3种剂量普通肝素雾化吸入对内毒素致肺损伤大鼠肺泡凝血和组织炎症损伤的效应比较

目的 通过比较雾化吸入不同剂量普通肝素(UFH)对内毒素致急性肺损伤(ALI)大鼠肺部凝血、炎症和肺损伤组织学的效应,探讨UFH局部给药干预肺内凝血病的合适剂量.方法 29只雄性Wistar大鼠经尾静脉注射大肠杆菌脂多糖(LPS)复制ALI模型,按随机数字表法分为对照组(5只)和UFH组(24只).UFH组于制模后2h分别给予6、12、18 U/g的UFH 10 ml雾化吸入1次实施干预,而对照组则仅用生理盐水进行雾化吸入.LPS注射后6h处死大鼠,进行肺泡灌洗,收集支气管肺泡灌洗液(BALF).采用酶联免疫吸附试验( ELISA)检测凝血酶-抗凝血酶复合物(TATc)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;计算肺组织湿/干重(W/D)比值,并进行肺损伤病理评分.结果 UFH 6 U/g和12 U/g组BALF中TATc(μg/L)、TNF-α(ng/L)以及肺组织W/D比值、病理评分(分)均明显低于对照组(TATc:0.959±0.681、1.165±0.854比2.141±0.791,TNF-α:4.449±5.054、9.096±4.099比18.184±3.869,W/D比值:7.018±1.137、7.367±0.349比8.472±0.614,病理评分:16.0±1.0、16.5±1.5比19.6±0.4,P＜0.05或P＜0.01).UFH不同剂量组间BALF中TATc水平和病理评分无差异;UFH 18 U/g组BALF中TNF-α明显高于UFH 6 U/g组(15.503±8.753比4.449±5.054,P＜0.01);UFH18 U/g组肺组织W/D比值明显高于UFH 6 U/g组(8.850±1.157比7.018±1.137,P＜0.05)和12 U/g组(8.850±1.157比7.367±0.349,P＜0.05).结论 雾化吸入不超过12 U/g剂量的UFH治疗ALI时,能够抑制肺泡局部高凝状态,减轻早期炎症反应和肺组织损伤.     

吸入一氧化氮对急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应的影响

目的 :探讨吸入一氧化氮 (NO)对内毒素〔即脂多糖 (L PS)〕诱导的急性肺损伤小鼠肺组织炎症反应的影响。方法 :利用腹腔内注射 L PS诱导小鼠急性肺损伤模型 ,按随机数字表法将动物分为 L PS组和 L PS 吸入 NO2 0× 10 - 6组。 L PS注射前 (0时 ,即正常对照 )及注射后 1、3、6和 12小时处死小鼠 (n=6 ) ,分别测定肺组织湿重 /干重 (W/D)比值 ,同时用迁移率改变电泳法 (EMSA)检测核因子κB(NFκB)的活性 ,用酶联免疫吸附法 (EL ISA )检测肿瘤坏死因子α(TNFα)和白介素 10 (IL 10 )的浓度 ,用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测 TNFα m RNA及 IL 10 m RNA的表达 ,并观察肺组织病理改变。结果 :L PS注射后 3、6、12小时 ,W/D分别为 4 .80± 0 .31、4 .82± 0 .10和 4 .6 3± 0 .18,明显高于正常对照 (3.6 7± 1.0 4 ,P均 <0 .0 5 )。吸入 2 0× 10 - 6 NO后 3和 12小时 ,W/D分别为 4 .0 4± 0 .77和 4 .2 4± 0 .75 ,显著低于 L PS组 (P均 <0 .0 5 )。吸入 NO2 0× 10 - 6 6小时后 ,小鼠肺组织核蛋白 NFκB活性为 2 5 0 .6± 5 1.5 ,明显低于 L PS组 (40 5 .7± 6 2 .4 ,P<0 .0 5 )。与 L PS组比较 ,吸入 NO后 3～ 12小时 ,肺组织匀浆中 TNFα和 IL 10浓度均明显降低。吸入 NO后 6小时 ,肺组织匀浆中 TNFα     

白细胞介素-10对内毒素诱导急性肺损伤大鼠炎症因子的影响

目的研究白细胞介素-10(IL-10)对内毒素诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织炎症因子mRNA表达的影响,探讨IL-10对急性肺损伤的保护作用。方法24只SD大鼠随机分为3组:对照组,实验组,治疗组。实验组于尾静脉注射内毒素,治疗组注射内毒素和IL10,对照组注射生理盐水。测定各组肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)mRNA表达和血浆TNF-α、IL-1β和IL-6水平,观察各组大鼠肺组织的病理改变。结果TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达:实验组、治疗组高于对照组,P<0.01;实验组高于治疗组,P<0.05。血浆TNF-α、IL1-β、IL-6:实验组高于治疗组对照组,P<0.05。肺组织病理改变:治疗组明显轻于实验组。结论IL10能抑制内毒素诱导ALI大鼠肺组织中TNF-α、IL-1β和IL6mRNA的表达,降低血浆炎症因子水平,减轻肺组织的病理损害,能起到治疗ALI的作用。     

大剂量盐酸氨溴索对大鼠内毒素性肺损伤保护作用的实验研究

目的 观察大剂量盐酸氨溴索（ambroxol，AMB）对内毒素（LPS）诱导的大鼠急性肺损伤时炎症介质的影响，探讨其对肺脏的保护机制。方法 健康雄性SD大鼠随机分成A、B、C、D组，各组分别设立1、2,4h三个亚组。A组为对照组，B组经腹腔注射AMB，C组经腹腔注射LPS，D组在腹腔注射LPS前1h经腹腔注射AMB。在到达各时间点后，作肺泡灌洗。测定肺泡灌洗液（BALF）中的肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白细胞介素-1β（IL-1β）与巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）。并测定BALF中的乳酸脱氢酶（LDH）与总蛋白量。结果 BALF中的LDH和总蛋白量，以及TNF—α、IL-1β与MIP-2等在A组和B组中的差异均无统计学意义（P〉0．05），各相同时间点之间差异也无统计学意义（P〉0．05）；C、D组与A、B组比较各项指标均明显升高（P〈0．05），其中以C组升高最明显（P〈0．05），D组在各相同时间点均低于C组（P〈0．05）。C、D组的LDH与TNF—α在2h时达到峰值，而总蛋白量、IL-1β、MIP-2在4h时达到峰值。结论 大剂量AMB可降低炎症介质水平，对肺脏具有保护作用。     

炎症、凝血纤溶交互反应对休克发生发展的作用

休克是临床各科常见的急危重症之一。尽管多年来国内外学者对休克的研究由微循环向细胞、亚细胞及分子、基因水平不断深入，休克的基础研究和临床治疗水平均有了很大的进步和提高。但十多年来的临床实践及调查统计发现，病死率与20多年前比，有增无减。     

吸入一氧化氮治疗对内毒素所致急性肺损伤肺泡液体清除影响的实验研究

目的 观察吸入不同浓度一氧化氮(NO)对急性肺损伤(ALI)时肺水肿形成、肺泡液体清除和渗出的影响,并探讨其治疗机制,为临床选择吸入NO(iNO)治疗ALI及其治疗方式提供理论依据.方法 健康雄性新西兰大耳白兔18只,建立内毒素脂多糖(LPS)所致肺损伤模型(0 h).将动物随机均分成3组:①机械通气(MV)组:行容积控制通气(VCV),潮气量(VT)15 ml/kg,呼气末正压(PEEP)5 cm H2O(1 cm H2O=0.098 kPa),通气频率40次/min;②高iNO(HNO)组:在MV组治疗基础上给予40×10-6 NO吸入;③低iNO(LNO)组:在MV组基础上加10×10-6 NO吸入.检测通气后不同时间点各组大鼠血流动力学、血气分析、呼吸力学等指标.通气4 h后放血处死动物,计算肺湿/干重(W/D)比值,并观察肺泡液体渗出情况.结果 ①治疗后0.5 h,HNO组和LNO组的氧合指数(PaO2/FiO2)显著高于MV组,并维持到实验结束(P均＜0.05).②治疗后0.5、2和4 h,LNO组气道峰压(Ppeak)和平台压(Pplat)较MV组下降(P＜0.05或P＜0.01);HNO组4 h时的Ppeak、2 h和4 h的Pplat低于MV组(P＜0.05或P＜0.01);LNO组2 h和4 h时的Pplat明显低于HNO组(P均＜0.01).③HNO组和LNO组肺泡液体渗出少于MV组(F=22.756,P＜0.01),肺泡液体清除多于MV组(F=3.965,P＜0.05),肺组织W/D比值MV组＞HNO组＞LNO组(F=11.740,P＜0.01).④HNO组和LNO组的肺损伤评分好于MV组,但差异无统计学意义.结论 ALI早期iNO治疗可显著促进肺泡液体清除、改善肺泡液体渗出、减轻肺水肿、改善氧合和降低气道压,相对较低浓度(10×10-6)吸入治疗可能更有益.     

小儿急性肺损伤凝血功能变化并微量肝素干预机制研究

目的:观察急性肺损伤患儿血小板参数、凝血功能的改变及探讨微量肝素对小儿急性肺损伤的疗效。方法:对58例重症肺炎患儿和50例健康小儿的血小板数(PLT)、平均血小板容积(MPV)和血小板分布宽度(PDW)及凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)纤维蛋白原(FIB)进行了测定和比较,同时将急性肺损伤患儿随机分为常规治疗组和微量肝素佐治组。结果:与对照组比较,急性肺损伤患儿多项指标显著改变,使用微量肝素佐治可使异常的血小板恢复正常的时间明显缩短。结论:血小板参数及凝血功能的变化的检测有助于急性肺损伤的预后评估,微量肝素佐治急性肺损伤较显著,其主要机制是抗凝、抗血栓、抗氧自由基及抗炎作用。     

黄芪对兔内毒素性急性肺损伤的保护作用

目的:探讨中药黄芪对兔内毒素性急性肺损伤(ALI)的保护作用.方法:将12只雄性新西兰兔采用压力控制辅助通气模式后静脉注射脂多糖,当氧合指数(PaO2/FiO2)≤300 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)时认为ALI模型制备成功.此时将动物随机分为黄芪组和对照组,每组6只.黄芪组静脉注射黄芪注射液8 g/kg;对照组静脉注射等量生理盐水.观察ALI时以及ALI后1、2、3、4、5和6 h肺动态顺应性(Cdyn)、平均动脉压(MAP)的变化.于ALI后6 h活杀动物取肺组织,观察过氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化以及肺组织病理变化.结果:对照组ALI后各时间点肺Cdyn较基础值显著降低,ALI后5 h和6 h MAP较基础值显著下降,差异均有显著性(P＜0.05或P＜0.01);但两组间肺Cdyn和MAP的变化差异无显著性.黄芪组肺Cdyn及MAP组内比较差异无显著性;黄芪组SOD活性较对照组升高,MDA含量较对照组降低,差异均有显著性(P＜0.01和P＜0.05);光镜下黄芪组肺损伤组织病理变化较对照组减轻.结论:黄芪对兔内毒素性ALI有明显的保护作用.     

内毒素预处理对大鼠急性肺损伤的影响

目的　探讨肺泡巨噬细胞核因子κB( NFκB)活性变化在内毒素所致大鼠急性肺损伤中的作用。方法　 Wistar大鼠 36只 ,12只腹腔连续 3d注射脂多糖 ( L PS) 0 .5、0 .5和 1.0 mg/ kg,第 4 d腹腔注射脂多糖 ( L PS) 6 mg/ kg( L PS预处理组 ) ;12只腹腔注射内毒素 6 m g/ kg(肺损伤组 ) ;12只为正常对照组 ,腹腔注射生理盐水。注射完毕后 4 h处死大鼠 ,取肺测定肺组织湿 /干质量比 ( W/ D) ;以 99Tc标记的血清白蛋白测定肺通透指数 ;从肺灌洗液中提取肺泡巨噬细胞核蛋白 ,用凝胶电泳迁移率 ( EMSA)方法检测 NFκB活性。各组肺进行病理组织学观察。结果　 L PS预处理组肺 W/ D及通透性显著低于肺损伤组 ,而 Pa O2 和碱剩余高于肺损伤组 ;且肺损伤组及 L PS预处理组的 NFκB活性皆显著升高 ( P均 <0 .0 5 ) ,L PS预处理组高于肺损伤组。结论　内毒素预处理可减轻内毒素造成的肺损伤 ,此现象可能与肺泡巨噬细胞 NFκB活性变化有关     

吸入一氧化氮保护脓毒血症兔肺泡毛细血管膜完整性

目的探讨吸入一氧化氮（NO）对革兰氏阴性杆菌内毒素（LPS）诱发的急性肺损伤（ALI）肺泡毛细血管膜的影响。方法在机械通气条件下观察吸入NO对损伤肺的氧合功能、肺动态顺应性（Cdyn）、气道阻力（Rrs）及支气管－肺泡灌洗液（BAIF）中蛋白含量（TP）、中性白细胞（PMN）记数及肺湿／干重比（W／D）的影响和形态学检查。结果与对照组比较,吸入NO组治疗6h后的氧合指数（PaO2／FiO2）为37．5±1．8kPa比29．2±3．4kPa、肺内分流率（Qs／Qt）为（18．4±0．99）×10－2比（24．10±1．97）×10-2、肺动态顺应性（Cdyn）为6．53±0．31ml／kPa比5．41±0．41ml／kPa,均较求治疗组有显著改善（P＜0．01）。吸入NO组BALF中TP含量显著降低,为84．0±9．0mg／kg比100．9±7．3mg／kg、PMN记数为（13．83±1．125）×106／L比（19．78±1．289）×106／L,肺湿／干重比（W／D）为3．83±0．13比4．37±0．11。形态学示肺内PMN浸润和水肿减轻。结论吸入NO可显著减轻肺泡毛细血管膜的损伤,对ALI的病程有显著的影响。能为综合治疗提供宝贵的时机。     

地塞米松对家兔急性肺损伤早期中性粒细胞相关功能的影响

目的研究地塞米松对家兔急性肺损伤(ALI)早期中性粒细胞(PMN)相关功能的影响,为临床治疗提供理论依据。方法雄性新西兰家兔32只,随机对照组(N)8只,急性肺损伤组(L)10只,早期干预组(E)7只,预处理组(P)7只,建立内毒素ALI模型。E、P组分别于建模前、后一次性给予地塞米松2mg。结果L组在内毒素注射后血压、心率、pH、PMN下降明显。PMN表面CD11b表达强度进行性升高。E、P两组血压、心率降幅减小;CD11b表达强度的升高及3h血PMN计数下降被明显抑制;肺病理改变明显减轻。E组血压及PMN下降幅度大于P组。结论地塞米松对于感染中毒性休克有一定的改善作用,可以抑制ALI的发生、发展。在血压和外周血PMN计数两项指标上,实验结果表明激素的预处理对于实验动物有更好的保护作用。     

Effect of valproic acid on acute lung injury in a rodent model of intestinal ischemia reperfusion

Objectives

Acute lung injury (ALI) can develop during the course of many clinical conditions, and is associated with significant morbidity and mortality. Valproic acid (VPA), a well-known anti-epileptic drug, has been shown to have anti-oxidant and anti-inflammatory effects in various ischemia/reperfusion (I/R) models. The purpose of this study was to investigate whether VPA could affect survival and development of ALI in a rat model of intestinal I/R.

Methods

Two experiments were performed. Experiment I: Male Sprague-Dawley rats (250-300 g) were subjected to intestinal ischemia (1 h) and reperfusion (3 h). They were randomized into 2 groups (n = 7 per group) 30 min after ischemia: Vehicle (Veh) and VPA (300 mg/kg, IV). Primary end-point for this study was survival over 4 h from the start of ischemia. Experiment II: The histological and biochemical effects of VPA treatment on lungs were examined 3 h (1 h ischemia + 2 h reperfusion) after intestinal I/R injury (Veh vs. VPA, n = 9 per group). An objective histological score was used to grade the degree of ALI. Enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was performed to measure serum levels of interleukins (IL-6 and 10), and lung tissue of cytokine-induced neutrophil chemoattractant (CINC) and myeloperoxidase (MPO). In addition, the activity of 8-isoprostane was analyzed for pulmonary oxidative damage.

Results

In Experiment I, 4-h survival rate was significantly higher in VPA treated animals compared to Veh animals (71.4% vs. 14.3%, p = 0.006). In Experiment II, ALI was apparent in all of the Veh group animals. Treatment with VPA prevented the development of ALI, with a reduction in the histological score (3.4 ± 0.3 vs. 5.3 ± 0.6, p = 0.025). Moreover, compared to the Veh control group the animals from the VPA group displayed decreased serum levels of IL-6 (952 ± 213 pg/ml vs. 7709 ± 1990 pg/ml, p = 0.011), and lung tissue concentrations of CINC (1188 ± 28 pg/ml vs. 1298 ± 27 pg/ml, p < 0.05), MPO activity (368 ± 23 ng/ml vs. 490 ± 29 ng/ml, p < 0.05) and 8-isoprostane levels (1495 ± 221 pg/ml vs. 2191 ± 177 pg/ml, p < 0.05).

Conclusion

VPA treatment improves survival and attenuates ALI in a rat model of intestinal I/R injury, at least in part, through its anti-oxidant and anti-inflammatory effects.     

乌司他丁对脓毒症大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨乌司他丁(UTI)对脓毒症性急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔(CLP)制作SD大鼠脓毒症ALI模型,随机分ALI组、糖皮质激素(GC)治疗(GC)和UTI治疗(UTI)组。成模后3 h、6 h、12 h开腹抽血行动脉血气分析,提取支气管肺泡灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酰胆碱(DSPC)含量,测定肺组织湿/干重(W/D)比值和肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量,血浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)含量,观察与比较各组肺组织病理改变。结果UTI组PaCO_2、PaO_2、HCO_3~-、BE与GC组差异无统计学意义(P＞0．05),但高于ALI组(P＜0．05);两组W/D均明显低于ALI组(P＜0．01),BALF中TP显著低于ALI组(P＜0．01),TPL和DSPC/TPL高于ALI组(P＜0．05、P＜0．01),但两组间差异无统计学意义(P＞0．05);两组肺组织匀浆中MPO、MDA含量均明显低于ALI组(P＜0．01),UTI组MPO含量还明显高于GC组(P＜0．05);两组血浆TNF-α、IL-6水平均低于ALI组(P＜0．01),UTI组IL-6高于GC组(P＜0．05);两组病理变化均较ALI组轻(P＜0．01)。结论UTI能改善缺氧、过度通气和酸中毒,减轻肺水肿和肺组织病理损伤,具有抗氧化和抑制炎性细胞因子释放作用,其抗炎作用与GC相似。     

低分子肝素雾化吸入对急性肺损伤兔炎性因子的影响

目的探讨低分子肝素雾化吸入对急性肺损伤(ALI)的抗炎治疗作用。方法健康纯种白兔24只,随机分成3组(n=8):正常对照组,生理盐水雾化组和低分子肝素雾化治疗组。各组分别测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6)和白介素-1(IL-1)的浓度。结果与正常对照组相比,生理盐水雾化组血清炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1浓度显著升高(P0.05);而低分子肝素雾化治疗组血清中上述三种炎性因子浓度虽然仍比正常对照组高,但较生理盐水雾化组相比,血清TNF-α、IL-6和IL-1浓度显著下降(P0.05)。结论低分子肝素雾化吸入治疗急性肺损伤可以发挥抗炎作用,减轻炎症反应,具有一定的保护和治疗作用。     

Effect of N-acetylcysteine (NAC) on acute lung injury and acute kidney injury in hemorrhagic shock

Aim of the study

N-acetylcysteine (NAC) has been investigated to attenuate organ injury in various experimental and clinical studies. However, results in hemorrhagic shock (HS) were controversial. We determined the effects of continuous administration of NAC on acute lung injury (ALI) and acute kidney injury (AKI) in HS model.

Methods

Twenty male Sprague-Dawley rats were used. Pressure controlled HS model defined by mean arterial pressure (MAP) 40 ± 2 mmHg for 90 min followed by resuscitation and observation was used. Rats (n = 10 per group) were randomized into 2 groups with NAC or dextrose. Intravenous NAC was given continuously from 15 min after induction of HS to the end of observation period (2 h). We measured serum IL-6, nitrite/nitrate concentration. NF-κB p65 DNA binding activity, expressions of cytoplasmic phosphorylated IκB-α (p-IκB-α) and IκB-α, malondialdehyde (MDA) and histopathological injury scores in lung and kidney were also evaluated.

Results

MAP did not show any difference during the study period. NAC decreased histopathologic scores in both lung and kidney. Lung and kidney MDA levels were significantly lower in the NAC group compared to control group. Serum nitrite/nitrate and IL-6 were also significantly lower in the NAC group. The levels of lung cytoplasmic p-IκB-α expression was mitigated by NAC, and NF-κB p65 DNA binding activity was also significantly decreased in the NAC group.

Conclusions

Continuous infusion of NAC attenuated inflammatory response and acute lung and kidney injury after hemorrhagic shock in rats.     

抑制一氧化氮合成对急性肺损伤炎症反应的调节作用

目的 :研究抑制一氧化氮对脂多糖 (LPS)诱导肺损伤炎症反应的影响。方法 :ELISA检测TNFα、IL 1β、IL 6和IL 10浓度 ,Griess法测定亚硝酸盐浓度。肺湿干重比反映小鼠肺损伤程度。结果 :小鼠腹腔注射LPS 2 0mg/kg后 ,血浆及肺泡灌洗液 (BALF)中TNFα、IL 1β、IL 6、IL 10和亚硝酸盐浓度显著升高。LPS注射前 30min给予地塞米松 70mg/kg,血浆TNFα、IL 1β、IL 6、IL 10及亚硝酸盐浓度明显降低 ,而BALF中IL 1β、IL 6、IL 10浓度明显降低。给予一氧化氮合酶抑制剂S 硫酸甲基异硫脲 (SMT) 85mg/kg ,血浆IL 1β和IL 6明显升高 ,BALF中TNFα明显升高 ,而IL 1β、IL 6和IL 10无明显改变。与LPS组相比 ,地塞米松组肺湿干重比明显降低 ,而SMT组相反。结论 :抑制一氧化氮引起促炎性细胞因子释放增加 ,并加重肺损伤。