病毒性心肌炎抗心肌线粒体ADP／ATP载体抗体检测的临床意义

应用免疫转印技术检测３８例病毒性心肌炎患者血清中抗犬心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体，发现病毒性心肌炎患者血清中存在抗心肌线粒体３０千道尔顿多肽自身抗体，这种抗体的阳性率，患者组为２６．３％，正常组为０（Ｐ〈０．０１）。研究提示抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体可能是引起病毒性心肌炎患者心肌功能损害的原因之一。     

抗ADP／ATP载体抗体在特发性扩张型心肌病诊断中的应用

抗ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体在特发性扩张型心肌病诊断中的应用李玉华郑典梅陈荣庆陈宋明杨建鑫董继华林建华我们应用免疫转印技术，检测了特发性扩张型心肌病，冠状动脉硬化性心脏病（冠心病）、风湿性心脏病（风心病）和正常人血清抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体抗体（以...     

高效液相色谱法测定心肌组织腺苷酸及意义

心肌组织腺苷酸含量变化可反映心肌能量代谢状况，也是评价缺血心肌的损害和心肌保护效果的指标，本文叙述了用反相色谱法，采用二元溶液体系分离测定生物样品中ＡＴＰ，ＡＤＰ，ＡＭＰ等３种腺苷酸，二元溶液为５０ｍｍｏｌ／Ｌ磷酸钾缓冲液（ｐＨ６．０）；甲醇（９０：１０）在柱温为２５℃条件下等度洗脱能合ＡＴＰ，ＡＤＰ及ＡＭＰ标准品在１０ｍｉｎ内完全分离，犬心肌组织提取液听ＡＴＰ，ＡＤＰ，ＡＭＰ也能与杂质完全分离，     

体外培养Wilson病患者肝细胞铜转运研究

目的：探讨铜转运Ｐ型ＡＴＰ酶在离体肝细胞铜代谢及Ｗｉｌｓｏｎ病（ＷＤ）发病机制中的作用。方法ＷＤ患者和对照者离体培养肝细胞模型，经单用铜（１５ｍｇ／Ｌ）及铜加Ｐ型ＡＴＰ酶阻滞剂矾酸钠（１８．３９ｍｇ／Ｌ）、铜加Ｐ型ＡＴＰ酶激动剂长春新碱（０．５ｍｇ／Ｌ）孵育，差速离心分离肝细胞胞浆、溶酶体、线粒体和微粒体，在不同孵育条件下ＷＤ患者及对照组各亚细胞组分的铜含量分别对照分析。结果ＷＤ患者肝细胞各组的铜     

二磷酸果糖对老年大鼠缺血性急性肾功能衰竭的防护作用

缺血／再灌引起细胞线粒体功能明显减退，三磷酸腺苷（ＡＴＰ）合成减少，是导致急性肾功能衰竭（ＡＲＦ）的重要因素之一。老年肾对缺血／再灌损伤敏感，易发生ＡＲＦ，且预后差。已知１，６－二磷酸果糖（ＦＤＰ）对心、脑缺血损伤有保护作用。我们通过观察ＦＤＰ对不同年龄组缺血性ＡＲＦ大鼠的肾功能、线粒体功能的影响，发现ＦＤＰ对其肾功能（菊糖清除率ＣＩｎ）和线粒体功能（ＡＴＰ合成量）确有保护作用，且对老年大鼠的防护作用优于对青年大鼠的作用。提示ＦＤＰ对老年肾脏缺血性损伤有特殊意义。     

犬膈肌起搏后疲劳膈肌腺嘌呤核苷酸、SOD、MDA含量及线粒体改变

目的　探讨膈肌起搏后膈肌疲劳的发生机制。方法 电刺激犬膈神经复制膈肌疲劳模型，测定疲劳前后膈肌ＡＴＰ、 ＡＤＰ、ＡＭＰ、ＡＸＰ、ＳＯＤ、ＭＤＡ含量，同时观察膈肌线粒体的形态变化。结果　疲劳后ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＸＰ、ＳＯＤ含量低于疲 劳前，ＭＤＡ含量高于疲劳前，ＡＭＰ水平无显著差异。疲劳膈肌线粒体出现肿胀、嵴模糊、少数线粒体空泡变性等可逆性 变化。结论　隔肌细胞ＡＴＰ过度消耗及合成障碍，直接供能物质减少以及氧自由基对亚细胞结构损伤可能是隔肌起搏 后膈肌疲劳发生的原因。     

GIK对大鼠离体心脏能量代谢的影响

目的：探讨葡萄糖－胰岛素－氯化钾（ＧＩＫ）对离体作功心脏能量代谢的影响，方法：通过离体作功心脏模型，测定对照组，缺血再灌注组与ＧＩＫ防护组心肌三磷酸腺苷（ＡＴＰ），二磷酸腺苷（ＡＤＰ）与总腺嘌呤核苷酸（ＴＡＮ），能量负荷（ＥＣ），心肌膜Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性，线粒体钙含量，结果：缺血再灌注可明显降低ＡＴＰ，ＡＴＰ／ＡＤＰ，ＴＡＮ，ＥＣ及Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ活性，增加心肌线粒体     

抗心肌线粒体ADP／ATP载体抗原决定簇多肽抗体对大鼠心肌的损伤

用人工合成心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ载体（ＡＮＴ）多肽免疫大鼠，动态观察末次免疫后第１４、２８、４２天时大鼠血清抗体滴度及心功能变化，免疫电镜胶体技术观察免疫复合物在心、肝、肾的沉积。结果：ＡＮＴ多肽免疫组大鼠中有６３％产生了特异性抗体，心功能发生了抗体滴度相关性的降低，心肌纤维及线粒体上可见特异性免疫复合物沉积，对照组大鼠未产生特异性抗体，心、肝、肾中均地免疫复合物沉积。     

胆固醇酯转运蛋白的提纯和鉴定

目的：分离纯化人血清胆固醇酯转运蛋白（ＣＥＴＰ），为制备ＣＥＴＰ单克隆抗体和ＣＥＴＰ浓度测定提供物质基础。方法：制备无脂血清，用Ｂｕｔｙｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４ＦＦ、ＣＭ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００三步柱层析分离、纯化ＣＥＴＰ。结果：纯化的ＣＥＴＰ经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ与ＣＥＴＰ特异性单克隆抗体免疫反应和活性测定等鉴定证实为纯化ＣＥＴＰ。结论：经三步柱层析获得了纯化ＣＥＴＰ，得率约２５％，活性３０ｎｍｏｌ／（μｇ·ｈ）。     

解偶联剂（FCCP）与氰化钾（KCN）对禁食大鼠肝细胞酮体代谢的影响

目的：研究解偶联剂（ＦＣＣＰ）和呼吸链阻断剂氰化钾（ＫＣＮ）对禁食大鼠肝细胞酮体代谢的影响。方法：使用胶原酶法分离大鼠肝细胞，然后分６组比较ＦＣＣＰ和ＫＣＮ对β羟丁酸（ＢＯＨＢ）和乙酰乙酸（ＡＣＡＣ）以及ＡＴＰ水平的影响。结果：单独使用ＦＣＣＰ和ＫＣＮ可使肝细胞损伤而酮体生成减少，加入丙酮酸后，ＦＣＣＰ使酮体生成（Ｐ＞００５），ＢＯＨＢ／ＡＣＡＣ比率与对照组无显著差别（Ｐ＞００５），而ＡＴＰ则明显减少（Ｐ＜００１）；ＫＣＮ则使酮体生成增加（Ｐ＜０００１），且ＢＯＨＢ／ＡＣＡＣ比率显著增加（Ｐ＜００１），ＡＴＰ也显著减少（Ｐ＜０００１）。结论：ＦＣＣＰ和ＫＣＮ均为强力的ＡＴＰ合成抑制剂，但作用机制不同，加入丙酮酸后ＦＣＣ使ＮＡＤＨ／ＮＡＤ比率降低，以ＡＣＡＣ为主；ＫＣＮ则使ＮＡＤＨ／ＮＡＤ比率增加，故以ＢＯＨＢ为主。     

日本血吸虫多坐分子疫苗的制备及其抗原性的研究

为了制备足量、高纯度的供血吸虫保护性免疫力研究的多价分子疫苗。通过制备型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和电渗方法从日本血吸虫成虫分离纯化出２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ蛋白。经ＢＣＡ法检测蛋白含量，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测蛋白纯度和分子量，Ｗｅｓｔｒｎ－ｂｌｏｔ及ＥＬＩＳＡ检测其抗原活性。结果日本血吸虫成虫２８ＫＤ，３１／３２ＫＤ及９７ＫＤ三种纯化蛋白经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测均为单一条带并与所分离的蛋白分子量相符     

生脉注射液对扩张型心肌病的免疫抑制作用研究

应用间接微固相放射免疫法检测了原发性扩张型心肌病（ＩＤＣ）患者的抗心肌线粒体ＡＤＰ／ＡＴＰ转运蛋白（ＡＮＴ）自身抗体，发现抗ＡＮＴ抗体持异存在于ＩＤＣ患者，阳性率３７．５％（１８／４８），表明ＩＤＣ发病与自身免疫反应有关。在强心利尿、依那普利等抗心衰治疗基础上，加用生脉注射液４０ｍｌ／ｄ治疗１８例抗ＡＮＴ抗体阳性的ＩＤＣ患者一月后，１４例患者心功能明显好转，血压稳定；抗ＡＮＴ抗体效价下降，抑制性Ｔ淋巴细胞数量增加，表明在常规抗心衰治疗基础上加用生脉注射液治疗扩张型心肌病具有抑制自身免疫反应，改善心功能的好效果。     

人心肌肌球蛋白轻链的提取、纯化和电泳分析

用一种简便有效的方法，从１３０ｇ成人心室肌中先提职心肌肌球蛋白纯品３１８ｍｇ，再从中进一步分离和纯化得到肌球蛋白轻链１８ｍｇ。纯化肌球蛋白轻链的核酸含量＜０．０１％，基本不含有肌动蛋白、原肌球蛋白、肌钙蛋白及其它蛋白。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ显示，人肌球蛋白轻链１和轻链２的分子量为２４ｋＤ和２０ｋＤ。纯化猪心肌球蛋白的Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性为０．４６μｍｏｌＰｉ／ｍｇ／ｍｉｎ，其分离后的轻链亚基则无此活性。本文对人和猪的心室肌肌球蛋白轻链的电泳行为进行了分析。     

牛磺酸对缺血大鼠心肌细胞膜ATP酶活性的影响

研究缺血大鼠心肌细胞膜ＡＴＰ酶活性改变及牛磺酸的影响。给Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射异丙肾上腺素（ＩＳＰ５ｍｇ／ｋｇ）制造心肌缺血损伤模型，另一组在注射ＩＳＰ前３０ｍｉｎ腹腔注射牛黄酸２００ｍｇ／ｋｇ及对照组注射等量生理盐水。观测心肌细胞膜Ｋ＋·Ｎａ＋－ＡＴＰ酶，Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性，丙二醛（ＭＤＡ）含量及心肌钙含量。结果显示，缺血组Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｋ＋，Ｎａ＋－ＡＴＰ酶活性分别降低４８．２３％和４５．８５％（Ｐ＜０．０１），ＭＤＡ含量升高８０％（Ｐ＜０．０１），牛磺酸保护组未见显著性变化。并发现Ｋ＋、Ｎａ＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活性与ＭＤＡ含量之间有显著负相关（Ｐ＜０．０５）。结果提示，牛磺酸可通过抑制心肌ＭＤＡ生成，实现它对心肌细胞膜Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶和Ｋ＋·Ｎａ＋－ＡＴＰ酶活性的保护作用。     

“寒体”,“热体”大鼠肝线粒体能量代谢的研究

为探讨“寒体”、“热体”大鼠肝线粒体能量代谢的机制,通过测定３月龄ＳＤ雄性青性年大鼠掌温,将大鼠分为“热体”、“寒体”和对照组３组,采用氧电极法、荧光法、放免法等测定心率、肝线粒体呼吸功能、氧化酶活性、游离钙及ＭＤＡ浓度和肝Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性。结果：“热体”有较高的ＲＣＲ、Ｐ／Ｏ、ＯＰＲ和琥珀酸氧化酶、Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性,“热体”线粒体内游离钙较高,与“热体”线粒体功能微观     

糖尿病性肾病的评价指标

本文报告用未定时的尿标村测定了１０３例健康成人及６９例Ⅱ型糖尿病人尿中总蛋白，白蛋白及Ｎ－乙酰－β－Ｄ－氨基葡萄糖苷酶与肌酐比率，健康对照组以Ｘ＋１．６４ｓ作为参考值上限，ＵＴＰ为１０９．５ｍｇ／ｇｕｃ，ＵＡ为３８．７ｍｇ／ｇｕｃ，ＮＡＣ为１０．９ｕ／ｇｕｃ，６９例糖尿病人根据有无并发症及其程度分为一组，一组临床诊断无糖尿病并发症，ＵＴＰ和ＮＡＧ与对照组比较无显著差异，Ｐ〉０．０５，ＵＡ平均值显著     

ATP合酶旋转机制

ＡＴＰ合酶 (ＡＴＰＳｙｎｔｈａｓｅ)是细胞内ＡＴＰ生成的关键酶 ,定位于线粒体、叶绿体和一些细菌的膜上 ,当ＡＤＰ、Ｐｉ合成ＡＴＰ时 ,该酶可结合ＡＤＰ和ＡＴＰ ,并有水解ＡＴＰ的活性 ,还可反向泵出质子。目前 ,对ＡＴＰ合酶自身结构研究得比较深入 ,但其合成ＡＴＰ的机制尚未完全阐明。本文对ＡＴＰ合酶作用机制研究的新进展作一综述 ,并提出今后的目标和展望。1　ＡＴＰ合酶的结构用生化技术分离得的ＡＴＰ合酶由Ｆ0 、Ｆ1二部分构成。Ｆ0 是脂溶性的 ,嵌在膜内 ,作用是将质子梯度产生的能量导向Ｆ1。Ｆ1是水溶性的 ,突出于膜外 ,…     

ATP敏感性钾通道开放剂Cromakalim心脏保护机制的初步探讨

本工作用大鼠离体灌流心脏缺血再灌注损伤模型观察了ＫＡＴＰ通道开放剂克罗卡林（Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ,ＣＲＫ）的心脏保护作用。结果表明,ＣＲＫ能明显减少缺血再灌注损伤心肌的ＬＤＨ及蛋白的漏出（Ｐ〈０．０１）,降低脂质过氧化产物ＭＤＡ的含量（Ｐ〈０．０１）,心肌组织及心肌线粒体钙含量也显降低（Ｐ〈０．０１）。ＣＲＫ明显抑制心肌线粒本的最大＾４５Ｃａ＾２＋摄取量及摄钙速率。ＣＲＫ的上述作用均能被ＫＡＴＰ     

氯丙烯对鸡胚脑神经细胞钙稳态与能量合成影响的研究

进一步研究氯丙烯的中毒机理,探讨氯丙烯对神经细胞内钙稳态与能量合成的影响。方法：用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ、电子探讨针Ｘ线微区分析,ＡＴＰ生物分光分析等方法测定氯丙烯染毒后鸡胚脑神经细胞内游离Ｃａ＾２＋、钙百分含量及ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＳＭＰ含量的改变。结果随着氯丙烯浓度的增加,细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度、钙百分含量明显增加,细胞内ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ含量明显减低,细胞外ＡＤＰ、ＡＭＰ含量明显增高。结论氯     

LPS,PLA2及氧自由基对线粒体跨膜质子转运和H^＋—ATPase的 …

目的：研究细菌内毒素（ＬＰＳ）、磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）及自由基对质子跨膜转运及Ｈ＾２＋－ＡＴＰ酶的影响。方法：采用正常大鼠，制备线粒体、亚线粒体（ＳＭＰ），用ＳＭＰ与ＬＰＳ（１００μｇ／ｍｌ）、ＰＬＡ２（１０ｕ／ｍｌ）、ＦｅＳＯ４（ＶｉｔＣ（３０／９００μｍｏｌ／Ｌ）分别共同温育（３０℃，３０ｍｉｎ），用ＡＣＭＡ荧光淬灭法测定质子跨膜转运能力。线闰体与不同浓度ＬＰＳ、ＰＬＡ２和ＦｅＳＯ４／ＶｉｔＣ