鼻咽癌病人血清抗重组EB病毒Zta抗原IgG抗体检测

目的:用免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗EB病毒Zta-IgG抗体.方法:利用含EB病毒BZLFl基因完整开放读框的pGEX2TK-ZcDNA质粒转染大肠杆菌,诱导产生并提纯重组基因产物GST-Zta,以GST-Zta作为抗原,用免疫印迹法检测24例鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体,28例正常人血清作为对照.结果:鼻咽癌组血清中91.7%Zta-IgG阳性,对照组中10.7%Zta-IgG阳性,两组差异有统计学意义(P=0.000).结论:免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体有较高的敏感性和特异性,可能可以作为鼻咽癌病人诊断筛选的指标.     

鼻咽癌免疫血清学诊断的临床应用——附1015份血清早期抗原的抗体检测分析

近年来,关于鼻咽癌和类疱疹病毒(下称EB病毒)在免疫血清学方面的密切关系,已被不少报道所证实。鼻咽癌患者血清中,存在着和EB病毒相关的几种抗体,并且抗体滴度明显地高于正常人和其他肿瘤病人(Burkitt淋巴瘤除外)。根据这种特异性,我们自1975年起探索了鼻咽癌的免疫血清学诊断方法,并将抗EB病毒早期抗原(Early Antigen,下称EA)的抗体检测方法法应用于临床,取得了较为满意的结果。材料和方法一、血清:1975～1977年检测EA抗体     

Identification of excreted and metabolic antigens from adult worms of Schistosoma japonicum

目的 制备日本血吸虫成虫分泌代谢抗原,对其免疫原性以及免疫反应性进行初步鉴定.方法 日本血吸虫尾蚴感染家兔,42 d后剖杀获取成虫,将虫体置无血清DMEM培养基中,5% CO2孵箱37℃培养4 h,得到成虫分泌代谢抗原;用该抗原免疫小鼠,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体反应;用该抗原包板,ELISA法检测血吸虫感染人血清抗体效价;采用十二烷基硫酸钠聚丙酰烯胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对其组分进行分析,然后用Western blot分析其对抗成虫分泌代谢抗原单抗发生反应的蛋白条带.结果 成功制备日本血吸虫成虫分泌代谢抗原;免疫小鼠可产生较高滴度(1:16 000)抗体反应;急性血吸虫病患者、慢性血吸虫病患者、晚期血吸虫病患者和钩虫病患者血清抗该抗原的抗体效价分别为1:800、1:400、1:800和1:100,华支睾吸虫患者和正常人血清均为阴性;SDS-PAGE显示其具有4条蛋白条带,分子量分别是13、40、60和180 ku左右;Western blot结果 表明该抗原能够被抗成虫分泌代谢抗原单抗在5 ku左右处识别.结论 制备的日本血吸虫成虫分泌代谢抗原具有较强的免疫原性和免疫反应性.     

急性白血病EB病毒抗壳抗原抗体(VCA-IgA)变化的观察

EB病毒(Epstein-Barr Rirus)是在人类B淋巴细胞寄生的疱疹病毒,在人群中广泛传播。在广东省和北京市2,300例正常人血清调查中,90%以上人群在3～5岁时已感染了EB病毒,EB病毒感染后,通常以潜伏感染的形式长期存在于人体内,显性感染则导致传染性单核细胞增多症。许多实验提示,EB病毒和非洲儿童恶性淋巴瘤(Burkitt淋巴瘤)和鼻咽癌可能存在着病因学上的关系,这些肿瘤患者体内常出现高滴度的EB病毒壳抗原(VCA)特异性抗体。其他恶性肿瘤和引起免疫功能不足的疾病,亦常有VCA的IgG型抗体的升高;白血病时这种抗体的升高国外亦有过报道。     

应用免疫酶法寻找颈部转移癌的原发肿瘤

本文对69例原发部位不明的颈部转移癌,采用免疫酶法进行血清 VCA-IgA 抗体检测,并分析寻找原发肿瘤的结果。血清 VCA-IgA 抗体滴度1:10以上阳性时,应着重考虑鼻咽癌的可能;抗体阴性或低滴度阳性(<1:20)时,则多从鼻咽腔外的部位寻找.抗体滴度愈高,提示鼻咽癌机会愈大.这种检测方法有利于缩短发现原发肿瘤的时间,争取及早治疗以提高疗效。     

自身抗体与恶性肿瘤的相关性研究

<正>自身抗体作为肿瘤早期诊断的标志物已受到人们广泛关注。研究表明,肿瘤能诱导机体免疫反应,产生抗肿瘤相关抗原的自身抗体[1-2]。研究采用间接免疫荧光法(IIF)、免疫印迹法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法,检测鼻咽癌、原发性肝癌、肺癌等几种常见恶性肿瘤患者血清抗核抗体(ANA)、抗双链DNA     

鼻咽癌血清miRNA表达谱分析

目的:探索血清中鼻咽癌特异性分子标志物,为其早期诊断提供依据.方法:采用miRNA表达谱芯片分析鼻咽癌患者和正常人的血清miRNA,应用GenePix pro V6.0软件(Axon)进行数据处理与分析,寻找差异表达的miRNA.结果:鼻咽癌患者与正常人比较,血清中2倍升高的miRNA有81个,其中5倍升高的有22个.2倍降低的miRNA有88个,其中5倍降低的有16个.鼻咽癌患者血清中有4个EB病毒相关miRNA(ebv-miRNA)的表达明显升高.结论:鼻咽癌患者血清中存在与鼻咽癌密切相关的miRNA.     

酶联免疫电转移印迹技术(EITB)检测抗EB病毒特异性DNA酶抗体

本研究用酶联免疫电转移印迹技术,检测血清中抗 EB 病毒特异性 DNA 酶抗体,试图建立一种可常规应用于临床的检测方法。结果表明:50例鼻咽癌患者血清中,26例在52～59KD 范围内出现由4条阳性显带融合而成的阳性反应区;健康成人和其他头颈部肿瘤患者血清无一例在此区域内出现阳性显带,表明其特异性甚高。     

NPC相关抗原的血清学分析

目的:对重组克隆表达抗原血清学分析(SEREX)法筛选出的鼻咽癌(NPC)系列肿瘤抗原进行特异性检测,判断新检测出的NPC抗原的相应抗体在NPC病人血清及正常人血清中的阳性率,为NPC抗原对NPC的免疫诊断、免疫治疗积累基础资料。方法:运用噬菌体转染-蛋白印迹、免疫组织化学技术,检测3种NPC肿瘤抗原(GX-NPC-1,GX-NPC-2,GX-NPC-4)在20个NPC病人及15个正常人血清中的阳性表达率。结果:3种NPC肿瘤抗原在NPC病人血清中的阳性表达率分别为55%(11/20)、55%(11/20)、50%(10/20);正常人各为33.3%(5/15)、26.7%(4/15)、6.7%(1/15),经统计学分析,前两种肿瘤抗原在NPC及正常人血清中的表达差异无统计学意义,而GX-NPC-4在两种血清中的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论:3种NPC肿瘤抗原中GX-NPC-4抗原在NPC患者的血清中的表达率明显增高,可能为NPC特异性抗原,值得进一步研究。     

免疫酶检测技术 Ⅱ、应用免疫酶检测鼻咽癌病人血清中EB病毒VCA—IgA抗体的实验报告

<正> 近年来多方面的研究已证明EB病毒与鼻咽癌的关系是非常密切的,鼻咽癌病人血清中抗EB病毒壳抗原的免疫球蛋白A抗体(VCA—IgA)滴度显著地高于其它恶性肿瘤病人和正常人。鼻咽癌病人在放射治疗后,这种抗体逐渐下降,复发时,抗体又再次升高。鼻咽癌是我国南方几省市多发恶性肿     

Graves''病甲状腺自身抗体的免疫印迹研究

目的：研究Graves'病（Graves' disease,GD）甲状腺自身抗体的异质性。方法：以正常、GD及桥本氏甲状腺炎患者（HT）甲状腺组织作为抗原、运用Western blot检测20例GD甲亢期及20例GD缓解期患者的甲状腺自身抗体，并以正常阴性血清及标准阳性血清[甲状球蛋白（TGAb）＋、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOA b）＋、TSH受体抗体（TRAb）＋]作为对照。结果；GD血清可与多种甲状腺抗原反应，每个患者出现的阳性条带带型均不一样。GD血清在HT及GD甲状腺组织抗原泳道出现的阳性条带数明显多于正常甲状腺组织抗原泳道出现的阳性条带数（P＜0．01）。且有的条带不出现于正常甲状腺组织抗原泳道。与标准阳性血清出现的阳性条带相比，GD血清出现更多的条带。结论：GD甲状腺自身抗体存在异质性，GD时存在除TGAb、TPOAb、TRAb以外其它的甲状腺抗体，甲状腺细胞中某些蛋白的变异可能是导致GD时产生甲状腺自身抗原的原因之一。     

华支睾吸虫成虫特异性诊断抗原分析

目的:寻找诊断华支睾吸虫病的特异性抗原.方法:应用SDS-PAGE和Western blot对华支睾吸虫成虫可溶性抗原中的蛋白组分进行分析,试验血清包括旋毛虫感染的大鼠和小鼠血清,正常大鼠和小鼠血清,旋毛虫病、华支睾吸虫病、并殖吸虫病、日本血吸虫病及囊虫病患者血清,斯氏狸殖吸虫感染的大鼠血清和正常人血清.结果:华支睾吸虫成虫可溶性抗原蛋白经SDS-PAGE后显示17条蛋白带,其中相对分子质量为65 000、54 000、31 000、25 000、13 000的为主带.Western blot结果显示,相对分子质量为108 000、94 000、71 000、65 000、56 000、53 000、43 000的蛋白带可被华支睾吸虫病患者血清识别,108 000、71 000、65 000、63 000、53 000的蛋白带可被并殖吸虫病患者血清识别,108 000、94 000、71 000可被日本血吸虫病患者血清、旋毛虫感染的大鼠血清及旋毛虫病患者血清识别;56 000的蛋白组分只能被华支睾吸虫病患者血清识别,而不与其他试验血清发生交叉反应.结论:华支睾吸虫成虫可溶性抗原中相对分子质量为56 000的蛋白组分为华支睾吸虫成虫的特异性抗原.     

肾小管间质性肾炎中抗肾小管基底膜抗体的检测

目的:探讨肾小管间质性肾炎(tubulointerstitial nephritis,TIN)患者血清中抗肾小管基底膜抗体及其意义.方法:选取北京大学第一医院肾内科2000年至2002年经肾穿刺活检确诊为TIN患者46例.抗肾小管基底膜抗体检测用Westem-blot方法.人肾小管来源于肾肿瘤切除肾脏的正常肾皮质,并经不同目数的筛网获得.肾小管基底膜(tubular basement membrane,TBM)经超声粉碎细胞后得到,在经6 mol/L盐酸胍处理后即为TBM可溶性抗原.分别对阳性和阴性患者的临床指标进行统计分析.结果:其中11人检出抗TBM抗体,可识别34×103、55×103、61×103、72×103、85×103、94×103、119×103蛋白条带,其中识别55×103的患者最多,占63.6%.抗TBM抗体阳性率在急性TIN患者中为29.6%,慢性TIN患者中为21.1%,两者相比差异无显著性.急性TIN患者抗TBM抗体阳性者与阴性者相比,其血沉和血清IgG、IgM均较高,差异有显著性.其它指标包括性别、年龄、血红蛋白、补体C3、IgA、血肌酐及内生肌酐清除率等差异均无显著性.慢性TIN患者上述指标差异均无显著性.结论:部分TIN患者血清中可检测到抗TBM抗体,提示自身免疫因素有可能参与了间质性肾炎的发病机制.     

紫外线照射日本血吸虫尾蚴疫苗保护性抗原的筛选

目的：分析经紫外线照射处理后日本血吸虫尾蚴蛋白的差异性表达，并从中筛选出有效的保护性抗原组分。方法：收集尾蚴，制备抗原，进行SDS-PAGE电泳后，转印至硝酸纤维素膜上，与照射尾蚴免疫血清和正常感染血清分别进行免疫印渍(Western blot)试验，比较两反应条带的差异性，筛选出惟有免疫血清所能识别的特有的抗原组分，并测定其分子量。结果：在童虫抗原中发现一条能被免疫血清所识别的特异性抗原条带，并测得其分子量为75kDa。结论：紫外线照射致弱尾蚴可诱导宿主产生特异性抗体，被该抗体所识别的抗原分子量为75kDa。     

鸡卵核提取物中诊断混合性结缔组织病的特异性抗原分析

目的：分析鸡卵核提取物中检测混合性结缔组织病（ＭＣＴＤ）的特异性抗原成份。方法：应用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及考马斯亮兰染色技术对鸡卵核提取进行蛋白组份分析;应用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ技术对鸡卵核蛋白抗原进行免疫识别分别。结果：鸡卵核提取物中可见１３个蛋白成份,分子量分别为７８,７６,７２,６４,５７,５５,５０,４８,４６,４２,３,３２和２４ＫＤ。皮肌炎和多发性肌炎（ＤＭ／ＰＭ）及硬皮病（ＰＳＳ）病     

流行性出血热病毒抗原组份的分析

用免疫转印技术对流行性出血热(EHF)病毒的抗原组份进行了初步分析。发现两种不同来源的兔抗EHF兔疫血清和20份4～21病日的EHF病人血清,均可与分子量在68,000和66,000道尔顿左右的两种病毒多肽成份发生反应,正常人和非EHF病人血清以及正常兔血清则否,表明这两种多肽可能是EHF病毒引起机体抗体应答反应的主要抗原成份。     

Detection of the antibody to Epstein-Barr virus-specific DNase by enzyme-linked immunoelectrotransfer blot technique

ＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅａｎｔｉｂｏｄｙｔｏＥｐｓｔｅｉｎＢａｒｒｖｉｒｕｓｓｐｅｃｉｆｉｃＤＮａｓｅｂｙｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄｉｍｍｕｎｏｅｌｅｃｔｒｏｔｒａｎｓｆｅｒｂｌｏｔｔｅｃｈｎｉｑｕｅＴｉａｎＹｏｎｇｑｕａｎ田勇泉，ＬｉＺｅｑ...     

An analysis of antigenic polypeptides of dengue viruses and their specificity with western blotting

Summary Dengue virus(DV) samples which harvested after having been either propagated in C₆/36 cells or passaged by murine intracerebral inoculation were investigated by Western bloting. Two different denaturing methods with the same solution were selected before electrophoresis, one at 60 °C for 20 min; the other at 100°C for 5 min. After the samples were heated at 60°C for 20 min, 3 bands of sizes 46 ku, 70 ku and 98 ku were positively recognized by rabbit immunized sera. The peptide of 98 ku was DV group specific; While that of 46 ku could also react with the sera against both heterologous DV serotype and Japanese B encephalitis virus (JEV), After the samples were heated at 100 °C for 5 min, 3 peptides in size of 20 ku, 46 ku and 57 ku were recognized by the rabbit sera against both homologous and heterologous DV serotypes, while the peptide of 57 ku could also be recognized by anti-JEV serum. There was no significant difference in the results of Western blot between the DV antigens harvested from cellular culture and those from intra-cerebral inoculation.     

抗子宫内膜抗体和子宫内膜异位症的关系

介绍一种改良的子宫内膜抗原提取方法，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析证实，产物中存在多条蛋白区带，分子量分别为１８，４２，５４，７１，８２及９１ＫＤ，另有三条大于９４ＫＤ，其中４２，８２，９１ＫＤ及３条大于９４ＫＤ的区带可和抗子宫内膜抗体发生特异反应。并在此基础上建立了抗子宫内膜抗体的ＥＬＩＳＡ测定方法，可用于人体液抗子宫内膜抗体的检测。该法灵敏度高，特异性好，方法稳定，操作简便。