胸腺微环境及其作用

胸腺是Ｔ淋巴细胞分化发育的场所，胸腺微环境由胸腺基质细胞、细胞外基质和细胞因子等构成。在胸腺基质细胞中，上皮细胞最多，分布最广。上皮细胞的分化、成熟和增殖依赖于胸腺内发育阶段的各Ｔ细胞亚群。位于胸腺内不同区域的基质细胞在Ｔ细胞发育的不同阶段起重要作用。血胸屏障是胸腺微环境中一个特殊结构，前Ｔ细胞可通过粘附分子，在趋化因子等作用下穿过血胸屏障进入胸腺，在胸腺内完成其分化发育过程。     

人胎儿胸腺T细胞亚群抗原的表达及其定位—免疫组织化学研究

用免疫组织化学法和多种识别Ｔ细胞亚群的抗体，观察了１５例胎儿胸腺内Ｔ细胞亚群的抗原表达及其分布。结果表明，胸腺皮、髓质Ｔ细胞对Ｌｅｕ４抗体均呈阳性，但髓质部较强。Ｌｅｕ３ａ和Ｌｅｕ２ａ阳性细胞分布于胸腺皮持、髓质，但髓质部阳性数目少于皮质。ＡＩＧ３和ＮＫ阳性细胞均分布于髓质，皮质几乎为阴性，ＩＬ－２Ｒ细胞分布于被膜下、皮质和髓质。ＢｒｄＵ标记的细胞主要存在于皮质，特别是外皮质区。此外胸腺内还有γδ     

抗鼠T细胞受体抗体抑制胸腺细胞的迁出

目的 通过检测抗仓鼠T细胞受体抗体对胸腺T细胞输出的影响，进一步研究胸腺是提供外周免疫细胞输出的有关机理。方法 体内注射抗TCR抗体48h后FACS分析新迁出细胞在胸腺、淋巴结的表达。结果 小鼠成熟髓质区高表达T细胞受体的单阳性细胞数目成倍增加，同时皮质区低表达T细胞受体的不成熟双阳性细胞数目减少。成熟的单阳性胸腺细胞高表达归巢受体L-Selectin，表型分析(TCRαβ、CD69、HAS、Vβ7-integrin、Qa-2)显示增加的这群细胞为胸腺的新迁出细胞，此群成熟细胞的高表达，表明胸腺的细胞迁出受到了抑制。胸腺内注射异硫氰酸荧光素16h后，抗TCR抗体注射小鼠外周淋巴结及脾脏CD4^ 、CD8^ 新迁出细胞数量减少。结论 抗TCR抗体能抑制胸腺T细胞向外周迁移。     

胸腺细胞对胸腺上皮细胞增殖的影响

为了分析胸腺细胞在胸腺上皮细胞发育中的作用，本文作者在体外分析了胸腺细胞对小鼠胸腺上皮细胞系（ＭＴＥＣ１）增殖的作用。结果表明，不同的胸腺细胞亚群以及胸腺细胞裂解液均能促进ＭＴＥＣ１增殖，考的松耐受性胸腺细胞和ＣＤ３－４－８－细胞具有同样的促进ＭＴＥＣ１增殖的作用，其促进程度与两种细胞的数量有关，胸腺细胞和ＭＴＥＣ１为２０１或４０１时，其促进作用最强。胸腺细胞裂解液在高浓度（１２稀释）时，能促进ＭＴＥＣ１增殖，在低浓度时则不影响ＭＴＥＣ１的增殖。本实验提示，胸腺细胞可以通过细胞－细胞相互作用以及分泌细胞因子影响ＭＴＥＣ１的增殖。     

166胸腺细胞与胸腺基质细胞的相互作用

胸腺内Ｔ细胞细胞依赖胸腺微环境提供的多种信号完成正常发育过程，然而研究发现无论在自然或实验条件下胸腺细胞的减少均可导致胸腺上皮细胞减少，从而提示胸腺微环境和胸腺细胞之间存在相互依赖关系。即Ｔ细胞的发育依赖于胸腺微环境同时Ｔ细胞的存在对形成和维持正常的胸腺微环境也是必需的。     

胸腺细胞与胸腺基质细胞的相互作用

胸腺内Ｔ细胞依赖胸腺微环境提供的多种信号完成正常发育过程。然而研究发现无论在自然或实验条件下胸腺细胞的减少均可导致胸腺上皮细胞减少，从而提示胸腺微环境和胸腺细胞之间存在相互依赖关系。即Ｔ细胞的发育依赖于胸腺微环境同时Ｔ细胞的存在对形成和维持正常的胸腺微环境也是必需的。     

LFA—1／ICAM—1与T细胞发育

粘附分子ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１是发育期Ｔ细胞和胸腺基质细胞（ＴＳＣ）表重面要的膜分子之一，不同Ｔ细胞亚群和不同部位或类型的ＴＳＣ表面表达的水平各异，ＬＦＡ－１与配基ＩＣＡＭ－１的结合在介导Ｔ细胞与Ｔ细胞、Ｔ细胞与ＴＳＣ之间的相互作用（辅助信号传导）以及胸腺细胞克隆选择等过程中发挥重要作用。     

LFA－1／ICAM－1与T细胞发育

粘附分子ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１是发育期Ｔ细胞和胸腺基质细胞（ＴＳＣ）表重面要的膜分子之一，不同Ｔ细胞亚群和不同部位或类型的ＴＳＣ表面表达的水平各异，ＬＦＡ－１与配基ＩＣＡＭ－１的结合在介导Ｔ细胞与Ｔ细胞、Ｔ细胞与ＴＳＣ之间的相互作用（辅助信号传导）以及胸腺细胞克隆选择等过程中发挥重要作用。     

小鼠胸腺基质细胞系(MTEC1)在裸鼠体内生物学特性研究

通过流式细胞仪（ＦＡＣＳ）、组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＴＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ１细胞周围有大量不成熟的淋巴细胞。初代培养的小鼠胸腺基质细胞则不能在脾脏内存活。     

调节性Ｔ细胞与免疫耐受

近年来关于调节Ｔ细胞在移植模型中介导免疫耐受的作用有相当大的进展，免疫调节的机制特别在感染性耐受途径中是通过调节性Ｔ细胞，包括Ｔh2细胞因子（ＩＬ－４、ＩＬ－１０和ＴＧＦ－β）均起着直接或间接的促进作用。胸腺是促进调节性Ｔ细胞产生的微环境，自身免疫性疾病模型中，调节性细胞有不同的胸腺来源的Ｔ细胞亚群，ＣＤ4^ T细胞和CD8^ T细胞都可调节免疫反应，诱导移植免疫耐受。     

胸腺细胞对胸腺基质细胞生长及功能的调节

目的研究胸腺细胞对不同亚群胸腺基质细胞生长及功能的调节作用。方法胸腺基质细胞增殖以３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定，ＩＬ－７活性以促ＩＬ－７依赖株法检测，其ｍＲＮＡ表达以ＲＴ－ＰＣＲ法检测。结果胸腺细胞与ＭＴＳＣ４细胞分别以８０∶１，４０∶１或２０∶１的比例共育时，能明显抑制ＭＴＳＣ４细胞的增殖，而培养上清中ＩＬ－７活性无明显改变；当两种细胞的比例为１０∶１或５∶１时，则对ＭＴＳＣ４细胞的增殖无任何影响，而培养上清中的ＩＬ－７活性明显升高。ＲＴ－ＰＣＲ证实，与胸腺细胞共育的ＭＴＥＣ１和ＭＴＳＣ４细胞，ＩＬ－７ｍＲＮＡ水平明显提高。结论胸腺细胞能促进ＭＴＥＣ１和ＭＴＳＣ４细胞分泌ＩＬ－７，对不同亚群基质细胞的生长和功能有不同调节作用     

ICAM-1抗体诱导小鼠胸腺上皮细胞分泌IL-6

目的研究胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体对胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６的作用。方法用促ＩＬ－６依赖株增殖法检测ＩＬ－６活性，用原位杂交法检测ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达。结果不同的胸腺细胞亚群均能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，而且作用无明显差异。ＩＣＡＭ－１抗体能够促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６，其促进作用呈剂量依赖关系。放线菌酮预处理ＭＴＥＣ１以后，ＩＣＡＭ－１抗体和胸腺细胞均不再能促进ＭＴＥＣ１分泌ＩＬ－６。原位杂交证实，经胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体活化后，ＭＴＥＣ１表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ明显增多，并且表达ＩＬ－６ｍＲＮＡ的ＭＴＥＣ１数量也增多。提示胸腺细胞和ＩＣＡＭ－１抗体能促进ＭＴＥＣ１合成新的蛋白和ｍＲ－ＮＡ。结论胸腺微环境内，胸腺细胞可以通过粘附分子与胸腺上皮细胞相互作用，并可促进胸腺上皮细胞分泌ＩＬ－６。     

7株小鼠胸腺基质细胞系诱导裸鼠骨髓干细胞表达CD4…

为研究胸腺微环境在Ｔ细胞发育中的作用，我室在体外建立了７株小鼠胸腺基质细胞系，命名为ＭＴＥＣ１－ＭＴＥＣ７。通过初步分离得到裸鼠骨髓富含干细胞的细胞群，表面ＣＤ４及ＣＤ８分子均为阴性，将分离的骨髓干细胞为胸腺基质细胞共育３天后，经双色荧光抗体染色，ＦＡＣＳ分析发现胸腺基质细胞可诱导裸鼠骨髓干细胞表达ＣＤ４ＣＤ８分子。ＭＴＳＣ－ＳＮ及ＭＴＳＣ主要诱导的是ＣＤ４＾＋ＣＤ８＾－细胞，部分ＣＤ４＾＋ＣＤ８     

小鼠胸腺基质细胞系（MTEC1）在裸鼠体内生物学特…

通过流式细胞仪，组织学染色和免疫组化的方法研究了脾内注射的小鼠胸腺上皮细胞系ＭＥＥＣ１和初代培养的小鼠胸腺基质细胞在裸鼠脾脏内存活状态及功能特性。结果发现ＭＴＥＣ１细胞不仅能够在脾脏内存活，而且在ＭＴＥＣ１细胞周围大量不成熟的淋巴细胞。初代培养的小鼠胸腺基质细胞则不能在脾脏内存活。     

Apo—1／Fas受体及其配体在诱导淋巴细胞凋亡中的作用

本文介绍了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体的结构及其分布，阐述了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体在免疫生物学方面的效应：诱导ＴＣＲ＾ｉｍ／Ａｐｏ－１＾ｈｉ胸腺细胞的阴性选择；清除外周自身反应Ｔ细胞克隆；诱导某些活化Ｔ，Ｂ细胞凋亡；介导某些白血病细胞凋亡，并阐述了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体在诱导细胞凋亡中的作用机理。     

7株小鼠胸腺基质细胞系诱导裸鼠骨髓干细胞表达CD4及CD8分子

为研究胸腺微环境在Ｔ细胞发育中的作用，我室在体外建立了７株小鼠胸腺基质细胞系，命名为ＭＴＥＣＩ～ＭＴＥＣ７。通过初步分离得到裸鼠骨髓富含干细胞的细胞群，表面ＣＤ４及ＣＤ８分子均为阴性。将分离的骨髓干细胞与胸腺基质细胞共育３天后，经双色荧光抗体染色，ＦＡＣＳ分析发现胸腺基质细胞可诱导裸鼠骨髓干细胞表达ＣＤ４ＣＤ８分子。ＭＴＳＣ－ＳＮ及ＭＴＳＣ主要诱导的是ＣＤ４＋ＣＤ８－细胞，部分ＣＤ４＋ＣＤ８＋细胞，而ＣＤ４－ＣＤ８＋细胞极少，这种诱导特点可能和基质细胞系的类型有关。     

CD28协同刺激分子对T细胞受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响

目的：分析anti-TCRαβmAb anti-CD28mAb诱导小鼠胸腺淋巴细胞不同亚群的凋亡及凋亡程度，分析CD28协同刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响。方法：新鲜分离胸腺细胞，加入anti-TCRαβmAb-anti-TCRαβmAb anti-CD28mAb等培养20h，进行多重染色，流式细胞仪分析。结果：与胸腺细胞自发凋亡的结果相比较；（1）双信号刺激可明显增加胸腺细胞凋亡的数目，尤其是CD4^ CD8^ 胸腺细胞的凋亡数目。（2）凋亡的CD4^ CD8^ 亚群，CD4^ CD8^-亚群细胞表面CD28的表达均增多。结论：CD28共刺激分子对TCR受体介导的胸腺细胞亚群凋亡的影响与细胞的成熟程度有关，CD28共刺激分子能明显增强不成熟皮质胸腺细胞的凋亡。     

小鼠胸腺基质细胞系的分型

为鉴定８株小鼠胸腺基质细胞（Ｔｈｙｍｉｃｓｔｒｏｍａｌｃｅｌｌｓ，Ｔｓｃ）系的类型及本室研制出的抗小鼠ＴＳＣ单抗的价值，我们采用细胞ＥＬＩＳＡ和免疫荧光法对３０种自制的及国外引进的ＭＴＳ系列抗小鼠ＴＳＣ单抗与８株ＭＴＳＣ细胞系的反应性进行了观察，结果表明：①ＭＴＳＣ１，２为髓质型胸腺上皮细胞（Ｔｈｙｍｉｃｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌｓ，ＴＥＣ）的不同亚群；ＭＴＳＣ３，５，６，７，８为皮髓质交界型ＴＥＣ的不同亚群。②在不同类型的ＴＳＣ间及胸腺细胞和ＴＳＣ间，均存在共同抗原。③ＭＴＳ系列ＭｃＡｂ不能鉴定的ＭＴＳＣ系，能用本室自制的抗小鼠ＴＳＣＭｃＡｂｓ定型。     

Apo－1／Fas受体及其配体在诱导淋巴细胞凋亡中的作用

本文介绍了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体的结构及其分布，阐述了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体在免疫生物学方面的效应：诱导ＴＣＲ￣（ｉｍ）／Ａｐｏ－１￣（ｈｉ）胸腺细胞的阴性选择；清除外周自身反应Ｔ细胞克隆；诱导某些活化Ｔ，Ｂ细胞凋亡；介导某些白血病细胞凋亡，并阐述了Ａｐｏ－１／Ｆａｓ受体及其配体在诱导细胞凋亡中的作用机理。     

MTEC 1分泌的趋化因子引起特定亚群胸腺细胞的定向迁移

分析胸腺髓质上皮样细胞系ＭＴＥＣ１分泌的化学趋化因子对胸腺细胞亚群的趋化作用。方法以抗体加补体杀伤结合免疫磁珠及ｐａｎｎｉｎｇ法，将小鼠胸腺细胞分离纯化，获得ＣＤ４＋ＣＤ８＋（ＤＰ），ＣＤ４－ＣＤ８－（ＤＮ），ＣＤ４＋ＣＤ８－（ＣＤ４ＳＰ）及ＣＤ４－ＣＤ８＋（ＣＤ８ＳＰ）四亚群细胞，用Ｂｏｙｄｅｎ小室分析ＭＴＥＣ１┐ＳＮ对四群胸腺细胞的趋化作用。结果ＭＴＥＣ１┐ＳＮ对ＤＰ及ＣＤ４ＳＰ胸腺细胞有趋化活性（ＣＩ＝６．６±１．０及６．１±１．８）；对ＣＤ８ＳＰ细胞有中度趋化活性（ＣＩ＝３．２±１．０）；对ＤＮ趋化活性微弱（ＣＩ＝１．３±０．６）。化学趋化因子ＭＣＰ┐１纯品对ＣＤ４ＳＰ胸腺细胞显示强趋化活性（ＣＩ＝５．６），对ＤＮ胸腺细胞则无可测出趋化活性。结论ＭＴＥＣ１分泌的化学趋化因子对ＤＰ，ＣＤ４ＳＰ及ＣＤ８ＳＰ胸腺细胞有显著趋化作用，对ＤＮ胸腺细胞几乎无趋化作用。提示此类化学趋化因子有趋使胸腺发育中后期阶段的细胞向胸腺髓质区迁移和定位的作用。