夫西地酸对葡萄球菌体外抗菌作用研究

目的评价夫西地酸对临床分离葡萄球菌的体外抗菌作用及影响因素。方法以琼脂二倍稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度，棋盘法测定联合抗菌作用并以杀菌曲线测定夫西地酸杀菌特征。结果对临床分离的359株葡萄球菌MIC测定结果显示夫西地酸对苯唑西林耐药葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0．25～1及1～8mg／L；对苯唑西林敏感葡萄球菌MIC50及MIC90值分别为0．25—0．5及0．5—1mg／L；抗菌活性与万古霉素、替考拉宁相似或稍强，93．16％的葡萄球菌对夫西地酸敏感，耐药菌主要为凝固酶阴性葡萄球菌；未发现万古霉素耐药葡萄球菌，但3．62％细菌对替考拉宁耐药。夫西地酸与亚胺培南、帕尼培南和美罗培南3种碳青霉烯类抗生素联用具有协同或相加作用，其中协同作用分别为87．5％、70．83％和43．75％，无拮抗作用；糖肽类药物与碳青霉烯类药物联用以协同与相加效果为主。夫西地酸对苯唑西林耐药和敏感葡萄球菌杀菌作用迅速，但杀菌作用在较高浓度时并没有进一步提高杀菌速度，提示该产品可能属于非浓度依赖性抗菌药物。结论夫西地酸对各种葡萄球菌，包括耐苯唑西林葡萄球菌，具有良好抗菌作用，其抗菌作用可能属于非浓度依赖性；夫西地酸与碳青酶烯类抗生素联用具有明显协同抗菌效果。     

耐甲氧西林金葡菌的头孢西丁检测法与耐药性分析

目的评价头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林金葡菌（MRSA）的效果．了解MRSA的耐药状况。方法用头孢西丁及苯唑西林纸片扩散法、mecA基因聚合酶链反应（PCR）检测MRSA．并以mecA基因PCR法为参考方法与头孢西丁及苯唑西林纸片扩散法检测MRSA进行比较分析。按CLSI（原NCCLS）规定的标准测定MRSA对青霉素等10种抗生素的耐药率（KB法）。结果95株金葡菌（SA）中mecA基因阳性株42株。头孢西丁纸片法筛选出40株MRSA，其中39株mecA基因阳性，方法特异性为97．5％，灵敏度92．9％；苯唑西林纸片法筛选出44株MRSA，其中36株mecA基因阳性．方法特异性为81．8％．灵敏度85．7％。MRSA对青霉素、苯唑西林100％耐药，对万古霉素全部敏感．对红霉素、头孢唑林、克林霉素、氨苄西林／舒巴坦、头孢呋辛、左氧氟沙星、奈替米星呈不同程度耐药。结论头孢西丁纸片扩散法检测MRSA特异性和灵敏度优于苯唑西林纸片扩散法。MRSA具有多重耐药性．须加强其对抗生素的耐药性监测。     

金黄色葡萄球菌耐消毒剂基因qacA的研究

目的 检测我院近年来临床分离的金葡菌耐消毒剂的qacA基因水平，为动态监测细菌耐药性的变化趋势、有效控制细菌耐药性的传播提供对策。方法 收集我科临床分离的金葡菌共252株，并经本实验室重新鉴定确认。参照美国CLSI／NCCLS标准，用6μg／ml苯唑西林和4％NaCl平板，筛选出耐苯唑西林金葡菌和对苯唑西林敏感的金葡菌。应用PCR基因扩增试验检测金葡菌中耐消毒剂的qacA基因水平。随机抽取一株MRSA阳性株进行基因测序，作qacA基因验证。作qacA基因阳性株的MIC检测，了解阳性株是否有耐药性的表达。结果 共检测金葡菌252株，其中MRSA84株（带有qacA基因4株），MSSA168株（带有qacA基因1株）。MRSA阳性菌株对消毒剂的MIC值明显高于MSSA菌株。结论 携带含有耐消毒剂基因qacA的金葡菌未在我院流行．     

注射用法罗培南钠对金葡菌的体内外抗菌活性研究

目的研究注射用法罗培南钠对临床分离的金葡菌的体内外抗菌活性。方法用头孢西丁纸片法在近年来本室保存的临床分离金葡菌中筛选耐甲氧西林的金葡菌（methicillin resistant staphylococcus aureus，MRSA），用琼脂平板稀释法测定法罗培南和万古霉素对甲氧西林敏感的金葡菌（methicillin sensitive staphylococcus aureus，MSSA）和MRSA菌株的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration．MIC）。根据MIC选择对法罗培南敏感、中度和高度耐药的MRSA菌株及1株MSSA建立小鼠腹膜炎模型，以注射用法罗培南钠及万古霉素通过静脉注射进行感染动物的治疗，评价对感染小鼠的保护作用。结果151株金葡菌中共分离出65株MRSA．阳性率为43％；体外试验法罗培南和万古霉素对86株MSSA均敏感。65株MRSA对法罗培南敏感者10株，其余均耐药；对万古霉素均敏感。注射用法罗培南钠对4株菌的ED50分别为38．3、38．6、71．9和7．07mg／kg；万古霉素则为2．25、10．18、20．85和1．77mg／kg。结论注射用法罗培南钠对MSSA有良好的体内和体外抗菌活性；注射用法罗培南钠对MRSA无效．即使体外敏感。     

长春市金葡菌耐药状况及耐甲氧西林金葡菌基因分型

目的调查长春地区临床分离金葡菌的耐药状况及Panton—Valentine杀白细胞素（PVL）分布情况；确定耐甲氧西林金葡菌（MRSA）染色体及葡萄球菌me~盒式染色体（SCCmec）基因分型。方法琼脂稀释法测定苯唑西林等17种抗菌药物对2004年6月～2005年1月长春市3家教学医院临床标本分离的83株金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）；聚合酶链式反应（PCR）进行金葡菌的PVL基因检测；脉冲场凝胶电泳（PFGE）对MRSA菌株作染色体同源性分析。多重PCR方法检测MRSA的SCCmec基因分型。结果83株金葡菌中MRSA12株（占14．5％）；金葡菌PVL的基因阳性7株（占8．4％）。MRSA对β-内酰胺类、红霉素、克林霉素、庆大霉素、四环素、氟喹诺酮类耐药率均超过90％，对氯霉素、利福平耐药率分别为8．3％、58．3％。未发现对糖肽类及复方磺胺甲嗯唑耐药的MRSA。甲氧西林敏感金葡菌（MSSA）对青霉素G、红霉素、克林霉素、四环素、庆大霉素耐药率分别为95．8％、67．6％、49．3％、45．1％、26．8％，对头孢菌素、氯霉素、利福平、氟喹诺酮类、复方磺胺甲曙唑耐药率均低于20％。MRSA的PFGE显示为A、B两种类型，以A型为主，占92％（11／12），三家医院均有分布。MRSA的SCCmec分型．Ⅲ型为主75％（9／12）。结论长春市MRSA发生率低于国内报道平均水平；MRSA为两种不同类型克隆株，在不同医院间存在克隆传播；未发现社区获得性MRSA菌株。     

Mohnarin 2006-2007年度报告：革兰阳性菌耐药监测结果

目的了解我国细菌感染患者革兰阳性致病菌耐药状况。方法采用纸片法、MIC法或E-test法测定细菌对抗菌药物敏感性,用WHONET5.4软件进行数据分析,对卫生部全国细菌耐药性监测网(Mohnarin)所属84家三级甲等医院2006年6月1日~2007年5月31日分离的革兰阳性细菌药物敏感性结果进行分析。结果1共收集革兰阳性菌28741株,包括葡萄球菌18689株,肠球菌6878株,链球菌2767株和其它革兰阳性菌407株;2头孢西丁耐药的金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为61.6%和83.8%,未发现对万古霉素耐药的金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌;3用1μg的苯唑西林纸片计算肺炎链球菌对青霉素的不敏感率为56.9%;4粪肠球菌和屎肠球菌中分别有1.3%和3.4%对万古霉素耐药,1.2%和3.2%对替考拉宁耐药;5革兰阳性球菌对大环内酯类耐药明显。结论我国革兰阳性菌耐药呈明显上升趋势,青霉素不敏感肺炎链球菌、MRSA检出率高;革兰阳性球菌对大环内酯类耐药明显。     

利奈唑胺、万古霉素对甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌的防耐药突变体选择浓度的研究

目的：比较利奈唑胺、万古霉素对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的防耐药突变选择能力;研究防耐药突变体选择浓度（MPC）和最低抑菌浓度（MIC）的相关性。方法：采用琼脂微量稀释法测定利奈唑胺、万古霉素对35株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）临床分离菌株的MPC和MIC;采用线性回归法比较利奈唑胺、万古霉素对MRSA的MPC和MIC的相关性;结合人体药代动力学数据,预测利夺唑胺、万古霉素对MRSA的防耐药突变体选择能力。结果：利奈唑胺、万古霉素对35株MRSA的MPC90值（抑制90％的细菌发生细菌耐药的最低防耐药突变体选择浓度）分别为16.8μg／mL,选择指数（MPC90／MIC90）均为8。两药对MRSA的MPC和MIC的线性相关系数R^2分别为0．32和0．008。结合两药药代动力学参数,利奈唑胺药物浓度在整个给药间隔落在耐药突变选择窗理论（MSW）中,万古霉素药物浓度在大部分给药间隔落在MPC之上。结论：万古霉素对MRSA的防耐药选择能力强于利奈唑胺;MPC和MIC的相关性差。     

异质性耐万古霉素溶血葡萄球菌的抗生素后效应研究

目的检测万古霉素对异质性耐万古霉素溶血葡萄球菌（heterogeneous-vancomycin-resistant Staphylococcus haemolyticus,h-VRSH）的抗生素后效应（postantibiotic effect，PAE），探讨h-VRSH的存在对万古霉素体外杀菌活性的影响。方法采用微量稀释法检测金葡菌标准菌株ATCC29213和h-VRSH（原代培养）的最低抑菌浓度（MIC），以菌落平板计数法检测最低杀菌浓度（MBC）和PAE；分析万古霉素对h-VRSH耐药性产生的影响，以及这种耐药性的稳定性。结果金葡菌ATCC29213的MIC和MBC分别为1和16μg／ml，h-VRSH（原代）的MIC和MBC分别为2和64μg／ml；两者PAE分别为0．9和2．4h。结论与敏感菌株不同，h-VRSH的PAE明显延长；原代培养MIC为2μg／ml的h-VRSH其MBC可达到64μg／ml，高于万古霉素有效血药浓度峰值（20～40μg／m1）。提示单独使用万古霉素已经不能完全清除h-VRSH，葡萄球菌对万古霉素的异质性耐药不容忽视。     

MRSA表面标志物PBP2a的检出与苯唑西林MIC的相关性分析

目的研究MRSA表面标志物PBP2a与苯唑西林MIC的相关性。方法收集62株金黄色葡萄球菌临床分离株,通过乳胶凝集试验和全自动细菌分析仪分别检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)和苯唑西林MIC值。结果62株金葡中32株PBP2a检测阳性,30株PBP2a检测阴性。苯唑西林MIC≥4μg/ml31株,苯唑西林MIC≤2μg/ml31株。在苯唑西林MIC≥4μg/ml的31株MRSA中30株PBP2a检测均为阳性。结论金黄色葡萄球菌耐苯唑西林的耐药水平与PBA2a的检出有较好的相关性。     

1330株临床分离革兰阳性菌耐药性分析

目的 了解临床分离的革兰阳性菌对不同抗菌药物的耐药情况,为临床医师及时提供抗生素的耐药动向与耐药变迁为临床抗感染治疗提供选药依据.方法 用苯唑西林检测葡萄球菌临床分离株的敏感性,用纸片扩散法检测革兰阳性菌对四环素、红霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、环丙沙星、头孢吡肟、复方磺胺甲噁唑、万古霉素、替考拉宁、利福平、克林霉素等抗菌药物的耐药结果.用E-test法检测对苯唑西林耐药的肺炎链球菌青霉素的MIC值.结果 1330株革兰阳性菌中耐甲氧西林的葡萄球菌对抗菌药物的耐药率显著高于对甲氧两林敏感的葡萄球菌.肠球菌属以粪肠球菌和屎肠球菌检出率最高,粪肠球菌对呋喃妥因、氨苄西林耐药率较低,屎肠球菌耐药性较强,仅对氯霉素、四环素耐药率较低.肺炎链球菌对四环素、克林霉素、红霉素有较高的耐药率,青霉素不敏感肺炎链球菌(PNSSP)的E-test检测结果以中介菌株为主,PNSSP的MIC值最高达到6μg/mL.结论 葡萄球菌、肺炎链球菌对万古霉素全部敏感,有仅发现1株耐万古霉素的屎肠球菌,万古霉素是临床治疗重症革兰阳性菌感染的首选药物.加强耐药性监测对指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义.