线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ和ⅡmRNA的表达与精子活动力的相关性研究

目的比较线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COXⅠ)和Ⅱ(COXⅡ)在正常精子和弱精子症患者精子中的表达差异。方法对48份精液进行常规检查,收集活动力正常的精子和(a b)级≤40%的弱精子症患者的精子,提取精子总RNA,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测COXⅠ,COXⅡ亚型mRNA的表达水平。结果与活动力正常的精子比较,COXⅠ和COXⅡmRNA在弱精子症患者精子中表达水平显著降低(P<0.05);精子密度与COXⅠ和COXⅡmRNA表达水平无相关性(r1=0.268,r2=0.042,P均>0.05)。结论人精子线粒体COXⅠ,COXⅡmRNA表达减少可能是精子活动力低下的原因之一。     

广东某市农村地区正常生育力男性精液参数的研究

目的探索现阶段正常生育力的健康男性精液的各项参数及其相互关系。方法采用WHO最新推荐的方法,对广东某市农村312例具有生育力的健康志愿者进行精液检测分析。结果(1)具有(a+b)级活动力精子率(60.63±11.76)%;(2)精子存活率(80.89±10.49)%;(3)精子密度(60.09±30.25)×106/ml;(4)不同年龄组间(a+b)级活动力精子、精子存活率及精子密度的参数比较,无显著差异(P>0.05);(5)禁欲时间与(a+b)级活动力精子、精子存活率间的关系呈负相关(P<0.05),与精子密度间的关系呈正相关(P<0.01),但不同禁欲时间组间与(a+b)级活动力精子、精子存活率及精子密度的比较,无显著差异(P>0.05);(6)精子密度与(a+b)级活动力精子和精子存活率无明显的相关关系(P>0.05),且(a+b)级活动力精子和精子存活率始终保持着平衡状态,并在50%以上。结论(1)(a+b)级活动力精子>50%、精子存活率>50%,即使精子密度偏低或<20×106/ml仍不影响正常男性的生育能力;(2)(a+b)级活动力精子、精子存活率以及精子密度与年龄(20~45岁)无关;(3)精子密度的高低对(a+b)级活动力精子和精子存活率无明显影响。     

健康男性和弱精子症患者精液精子中GP130的表达

目的观察在正常和活动力低下的人精液精子中白细胞介素-6(IL-6)及其受体(IL-6R)和GP130的表达差异。方法收集活动力正常的人精液精子和A、B级精子低于20％的弱精子症患者的精液精子,采用逆转录-聚合酶链反应 (RT-PCR)和免疫细胞化学的方法检测IL-6及其受体和GP130的表达水平。结果与活动力正常的精液精子比较, GP130在活动力低下患者精液精子的表达显著降低(P<0．01),本实验未检测到IL-6和IL-6R在人精液精子的表达。结论精液精子GP130的表达减少与人精子活动力低下相关,提示GP130表达减少可能是精子活动力低下的原因之一。     

腺苷酸环化酶和磷酸二酯酶在人成熟精子的表达及临床意义

目的:比较腺苷酸环化酶(AC)和磷酸二酯酶(PDE)在活动力正常和活动力低下的人精子表达的差异。方法:收集活动力正常的人精子和a、b级精子低于20%的弱精子症患者的精子,提取总RNA,采用反转录多聚酶链式反应(RTPCR)的方法检测AC和PDE亚型mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附法测定两组样本环磷酸腺苷(cAMP)和环磷酸鸟苷(cGMP)的含量。结果:与活动力正常的精子比较,可溶性腺苷酸环化酶(sAC)表达和cAMP含量在活动力低下的患者精子显著降低(P均<0.01),而磷酸二酯酶4C(PDE4C)的表达显著增加(P<0.01);腺苷酸环化酶3(ACIII)的表达和cGMP的含量在活动力正常和活动力低下的精子差异无显著性(P>0.05)。结论:精子sAC的表达减少和PDE4C的表达增加是精子活动力低下的原因之一。     

深圳地区与其他地区男科就诊患者精液质量比较分析

目的 了解深圳地区就诊男科患者的精液质量特征.方法 对北京大学深圳医院泌尿男科及辅助生育科室就诊病人的6 964份精液标本检测结果进行统计分析,并将结果与成都、遵义及西班牙男科门诊就诊病人精液质量进行比较.分析指标包括精液量、密度、活动率、活力(A+B)精子百分比等.结果 在6964份精液中,正常的精液占19.74%,弱精子症占50.72%,少精子症占24.11%,无精子症占2.77%,其他指标异常占2.66%.各项指标均数:精液量(3.04±1.05)ml,精子密度(50.73±42.11)×106/ml,精子总数(148.03±127.05)×106/ml,精子活动率(50.06±17.90)%,a级精子(17.98±11.75)%,(a+b)级精子(32.80±15.14)%.对比成都、遵义地区的相关数据,精子密度下降、精子活动率下降、精子活力下降等精液异常的百分比较高,差异有统计学意义,而无精子症百分比差异有统计学意义.对比西班牙相关数据,(a+b)级精子百分比差异无统计学意义(P>0.05);精子密度、(a+b)级精子数目高于西班牙(P<0.01);精液量、禁欲时间、精子总数低于西班牙指标,差异有统计学意义(P<0.01).结论 深圳地区就诊男科患者精液质量低于成都地区及遵义地区水平,与西班牙比较精液质量无明显下降.     

弱精子症患者精子外周致密纤维2基因及蛋白的表达

目的:探讨弱精子症患者精子中外周致密纤维2(ODF2)mRNA及蛋白的表达水平,比较ODF2在健康男性与弱精子症患者中的表达差异。方法:根据WHO第5版,收集身体健康无疾病正常男性精液(n=15)和弱精子症患者精液(n=45)共60份,利用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精子统计,将弱精子症分为轻、中、重度3组,采用实时定量PCR和Western印迹对4组标本进行ODF2基因的表达量研究。结果:与正常组相比,轻度弱精子症组精子中ODF2基因表达无明显统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.6880±0.3720,P0.05);中度弱精子症组ODF2基因表达降低,有显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.4833±0.1863,P0.05);重度弱精子症组ODF2基因表达明显降低,有极显著的统计学差异(1.1120±0.5255 vs 0.448 3±0.3408,P0.01)。Western印迹中ODF2的OD值(ODF2/β-actin)在正常组和轻、中、重度弱精子症组分别为:0.4587±0.0521、0.3261±0.0714、0.1454±0.0536和0.1227±0.0457,与正常组相比,轻度弱精子症组无明显统计学差异(P0.05),中度弱精子症组有显著的统计学差异(P0.05),重度弱精子症组有极显著的统计学差异(P0.01)。结论:ODF2基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调与精子活动力下降有密切联系,呈正相关性,提示ODF2基因可能参与精子活力的调控。     

复方玄驹胶囊治疗少弱精子症患者的多中心临床研究

目的:观察复方玄驹胶囊治疗少弱精子症患者的疗效。方法:采用多中心、开放性、自身前后对照的临床研究方法,对120例少弱精子症患者采用口服复方玄驹胶囊(3粒,3次/d)治疗12周。以精子密度和(a+b)级精子为主要疗效指标,以a级精子、精子活动率及精液量为次要疗效指标,评价复方玄驹胶囊治疗效果。结果:有107例患者完成了临床研究,与治疗前相比,除精液量仅在治疗12周后明显增加(P<0.01)外,精子密度、a级精子和(a+b)级精子及精子活动率等精液参数在治疗4、8和12周后具有显著改善(P均<0.01)。此外,与治疗4周后相比,精子密度、a级精子和(a+b)级精子及精子活动率等精液参数在治疗8周和12周后也有显著改善(P<0.05或0.01);同样,与治疗8周后相比,精液参数在治疗12周后也有显著改善(P均<0.01)。治疗12周后,精子密度增加了63.28%,达到正常标准的病例数为73例(68.22%);(a+b)级精子提高了63.17%,达到正常标准的病例数为39例(36.45%);a级精子提高了78.56%,达到正常标准的病例数为34例(31.78%);精子活动率提高了44.36%,达到正常标准的病例人数为77例(71.96%);精液量增加了18.13%。结论:复方玄驹胶囊可明显提高少弱精子症患者精液质量,未见明显不良反应。     

细胞外信号调节激酶和P38蛋白激酶在自体移植静脉中的表达

目的研究丝裂原活化蛋白激酶亚单位细胞外信号调节激酶(ERK)和p38蛋白激酶(p38 MAPK)在移植静脉血管重塑过程中的表达.方法选Wistar大鼠80只,建立自体移植静脉模型,术后随机分为6 h、24 h、3 d、7 d、2周、4周、6周及8周组,于相应时点取材,半定量逆转录PCR法检测移植血管中ERK和p38 MAPK的mRNA表达;Western蛋白印迹定量检测ERK和p38 MAPK的蛋白产物及磷酸化蛋白产物表达;脱氧核苷酸末端转移酶末端标记法(TUNEL)检测血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的变化;免疫组化检测增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果移植静脉术后6 h,ERK1和p38 MAPK的mRNA表达均明显增强,与正常静脉组比较差异均有显著性意义(P＜0.01);ERK1mRNA表达在移植后7 d达高峰,表达值为(33.2±14.2)%,p38 MAPK的mRNA表达于术后2周达到高峰,表达值为(58.8±26.2)%,与其余各时点比较差异有显著性意义(P＜0.01).Western蛋白印迹提示ERK1/2在术后1～2周达高峰,6周时逐渐恢复至正常水平;而p38 MAPK则在移植后2～4周达高峰,之后开始减少,8周时仍维持一定表达量(1/4～1/2).ERK1与PCNA表达呈正相关(r=0.759 6,P＜0.01),p38 MAPK与凋亡呈正相关(r=0.892 2,P＜0.01).结论MAPK的激活是移植静脉内膜增生以及血管重塑的关键环节,可能成为防治移植静脉狭窄、闭塞的新的治疗靶点.     

CATSPER1蛋白与特发性弱精子症关系的研究

目的:探讨CATSPER1蛋白在特发性弱精子症发病中的作用。方法:采用非连续密度梯度离心分离精子,免疫细胞化学技术检测CATSPER1蛋白在特发性弱精子症患者精子中的定位及表达变化;同时用蛋白印迹技术检测CATSPER1蛋白在正常对照组及轻度弱精子症组、中度弱精子症组和重度弱精子症组中表达的差异,进行统计学分析。结果:CATSPER1蛋白定位于精子鞭毛主段;与正常对照组相比,CATSPER1在弱精子症患者中的表达下降,差异具有显著性(t=2.188,P=0.042);CATSPER1蛋白在正常对照组、轻度弱精子症组、中度弱精子症组和重度弱精子症组中的相对含量分别为(0.806±0.266)、(0.669±0.207)、(0.505±0.214)、(0.295±0.162),与对照组相比,CATSPER1蛋白相对表达量在各弱精子症组均存在不同程度的下降,差异存在显著性(P<0.05)。前向运动精子(a+b级)百分率与CATSPER1蛋白的含量成正相关(r=0.633,P=0.000)。结论:CATSPER1蛋白表达下降或异常可能是导致特发性弱精子症发生的一个环节。     

左旋肉碱和乙酰左旋肉碱复合制剂对特发性弱精子症精子质量的影响

目的:观察左旋肉碱和乙酰左旋肉碱复合制剂对特发性弱精子症精子质量的影响。方法:采用自身对照实验设计。按WHO的标准诊断为特发性弱精子症的30例患者,经过中西医结合治疗无效后,服用左旋肉碱和乙酰左旋肉碱复合制剂,每次1袋,2次/d,疗程为3个月。应用本复合制剂前后按WHO标准进行精液分析各2次。结果:最终25例完成本观察。和治疗前比较,治疗后的精子存活率从(24.89±12.28)%提高为(49.45±17.40)%,精子活动力(a+b)级从(16.04±8.33)%提高为(24.64±7.09)%,一次射精的精子总数从(76.79±43.14)×106提高为(131.01±94.53)×106,有统计学显著差异(P<0.05)。结论:左旋肉碱和乙酰左旋肉碱对特发性弱精子症有辅助治疗效果,能提高患者的精液质量。     

无症状性前列腺炎对精液参数的影响

目的:探讨无症状性前列腺炎对精液参数的影响。方法:对已诊断无症状前列腺炎的152例患者按EPS中的WBC水平进行分组:A组(WBC+～++)和B组(WBC+++～++++);并设立健康正常的个体作为对照组(C组)。检测指标包括:精液量、pH值、液化时间、精子浓度、精子存活率、a级精子百分率、正常形态精子百分率、WBC计数与相关的炎症细胞因子等。结果:精液参数中液化时间、a级精子百分率(%)和正常形态精子百分率(%):A组(24.5±5.2)min、(20.0±4.1)、(10.5±4.8)和B组(30.4±5.0)min、(10.0±3.8)、(7.5±4.2)与C组(18.5±5.3)min、(32.3±4.5)、(17.8±3.6)相比,以及B组与A组相比,差异均有显著性(P<0.001),而pH值、精液量、精子存活率、精子浓度:A组(7.6±0.3)、(3.0±1.1)ml、(56.0±6.0)%、(65.9±11.3)×106/ml,B组(7.7±0.3)、(2.8±1.2)ml、(52.3±6.3)%、(62.5±10.3)×106/ml和C组(7.5±0.2)、(2.9±1.2)ml、(62.1±5.3)%、(87.7±10.1)×106/ml差异均无显著性(P>0.05)。B组精液中IL-1β(58.64±30.82)pg/ml、TNF-α(50.57±27.48)pg/ml与C组IL-1β(17.68±5.65)pg/ml、TNF-α(23.50±4.80)pg/ml比较,显著上升(P<0.001)。结论:无症状性前列腺炎对精液主要参数有明显影响。     

弱精子症患者精子中CRISP2基因及蛋白的初步研究

目的:探讨弱精子症患者精子中富含半胱氨酸的分泌蛋白2(CRISP2)mRNA及蛋白的表达水平,探讨其与精子活力的关系及相关的分子机制。方法:收集成年男性弱精子症患者精液78例,活力正常精液70例作为对照组,50% Percoll离心分离纯化后,提取精子总RNA及总蛋白,采用RT-PCR,SYBR Green实时定量PCR和Western印迹技术检测CRISP2 mRNA及蛋白相对表达量。结果:CRISP2基因在弱精子症患者精子中的表达量明显低于其在正常对照组精子中的表达量,下降达4.3倍;Western印迹发现CRISP2蛋白在弱精子症组较正常对照组下降达1.71倍,两组之间的表达量有明显的统计学差异(P<0.05)。结论:CRISP2基因及蛋白在弱精子症患者精子中的表达下调可能与精子活力下降有密切联系,提示CRISP2基因及蛋白可能成为弱精子症发病机制研究的一个分子靶标。     

重组人睾丸精子结合蛋白对人精子运动参数的影响

目的:探讨重组人睾丸精子结合蛋白(TSBP)对体外培养人精子运动参数的影响。方法:将22例生育男性的精液经Percoll密度梯度离心后,分别与0.01mg/ml及0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外共同孵育1h或3h,同时设立对照组,Western印迹检测重组His6-TSBP与精子膜的结合情况,计算机辅助精液分析(CASA)系统测定重组His6-TSBP对精子运动参数的影响。将12例弱精子症患者的精液按同样方法处理,检测重组His6-TSBP对弱精子症患者精子运动参数的影响。结果:0.1mg/ml重组His6-TSBP与生育男性精子作用1h可以提高体外培养精子的前向运动百分率(a+b级精子百分率),培养3h后前向运动百分率和活率均有所提高,差异具有显著性(P<0.05);0.01mg/ml重组His6-TSBP对检测各指标均无显著性影响。0.1mg/ml重组His6-TSBP与弱精子症患者精子作用3h可以提高精子前向运动百分率(P<0.05),但对活率无显著影响。结论:0.1mg/ml的重组His6-TSBP在体外可以提高生育男性精子的前向运动百分率和活率及弱精子症患者精子的前向运动百分率。     

三种精子质膜完整性检测方法的比较

目的对6-羧基二乙酸荧光素／碘化丙啶（6-CFDA／PI）双荧光标记方法进行改良并应用于人精子质膜完整性的检测,并与单用伊红Y染色、低渗肿胀试验（HOS）两种检测方法进行比较。方法随机选择30例本所人类精子库志愿者精液标本（密度≥20×10^6／ml、活力（a＋b）≥50%）,分别采用单用伊红Y染色、HOS和6-CFDA／PI双荧光标记试验检测精子质膜完整性。结果30例精液标本伊红Y染色活精子比率、HOS肿胀精子数比率、6-CFDA／PI双荧光标记结果分别为（68．8±7．6）％、（68．7±7．8）％和（67．9±7．8）％,两两比较,无显著性差异（P均〉0．05）,但双荧光标记能显示死活精子的过渡状态。相关性分析结果显示,三种方法检测的活精子比率均与前向运动（a＋b）精子呈显著正相关。结论6-CFDA／PI双荧光标记检测方法与单用伊红染色、HOS两种常用检测精子质膜完整性方法具有一致性,同时能鉴定出精子过渡的中间状态。     

丝裂原活化蛋白激酶类和蛋白激酶C在转化生长因子β1诱导肾小管细胞结缔组织生长因子表达中的作用

目的了解转化生长因子β1（TGF-β1）诱导肾小管细胞结缔组织生长因子（CTGF）表达的机制，特别是蛋白激酶C（PKC）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）在CTGF基因表达中的作用及其对Smad磷酸化的影响。方法分别应用PKC抑制剂G06850以及MAPK的3个组成成分ERK、JNK和p38MAPK的抑制剂PD98059、U0126、SP600125和SB203580阻断相应通路，观察其对TGF．131诱导的CTGF表达以及Smad2／Smad3磷酸化的影响。结果TGF-β1（5μg／L）以时间依赖方式诱导HK-2细胞中Smad2／Smad3的磷酸化，从基础值0．87±0．09上升至2h时高峰2．350±0.11。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）和ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）、U0126（10μmol／L）可部分抑制TGF-β1诱导的CTGF表达，而p38MAPK抑制剂SB203580（20μmol／L）和JNK抑制剂SP600125（10μmol／L）对TGF-β1诱导的CTGF的表达无影响。PKC抑制剂G06850（5μmol／L）可减少TGF-β1诱导的Smad2／Smad3磷酸化，而ERK抑制剂PD98059（10μmol／L）和U0126（10μmol／L）对Smad2／Smad3的磷酸化没有影响。结论在肾小管上皮细胞中，TGF-β1诱导CTGF的表达需要PKC和Ras／MEK／ERK的参与。PKC以Smad依赖的方式参与肾小管上皮细胞中TGF-β1诱导的CTGF的表达，而Ras／MEK／ERK对CTGF表达的调节不依赖于Smads。     

P38MAPK 信号通路在高糖导致人腹膜间皮细胞 PARP -1激活、细胞外基质聚集及转分化的作用

目的：探讨人腹膜间皮细胞株 HMrSV5在高糖刺激下,P38MAPK 信号通路的活化情况及 PARP -1的蛋白表达情况。探讨 P38MAPK 抑制剂对腹膜间皮细胞外基质聚集及细胞转分化的作用及对 PARP -1的活性变化。方法：无血清培养 HMrSV5细胞株16~24 h 后,分别用高糖（终浓度138 mmol/ L 葡萄糖）刺激0 m、5 m、30 m、1 h、2 h、8 h、24 h,并选择等渗的甘露醇作为对照用。Western Blot 分别检测不同时间总的 P38MAPK 及磷酸化的 P38MAPK 的蛋白表达水平。同时用Western blot 检测在不同时间点 PARP -1的蛋白表达情况。无血清培养 HPMCs16~24 h 后,分为4各组：（1）低糖组（5．6 mmol/ L 葡萄糖）;（2）刺激组（138 mmol/ L 葡萄糖）;（3）抑制剂组（138 mmol/ L 葡萄糖＋ SB203580P38抑制剂,浓度为10μmol/ L）;（4）DMSO 对照组。在24 h 收取细胞用 Western blot 检测 P38MAPK、PARP -1、FN、PAI -1、E - cadherin 及α-SMA 的蛋白水平变化。结果：高糖以时间依赖的方式刺激 HPMCs 后,磷酸化的 P38MAPK 表达增加。PARP -1的表达在高糖刺激下也呈时间依赖性增高,24 h 已很明显。用 P38MAPK 抑制剂 SB203580后,PARP -1及 FN、PAI -1及α- SMA 也下调,E - cadherin 表达上调,差异有统计学意义（P 〈0．05）。结论：高糖可使得人腹膜间皮细胞 P38MAPK 通路的活化。运用P38的抑制剂,均能使得 PARP -1活性下调,同时逆转腹膜间皮细胞外基质聚集及 HPMCs 转分化。这提示在高糖刺激腹膜间皮细胞时,P38MAPK 参与了 PARP -1的活化,并参与腹膜间皮细胞外基质聚集及人腹间皮细胞转分化。     

淫羊藿素对大鼠肝星状细胞HSC-T6的抑制作用

目的探讨淫羊藿素对肝星状细胞HSC-T6的影响及其相关机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,用含10％胎牛血清的无酚红DMEM培养基培养细胞,细胞用含5％活性炭吸附胎牛血清的无酚红DMEM培养基接种于细胞培养板。采用雌激素受体完全拮抗剂ICI-182780观察淫羊藿素（ICT）是否能够通过雌激素受体对HSC-T6细胞产生影响。实验分为对照组、ICI-182780组、淫羊藿素组、淫羊藿素联合ICI-182780组。通过MTT和免疫组化来观察ICT对HSC-T6增殖和活化的影响,通过ELISA检测TGF—D1、TIMP-1、MMP-1的表达活性来观察ICT对细胞外基质合成与降解的影响,通过Western blotting的方法检测ERK、p38、JNK的磷酸化水平来观察ICT对MAPK信号通路的影响。结果与对照组比较,加入ICI-182780（1μM）对HSC—T6细胞增殖、a—SMA、TGF-p1、TIMP-1、MMP-1的表达以及pERK、pp38、pJNK的水平均无明显影响。药物ICT干预后,细胞增殖、a—SMA、TGF—β1、TIMP-1的表达以及pERK、pp38、pJNK的水平明显被抑制,MMP-1的表达活性明显增强,差异有统计学意义（P〈0．01）,药物ICT联合ICI与单独用药比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论ICT可以抑制HSC—T6细胞的增殖与活化、降低细胞外基质的合成,但是我们发现上述效应不是通过雌激素受体来调控的。     

三羟基异黄酮对增生性瘢痕成纤维细胞受体型酪氨酸蛋白激酶-丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

目的 了解5,7,4'-三羟基异黄酮(genistein)对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFb)内受体型酪氨酸蛋白激酶-丝裂原活化蛋白激酶(TPK-MAPK)信号转导通路的影响,探讨genistein抑制瘢痕增生的分子机制. 方法体外分离培养HSFb,以不同浓度genistein(25、50、100μmol/L)处理细胞,再加入10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)刺激,用[γ-32P]腺苷三磷酸底物掺入法检测细胞TPK活性;用蛋白质印迹法检测TPK-MAPK通路中主要信号蛋白分子c-Raf、丝裂原激活蛋白激酶激酶(MEK)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38 MAPK、c-Jun氨基末端激酶(JNK)磷酸化蛋白的表达变化.以二甲亚砜溶剂处理的HSFb为对照组. 结果 25、50、100μmol/L genistein作用后,HSFb内TPK活性分别为(7.15±0.35)、(5.62±0.88)、(3.17±0.94)×105 pmol·min-1·mg-1,与对照组(8.92±0.28)×105 pmol·min-1·mg-1比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);细胞内磷酸化c-Raf、MEK1/2、ERK1/2、p38蛋白的含量均有不同程度降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).genistein各剂量组磷酸化JNK蛋白含量与对照组近似.在genistein预处理前提下,加入bFGF刺激的细胞内TPK活性及各信号蛋白的表达亦呈下降趋势. 结论 genistein可通过抑制细胞受体TPK信号转导途径影响HSFb的增殖与活化,主要信号通路可能为TPK→Raf→MEK→ERK/p38途径.     

复方玄驹胶囊治疗Ⅲ型和Ⅳ型前列腺炎的疗效观察

目的:研究复方玄驹胶囊治疗Ⅲ型和Ⅳ型前列腺炎的效果,并对其机制进行探讨。方法:106例前列腺炎中88例Ⅲ型前列腺炎,18例Ⅳ型前列腺炎。其中有14例伴不育,27例伴ED,8例伴血PSA增高。给予前列腺按摩、心理治疗同时,采用复方玄驹胶囊,3粒/次,3次/d,连续治疗3个月以上。采用自身对照的方法,根据服药前后各项指标的变化情况评价疗效。结果:治疗1个月后,Ⅲ型前列腺炎NIH-CPSI总评分降低47.59%(治疗前22.17±3.48,治疗后11.62±2.53),治疗3个月后,NIH-CPSI总评分降低74.61%(治疗前22.17±3.48,治疗后5.63±3.14),治疗前后NIH-CPSI总评分及各项评分比较均有显著性差异(P0.05或P0.01)。前列腺炎伴不育患者,治疗后精子质量[精子浓度(28.32±8.36)×106/ml,a级精子活动率(26.06±10.18)%,a+b级精子活动率(53.26±11.29)%]与治疗前[精子浓度(12.52±3.16)×106/ml,a级精子活动率(10.12±4.56)%,a+b级精子活动率(29.89±8.86)%]比较有显著性差异(P0.05),并有8例患者配偶怀孕。前列腺炎伴ED患者,IIEF-5评分(19.78±3.00)与治疗前(10.41±3.65)比较有显著性差异(P0.05),并有19例完全恢复正常。8例血PSA增高患者在治疗后下降至正常范围。19例前列腺液常规中白细胞计数100个/HP,各种培养阴性者,治疗后,白细胞减少,有的恢复正常。结论:复方玄驹胶囊治疗前列腺炎及伴不育、ED、PSA增高患者,以及EPS常规中白细胞高,细菌培养阴性的患者,疗效显著,无明显不良反应,值得临床推广应用。     

弱精子症动物模型中尿纤溶酶原激活因子的含量及表达情况研究

目的:利用奥硝唑所致弱精子症动物模型,采用免疫组化方法和RT-PCR技术,了解尿纤溶酶原激活因子(uPA)在弱精子症动物模型中的含量及表达情况,初步探讨奥硝唑所致弱精子症动物模型的机制及uPA作为预防或治疗弱精子症药物的可能性。方法:48只雄性SD大鼠随机分为1d用药组,5d用药组,10d用药组,15d用药组,20d用药组和对照组,每组8只,用药组每天给予奥硝唑200mg/kg,对照组给予0.5%羧甲基维素钠连续灌胃,用药组分别在给药第1、5、10、15、20d后24h内,麻醉处死动物取附睾和睾丸。低渗肿胀试验检测精子细胞膜完整性,免疫组化方法动态观察睾丸与附睾组织中uPA蛋白表达情况,RT-PCR检测睾丸组织中uPAmRNA含量。结果:奥硝唑持续给药构建弱精子症时,精子膜完整性下降发生在给药的第10d,并一直维持低值。与建立弱精子症模型同步的uPA在睾丸和附睾组织蛋白表达及mRNA含量下降在用药15d,下降趋势上是平行的,而显效性稍滞后。用药15d组与用药20d组uPA蛋白表达、mRNA水平分别与对照组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:精子细胞膜受损、运动能力下降与uPA表达及含量下降平行,奥硝唑所致弱精子症模型形成可能是由于uPA含量及表达下降所致。弱精子症形成原因较复杂,uPA含量及表达的下降可认为是弱精子症形成因素之一,检测uPA含量可能有助于弱精子症的诊断和预防。