微量元素水平对人肺癌细胞药物敏感性的影响

目的:探讨不同微量元素水平对人肺癌细胞药物敏感性的影响。方法:对人肺癌细胞(GLC—8L)进行体外有药培养,同时将不同水平的微量元素水平组合加入有药培养液中,72 h后用MTT法检验化疗药物的敏感性。结果:人肺癌细胞在不同微量元素水平体外有药培养后出现不同变化。结论:不同微量元素水平对体外人肺癌细胞药物敏感性不同。     

MTT法检测Hela细胞对化疗药物敏感性的研究

目的:分析宫颈癌Hela细胞对化疗药物顺铂的体外敏感性。方法:采用MTT法测定宫颈癌Hela细胞对4种不同浓度顺铂的体外敏感性。结果:不同浓度的顺铂对宫颈癌Hela细胞的生长均有一定的抑制作用。结论:MTT法检测有助于指导临床选择化疗药物剂量,提高化疗效果,减少副作用,具有重要的临床应用价值。     

白英提取物单独或与顺铂联合对宫颈癌Hela细胞的影响

目的:观察中药白英提取物(Solanum lyratum Thunb extract,STE)对体外培养宫颈癌HeLa细胞的作用,以及STE对HeLa细胞对顺铂(DDP)的敏感性的影响。方法:体外培养宫颈癌HeLa细胞分别用STE、DDP、DDP+STE处理细胞,MTT法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞凋亡。结果:白英提取物及DDP对宫颈癌HeLa细胞的生长均表现出明显的抑制作用,低剂量STE可加强DDP对HeLa细胞的抑制作用;流式细胞术检测结果显示,白英提取物作用后HeLa细胞出现凋亡,且随着时间的延长,凋亡细胞的比例明显增加。结论:白英提取物对宫颈癌HeLa细胞有明显的抑制生长和促凋亡作用,同时能提高HeLa细胞对顺铂的敏感性。     

检测乳腺癌细胞株对化疗药物5-氟脲嘧啶的敏感性

目的:检测不同乳腺癌细胞株对化疗药物5-氟尿嘧啶的敏感性。方法:体外培养乳腺癌低转移细胞株MCF-7和高转移细胞株MDA-MB-435S,并加入不同浓度的5-氟尿嘧啶,MTT法检测这两种细胞株对5-氟尿嘧啶的敏感性。结果:5-氟尿嘧啶对这2种细胞株的细胞生长均具有抑制作用,且抑制作用与给药剂量正相关。结论:应用MTT法可检测乳腺癌细胞对化疗药物5-氟尿嘧啶的敏感性,可用于指导临床选择合适的化疗药物,制定治疗方案。     

Pin1抑制剂对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究Pin1抑制剂(Juglone)对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响,探讨Juglone的抗肿瘤作用。方法:体外培养人宫颈癌细胞SiHa,采用MTT试验观察细胞生长抑制状况,流式细胞仪检测细胞周期阻滞以及Hoechst33258检测细胞凋亡情况。结果:MTT试验表明,Juglone对宫颈癌SiHa细胞生长有明显的抑制作用,且随着作用浓度和作用时间的增加,抑制作用增强。流式细胞仪检测表明,Juglone药物(50μmol/L)培养12、24、48 h后,G2/M期细胞比例数明显增加,而S期细胞比例数却较对照组降低。Hoechst33258实验组可见凋亡细胞。结论:Juglone可能通过体外抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡途径抑制宫颈癌的发展。     

墓头回提取液对小鼠宫颈癌U14细胞株抑制增殖的实验研究

目的:探讨墓头回提取液对小鼠宫颈癌U14细胞株体外生长的影响。方法:以不同药物浓度和不同时间作用于宫颈癌U14细胞株后,采用MTT法检测其对细胞增殖的影响,并通过倒置显微镜观察细胞形态学变化。结果:墓头回提取液对宫颈癌U14细胞有一定的抑制作用,其抑制率与药物浓度、作用时间有关系;倒置显微镜观察细胞胞体变长,颗粒感增强,细胞浆减少,细胞质减少,细胞脱落呈悬浮状,可见细胞碎片。结论:墓头回提取液可抑制小鼠宫颈癌U14细胞株的增殖。     

实时荧光定量PCR检测人宫颈癌细胞赖氨酰氧化酶样-4基因的表达

目的:利用实时荧光定量PCR检测赖氨酰氧化酶样-4(Lysyloxidase-like 4,LOXL4)基因在Hela、ME180、HCC94人宫颈癌细胞中的表达情况.方法:提取3株体外培养宫颈癌细胞株的总RNA,逆转录为cDNA,实时荧光定量PCR扩增,结合内参基因GAPDH及标准曲线比较LOXL4 mRNA在Hela、ME180和HCC94 3株体外培养的人宫颈癌细胞中的表达.结果:LOXL4基因在3株人宫颈癌细胞中均有表达,但表达水平存在统计学差异,以Hela的表达为参照(Ratio=LOXL4/GAPDH=1.00),ME180的表达水平为6.80E-3,HCC94细胞株表达丰度最低为5.62E-4.结论:建立了LOXL4基因在宫颈癌细胞表达的检测平台,为宫颈癌早期诊断及预测预后提供可借鉴的观察指标.     

枸杞多糖对人宫颈癌细胞生长及细胞凋亡影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的人宫颈癌Hela细胞生长及其细胞凋亡的影响。方法不同剂量的枸杞多糖作用于体外培养的宫颈癌Hela细胞，用苔盼蓝染色、四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）法及流式细胞仪检测人宫颈癌Hela细胞存活率、抑制率及细胞凋亡等指标。结果枸杞多糖可明显抑制人宫颈癌Hela细胞的生长，抑制率司达96．85％，并呈剂量效应关系，细胞凋亡率可达36．8％。结论枸杞多糖对人宫颈癌Hela细胞生长具有抑制作用，其抑制机制可能是通过影响人宫颈癌细胞的生长周期和诱导其凋亡而实现。     

大蒜素对子宫颈癌Hela细胞增殖的影响

目的:探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法:不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化;采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,采用流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果:MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度的大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论:大蒜素对人宫颈癌Hela细胞的生长有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

人脑星形细胞瘤原代细胞体外化疗药物敏感性实验研究

目的应用偶氮噻唑蓝比色法(MTT),检测常用化疗药物卡莫司丁(BCNU)、替尼泊甙(VM26)、多柔比星(ADM)、顺铂(CDDP)、环磷酰胺(CTX)单用及联合应用对人脑星形细胞瘤(AT)细胞的敏感性,比较不同类型(高分级,低分级,原发,复发)星形细胞瘤细胞对化疗药物敏感性的差别,以期对AT术后化疗提供合理、个性化的用药依据。方法 44例不同类型人脑星形细胞瘤细胞(术后病理证实为AT),在CO2培养体系中进行体外原代培养,差速贴壁法将其分离纯化,应用免疫荧光技术检测脑胶质纤维酸性蛋白(GFAP)对其鉴定;在分离纯化鉴定后的AT细胞中,加入不同浓度的化疗药物进行干预,MTT法测光密度值(OD值),计算敏感率。结果 38例AT标本成功进行了体外培养,培养成功率86%,高分级AT培养成功率最高;五种药物对AT细胞的抑制范围差异性很大,敏感性均不同;不同作用机制的药物联合应用对AT的敏感率高于其单一药物,单用与联合间有显著性差异(P<0.05);高分级及复发AT细胞对单一药物的敏感率均高于低分级及原发AT细胞,高分级与低分级间、原发与复发间差异有统计学意义(P<0.05),而联合用药时,高分级与低分级间、原发与复发间均无差异性(P>0.05)。结论 AT细胞可在体外成功地培养、纯化及鉴定,培养成功率与肿瘤病理类型密切相关;不同肿瘤个体对药物敏感性差异很大,联合用药可提高药物的敏感性,化疗药物对高分级及复发AT的敏感性比对低分级及原发的高;临床上应根据药敏结果,选择敏感性药物,行个体化化疗,以提高疗效,最大限度地减少副反应及肿瘤复发。     

人体宫颈上皮细胞的体外培养及鉴定

随着宫颈癌及癌前期疾病发病率的增加,人们对其发病机制的的研究也越来越深入.自对人宫颈癌细胞体外培养获得成功后,学者对不同类型的宫颈细胞的体外培养实验也相继展开研究.通过对宫颈上皮细胞特定角蛋白及免疫标记物的测定来鉴定是否为宫颈细胞,通过观察培养出的各类型宫颈细胞的生物学特性是进一步研究宫颈疾病发生发展规律从而找出治疗宫颈疾病的最佳途径.     

胃癌CyclinD1、PTEN表达及与化疗药物耐药性关系的研究

目的探讨胃癌组织中CyclinDl、PTEN蛋白的表达和与化疗药物敏感性的关系。方法取胃癌手术标本84例,用免疫组化检测CyclinDl、PTEN蛋白在胃癌组织中的表达。并用MTT比色法观察胃癌原代培养细胞在体外对化疗药物HCPT、CDDP、5-Fu、ADM和MMC的敏感性。结果胃癌组织中CyclinDl和PTEN蛋白的阳性率分别为67.86%和46.43%。胃癌细胞对不同化疗药物敏感性不同:5-Fu、MMC和DDP对胃癌细胞的抑制率显著高于ADM和HCPT(P<0.05)。CyclinDl阳性者对5-Fu、HCPT的敏感性显著高于阴性者(P<0.05)。PTEN蛋白表达与五种化疗药物的体外耐药无相关性(P>0.05)。结论CyclinDl蛋白与胃癌对化疗药物敏感性相关,检测其表达对选择化疗药物有实用价值。     

基因重组hNK4对Hela、EJ、SK-OV-3、MDA-MB-231细胞生长抑制研究

目的:研究不同浓度的rhNK4因子对肿瘤细胞生长侵袭能力的影响。方法:通过基底膜侵袭实验检测并分析基因重组NK4对人卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌等肿瘤细胞体外的抑瘤性。结果:rhNK4因子对人卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌细胞有明显的抑瘤性,对人卵巢癌细胞、宫颈癌细胞、人乳腺癌细胞和人膀胱癌细胞的抑制率分别为48.2%,29.6%,58.4%和30.1%。结论:基因重组NK4因子具有抑制人卵巢癌、乳腺癌等多种肿瘤细胞侵袭的能力,有较强的抑瘤性。     

tTG蛋白与子宫内膜癌细胞凋亡和紫杉醇化疗敏感性

目的:探讨组织转谷氨酰胺酶抑制剂(monodansylcadaverine,MDC)对体外培养的人子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的诱导作用和对紫杉醇(TS)的化疗增敏性。方法:用MTT法检测逐渐递增的MDC药物浓度和不同作用时间对细胞增殖的影响。用流式细胞技术检测MDC对细胞凋亡和紫杉醇的化疗敏感性的影响。结果:Ishikawa细胞中,MDC处理组和对照组凋亡率差异有统计学意义(P<0.05);MDC+TS组的细胞凋亡率亦高于TS组(P<0.05);同时,MDC对细胞凋亡的诱导作用呈一定的剂量时间依赖关系。结论:组织转谷氨酰胺酶对维持子宫内膜癌细胞生长有一定作用,抑制酶的活性可以促进细胞凋亡并增加细胞对紫杉醇的化疗敏感性。     

顺铂诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡及其对细胞周期影响的研究

目的:观察顺铂对人宫颈癌Hela细胞凋亡及细胞周期的影响,以揭示顺铂治疗宫颈癌的机理。方法:运用体外细胞培养技术,以不同浓度的顺铂作用于培养的人Hela细胞72 h,用流式细胞仪分析其凋亡率及细胞周期。结果:顺铂能以浓度依赖的方式诱导Hela细胞凋亡,并呈现出G0/G1期阻滞作用。结论:顺铂能诱导Hela细胞凋亡并改变其细胞周期分布,阻滞Hela细胞于G0/G1期,这可能是顺铂抗宫颈癌作用的重要机制之一。     

不同压力CO_2气腹对宫颈癌细胞侵袭黏附能力的影响

目的:体外模拟腹腔镜手术CO2气腹方法,研究不同压力CO2环境对人宫颈癌Hela细胞黏附和侵袭能力的影响。方法:培养人宫颈癌Hela细胞株,模拟CO2气腹压力12 mmHg、16 mmHg处理4 h,以培养于常规条件下的人宫颈癌Hela细胞为对照,通过MTT法检测细胞活性,通过细胞基质黏附试验检测细胞基质黏附能力改变,应用免疫组织化学方法检测人宫颈癌Hela细胞中E-钙黏素(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的表达变化。结果:与对照组相比,CO2气腹处理组生长曲线上移(P<0.05)、随压力增加生长速度加快;气腹组与对照组相比,细胞基质黏附能力增强(P<0.05)、E-钙黏素表达减少(P<0.05)、MMP-9表达增加(P<0.05)。但不同压力条件下E-钙黏素和MMP-9表达水平无统计学差异(P>0.05),细胞基质黏附能力无明显增加。结论:CO2气腹环境增加了宫颈癌的侵袭和转移的风险,其机制可能与人宫颈癌Hela细胞的E-钙黏素的表达降低,MMP-9的表达增加有关,不同压力的CO2气腹对宫颈癌的侵袭和转移能力无明显影响。     

宫颈癌细胞体外培养的形态学观察

目的:研究宫颈癌siha细胞在体外不同培养条件下细胞形态学的改变。方法:体外培养人宫颈癌siha细胞,以终浓度为1、5、10、15μmol/L的溶血磷脂酸和终浓度为5、10、20、40 mg/L的多西环素分别干预,并设不加任何药物作为空白对照组。各组均于干预后3、5、7天行过典酸雪夫反应(PAS)染色,用倒置显微镜观察各组宫颈癌细胞的形态变化。结果:溶血磷脂酸组siha细胞随着溶血磷脂酸浓度升高及作用时间的延长,细胞增殖能力增强,细胞异形性及可塑性增加,PAS染色阳性物质生成增多并最终形成环状结构的血管拟态;而多西环素处理组随着多西环素浓度增加,细胞增殖明显受到抑制,细胞核固缩、碎裂,细胞破坏。结论:宫颈癌siha细胞的增殖能力与细胞形态学的改变密切相关,溶血磷脂酸促进siha细胞增殖及血管生成拟态的形成,而多西环素则具有相反的抑制作用,且两者作用均有浓度及时间依赖性。     

叶黄素对人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨叶黄素对体外培养的人宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法选择对数生长期的人宫颈癌HeLa细胞为研究对象,采用随机数字表法,将其随机分为6组:20,40,80,160,320μmol/L叶黄素组及对照组,叶黄素组分别加入200μL含20,40,80,160,320μmol/L叶黄素终浓度的RPMI1640培养基及HeLa细胞,对照组仅加入200μL RPMI1640培养基及HeLa细胞。采用噻唑蓝(MTT)法检测人宫颈癌HeLa细胞增殖抑制率,并采用流式细胞术检测HeLa细胞凋亡率。采用统计学方法分析相同时间不同浓度叶黄素培养及相同浓度叶黄素培养不同时间的HeLa细胞增殖抑制率及凋亡率差异。结果 HeLa细胞在培养时间相同(为24h或48h或72h)时,随着叶黄素浓度依次增加(分别为20,40,80,160,320μmol/L)均较前一低浓度组的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异均有统计学意义(P<0.01);HeLa细胞在叶黄素浓度相同(为20μmol/L或40μmol/L或80μmol/L或160μmol/L或320μmol/L)培养时,随着培养时间增加(分别为24,48,72h)均较前一时间点的增殖抑制率及凋亡率显著升高,且差异有统计学意义(P<0.01)。结论叶黄素可抑制体外培养的人宫颈癌HeLa细胞的增殖,诱导其凋亡,并且HeLa细胞体外培养的增殖抑制率及凋亡率分别随着叶黄素浓度增加及作用时间延长而升高。     

大蒜素影响子宫颈癌Hela细胞增殖的实验研究

目的探讨大蒜素对宫颈癌Hela细胞增殖的影响。方法不同浓度的大蒜素作用于体外培养的Hela细胞,倒置显微镜下观察Hela细胞的形态学变化,采用MTT法检测大蒜素对Hela细胞增殖抑制能力,流式细胞术分析大蒜素对Hela细胞凋亡的影响。结果 MTT显示大蒜素能抑制人宫颈癌Hela细胞的增殖,并具有时间-剂量依赖性;流式细胞术测定结果显示50μg/ml浓度大蒜素可明显诱导Hela细胞凋亡,并将细胞周期阻滞在G2/M期。结论大蒜素对人宫颈癌Hela细胞增殖有抑制作用,其抑制作用与诱导Hela细胞凋亡和阻抑细胞周期有关。     

人宫颈癌干细胞的分离鉴定

目的:通过分选人宫颈癌细胞中的侧群细胞验证其肿瘤干细胞特性。方法:取16例行宫颈鳞癌切除的手术标本进行宫颈癌细胞原代培养,流式细胞仪分选侧群细胞(Side Population,SP),对比SP细胞和非SP细胞(Non Side Population,Non-SP)的体外自我更新能力和肿瘤形成能力。结果:在原代培养的16株宫颈癌细胞中均分选出SP细胞,比例约占(1.67±0.94)%。SP细胞的克隆形成能力显著高于NSP细胞,SP细胞在裸鼠肿瘤形成能力显著高于NSP细胞。结论:人宫颈癌侧群细胞具有肿瘤干细胞特性,为宫颈癌干细胞的研究提供了简单、有效的分离方法。