重组人p53腺病毒注射液治疗喉癌的Ⅰ期临床试验及追踪观察

目的　评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)对喉癌患者的毒理、药理作用。方法将 12例各期喉癌患者随机平分成 3个剂量组 (1× 10 1 0 VP、1× 10 1 1 VP、1× 10 1 2 VP) ;局部注射rAd p5 3,1次 隔日× 5次× 2个疗程 ,经 3年以上的追踪 ,通过症状、体检 (含喉镜检查 )和实验室检查观察其副作用及临床疗效。结果　在 1× 10 1 2 VP组 1例患者出现自限性发热 ,余 11例无异常。所有患者在治疗后常规和重要脏器等检测值均在正常范围。rAd p5 3特异性抗体在治疗后 2～ 3周后转阳性 ;rAd p5 3治疗患者肿瘤组织p5 3蛋白表达明显增强 ;2例患者治疗后SIL 2R水平异常和T细胞亚群失调指标好转 ;所有患者随访 3年以上示无瘤生存。结论　rAd p5 3局部治疗喉癌安全、有效 ,具有广阔的临床应用前景。     

携带野生型p53基因的重组腺病毒载体的构建

应用同源重组方法成功地构建了携带野生型Ｐ５３基因的复制缺陷型重组腺病毒，通过光镜电镜、酶切、ＰＣＲ共扩增等方法证实了构建载体的正确性，并使常规的同源重组方法进一步改进，简化了载体构建的操作程序，结果准确，成功率高。本结果可用于以腺病毒为载体进行肿瘤、心血管疾病等基因治疗的研究。     

超声引导下瘤体内注射重组人p53腺病毒治疗晚期肝癌

目的 评价超声引导下瘤体内注射重组人 p53 腺病毒治疗晚期难治性肝癌的临床疗效及超声导入基因治疗的临床应用价值.方法 对 57 例晚期肝癌患者行超声引导下瘤体内注射重组人 p53 腺病毒(rAd-p53),每次剂量1×1012VP或2×1012VP,每周 1 次,4 次 1 疗程,治疗后选择完成 1 个疗程及以上,并符合基因治疗入选标准者 38 例,采用彩色多普勒超声(彩超)及病理学检查评估其临床疗效.结果 彩超结果示:肝脏肿块均有不同程度缩小,其中 4 例患者肿块缩小明显(>50%);16 例患者肿块周边和内部彩色血流信号减少或消失.大部分患者病情稳定,症状好转,一般状况改善,Karuafsky 评分明显提高[术前(55.79±11.30)vs术后(61.05±21.64),P<0.05].11 例患者行肝穿刺活检组织病理学检查,7 例可见肿瘤组织纤维化伴淋巴细胞浸润及肿瘤组织明显变性坏死.治疗的不良反应主要为一过性自限性发热.结论 超声引导瘤内注射既能控制肝癌基因治疗的靶向性,又能对基因药物疗效进行影像学评估,具有较高的临床应用价值.     

重组人p53腺病毒联合化疗治疗颈部转移癌的临床疗效观察

目的：观察重组人p53（rAd—p53）腺病毒配合化疗治疗颈部转移性癌的疗效及毒性反应。方法：选择2009年7月-2012年3月在本院接受今又生与化疗联合治疗的患者26例,均经病理组织学或细胞学确诊为颈部转移性癌。近期疗效评价参照实体肿瘤客观疗效评定标准,用B超测量治疗前后肿瘤大小变化;患者生活质量采用KPS评分标准。结果：本组病例在接受治疗后4周进行疗效评价：其中完全缓解（CR）9例,部分缓解（PR）12例,病情稳定（SD）2例,病情进展（PD）3例,总有效率（CR＋PR）为80．8％（21／26）,疾病控制率（CR＋PR＋SD）为88．5％（23／26）;21例患者的生活质量（QOL）得到改善,2例QOL稳定,3例QOL下降。rAd～p53最常见的不良反应为发热,多为自限性低热（37．3～38-3℃）,患者均能耐受。结论：使用rAd—p53局部注射与DF（氟尿嘧啶、顺铂）化疗联合应用方法治疗颈部转移性癌显示较好的疗效,临床使用安全,不良反应轻。     

重组人p53腺病毒注射液结合放射治疗鼻咽癌Ⅱ期临床试验观察

目的　观察重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)配合放疗治疗鼻咽癌 (NPC)的疗效及毒性反应。方法　 2 9例鼻咽鳞癌随机分成基因治疗 +放疗组 (GTRT) 16例和单纯放疗组 (RT) 13例。GTRT组患者应用rAd p5 3瘤内注射 1次 周× 8,放疗在rAd p5 3注射 3d后开始。两组放疗剂量和方法相同。结果　采用rAd p5 3注射液治疗 4周后 ,两组肿瘤平均缩小率分别为 71%± 18%和 4 9%±2 3% (P <0 0 0 1)。治疗 8周后 ,两组肿瘤平均缩小率分别为 95 %± 10 %和 80 %± 17% (P <0 0 0 1)。治疗结束 4周后 ,两组肿瘤完全消退率分别为 75 %和 15 % (P <0 0 1)。GTRT组有 3例患者治疗过程中出现自限性低热 ,余无明显毒副反应。结论　rAd p5 3配合放疗治疗NPC具有较好疗效 ,临床使用安全 ,不良反应轻微。     

重组人p53腺病毒注射液联合放射线治疗头颈鳞癌的Ⅱ期临床试验

目的　评价重组人p5 3腺病毒注射液 (rAd p5 3)联合放射线治疗头颈鳞癌的疗效及安全性。方法　自 2 0 0 1年 10月至 2 0 0 2年 9月 ,对 4 2例头颈鳞癌进行了rAd p5 3制剂结合放疗 (基因治疗加放疗 ,GTRT)对比单纯放疗 (单纯放疗 ,RT)的前瞻性随机对照Ⅱ期临床试验。患者被随机地分入结合治疗的GTRT组 (共 2 0例 )和作为对照的RT组 (共 2 2例 )。在GTRT组 ,每周 1次行瘤内注射rAd p5 3制剂 1× 10 1 2 病毒颗粒共 8次 ,同时结合放疗。两组都采用同样的常规放疗方案 ,每次 2Gy ,每周 5次 ,使原发灶和颈部转移淋巴结都达到 70Gy 35f 7～ 8w。观测病人的不良反应、血清抗腺病毒抗体水平和肿瘤变化。以CT对比分析GTRT组和RT组病人在 4 0Gy、70Gy及疗效确认时 (治疗后 2月 )肿瘤即刻反应率。结果　随机对比分析或自身对比分析结果都表明 ,rAd p5 3明显地提高了头颈鳞癌患者放疗的疗效 (P <0 0 5 )。随机对比结果表明 ,rAd p5 3对 4 0Gy放疗的增效倍数为 1 72 ,疗效确认时头颈鳞癌GTRT组CR率比RT组CR率提高 1 6 8倍。自身对比结果表明 ,rAd p5 3对 4 0Gy放疗的增效倍数为 1 6 9,疗效确认时头颈鳞癌GTRT瘤灶的CR率比自身RT瘤灶CR率提高 2 5 3倍。 2 0例头颈鳞癌患者接受多次rAd p5 3瘤内注射 ,除了出现一时性     

重组人p53腺病毒增强肝癌放疗敏感性的实验研究

目的 观察重组人p53腺病毒(recombinant human adenovinm p53,rAd-p53)联合放疗对肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 人肝癌细胞SMMC-7721荷瘤裸鼠18只,应用随机数字表法选取2只,1只瘤内注射rAd-p53,另1只注射PBS,注射后48 h处死动物取瘤,Western blot方法检测肿瘤P53蛋白表达;其余16只分为4组:对照组、单独放疗(IR)组、重组人pS3腺病毒(rAd-p53)治疗组和重组人p53腺病毒+放疗(rAd-p53+IR)联合治疗组.实验治疗第16天处死动物,绘制肿瘤生长曲线;光镜下观察肿瘤治疗后组织形态学变化;免疫组化S-P法检测Ki-67,TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡.结果 rAd-p53成功感染了肝癌裸鼠移植瘤细胞,并增强肝癌细胞P53蛋白的表达;rAd-p53+IR联合治疗组、IR组和rAd-p53治疗组的肿瘤生长抑制率分别为81.49%、30.74%和33.67%,其中rAd-p53+IR联合治疗组的肿瘤抑制最强(P<0.01).光镜下观察各治疗组的肿瘤组织均出现坏死,其中rAd-p53+IR联合治疗组肿瘤坏死较多;rAd-p53+IR联合治疗组肿瘤细胞表达Ki-67明显低于对照组、IR组和rAd-p53治疗组(P<0.01),而肿瘤细胞凋亡显著增加(P<0.01).结论 rAd-p53+IR联合治疗较单独放疗能显著抑制肝癌的生长,rAd-p53能增强肝癌对放疗敏感性.     

p53重组腺病毒载体的构建

目的　构建 p5 3重组腺病毒载体以研究 p5 3过度表达与腺病毒感染对细胞生长的影响 .方法　将 p5 3c DNA克隆到转移载体 p Ad CMV/ p5 3重组质粒 ,用该重组质粒及p JM1 7质粒共转染 2 93细胞获得重组腺病毒 ,PCR法筛选含p5 3c DNA的重组病毒 .结果　在挑选的 5个空斑中 ,有 4个含 p5 3c DNA阳性重组腺病毒 .p5 3重组腺病毒可感染 2 93细胞并在 2 93细胞内进行有效的复制 .结论　成功构建了 p5 3重组腺病毒 ,为进一步研究 p5 3重组腺病毒的功能提供了条件     

放疗联合p53腺病毒治疗中晚期宫颈癌近期疗效分析

目的 评价调强放疗联合重组人p53腺病毒注射液治疗中晚期宫颈癌的近期临床疗效.方法 46例中晚期宫颈癌患者随机分为治疗组(调强放疗联合p53基因治疗)21例和对照组(单纯调强放疗)25例.治疗组给予重组人p53腺病毒注射液瘤内注射每周1次,两组患者放疗剂量和放疗方法相同,治疗结束2个月后,复查评估治疗疗效;并于放疗前后刷取宫颈细胞,行DNA倍体定量分析,比较两组患者宫颈细胞DNA指数≥2.5的细胞个数.结果 治疗组完全缓解(CR) 13例(61.9%),部分缓解(PR) 6例(28.6%),有效率90.5%;对照组CR 7例(28%),PR 9例(36%),有效率64.0%;治疗组有效率明显高于对照组(P<0.05).DNA倍体定量分析放疗后治疗组与对照组差异有统计学意义(χ2=4.544,P=0.033).结论 影像学及DNA倍体定量分析结论一致,提示重组人p53 腺病毒联合调强放疗治疗中晚期宫颈癌近期疗效优于单独放疗组.     

食管癌内镜下注射重组人p53腺病毒联合化疗的临床疗效观察

目的 评价重组人p53(rAd-p53)腺病毒注射液联合化疗治疗中晚期食管癌的疗效观察.方法 对30例食管癌患者进行了rAd-p53内镜下注射联合化疗(基因治疗联合化疗,GTCT组)与30例食管癌单纯化疗(单纯化疗,CT组)的对照临床观察.在GTCT组,每周1次行内镜下注射rAd-p53制剂1×1012 VP/支共4次,同时结合化疗,口服替吉奥胶囊50mg,口服,2次/d,d1-14×4.两组所用的化疗方案相同.结果 GTCT组和CT组治疗4、8、12周后有效率(完全缓解+部分缓解)分别63％、77％、80％和33％、37％、39％,差异有统计学意义(P＜0.01).GTCT组在治疗过程中有24例出现自限性发热,其他无明显不良反应.结论 rAd-p53联合化疗治疗食管癌有较好疗效,临床使用安全,不良反应轻微.     

重组人p53腺病毒注射液治疗宫颈鳞癌的近期疗效评价

目的评估重组人p53腺病毒注射液(rAd-p53)治疗宫颈鳞癌的近期疗效和安全性。方法自2004年6月￣2005年12月,对13例宫颈鳞癌患者使用rAd-p53瘤内注射治疗,剂量为1×1012VP/ml,其中基因治疗联合化疗(GTCT组)6例,基因治疗(GT组)7例。观察病人的不良反应、肿瘤大小的变化、血清Cyfra21-1水平和免疫组化p53蛋白的变化。除1例Ⅳ期患者外,其余患者治疗后均行广泛全子宫切除和盆腔淋巴结清扫术,术后随访并对短期疗效进行评价。结果使用rAd-p53基因治疗后瘤灶明显缩小,其中完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)5例,稳定(SD)6例,进展(PD)1例。除自限性发热外,无明显毒副反应。结论rAd-p53瘤内注射治疗宫颈鳞癌是安全有效而且方便的。大大缩小了肿瘤体积,提高手术治愈率。     

重组p53基因腺病毒注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的临床疗效观察

目的观察重组p53基因腺病毒（rAd-p53）注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的临床疗效。方法45例恶性胸水患者均行胸腔穿刺彻底引流后通过胸腔闭式引流管灌注rAd—p53,用量为1×1012VP×2支,4周后根据胸水量的变化进行疗效评价。结果45例患者中完全缓解（CR）20例,部分缓解（PR）19例,稳定（SD）4例,进展（PD）2例,总有效率达86．7％（39／45）。达到CR的20例病人中,有16例病人胸水在3个月内没有再出现。各肿瘤病种之间没有差异。所有患者主要副反应为自限性发热,体温在37．5℃～39．1℃之间,12h～24h后均可自行恢复正常。结论rAd-p53注射液胸腔灌注治疗恶性胸水的有效率高、疗效确切、副作用可以耐受,值得临床进一步应用观察。     

重组人腺病毒p53提高肺腺癌放射敏感性的实验观察

目的:评价重组人腺病毒p53(rAd-p53)注射液对肺腺癌A2细胞系放射敏感性的影响。方法:实验分空白对照组(C组)、照射组(R组)、加药组(D组)、照射加药组(R D组),利用单击多靶数学模型拟合辐射剂量效应曲线,应用细胞克隆形成实验观察各组细胞存活情况,应用流式细胞仪技术分析各组细胞周期分布和细胞凋亡率。结果:R组与R D组平均致死剂量(D0)分别为1.26Gy、0.45Gy,准阈剂量(Dq)分别为3.37Gy、1.05Gy;两组放射增敏比SERD(0D0之比)为2.8,SERD(qDq之比)为3.21;流式细胞仪结果提示R D组G2/M期细胞比例及细胞凋亡率增加最明显(P<0.05),二者之间存在正相关关系(rs=0.989,P<0.05)。结论:rAd-p53对体外培养的肺腺癌A2细胞具有放射增敏作用。     

重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤30例疗效观察

目的：观察重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤的可行性。方法：鼻咽癌颈部肿瘤患者60例分为观察组与对照组，每组30例，两组患者均接受放疗，观察组给予重组人p53腺病毒注射液，对两组患者进行一定护理。结果：观察组显效率为70％，有效率为30％。对照组显效率为17％，有效率为63％，两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：通过重组人p53腺病毒注射液治疗颈部肿瘤，进行心理护理、健康教育等正确的护理措施，使患者积极主动配合治疗，保证了治疗计划顺利进行，提高了中晚期鼻咽癌患者的治疗疗效和生存率。