萄膜炎患者外周血细胞因子的研究

目的:通过分析细胞因子的性质,旨在探讨前葡萄膜炎可能的发病机制。方法:取20例HLA-B27相关前葡萄膜炎患者、20例小柳原田患者外周血和正常人作为对照组,通过酶联免疫反应(ELISA)检测患者外周血IFN-γ,IL-4和IL-10的含量。结果:两组患者外周血IFN-γ的含量较正常人显著增高(P<0.05),且小柳原田患者外周血中IFN-γ含量显著高于HLA-B27相关前葡萄膜炎患者外周血中IFN-γ含量(P<0.05)。结论:前葡萄膜炎发病机制可能和对自身抗原诱发的Th1型免疫反应过强有关。     

Toll样受体4对HLA-B27相关前葡萄膜炎患者外周血单个核细胞分泌细胞因子的影响

目的通过对比正常人与HLA-B27相关前葡萄膜炎恢复期患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)受脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激及抗Toll样受体4(Toll like receptor4,TLR4)抗体(HTA125)干预后分泌细胞因子的变化,探讨TLR4在HLA-B27相关前葡萄膜炎发病机制中的作用。方法选取HLA-B27阳性前葡萄膜炎恢复期患者10例,相同性别及年龄段的HLA-B27阴性正常人10例作为对照。抽取研究对象外周血分为以下5组体外培养PBMC:(1)正常人非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(2)正常人LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(3)HLA-B27阳性患者非LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的PBS进行培养;(4)HLA-B27阳性患者LPS刺激组:加入终浓度为1mg·L-1的LPS进行培养;(5)HLA-B27阳性患者LPS+HTA125干预组:终浓度为5mg·L-1的HTA125预先干预PBMC 30 min后再加入1mg·L-1的LPS共同培养。分别于培养4h、8h、12h、24h后,利用ELISA法测定细胞培养上清液中的TNF-a、IL-10和(4)(5)组中IL-6的浓度。结果 LPS未刺激组,PBMC培养4h、8h、12h、24h后,HLA-B27阳性患者TNF-α浓度分别为(1329.46±155.09)ng·L-1、(1926.76±163.28)ng·L-1、(1424.61±141.63)ng·L-1、(526.98±112.29)ng·L-1,正常人分别为(562.83±106.45)ng·L-1、(839.57±73.98)ng·L-1、(559.60±88.48)ng·L-1、(200.81±51.39)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05);HLA-B27阳性患者PBMC培养8h、12h、24h后,IL-10浓度分别为(145.51±26.91)ng·L-1、(259.16±32.71)ng·L-1、(435.98±134.54)ng·L-1,正常人分别为(63.57±17.28)ng·L-1、(123.21±15.73)ng·L-1、(247.82±32.10)ng·L-1,两组各时间点相比差异均有统计学意义(均为P<0.05)。LPS刺激后,正常人与HLA-B27阳性患者PBMC分泌TNF-α和IL-10水平在各时间点均比LPS刺激前明显升高,且HLA-B27阳性患者升高更明显。HLA-B27阳性患者PBMC在LPS刺激后与LPS+HTA125干预组相比,后者各时间点分泌TNF-α、IL-10的水平均显著降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05),且HTA125干预组IL-6浓度在4h、8h时较单纯LPS刺激组低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。结论 HLA-B27阳性患者PBMC对LPS的刺激更加敏感,抗TLR4单克隆抗体能够抑制HLA-B27阳性患者PBMC分泌细胞因子的水平。     

配戴角膜塑形镜对泪液渗透压及炎症因子的影响

目的：观察配戴角膜塑形镜后的泪液渗透压及炎症因子水平变化。

方法：前瞻性随机对照试验。纳入2016-05/2019-02就诊的-1.00～-5.00D的79例青少年近视患者,随机分为角膜塑形镜组39例配戴角膜塑形镜及框架眼镜组40例配戴框架眼镜。随访观察患者治疗1a期间的平均非侵入性泪膜破裂时间(NIKBUTav)、泪液渗透压(TFO)、泪液白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)表达。

结果：角膜塑形镜组NIKBUTav及泪液TNFα戴镜6mo,1a、停戴后4wk与戴镜前有差异(P<0.001); TFO戴镜1、3、6mo,1a与戴镜前有差异(P<0.001); 泪液IL-1β及泪液IL-6戴镜3、6mo,1a与戴镜前有差异(P<0.001)。戴镜1a角膜塑形镜组NIKBUTav(8.54±1.92s)低于框架眼镜组(12.93±2.22s)(P<0.001),角膜塑形镜组TFO、IL-6、TNFα均高于框架眼镜组(P<0.01); 而IL-1β角膜塑形镜组(16.60±4.32ng/mL)和框架眼镜组(14.67±4.43ng/mL)无差异(P=0.053)。

结论：配戴角膜塑形镜后,NIKBUTav降低,TFO、IL-1β、IL-6、TNFα升高,但具有可逆性。     

NLRP3/IL-1β通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制

目的：探究核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)/白介素-1β(IL-1β)通路在增殖性糖尿病视网膜病变中的作用机制。

方法：收集2015-09/2018-03我院眼科收治的增殖性糖尿病视网膜病变患者49例49眼(研究组)和特发性黄斑裂孔患者41例41眼(对照组)。检测研究组患者视网膜增殖前膜与对照组患者黄斑前膜中NLRP3蛋白表达情况、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)水平与超氧化物歧化酶(SOD)活性,测定两组患者玻璃体中IL-1β与IL-18浓度。

结果：研究组患者视网膜增殖前膜中NLRP3蛋白阳性表达率明显高于对照组患者黄斑前膜(90% vs 5%,P<0.05),且研究组患者视网膜增殖前膜中ROS与MDA水平明显升高,而SOD活性明显降低。研究组患者玻璃体中IL-1β、IL-18浓度(30.84±7.15、97.61±15.73pg/mL)均明显高于对照组(4.63±0.92、52.07±11.38pg/mL)。

结论：NLRP3与IL-1β在增殖性糖尿病视网膜病变组织中呈高表达,NLRP3/IL-1β通路可上调炎性因子与氧化因子表达水平,促进疾病发展。     

急性前葡萄膜炎患者血清IL-35和TGF-β1表达水平及临床意义

目的:研究急性前葡萄膜炎患者血清IL-35、TGF-β1表达水平变化及两者之间的相关性,探讨IL-35、TGF-β1在急性前葡萄膜炎中的临床意义。方法:纳入2018-05/2019-05在甘肃省人民医院眼科确诊的急性前葡萄膜炎患者30例作为急性前葡萄膜炎组,同期进行体检的健康人30例作为健康对照组,采用ELISA法检测两组受检者血清IL-35、TGF-β1表达水平,并根据改良的EIU临床评分标准评估急性前葡萄膜炎严重程度。结果:急性前葡萄膜炎患者血清IL-35、TGF-β1表达水平显著高于健康对照组(均P<0.05),且急性前葡萄膜炎患者血清IL-35、TGF-β1水平与疾病严重程度无明显相关性(rs=0.087、0.044,均P>0.05),但血清IL-35与TGF-β1表达水平呈正相关(rs=0.637,P<0.001)。结论:血清IL-35、TGF-β1水平变化与急性前葡萄膜炎的发生和发展密切相关,可能在急性前葡萄膜炎中协同发挥免疫抑制作用。     

强直性脊柱关节病伴发葡萄膜炎的临床研究

目的探讨HLA-B27与强直性脊柱关节病（As）伴发葡萄膜炎发病的关系。方法应用SSP-PCR对正常人和患者进行HLA-B27抗原进行研究，并对患者的临床特征、影像学检查加以分析。结果强直性脊柱关节病伴发葡萄膜炎患者和对照组HLA．B。阳性率分别80．56％和24．32％（χ^2=23．12，P〈0．01），两者比较差异有显著性，X线有轻重不等的骶髂关节改变。结论采用SSP-PCR基因检测技术测定HLA-B27，快速、简单、准确性高，值得推广应用。HLA-B27，与强直性脊柱关节病伴发葡萄膜炎的关系密切。对原因不明的葡萄膜炎患者进行HLA-B27及影像学检查有助于早期发现强直性脊柱炎。     

TGF-β2体外抑制牛角膜内皮细胞增殖的研究

目的:观察体外不同浓度的转化生长因子β2(transforming growth factor-β2,TGF-β2)对牛角膜内皮细胞(bovine corneal endothelial cells,bCECs)的抑制作用,探讨其可能的分子机制。方法:培养新生小牛的角膜内皮细胞,将第3代内皮细胞转移至96孔培养板,实验分6组,每组设定4个复孔。1,2组分别为只含有培养液不含细胞和TGF-β2的空白对照组,和只含细胞和培养液不含TGF-β2的阴性对照组,3～6组分别加入含0.1,1,10,100ng/LTGF-β2的培养液。作用24,48,72h后用MTT检测法测定各孔吸光度A值。作用48h后,用流式细胞检测仪对各组细胞周期进行检测。RT-PCR法测定不同浓度的TGF-β2组p27Kip1基因的表达情况。结果:TGF-β2浓度为0.1～1ng/L,作用24～72h,能明显的使bCECs的吸光度发生改变,作用48h抑制效果最明显。0.1和1ng/L浓度组吸光度与阴性对照组相比有显著差异性,作用48h可使bCECs的G0/G1周期细胞所占比例与阴性组对比有显著差异,其p27Kip1表达较其他组明显增强。结论:0.1～1ng/L TGF-β2作用48h对bCECs具有显著增殖抑制作用,其抑制作用可能是通过上调细胞周期蛋白p27来实现的。     

HLA-B27抗原与前葡萄膜炎的相关性及其临床意义

探讨ＨＬＡ－Ｂ２７抗原与前葡萄膜炎的相关性及可能的意义。方法用多聚酶链反应（ＰＣＲ）和微量淋巴细胞毒试验对２０例伴有关节强直性脊椎炎（ＡＳ）的急性前葡萄膜炎（ＡＡＵ）、６７例ＡＡＵ、７０例慢性前葡萄膜炎和７０８个健康人进行ＨＬＡ－Ｂ２７分型。结果ＡＳ伴有ＡＡＵ和单纯的ＡＡＵ患者ＨＬＡ－Ｂ２７阳性率分别为７０％和４９．２５％,显著高于对照组（２．９７％,Ｐ〈０．００１）,慢性前葡萄膜炎患者中ＨＬＡ－     

27G微创玻璃体切除手术的发展及应用

自二十世纪初25 G、23 G无缝线玻璃体切除术的相继推出,已将我们带入玻璃体视网膜手术的微创时代约有10余年历史。与传统20 G三通道玻璃体切除术相比,25 G、23 G无缝线微创玻璃体切除术不仅缩小巩膜切口,而且还大大简化了手术程序,缩短了手术时间及降低了手术并发症。因此,在过去十余年时间里,越来越多的医生由传统的20 G玻璃体切除术转向25 G、23 G玻璃体切除术。但随着微创玻璃体切除术的普及,无缝线巩膜切口的相关并发症也随之增多。本着“越小越好”的理念,眼科学者开始研究下一代玻切手术,并且得益于不断更新换代的高速玻切机、高通量的照明光源、更精细的制造技术和清晰广角镜的发展,日本学者Oshima于2010年正式推出了27G玻璃体切除术。27 G玻璃体切除术较之前的微创玻璃体切除术切口更小,切割速率更高,带给眼底外科医生全新的体验。目前27 G甚至更细的玻璃体切除术尚处在继续革新之中,围绕其优缺点、适应证及未来发展也逐渐成为大家关注讨论的焦点。本文在此结合笔者27 G玻璃体切除术经验,对27 G微创玻璃体切除术玻璃体切除术进行了一个简要的综述。     

HLA-B27相关前葡萄膜炎的研究进展

HLA-B27阳性前葡萄膜炎是前葡萄膜炎最常见的类型,患者多为青壮年,反复发作,常引起一些并发症,严重影响视力,并可伴有其他系统性疾病。但其发病机制目前仍不清楚,尚无特效的治疗方法。近年来,建立了一些前葡萄膜炎动物模型,如内毒素诱导的前葡萄膜炎和HLA-B27转基因动物模型,并进行了一系列的研究。一些新的治疗方法在临床及动物实验中也取得了很好的疗效。就HLA-B27相关前葡萄膜炎的发病机制、流行病学、动物模型及一些新的治疗方法进行综述。     

合并成型性渗出的急性前葡萄膜炎与HLA-B27的相关性研究

目的 探讨急性渗出性前葡萄膜炎与HLA-B27的相关性。方法 对53例前房内出现成型性渗出的急性前葡萄膜炎（AAUPE）患者及61例前房内无成型性渗出的急性前葡萄膜炎（AAU）患者进行HLA-B27的检测,并结合临床表现加以分析。结果 成型性渗出的AAUPE患者的HLA-B27阳性率为100％,而无成型性渗出的AAU患者的HLA-B27阳性率仅为50.8％。二者有显著差异性（P<0.01）。两组HLA-B27阳性的病人强直性脊柱炎发生率分别为50.0％和42.9％。结论 结果进一步证实了HLA-B27与成型性渗出密切相关的论点。提示检测AAU患者HLA-B27的阳性率,发现成型性渗出裂隙灯检查似与血清法检测同样准确。     

Clinical features of ankylosing spondylitis associated with acute anterior uveitis in Chinese patients

AIM: To characterize the clinical features, diagnosis, treatment and prognosis of uveitis associated with ankylosing spondylitis (AS) in Chinese patients. METHODS: Two hundred and three patients with uveitis associated with AS followed-up in the Third Military Medical University Daping Hospital between 2005 and 2010 were retrospectively evaluated in this study. Complete ophthalmological examinations were evaluated at baseline and during the follow-up period. The gender, age, follow-up time, mean frequency of uveitis onset, and accompanying eye examination findings, history, demographical parameters were reviewed. All the patients presented complete clinical and radiologic (sacroiliac, lumbar, dorsal and cervical spine, knee, ankle, shoulder, hip, elbow) evaluation. HLA-B27 typing was also searched. RESULTS: There were 203 patients diagnosed with AS associated uveitis. All showed sacroiliac X-ray changes indicative of AS. There were 184 male and 19 female patients. The average age of patients was 35±12 (range 18–50). Mean follow-up period was 2.4 years (1-5 years). Acute anterior uveitis was the most common type of uveitis in both genders. 121 eyes presented unilateral involvement (55.2%), and 92 eyes presented bilateral involvement (45.3%) with onset alternately. 22 eyes occurred hypopyon, 16 eyes were found anterior vitreous cells, 7 eyes were noted reactive macular edema or exudation, 29 eyes presented posterior synechiae of iris, and 14 eyes presented cataract, 9 eyes presented secondary glaucoma, 2 eyes presented bend corneal degeneration and 1 eyes presented atrophy of eyeball. At the final visit, uveitis was well controlled in most patients. CONCLUSION: AS associated with uveitis in Chinese patients mainly manifests as acute anterior uveitis. A combination of corticosteroids with other mydriasis agents is effective for most AS associated with uveitis patients. In general, the prognosis is good in these cases.     

鼠青光眼模型中热休克蛋白27的表达及其作用

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)在鼠青光眼模型视网膜神经节细胞(RGCs)中的表达以及眼压对抗HSP27自身抗体的影响。方法:使用SPSS12.0软件将55只Wistar大鼠随机分为高眼压组(25只鼠)、sham对照(假手术)组(25只鼠)及正常对照组(5只鼠)。采用电凝鼠巩膜表面至少3组静脉及角膜缘周围血管,建立鼠青光眼模型。采用免疫组化和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法分别检测术后1,2,3,4及8wk视网膜中RGCs以及神经纤维层(RNFL)HSP27的表达、分布以及血清中抗HSP27抗体水平。结果:随着眼压升高及高眼压持续时间延长,高眼压组右眼RGCs中HSP27表达逐渐增强,与其左眼、sham对照组右、左眼和正常对照组右、左眼比较,差异均有统计学意义(P<0.001),且RNFL中也出现HSP27的表达。高眼压组血清中抗HSP27抗体水平在术后1wk轻度升高(P>0.05),随着眼压升高及高眼压持续至术后8wk,血清中HSP27抗体水平逐渐升高并稳定于较高水平,与sham对照组和正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:内源性HSP27表达增强可能在青光眼视神经病变中具有重要作用。