慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因含量与临床的相关性研究

目的探讨慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者病毒复制水平与HBV标志物(HBV-M)模式及肝损害程度的关系。方法 360例慢性乙型肝炎(轻度160例、中度140例、重度60例)患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,HBV-M检测采用ELISA法。结果血清HBV DNA含量与HBV-M模式有关,血清HBeAg阳性组HBV DNA含量(106.35±1.84)显著高于HBeAg阴性组(104.73±1.88)(P<0.01),慢乙肝轻度、中度患者HBV DNA含量[(105.58±1.92),(106.27±2.05)]与慢乙肝重度患者HBV DNA含量(105.73±1.90)相比较无显著性差异(P>0.05),且不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05)。结论血清HBeAg的存在影响HBV DNA的水平变化,随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系。     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA基因检测及其临床意义

目的探讨不同类型慢性乙型肝炎患者病毒复制水平与肝损害程度的关系。方法 150例慢性乙型肝炎(轻度70例、中度60例、重度20例)患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(Ampli Sensor)定量PCR方法检测。结果慢性乙型肝炎轻度、中度患者HBV DNA含量(105.58±1.92、106.27±2.05)与慢性乙型肝炎重度患者HBV DNA含量(105.73±1.90)相比较无显著性差异(P>0.05),且不同HBV DNA水平患者的TBil、ALT、AST差别无显著性(P>0.05)。结论随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎轻度、中度、重度患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与TBil、ALT、AST水平无明显关系。     

慢性乙型肝炎患者HBV低水平复制状态与临床的相关性研究

目的 探讨HBV低水平复制状态下慢性乙型肝炎(慢乙肝)患者的临床表现.方法 采用荧光定量PCR方法 检测180例各型慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量,按照HBV DNA水平的高低进行分组,对不同组别患者的临床表现进行分析,探讨HBV低水平复制对病情的影响.结果 HBVDNA含量≤103 copy/ml组的总胆红素(TBil)为(43.00&#177;57.79)μmol/L,与其他各组比较无明显差异(P＞0.05);丙氨酸氨基转移酶(ALT)为(223&#177;344)U/L、门冬氨酸氨基转移酶(AST)为(138&#177;221)U/L,均低于HBV DNA含量为108组(P＜0.05),而且HBV DNA含量≤103 copy/ml组中慢性乙型肝炎轻、中、重度患者的发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 慢性乙型肝炎患者的病情轻重与血清中HBV DNA含量无明显相关性,HBV的低水平复制也不能代表患者的病情较轻.     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA水平与血清ALT的关系

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)复制水平与丙氨酸氨基转移酶(ALT)之间的关系。方法对180例慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量采用荧光标记(AmpliSensor)定量PCR方法检测,并比较HBV DNA含量与ALT的关系。结果慢性乙型肝炎轻度、中度患者HBV DNA含量(105.58±1.92,106.27±2.05)与慢性乙型肝炎重度患者HBV DNA含量(105.73±1.90)相比较差异无统计学意义(P>0.05),且不同HBV DNA水平患者的ALT差异无统计学意义(P>0.05)。结论随着肝损害程度的加重,慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA基因含量未发生显著变化,同时血清HBV DNA含量与ALT水平无明显关系。     

HBV DNA含量与慢性乙型肝炎分析

目的　探讨慢性乙型肝炎患者血清中病毒血症水平与病情程度的相羞生。 方法　 采用FQ -PCR方法检测 12 6例慢性乙型肝炎轻、中、重度患者的血清HBVDNA含量。 结果　 慢乙肝轻、中、重度组HBVDNA含量分别是 (4 85± 1 0 )× 10 8- 10 7copy .ml、(3 82± 0 8)× 10 6- 10 5copy .ml、(1 8± 0 5 )× 10 5- 10 4copy .ml。结论　慢乙肝轻、中、重度各组之间的HBVDNA含量差异有显著性 ;中重度组病毒含量与总胆红素水平呈负相关 ,与白 /球比例呈正相关。     

乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂性能评价要点

目的 阐述乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评价要点.方法 结合体外诊断试剂现行法规和此类试剂自身的特点,对其标准品建立及分析性能评估中检测限、特异性、准确度、线性范围评估等方法进行了详细解析.结果与结论 乙型肝炎病毒核酸定量检测试剂的分析性能评估应从试剂本身的定量特点出发,重点针对试剂定量的检测限、准确性、特异性等性能进行科学合理的评估.     

检测乙肝患者血清HBVDNA含量探讨其临床意义

目的 荧光定量PCR检测乙肝患者血清的HBVDNA含量,并探讨及其对临床意义。方法 对520例怀疑乙肝患者的血清进行ELISA法检测乙肝病毒血清标志物(HBVM)和荧光量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测HBVDNA的含量并进行比较。结果 检测的520例血清标本中HBVDNA水平在不同乙型肝炎类型中显著性差异(P>0.05),与HBV-M主要阳性模式组对比,在“135”阳性组HBVDNA的阳性率为97.7%(164/168),“13”模式组阳性率为100%(20/20),“145”模式组阳性率为55.56%(15/27),在检测的全阴性的模式组中有一例DNA阳性为 5.88%(1/17)。结论 HBVDNA的含量在不同的阳性模式中均不同程度地检测出HBVDNA的含量。其中,HBeAg阳性血清标志物中HBVDNA的检测率最高几乎达到100%。采用简单快捷的荧光定量PCR检测对乙肝患者的带毒状态进行准确判断。但HBVDNA的复制状态与不同临床类型乙型肝炎无明显相关关系,HBVDNA含量高低与肝功能的损害程度亦无明显关系。     

乙型肝炎患者血清HBV标志物检测临床研究

目的 :深入探讨乙型肝炎患者血清乙肝病毒标志物 (HBV—M)的临床意义。方法 :利用聚合酶链反应 (PCR)技术对 10 0 0例血清样品进行HBVDNA定性检测 ,其中 10 0份样品采用荧光标记 (AmpliSensor)定量方法 ,测定不同HBV—M模式中血清HBVDNA含量。结果 :定性PCR与免疫荧光定量PCR检测结果基本一致 ,在不同HBV—M模式中均可检出HBVDNA ,其中HBsAg、HBeAg、抗 -HBc阳性组HBVDNA检出率明显高于其他各组 (P <0 0 1)。结论 :除HBsAg、HBeAg、抗 -HBc阳性者外 ,其余HBV—M的各项表现形式中 ,均可存在不同程度的HBV复制 ,对HBV—M临床意义的认识需进行观念更新。     

乙型肝炎病毒感染者HBV DNA与血清病毒标志物的关系

目的 探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者HBV DNA检出情况及其与血清病毒标志物的关系。方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测200份HBV感染者血清中HBV DNA含量，同时用全自动免疫分析仪检测HBV5项血清标志物。结果 200份血清中，乙型肝炎病毒标志物不同组合组的HBV DNA阳性率有差异，HBsAg、HBeAg和（或）HBcAb阳性组阳性率为98．1％，其中96％以上HBV DNA≥10^4 cope／ml；HBsAg、HBcAb和（或）HBeAb阳性组HBV DNA阳性率约为76，5％，但其中90％以上HBV DNA≤10^4 cope／ml；单纯HBV抗体阳性组HBV DNA阳性率约为13．0％，但均为HBV DNA≤10^3cope／ml。三组间HBV DNA阳性率及分布均有明显差异（P〈0．05）。而且HBV DNA含量与疾病严重程度相关。结论 FQ-PCR检测HBV DNA含量结合血清病毒标志物的检测结果对乙型肝炎的临床诊断与病情判断有重要意义。     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA定量检测及其临床意义

目的 探讨慢性乙型肝炎（CHB）病人血清HBV DNA含量与HBeAg及肝损害程度的关系。方法 应用定量PCR法和ELISA法检测116例CHB病人血清HBV DNA含量与HBVM。结果 血清HBeAg阳性组HBV DNA含量显著高于HBeAg阴性组（P＜0．05）;CHB轻、中、重度血清HBV DNA含量逐渐降低（P＜0．05）。结论 基因水平证实HBeAg是HBV复制指标;随着肝损害程度加重,血清HBV DNA含量逐渐下降;定量检测HBV DNA对判断肝损害程度、指导抗病毒治疗有重要意义。     

慢性乙型肝炎血清HBV DNA载量与肝组织病理的关系

目的探讨HBeAg阳性和HBeAg阴性慢性乙型肝炎血清HBV DNA载量与肝组织炎症活动度、纤维化程度之间的关系。方法分别对103例HBeAg阳性和81例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者肝脏穿刺活检,进行肝组织炎症活动度分级和纤维化程度分期,同期检测血清HBV DNA载量,并分析两者之间的关系。结果 103例HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症活动度、纤维化程度均无明显相关性(r=0.125,P>0.05;r=0.164,P>0.05)。81例HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量与肝组织炎症活动度、纤维化程度均呈正相关(r=0.326,P<0.01;r=0.267,P<0.05)。结论 HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA载量能反映肝组织炎症活动度和纤维化程度,可作为抗病毒药物选择和疗效观察的指标。     

慢性乙型肝炎患者HBV cccDNA的检测

目的 建立和优化肝细胞内乙型肝炎病毒（HBV）共价闭合环状DNA（cccDNA）的检测方法。方法 蛋白酶K裂解法释放肝细胞核内HBV cccDNA及基因组DNA,细胞裂解液进行核酸纯化后用酚-氯仿法抽提,并采用酶消化和设计特异性引物两种方法排除其他病毒复制中间体对检测结果的干扰,最后进行聚合酶链式反应（P（R）。结果 以HBV松弛环状DNA（rcDNA）、阴性肝细胞、阴性血清作为对照,以包含HBV基因组全序列的质粒作为阳性对照,HBV感染者肝组织的PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳后出现的条带与目标片段分子量相等,且产物的DNA测序结果显示其序列与目标序列一致。外周血HBeAg（＋）患者组肝组织检测结果的阳性率高于HBeAg（-）患者组。结论 该方法检测肝细胞内cccDNA具有较高的特异性、敏感性,且成本较低。本方法临床标本初步检测结果显示病毒复制活跃患者肝组织中HBV cccDNA的阳性率较复制低的患者为高。     

慢性乙肝患者HBV DNA载量与YMDD自然变异之间的相关性

目的探讨未经任何抗病毒药物治疗的慢性乙肝患者HBV DNA载量与YMDD自然变异之间的关系。方法筛选51例未经任何抗病毒药物治疗的慢性乙肝患者,检测HBV DNA载量与YMDD变异情况。结果 51例标本中检出YMDD变异株13例（25.5%）,其中YIDD变异1例,YVDD变异7例,共生变异（YIDD＋YVDD）5例;未检出YMDD变异株38例（74.5%）。结论未经任何抗病毒药物治疗的慢性乙肝患者存在YMDD自然变异,其自然变异的发生率与HBV DNA载量呈正相关。     

HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量与ALT的关系

目的探讨HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清HBV DNA含量与ALT的关系。方法回顾性分析269例乙型肝炎患者的临床资料和实验室检测数据,HBeAg阴性组148例和阳性组121例,对比分析两组患者HBV DNA含量及ALT水平的关系。结果 148例HBeAg阴性乙型肝炎患者中血清HBV DNA阳性者107例(72.3%),其均值为(5.4±1.3)log10copies.ml-1,血清ALT水平为49(129.0)IU.L-1(中位数,四分位数间距),肝硬化比例为51.4%(55/107)。121例HBeAg阳性乙型肝炎患者中血清HBV DNA阳性118例(97.5%),其均值为(6.8±1.2)log10copies.ml-1,ALT水平为105(139.5)IU.L-1(中位数,四分位数间距),肝硬化比例为13.6%(16/118)。HBV DNA阳性率及含量和ALT水平HBeAg阳性组高于HBeAg阴性组(P0.01)。ALT水平在HBeAg阴性伴HBV DNA阳性组与HBeAg阳性伴HBV DNA阳性组比较无统计学意义(Z=-1.43,P=0.150.05)。肝硬化在HBeAg阴性伴HBV DNA阳性组所占比例最高。HBeAg阴性组较HBeAg阳性组患者的年龄较大(t=7.046,P0.01)。结论 HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者年龄偏大,肝硬化比例偏高,尤其是HBV DNA阳性者,肝脏炎性损伤程度与HBeAg阳性患者相似。     

荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA及其与血清标志物的关系探讨

目的　用荧光定量聚合酶链反应 (fluorescence quantitative polymerase chain reaction,FQ- PCR)方法定量检测血清中乙型肝炎病毒 (hepatitis B virus,HBV)的数量及探讨其与 HBV标志物 (HBV M)表现模式的关系 ,以指导临床。方法　共 2 4 4份临床血清标本 ,HBV DNA定量采用荧光定量 PCR分析系统 ,HBV M采用 EL ISA法。结果　经 FQ- PCR检测 ,99例 HBs Ag(+) / HBe Ag(+) / HBc Ab(+)的标本 ,其血清标本 HBV DNA亦全部阳性 ,平均 HBV DNA拷贝数为 1.82× 10 7copies/ ml;96例 HBs Ag (+) / HBe Ab (+) / HBc Ab (+)的标本 ,其 HBV DNA检出率为 6 6 .7% (6 4例 ) ,平均拷贝数为 1.82× 10 4 copies/ m l;11例 HBs Ag (+) / HBc Ab (+)的标本其 HBV DNA检出率为 6 3.6 % (7例 ) ,平均拷贝数为 7.94× 10 4 copies/ ml。结论　血清 HBV DNA水平与 HBV M表现模式有关 ,HBs Ag (+) / HBe Ag (+) / HBc Ab (+)的标本 HBV DHA值显著高于 HBs Ag (+) / HBe Ab (+) / HBc Ab (+)的标本和 HBs Ag (+) / HBc Ab (+)的标本 ,提示 HBs Ag与 HBe Ag的存在影响 HBV DNA水平。 FQ- PCR能实现准确定量 ,可以检测 HBV的真实感染和复制情况 ,对于乙型肝炎的临床诊断、治疗方案的选择和疗效考察有较大的指导意义     

实时荧光定量PCR法检测乙型肝炎患者血清HBVDNA含量512例分析

目的探讨实时荧光定量PCR检测不同血清标志物模式的乙型肝炎患者的血清HBVDNA含量的特点。方法应用ELISA对512例病人血清中乙型肝炎血清标志物进行检测,同时用实时荧光定量PCR检测标本中HBVDNA的含量,分别统计每组的HBVDNA阳性例数及其阳性率,用u检验进行统计学处理。结果HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc㈩组168例,HBVDNA阳性161例,占95．8％;HBsAg（＋）／抗HBe（＋）／抗HBc（＋）组163例,HBVDNA阳性51例,占31．3％;HBsAg（＋）／抗HBc（＋）组181例,HBVDNA阳性94例占51．9％;三组之间互相比较差异均有显著性（P〈0．001）。结论HBsAg（＋）／HBeAg（＋）／抗HBc（＋）组中HBV复制最活跃,实时荧光定量PCR检测HBVDNA比血清标志更能反映乙型肝炎病毒存在与复制情况。