针刺对2型糖尿病大鼠弓状核INSR基因表达的影响

[目的]探讨2型糖尿病(T2DM)大鼠是否存在中枢胰岛素抵抗(IR)以及针刺对T2DM大鼠弓状核胰岛素受体(INSR)基因表达的影响.[方法]给食源性肥胖大鼠腹腔注射小剂量链脲佐菌素(STZ)造成T2DM模型,随机分为针刺组、优降糖组、模型组,设正常对照组.处理4周后,用罗氏活力型血糖仪测空腹血糖(FBS)、放免法测空腹胰岛素(FINS)、原位杂交测弓状核INSR mRNA表达.[结果]治疗后针刺组FBS、FINS显著降低,与模型组差异显著,接近正常组水平;优降糖组FBS显著降低,接近正常组水平(P＞0.05),FINS低于模型组但无显著差异(P＞0.05).模型组弓状核INSR基因表达明显低于针刺组(P＜0.01)和正常组(P＜0.05),低于优降糖组但无显著差异(P＞0.05);针刺组、优降糖组与正常组比较无显著差异(P均＞0.05);优降糖组明显低于针刺组(P＜0.05).[结论]T2DM大鼠存在弓状核INSR基因表达低下,T2DM机体存在中枢IR,针刺和优降糖均可以改善T2DM大鼠弓状核INSR基因的表达,而针刺对改善T2DM大鼠弓状核INSR基因表达的作用优于优降糖.     

葛根素对2型糖尿病大鼠脂肪组织ADRP基因表达的影响

目的：观察葛根素(Pue)对实验性2型糖尿病(2-DM)大鼠脂肪组织中脂肪分化相关蛋白(ADRP)基因mRNA表达的影响。方法：Wistar大鼠喂以高糖高脂饮食伴尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(STZ)25 mg·kg^-1复制2-DM大鼠模型，将造模大鼠随机分为模型组(腹腔注射丙二醇)和3个Pue治疗组(腹腔注射40，80，160 mg·kg^-1)，另选10只大鼠为正常组。各组大鼠连续腹腔注射6周后，空腹取材，测定空腹血糖(FBG)、血清胰岛素(FINS)水平，并计算胰岛素抵抗指数(IR)；同时以RT-PCR法检测脂肪组织ADRP基因mRNA的表达。结果：与2-DM模型组比较，Pue高、中剂量组大鼠脂肪组织ADRP基因 mRNA表达显著降低(P<0.05)；Pue高、中、低剂量组大鼠FBG，IR及Pue高、中剂量组大鼠FINS显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论：Pue可通过降低2-DM大鼠ADRP基因mRNA表达，降低胰岛素抵抗水平，从而降低2-DM大鼠血糖。     

针刺对2型糖尿病大鼠抵抗素基因表达的研究

目的:探讨针刺对2型糖尿病大鼠抵抗素(Resistin)基因表达的作用。方法:将造模成功的大鼠按随机化原则分为针刺组、西药组、模型组,同时将普食组大鼠作为正常对照组,每组各8只。针刺组大鼠放入固定器中,取"后三里"(相当于足三里)、内庭和胰俞穴针刺治疗,西药组用罗格列酮灌胃,模型组用双蒸水灌胃,1次/d,连续4周。实验结束后,处死动物取材,检测血清胰岛素、抵抗素含量,RT-PCR检测抵抗素的基因表达。结果:针刺组在血糖、血脂明显降低的同时,血清胰岛素、抵抗素均低于模型组,两组相比有显著性差异(P<0.05,P<0.01);西药组抵抗素与模型组相比明显下降(P<0.01),但胰岛素无明显下降。针刺组大鼠抵抗素基因表达显著低于模型组和西药组。结论:针刺对2型糖尿病大鼠抵抗素基因表达具有明显降低作用,从而有效改善胰岛素抵抗。     

怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠脑组织Nestin表达的影响

目的：观察怀牛膝对重型颅脑损伤大鼠脑组织巢蛋白（Nestin）表达的影响。方法：将大鼠分为怀牛膝高剂量组、怀牛膝中剂量组、怀牛膝低剂量组、模型组、假手术组,按自制改良的Feeney法制备重型颅脑损伤模型,治疗7d后处死各组大鼠取脑,用HE染色观察损伤灶脑组织病理变化,免疫组化法检测大鼠损伤灶脑组织Nestin的表达。结果：怀牛膝高剂量组Nestin表达明显高于模型组（P〈0.05）;怀牛膝中剂量组及低剂量组与模型组比较无明显差别;假手术组仅偶尔在海马区见极少量Nestin阳性细胞表达,部分切片无阳性表达。结论：高剂量怀牛膝能上调重型颅脑损伤大鼠脑组织Nestin的表达,对重型颅脑损伤大鼠神经干细胞的再生有促进作用。     

翻白草对2型糖尿病大鼠胰岛素降解酶基因表达的影响

目的 研究翻白草水煎剂对2型糖尿病大鼠胰岛素降解酶基因mRNA表达的影响。方法 随机选取以不同剂量的翻白草水煎剂灌胃的2型糖尿病大鼠、以安慰剂灌胃的2型糖尿病大鼠以及正常对照各10只,用RT-PCR法测定肝细胞胰岛素降解酶基因mRNA的表达。结果 服用翻白草后,2型糖尿病大鼠的胰岛素降解酶基因mRNA的表达下降,而服用安慰剂的糖尿病大鼠上述指标无显著变化。结论 翻白草能降低2型糖尿病大鼠胰岛素降解酶基因的表达。     

石榴皮对2型糖尿病大鼠的影响

目的:观察石榴皮醇提物(EEOPP)对2型糖尿病模型大鼠的治疗作用。方法:SPF级雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、石榴皮低(0.4 g/kg)、中(0.8 g/kg)、高(1.6 g/kg)剂量组、乙酸乙酯组(0.8 g/kg)、除去乙酸乙酯组(0.8g/kg)、阳性对照二甲双胍组(0.4 g/kg)。在用高脂饮食和链脲佐菌素(streptozotic,STZ)制造2型糖尿病大鼠模型后,给药组大鼠分别灌服石榴皮醇提物或二甲双胍,连续4周,取血测定大鼠空腹血糖(FBG)、血脂、脂联素(Adiponectin)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)含量。结果:石榴皮醇提物中(0.8 g/kg)、高(1.6 g/kg)剂量组以及乙酸乙酯组(0.8 g/kg)可显著降低实验大鼠的血糖水平、总胆固醇(TC)、血清甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、瘦素(Leptin)、肿瘤坏死因子(TNF-α)的水平,升高高密度脂蛋白(HDL-C)和脂联素(Adiponectin)水平,与模型组比较存在显著性差异。结论:石榴皮醇提物有较好的降血糖作用。     

小檗碱对2型糖尿病大鼠IRS-1／-2、p85基因表达的影响

目的：探讨小檗碱降血糖和治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法：对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠，给予小檗碱治疗8周。氧化酶法测定血糖，RT—PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1／-2、p85mRNA的表达及Western blot法测定上述3个组织中IRS-1／-2、p85蛋白的表达。结果：治疗8周时，小檗碱治疗组大鼠的空腹血糖显著下降，各组织IRS-1／-2、p85基因表达均有不同程度的提高。结论：小檗碱治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-1／-2、p85基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。     

仙灵脾对2型糖尿病大鼠尿蛋白的影响

目的探讨仙灵脾对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾脏的保护作用及作用机制。方法高脂高糖饲料加小剂量链脲佐菌素建立T2DM大鼠模型。将大鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组(n=16)、仙灵脾组(n=16)和二甲双胍组(n=12);8周处死大鼠,取血、尿、肾标本,检测血糖、肾功能、肾脏指数、TG、TC及24 h尿蛋白水平。结果与模型组比较,仙灵脾组的肾脏指数和24 h尿蛋白水平均明显降低(P均<0.05)。结论仙灵脾可能对糖尿病大鼠的肾脏有保护作用。     

怀牛膝对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制研究

目的:研究怀牛膝对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制。方法:将Wistar大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、怀牛膝高剂量组、怀牛膝中剂量组和怀牛膝低剂量组5组。灌胃治疗12周后,观察肾功能、尿蛋白、肾脏病理变化;以RT-PCR检测p53和mdm2基因mRNA表达;以琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:怀牛膝能显著改善肾脏功能,明显降低肾组织细胞凋亡,且可下调p53基因表达、上调mdm2基因表达。结论:怀牛膝可能通过抑制细胞凋亡而发挥保护糖尿病大鼠肾脏功能的作用。     

蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡的影响

目的观察蜂贝化瘀胶囊对2型糖尿病大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡的影响,比较中药治疗前后肾脏和视网膜病理变化的改变,并探讨其作用机制。方法建立2型糖尿病大鼠模型,通过RT-PCR、DNA凝胶电泳、流式细胞仪等技术,观察蜂贝化瘀胶囊对糖尿病大鼠FasL基因表达、T细胞凋亡的影响及电镜观察肾脏、视网膜病理变化。结果糖尿病模型组大鼠FasL基因表达和T细胞凋亡率明显高于正常对照组(P<0.05),而中药治疗组以上指标均明显降低(P<0.05),与正常对照组比较无显著性差异(P>0.05);中药治疗组与西药治疗组相比较,T细胞凋亡率也明显降低(P<0.05);电镜结果显示,中药治疗组肾脏和视网膜病理变化较糖尿病模型组明显减轻。结论蜂贝化瘀胶囊可明显降低T细胞凋亡率,明显改善肾脏病理变化,其作用机理是通过控制功能基因FasL基因的表达,减少了T细胞凋亡,从而增强免疫功能来实现的。     

磷素对怀牛膝耐铜毒性的影响研究

目的:通过施磷(P)来调控怀牛膝对铜(Cu)的吸收和累积,防止怀牛膝过量吸收重金属Cu.方法:采用2因素完全设计,用自制PVC管栽培.结果与结论:Cu处理间、P处理间以及Cu,P交互间怀牛膝生物量差异都达到显著水平,土壤中P,Cu均为100 mg·kg~(-1)时生物量最大;低Cu可以增加怀牛膝产量,Cu超过200 mg·kg~(-1)后,怀牛膝产量、质量均下降,但对药材中活性成分齐墩果酸和脱皮甾酮的含量无影响.P的施入可以减轻高Cu对植株的毒害,怀牛膝产量增加,重金属Cu含量降低,但是当土壤Cu超过200 mg·kg~(-1)后,怀牛膝药材中Cu高于20.0.mg·kg~(-1)的限度,因此要生产出合格的怀牛膝药材,种植基地土壤中Cu一定要低于200 mg·kg~(-1).     

牛膝提取物神经再生素促小鼠坐骨神经再生的实验研究

目的观察中药牛膝提取物神经再生素（NRF）对小鼠损伤坐骨神经的修复作用。方法ICR小鼠50只,雌雄各半,行坐骨神经夹伤术,随机分成5组：NRF高、中、低剂量组,弥可保组（阳性对照）,生理盐水组（空白对照）。术后每日腹腔注射给药。采用小鼠坐骨神经功能指数（sciatic functionindex,SFI）、组织形态学及电镜检查,观察NRF对损伤坐骨神经的影响。结果与空白对照组相比,NRF可显著改善小鼠的坐骨神经功能。超微结构观察表明,实验组有髓神经纤维的髓鞘形态、厚度、成熟度均优于对照组,而变性纤维的数目少于对照组。结论NRF能促进小鼠坐骨神经损伤后的修复及其功能的恢复。     

三妙丸中牛膝对关节炎大鼠引药作用的机制研究

目的：研究三妙丸中牛膝对关节炎大鼠引药作用的机制。方法：用弗氏完全佐剂和湿热处理法制备大鼠湿热痹症关节炎模型，造模成功的大鼠分为3组：模型组，含牛膝的三妙丸（18 g·kg-1）组，不含牛膝三妙丸（10 g·kg-1）组。HPLC法测定三妙丸中主要成分小檗碱在心脏、关节组织中的分布情况，体积法测定大鼠足关节肿胀度，同时观察组织病理变化；测定血浆血液流变学指标。结果：含牛膝三妙丸组在给药后2，4，6 h和多次给药14 d后关节浓度均高于不含牛膝组，关节／心脏小檗碱浓度比显著大于不含牛膝组。含牛膝的三妙丸明显改善关节炎模型大鼠的关节肿胀和组织病理改变。含牛膝三妙丸组明显改善关节炎大鼠血液流变学指标，与不含牛膝三妙丸组比P<0.01,与模型组相比也有显著性差异（P<0.01）。结论：牛膝能够引导三妙丸中主要有效成分小檗碱的靶组织分布，并与其药效作用相吻合。其促进小檗碱组织分布的作用和其活血作用可能有一定关系。     

牛膝多糖对糖尿病大鼠视网膜细胞凋亡的影响

目的探讨牛膝多糖（achyranthes bidentata blume polysaccharides,ABPS）对糖尿病大鼠视网膜病变的保护作用及其作用机制。方法将Wistar大鼠随机分为5组,正常对照组、糖尿病模型组、ABPS高、中、低剂量组（300mg.kg-1.d-1、200mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1）。8周后,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡,RT-PCR观察bax、survivin基因的表达。结果与糖尿病模型组比较,ABPS各组视网膜细胞凋亡明显减少,survivin表达上调,bax表达降低。结论 ABPS对糖尿病大鼠视网膜组织保护作用的机制可能与抑制视网膜组织细胞凋亡及上调survivin,降低bax基因表达有关。     

芪玄益心胶囊对糖尿病大鼠急性缺血心肌血管内皮生长因子121mRNA表达的影响

目的:探讨芪玄益心胶囊对糖尿病(DM)大鼠急性缺血心肌保护作用的机制.方法:以四氧嘧啶腹腔注射致胰腺损伤,舌下静脉注射垂体后叶素致心肌急性缺血复制大鼠DM心肌缺血模型,将其随机分美吡达组、丹参滴丸组、芪玄益心胶囊高、中、低剂量组、模型组,并设空白对照组.观察各组模型心肌组织血管内皮生长因子(VEGF)121mRNA表达水平,并与空白组对照.结果:模型组及各治疗组与空白组比较VEGF121mRNA表达均显著增高(P《0.05).芪玄益心胶囊各剂量组与模型组比较VEGF12-1mRNA表达明显增高(P《0.05),以高剂量组变化最显著.芪玄益心胶囊各剂量组与美吡达组、丹参滴丸组比较.对心肌组织VEGF121mRNA改善优于美吡达组(P《0.05),而高剂量组优于丹参滴丸组(P《0.05).结论:芪玄益心胶囊可能通过增强VEGF121mRNA表达,对心肌产生积极的保护作用.     

三妙丸中牛膝引药作用的机理研究

目的通过药代动力学组织分布研究法,研究牛膝在正常大鼠体内对三妙丸中主要有效成分小檗碱组织分布的影响．以探讨其引药的作用。方法大鼠均分成两组,分别灌胃给予含或不合牛膝的三妙丸水提物,给药后2h,4h,6h和7d处死动物．取血浆和心脏、后肢关节组织的匀浆,用高效液相色谱（HPLC）法测定组织中小檗碱的浓度。结果含牛膝三妙丸组动物给药后关节药物浓度在2h时与去牛膝三妙丸组相近,4h明显高于去牛膝组,6h与去牛膝组相近,多次给药后明显高于去牛膝组。含牛膝组的关节／心脏药物浓度比始终明显大于去牛膝组。结论牛膝有促进三妙丸中有效成分小檗碱向关节组织分布的作用。     

桑酮碱对2型糖尿病肾病大鼠的保护作用及机制

目的观察桑酮碱(桑叶总黄酮和总生物碱)对2型糖尿病肾病大鼠的肾功能和肾TGF-β1/Smad信号通路的影响。方法以高脂联合链脲佐菌素复制2型糖尿病肾病大鼠模型,成模后分为模型组,二甲双胍组,桑酮碱低、中、高剂量组,另设正常空白组10只。灌胃给药,12周后测定各组大鼠空腹血糖及24 h尿量,尿液中白蛋白、肌酐的含有量;取血测定血清肌酐、尿素氮,并计算肌酐清除率;HE染色观察肾脏形态学的变化;Western bolt方法测定TGF-β1、Smad2/3、p-Smad2/3、IV型胶原(Co IV)、E钙黏蛋白(E-Ca)的蛋白表达水平;real time PCR方法检测Tgfb1、Co IV和E-Ca的mRNA表达水平。结果桑酮碱给药组能够显著降低糖尿病肾病大鼠空腹血糖、24 h尿量、尿白蛋白含有量及肌酐清除率,改善肾脏组织病理损伤,下调TGF-β1、p-Smad2/3、Co IV的表达,上调E-Ca表达。结论桑酮碱能延缓2型糖尿病大鼠早期肾病并发症的发生,其机制与调节肾脏TGF-β1/Smad信号通路有关。     

针刺“足三里”对哮喘大鼠嗜酸细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:观察针刺"足三里"对脾虚哮喘和哮喘大鼠的效应差异,并探讨其作用机制。方法:60只SD大鼠按体质量随机分为5组:脾虚哮喘组、脾虚哮喘针刺组、哮喘组、哮喘针刺组、正常对照组,每组12只。前两组先建立脾虚模型,之后与哮喘组及哮喘针刺组一起均采用卵蛋白诱发哮喘动物造模方法,建立大鼠脾虚哮喘结合模型和哮喘模型,正常对照组以同等剂量的生理盐水进行处理。脾虚哮喘针刺组和哮喘针刺组均针刺"足三里"穴进行治疗,每日1次,连续治疗8d,其他组不予治疗干预。采用原位杂交法检测肺组织中Fas基因(mRNA)、Bcl-2mRNA的表达。以脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)进行肺组织细胞凋亡的检测。结果:与正常对照组比较,脾虚哮喘组和哮喘组均显示为Fas mRNA表达明显减少和Bcl-2mR-NA表达增多(均P<0.01)、嗜酸细胞(EOS)计数显著增多和EOS凋亡率下降(均P<0.01);与哮喘组比较,脾虚哮喘组的Fas mRNA表达明显减少、Bcl-2mRNA表达增多(均P<0.01)、EOS计数明显增多(P<0.01);与两对应的哮喘组比较,两针刺组的Fas mRNA表达明显增多和Bcl-2mRNA表达显著减少(均P<0.01)、EOS计数显著减少和EOS凋亡率明显升高(均P<0.01);哮喘针刺组与脾虚哮喘针刺组比较,Fas mRNA和Bcl-2mRNA的表达无明显差异(均P>0.05),哮喘针刺组的EOS计数显著下降、EOS凋亡率显著提高(均P<0.01)。结论:针刺"足三里"均可调整脾虚哮喘和哮喘状态下Fas mRNA和Bcl-2mRNA表达的失衡状态,促进EOS的凋亡,从而抑制哮喘炎性反应的进一步发展;针刺"足三里"在调整脾虚哮喘EOS相关基因表达失衡上具有一定的优势。     

原钒酸钠对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4mRNA表达的影响

 目的 观察原钒酸钠(sodium orthovanadate)对2型糖尿病大鼠骨骼肌葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)mRNA表达的影响。方法 用高脂饲料灌胃正常大鼠10 d,引起肥胖,再用四氧嘧啶(120mg·kg^-1)腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型。筛选空腹血糖值大于16.7 mmol·L^-1的大鼠,随机分成5组:原钒酸钠大剂量组(9 mg·kg^-1·d^-1)、原钒酸钠中剂量组(3 mg·kg^-1·d^-1)、原钒酸钠小剂量组(1 mg·kg^-1·d^-1)、糖尿病模型组、苯乙双胍组(75 mg·kg^-1·d^-1)。连续用药7d,用快速血糖仪测空腹血糖值。用胰岛素放免试剂盒测血清胰岛素值。用骨骼肌GLUT4原位杂交试剂盒检测骨骼肌GLUT4 mRNA的表达。结果①2型糖尿病大鼠经原钒酸钠灌胃给药后,空腹血糖值与模型组相比有明显的降低(P<0.05);②用药组大鼠血清胰岛素值与模型组相比无显著差异;③用药组大鼠的骨骼肌GLUT4 mRNA表达量与模型组相比均有明显增多。结论 原钒酸钠对2型糖尿病大鼠有明显的降糖作用,对血清胰岛素的分泌无明显影响,对2型糖尿病大鼠骨骼肌GLUT4 mRNA的表达有促进作用。