光动力疗法治疗鲜红斑痣1216例临床分析

目的：分析比较血啉甲醚（HMME）与血卟啉衍生物（HpD)为光敏剂行光动力疗法（PDT）鲜红斑痣的临床疗效及副反应。材料与方法：鲜红斑痣患者1216例,粉红型13．2％,紫红型68．3％,增厚型18．4％。静脉注射HpD或HMME3－7mg/kg后给予铜蒸气激光、KTDS／532激光或氩离子激光照射,功率密度50－100mW/cm^2,能量密度90－540J／cm^2,随访观察。结果：HMME－PDT和HpD－PDT对各型鲜红斑痣均能有效地消除病变颜色,所随访的1632个病灶在2个月至9年的随访期内末见复发。治疗后反应有：局部水肿5－7天,部分患者有结痂或一过性色素沉着,皮肤暂时性光过敏反应。HpD－PDT组避光期30－90天,HMME－PDT组占光期7－14天,与HpD－PDT相比,HMME－PDT具有反应轻、愈合快、不衣反应少,安全度大、避光期短、色素沉着轻、护理容易、重复治疗间隔期短的特点。结论：HMME－PDT与HpD－PDT都能有效治疗各型鲜红斑痣,但HMME－PDT具有不良反应少、安全度大,避光期短、护理容易、重复治疗间隔期短等优点。     

血啉甲醚对体外培养的类风湿关节炎滑膜细胞光动力杀伤作用的初步研究

探讨血啉甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether,HMME)对体外培养的类风湿关节炎患者滑膜细胞的光动力杀伤作用。方法：用四唑盐化色法（MTT）检测了不同能量的铜蒸气激光,不同浓度的HMME对体外培养的类风湿关节炎滑膜细胞的杀伤效应,并与血卟啉衍生物（hematoporphyrin derivative,HpD)进行比较。结果：（1）单纯照光及单加HMME,HpD对细胞存活率均无明显抑制作用。（2）各种浓度的HMME在不同剂理的激光作用下对细胞均有杀伤作用,浓度越高其杀伤作用越明显;HMME浓度一定,随着照光剂量的增大杀伤作用增强;不同浓度HMME介导的光动力杀伤作用所能产生的最大抑制率不同,此时所需的光剂量也不同。（3）HMME介导的光动力效应对滑膜细胞的杀伤作用受照光前孵育时间的影响。（4）相同浓度的HMME介导的光动力杀伤效应较HpD更强。结论：HMME介导的光动力效应对滑膜细胞的杀伤作用受光敏剂的浓度及照光能量密度的影响,且明显强于HpD,临床应用于滑膜切除术可能具有更大的优势。     

光动力治癌新药血卟啉单甲醚（HMME）的研究

本文报道了一种单体卟啉血卟啉单甲醚的合成及其光敏化力、人癌细胞光灭活作用、动物移植瘤光动力疗效和有关的临床前药理毒理学研究资料。实验结果表明,与临床应用的混合卟啉制剂血卟啉衍生物(HpD)相比,HMME具有光敏化力强、肿瘤选择性摄入率高、光动力效应强、毒性低、无致突变和致畸胎作用等优点,是一种较理想的光动力治癌新药。     

光动力疗法治疗鲜红斑痣的基础研究—血啉甲醚与血卟啉衍生物吸收特性的比较

目的　观察新型光敏剂——血啉甲醚(HMME)在鸡冠皮肤组织和血管内皮细胞(EC)的吸收特点。 方法　莱亨鸡12只,分为HMME组和血卟啉衍生物(HpD)组,每组6只。分别静脉注射HMME或HpD10mg/kg,每隔10min取血2.5ml和鸡冠皮肤组织2.5g。培养新生儿脐带EC,培养液中加入HMME或HpD,孵育浓度分别为20、40、60、80和100 μg/ml,孵育时间为即刻、15、30、60、120、180和240min。采用荧光分析法测定光敏剂含量,并绘制EC吸收光敏剂的浓度—含量和时间—含量关系曲线。 结果　静脉注射HMME或HpD后,其血清浓度的峰值出现在注射后10min,以后随时间迅速下降,二者的曲线形态基本一致。HMME在鸡冠组织中的含量于注射后10min显著高于HpD（P＜0.01）,以后虽然下降速率较快,但在注射后80min仍显著高于HpD（P＜0.05）。培养EC可迅速吸收HMME和HpD,30min达峰值的89%以上;其吸收量与孵育浓度呈线性关系,对HMME的吸收量显著高于HpD（P＜0.01）。 结论　HMME较HpD更容易被皮肤微血管EC摄取,这将有利于鲜红斑痣的治疗。     

血啉甲醚与血卟啉衍生物对鸡冠皮肤光敏损伤特点的比较研究

目的：采用形态学方法观察比较国产新型光敏剂－血啉甲醚（HMME）与传统光敏剂－血卟啉衍生物（HpD)对鸡冠表皮层、真皮乳头层毛细血管网、乳头下网状层和真皮深层组织的光敏损伤特点。方法：成年莱亨鸡234只,随机分为对照组42只,实验组192只。实验组动物静脉注射HMME或HpD1、5、10或20mg/kg,于给药后即刻、1、2、3或4h对鸡冠进行激光照射,波长为488．0和514．5、510．6、578．2或627．8nm,功率密度为50、100或150mW/cm^2,能量密度为30、60、90、120、150、180或270J/cm^2,于照射后即刻、1、3、7、14和28天取材,进行大体和光镜观察。结果：PDT作用区的红色鸡冠安全变白,乳头层毛细管肉皮细胞（EC）坏死,管壁破坏及血管数量减少,其作用程度与光敏剂给药量和激光照射量相关。HMME和HpD对乳头层毛细血管的损伤程度相似;HMME组未见皮及乳头下各层损伤,而部分HpD组见表皮基底细胞层有局灶性坏死、乳头下网状层有微血管及结缔组织损伤和淋巴细胞浸润。结论：HMME和HpD对鸡冠真皮乳头层毛细血管肉的损伤程度相似,但HMME的组织选择性优于HpD.     

血卟啉单甲醚在血管内皮细胞和角质形成细胞的亚细胞定位及光动力治疗作用点

目的探讨血卟啉单甲醚（hematoporphyrin monomethyl ether,HMME）在血管内皮细胞系ECV304和角质形成细胞系HaCaT的亚细胞定位及光动力疗法的作用点。方法 HMME与ECV304和HaCaT分别孵育1和18 h,选择特异性细胞器荧光探针分别标记线粒体、核膜、细胞膜和过氧化物酶体,应用共聚焦显微镜观察孵育1和18 h时HMME与细胞器的结合率;HMME与ECV304和HaCaT分别孵育20 h,细胞器荧光探针选择同前,给予532 nm连续激光照射,分别在照光前后采集上述细胞器中HMME的荧光强度,比较照光前后HMME的漂白率。结果 HMME与细胞器的结合率结果示,ECV304孵育1 h时线粒体、核膜、细胞膜、过氧化物酶体HMME的结合率分别为1.18±0.18、0.72±0.21、0.95±0.24、0.68±0.15,孵育18 h时上述4种细胞器HMME的结合率分别为1.35±0.13、0.83±0.11、0.73±0.13、0.91±0.15;HaCaT1 h组孵育1 h时上述4种细胞器HMME的结合率分别为1.09±0.12、0.66±0.20、0.92±0.24、0.77±0.16,孵育18 h时上述4种细胞器HMME的结合率1.13±0.13、0.86±0.12、0.72±0.14、1.1±0.20。HMME在线粒体、核膜、细胞膜、过氧化物酶体的漂白率结果显示,ECV304分别为（18.22±3.53）%、（10.77±2.06）%、（7.44±1.06）%、（8.56±3.51）%,HaCaT分别为（11.90±1.46）%、（5.02±1.48）%、（3.82±0.54）%、（8.90±2.30）%。结论 ECV304中HMME主要定位于线粒体,HaCaT定位于的线粒体和过氧化物酶体;ECV304光动力疗法的主要作用点可能为线粒体,而HaCaT的主要作用点为线粒体和过氧化物酶体。     

HMME在不同溶液中光漂白反应动力学规律

目的 分析国产光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）在不同溶液中光漂白反应动力学规律，加深对光漂白反应复杂反应过程的理解，并为HMME-PDT治疗微血管病变的数学建模研究提供实验依据和参数。 方法 根据光化学反应动力学原理，从理论上推导出在单纯溶液和复杂溶液（含可被光氧化的底物）中，单态氧介导的光漂白反应动力学方程，通过对实验测定的漂白数据（不同时间点的HMME浓度）进行拟合，进一步验证理论推导出光漂白反应动力学方程。 结果 HMME在单一溶液体系（PBS、DMSO）中的光漂白符合1级反应动力学过程，在含底物的复杂体系（白蛋白缓冲液、细胞悬液）中符合2级反应动力学过程。 结论 HMME在不同溶液体系中的光漂白遵循不同的反应动力学规律。根据化学反应动力学原理进行光漂白等复杂光化学反应过程的数学模拟是可行的，并有利于对复杂光化学反应过程的深入理解。     

卟啉还原合成二氢卟吩及其光生物活性研究

目的：研究获得具有红光区高吸收系数的新型光敏剂的结构及其光生物活性。方法：以氯化血红素为原料合成了中卟啉与次卟啉,通过Brich还原将其转变为二氢中卟啉和二氢次卟啉,以血卟啉衍生物（HpD)为阳性对照测定了所合成卟啉及其还原所得相应二氢卟啉对还原辅酶Ⅱ（NADPH）在重水中光氧化作用的敏化效应和对小鼠肉瘤180的光动力损伤作用,结果：还原所得二氢卟吩的光敏化效应和对小鼠肉瘤180的光动力损伤作用均高于其还原前的母体化合物及目前临床使用的光动力治癌药物HpD(均为P＜0．01）。结论：卟啉还原为二氢卟吩后提高了红光的吸收,光敏化力与光动力作用增强,是发展光动力治癌新药的一种有效途径。     

光动力学疗法治疗鲜红斑痣的护理体会

目的：介绍光动力学治疗鲜红斑痣的治疗方法及护理体会。方法：鲜红斑痣136例，光敏剂为血卟啉单甲醚，光源为HLCu-10型铜蒸气激光器。取HMME1μg做皮试，静脉推注HMME3．5～5mg／kg，5min内激光照射，功率密度80～100mW／cm^2，照射时间1个光斑20～40min，光斑直径8～10cm。     

激光功率密度对HMME-PDT的视网膜和脉络膜生物学效应的影响

目的观察激光功率密度对血卟啉单甲醚(HMME)的视网膜和脉络膜的光动力效应的影响。方法以新西兰兔正常脉络膜毛细血管层为实验对象,HMME注射剂量为5mg/kg,波长532nm激光作为激发光源,眼底光斑能量密度为20J/cm2,功率密度分别为100、200、300和400mW/cm2,相匹配的照射时间分别为200、100、66和50s,照光时机为注射药物结束后5min之内。在PDT后第6小时和12小时,1、3和5天进行眼底观察、荧光眼底造影,并在眼底造影出现脉络膜毛细血管闭塞时取照光部位进行组织学检查。结果激光功率密度为100mW/cm2,PDT后第5天出现脉络膜毛细血管的选择性闭塞;功率密度为200mW/cm2时,PDT后第3天出现脉络膜毛细血管的选择性闭塞;功率密度为300mW/cm2时,PDT后第1天出现视网膜的非选择性损伤,PDT后第3天视网膜恢复正常,脉络膜毛细血管闭塞;功率密度为400mW/cm2时,PDT后第6h出现视网膜的非选择性损伤,PDT后第5天视网膜恢复正常,脉络膜毛细血管和大部分脉络膜大血管的闭塞。结论在激光能量密度相同时,其功率密度是影响生物学效应的重要因素。即随着功率密度的增加,生物学效应出现的时间提前,照射部位的视网膜和脉络膜大血管受累的可能性越大。     

血管平滑肌细胞对血啉甲醚吸收特性的研究

目的 探讨血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）对光敏剂血啉甲醚（ＨＭＭＥ）的吸收特点及影响因素,为进一步建立动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄的光动力治疗方法提供实验依据。方法 培养兔主动脉ＳＭＣ并接种至９６孔培养板。首先,培养液中分别加入ＨＭＭＥ和血卟啉衍生物（ＨＰＤ）,浓度分别为２０、４０、６０、８０、１００μｇ／ｍｌ,采用荧光分析法测定细胞内光敏剂含量,绘缺点ＳＭＣ吸收光敏剂的浓度－含量和时间－含量关系曲     

血啉甲醚用于光动力疗法治疗鲜红斑痣的初步临床研究

经六年大量临床验证，光动力疗法已成为具有高度选择性和稳定可靠疗效的无瘢痕治疗鲜红斑痣的新方法。为解决治疗后的较长时间皮肤光敏反应这一主要副作用，本文对２１例志愿鲜红斑痣患者的２６个病灶应用血啉甲醚（ＨＭＭＥ）为光敏剂进行了治疗，对ＨＭＭＥ的作用进行了临床观察，发现ＨＭＭＥ具有良好的疗效、较轻的局部反应、较短的避光期和可行重复治疗的间隔期等优点，值得对其进行深入的研究。     

钙在血卟啉单甲醚-光动力学疗法处理后HeLa细胞中的变化及作用

目的 了解钙离子在血卟啉单甲醚-光动力学疗法(HMME-PDT)处理后HeLa细胞中的变化和作用。方法 Fura-2／AM孵育荧光分光光度计检测细胞质游离钙浓度[Ca^2 】i的变化，MTT法分析PDT及钙离子对HeLa细胞存活率的影响，Western印迹法分析HMME-PDT后HeLa细胞的肌浆／内质网钙泵(SERCA2)蛋白的降解情况。结果 HMME-PDT处理后即刻HeLa细胞内【Ca^2 】i就开始增高，且与PDT剂量成正相关用，BAPTA／AM拮抗【Ca^2 】i的升高可增加HeLa细胞的存活率。同时HMME-PDT可引起SERCA2蛋白的降解。结论 HMME-PDT处理后HeLa细胞内【Ca^2 】i可迅速增高，【Ca^2 】i，升高可能与SERCA2蛋白的降解相关，并可促进HeLa细胞的死亡。     

血卟啉单甲醚在生理盐水溶液中光漂白的研究

目的观察在光动力学反应过程中血卟啉单甲醚(HMME)的光漂白现象,探讨其影响因素。方法通过本研究建立的光敏剂荧光分析系统,应用光学多通道分析仪对生理盐水溶液中HMME介导的光动力反应过程中光漂白的情况进行监测。HMME的浓度分别为1、10μg/ml。Nd∶YAG倍频532nm激光作为光动力的照射光源,同时利用其作为荧光激发光源。在光动力反应过程中采集溶液的荧光光谱,并进行分析处理。结果光敏剂HMME在一定的浓度范围内,初始浓度越高,光漂白的速率越快。在HMME的光漂白过程中于639nm处出现新的荧光峰。根据漂白造成的自体背景的变化,HMME的光漂白可以分为两个阶段:(1)在0～45min阶段,随着照光过程的持续,HMME在613nm与674nm处的荧光特征峰强度下降,同时在639nm处出现新的荧光峰,且其强度持续增强,自体背景强度起伏很小,稳定在HMME初始荧光强度的0.16倍左右;(2)而45～90min阶段,随着照光时间延长,在613、674和639nm处荧光峰的强度均下降,自体背景强度呈接近于线性持续增强,到照光结束时增至HMME初始荧光强度的约0.45倍。结论HMME的光漂白是一个较复杂的过程,初始浓度影响其漂白的速度,并伴有光漂白产物的生成及其再漂白的现象。     

瘢痕成纤维细胞对血卟啉单甲醚的吸收特性及其光动力效应

目的探讨增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）对光敏剂血卟啉单甲醚（HMME）的吸收特性和光动力疗法（PDT）的杀伤效应。方法取原代培养的HSF,经流式细胞仪（FCM）检测HMME浓度（0～40μg/ml）和孵育时间（0～120 min）对HSF细胞吸收HMME的影响;MTT法检测HMME-PDT对HSF细胞存活率的影响。结果在一定HMME浓度范围内（0～40μg/ml）,HSF细胞对HMME的吸收量随HMME浓度和孵育时间的增加而增大。实验范围内的HMME-PDT对HSF细胞的杀伤效应与HMME浓度和激光能量密度正相关。结论 HSF对HMME的吸收随HMME浓度和孵育时间的增加而增大,HMME-PDT处理HSF时,光敏剂HMME浓度和激光能量密度是影响细胞存活率的重要因素。